崔春紅，孫兆霞，李偉，姜鶴

1.山東萬(wàn)杰醫(yī)學(xué)院組胚教研室，山東淄博 255213；2.山東萬(wàn)杰醫(yī)學(xué)院解剖教研室，山東淄博 252133

應(yīng)激在我們的日常生活中非常普遍，幾乎每一個(gè)人都會(huì)遇到某些應(yīng)激源的作用。過強(qiáng)或持續(xù)時(shí)間比較長(zhǎng)的應(yīng)激對(duì)機(jī)體是有害的，影響機(jī)體的生理狀態(tài)和免疫系統(tǒng)[1],應(yīng)激對(duì)機(jī)體健康的影響越來越受到重視。機(jī)體在應(yīng)激狀態(tài)下，多出現(xiàn)以交感神經(jīng)-腎上腺髓質(zhì)軸和下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸反應(yīng)為主的變化，使血清腎上腺糖皮質(zhì)激素含量增加，這常常被視為應(yīng)激的標(biāo)志[2-3]。

胸腺是機(jī)體重要的中樞免疫器官，是T 淋巴細(xì)胞發(fā)育、成熟的場(chǎng)所，對(duì)機(jī)體外周淋巴器官的發(fā)育和免疫應(yīng)答的發(fā)生起著重要的調(diào)節(jié)作用[4]。應(yīng)激反應(yīng)可導(dǎo)致胸腺的退化萎縮[5]，并伴有免疫功能受損。目前，對(duì)應(yīng)激反應(yīng)中血清胸腺肽濃度變化的研究較少。該研究試圖通過急性應(yīng)激探討應(yīng)激對(duì)大鼠胸腺指數(shù)和血清CORT 以及胸腺肽濃度的影響，為進(jìn)一步探討應(yīng)激影響機(jī)體免疫功能的機(jī)制與途徑奠定基礎(chǔ)。測(cè)定胸腺指數(shù)旨在了解應(yīng)激對(duì)大鼠胸腺體積、重量的影響；檢測(cè)應(yīng)激后血清胸腺肽濃度，旨在了解應(yīng)激對(duì)胸腺肽的影響，為進(jìn)一步探討胸腺肽在應(yīng)激影響胸腺結(jié)構(gòu)過程中的作用及其機(jī)制提供理論依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

實(shí)驗(yàn)于2014年7—8月間以12 只Wistar 雄性大鼠（山東大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供）為研究對(duì)象，大鼠體重180±10 g，6 只一籠合養(yǎng)（籠子尺寸為約為500 mm×400 mm×300mm）。在實(shí)驗(yàn)室中在環(huán)境適應(yīng)5 d，晝/夜周期為12 h/12 h(光照時(shí)間為08:00~20:00)，室內(nèi)溫度為（23±2）℃，濕度為50%左右。適應(yīng)期內(nèi)所有動(dòng)物自由攝食和飲水。適應(yīng)期后對(duì)大鼠進(jìn)行分組，采用隨機(jī)數(shù)表法選取6只作為正常對(duì)照組，不作任何實(shí)驗(yàn)處理；另6 只作為應(yīng)激組。

1.2 方法

室溫下將大鼠置入帶有通氣孔但可以限制其各個(gè)方向活動(dòng)的束縛器中，應(yīng)激刺激持續(xù)6 h。應(yīng)激結(jié)束后2%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，后剖開腹腔，自腹主動(dòng)脈抽取血液5 mL，室溫靜置30 min 后3500 r·min-1離心15 min 取上層血清，-20 ℃保存；剖開胸腔取出胸腺，清除表面附著的脂肪等其他組織，用濾紙吸干凈其表面的血液，后用電子天平稱量其重量。

1.3 觀察指標(biāo)

①胸腺指數(shù)胸腺指數(shù)=胸腺重量/體重，胸腺重以mg 為單位，體重以g 為單位。

②血清CORT 和胸腺肽的濃度酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)血清CORT 和胸腺肽的含量。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS19.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料以據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t 檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 大鼠胸腺指數(shù)

應(yīng)激后大鼠胸腺指數(shù)與對(duì)照組比較要低，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 急性應(yīng)激對(duì)大鼠胸腺指數(shù)的影響[（±s）,mg/g]

表1 急性應(yīng)激對(duì)大鼠胸腺指數(shù)的影響[（±s）,mg/g]

對(duì)照組應(yīng)激組t P組別2.06±0.24 1.99±0.15 5.13 0.47胸腺指數(shù)

2.2 大鼠血清CORT 和胸腺肽的濃度

應(yīng)激后大鼠血清CORT 的濃度明顯增高，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；胸腺肽的濃度與對(duì)照組比較顯著性減低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 急性應(yīng)激對(duì)大鼠血清CORT 和胸腺肽濃度的影響[（±s）,pg/mL]

表2 急性應(yīng)激對(duì)大鼠血清CORT 和胸腺肽濃度的影響[（±s）,pg/mL]

注：與對(duì)照組比較#P＜0.05。

對(duì)照組應(yīng)激組t 值P 值組別67.82±4.76（89.05±4.30）#-8.97 0.00 1.46±0.08（0.66±0.06）#23.49 0.00 CORT 胸腺肽（×103）

3 討論

胸腺是機(jī)體主要的免疫器官，為T 淋巴細(xì)胞的成熟和選擇提供微環(huán)境，在免疫功能的執(zhí)行與維持中發(fā)揮重要的作用。胸腺隨著年齡的增長(zhǎng)而退化萎縮，受性激素的影響[6-7]，因此本實(shí)驗(yàn)中研究對(duì)象選擇的是青春期雄性Wistar 大鼠。

各種應(yīng)激刺激均可導(dǎo)致胸腺退化，這種退化是在機(jī)體應(yīng)激時(shí)，通過下丘腦-垂體-腎上腺軸的作用而發(fā)生的[8]。這與該實(shí)驗(yàn)的結(jié)果類似，大鼠急性應(yīng)激6 h 后血清CORT 的濃度 （89.05±4.30）pg/mL 明顯增高,與對(duì)照組（67.82±4.76）pg/mL 比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

胸腺退化萎縮意味著在細(xì)胞免疫功能中起主導(dǎo)作用的T 淋巴細(xì)胞的數(shù)目減少，從而導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能下降甚至抑制。胸腺指數(shù)是反映機(jī)體胸腺免疫功能的重要指標(biāo)之一，其數(shù)值高低的變化可以反映機(jī)體免疫功能的狀態(tài)[9-10]。該實(shí)驗(yàn)中，我們觀察到大鼠急性應(yīng)激6 h 后，胸腺指數(shù)出現(xiàn)降低（1.99±0.15）mg/g，但與對(duì)照組（2.06±0.24）mg/g 比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這可能是急性應(yīng)激對(duì)胸腺體積、重量的影響需要一個(gè)反應(yīng)過程，可以通過延長(zhǎng)觀察時(shí)間點(diǎn)來予以驗(yàn)證；或者是短暫應(yīng)激對(duì)胸腺體積、重量的影響較小，需要一定的時(shí)間積累；也可能是應(yīng)激強(qiáng)度相對(duì)較小，對(duì)胸腺的影響有限，可以加大應(yīng)激的強(qiáng)度來進(jìn)行驗(yàn)證。

研究表明，胸腺激素在胸腺細(xì)胞的發(fā)育和成熟過程中發(fā)揮重要的作用[11-12]，胸腺肽可以增加T 細(xì)胞的產(chǎn)生、刺激T 細(xì)胞分化與成熟、減少T 細(xì)胞凋亡以及產(chǎn)生T 細(xì)胞介導(dǎo)抗體等[13]。該實(shí)驗(yàn)中，急性應(yīng)激6 h 后大鼠血清胸腺肽的濃度（0.66±0.06）×103 pg/mL 明顯下降，與對(duì)照組（1.46±0.08）×103 pg/mL 比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。可能在應(yīng)激誘導(dǎo)胸腺退化萎縮的過程中起到一定的作用。但血清胸腺肽濃度降低的機(jī)制以及其與胸腺細(xì)胞凋亡間是否有關(guān)系尚不明確，需進(jìn)一步研究。

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