郭紅麗　雷川云

[摘要] 目的 分析和探討甲狀腺癌患者體內促甲狀腺激素受體表達情況。 方法 對整群選取的2011年4月—2015年3月該院腫瘤科收治的65例甲狀腺癌患者臨床資料進行回顧性分析，選取30例甲狀腺功能正常的健康人作為對照組，對采集的甲狀腺組織進行HE染色觀察并進行免疫組織化學檢測促甲狀腺激素受體在其中的表達情況。 結果 檢測結果表明促甲狀腺激素受體在正常甲狀腺組織和甲狀腺癌患者甲狀腺組織中均有表達，但后者著色明顯要淺，表達部位均位于細胞膜的基地側。在正常甲狀腺組織中的陽性表達率為100.00%（30/30），顯著高于甲狀腺腫瘤患者的84.84%（28/33）和甲狀腺癌患者的68.75%（22/32）。并且甲狀腺腫瘤患者的陽性率顯著高于甲狀腺癌患者，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。 結論 該研究結果表明，在正常的甲狀腺組織中促甲狀腺激素受體具有較高表達，隨著甲狀腺組織分化程度的降低其表達率明顯下降，這一結論為臨床上分化型甲狀腺癌患者的TSH抑制療法提供了重要的數據參考。

[關鍵詞] 甲狀腺癌；促甲狀腺激素受體；表達率；臨床作用；回顧性分析

[中圖分類號] R736.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2015）09（c）-0040-03

[Abstract] Objective To analyze and investigate the expression of thyroid stimulating hormone receptor in thyroid cancer patients. Methods A retrospective analysis was conducted on the clinical data of thyroid cancer patients admitted in the Oncology Department of our hospital from April 2011 to March 2015. And other 30 healthy people with normal thyroid function were selected as the control group. The thyroid tissues of the thyroid cancer patients and control group were stained by HE staining and measured by immunohistochemistry for detecting the expression of thyroid stimulating hormone receptor. Results The results showed that thyroid stimulating hormone receptor in normal thyroid tissue and the thyroid tissue of thyroid cancer patients expressed， but the latter coloring was shallow， the expression site was located in the base side of the cell membrane. The positive expression rate of thyroid stimulating hormone receptor in the normal thyroid tissues was 100% （30/30）， significantly higher than 84.84% （28/33） in thyroid tumor patients and 68.75% （22/32） in thyroid cancer patients. And the positive rate of thyroid stimulating hormone receptor in thyroid tumor patients was significantly higher than that in thyroid cancer patients with statistically significant difference（P<0.05）. Conclusion The results suggested that the expression of thyroid stimulating hormone receptor in the normal thyroid tissue is higher， but with the degree of differentiation of the thyroid tissue decreases， the expression decreases significantly， which provides an important reference for the TSH suppression therapy in differentiated thyroid cancer patients.

[Key words] Thyroid cancer； Thyroid stimulating hormone receptor； Expression rate； Clinical effect； Retrospective analysis

該研究對該院腫瘤科2011年4月—2015年3月間收治的65例甲狀腺癌患者臨床資料進行回顧性分析，分析和探討甲狀腺癌患者體內促甲狀腺激素受體表達情況，分析其臨床意義為該患者的TSH抑制療法提供參考依據，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該研究整群選取的65例為該院腫瘤科收治的甲狀腺癌患者，根據腫瘤組織分化程度不同將其分成甲狀腺腫瘤組和甲狀腺癌組，甲狀腺腫瘤組患者33例，年齡在32～69歲之間，平均年齡為（42.6±2.8）歲，其中男性患者8例，女性患者25例；甲狀腺癌組患者32例，年齡在30至70歲之間，平均年齡為（43.1±2.7）歲，其中男性患者7例，女性患者25例；選取30例甲狀腺功能正常的健康人作為對照組，年齡在31至69歲之間，平均年齡為（42.8±2.3）歲，其中男性6例，女性24例。

1.2 檢測方法

1.2.1 HE染色 所有患者均進行石蠟連續(xù)切片，HE染色操作步驟如下[1]：①脫蠟。將烤干的切片放入二甲苯（Ⅰ），后再放入二甲苯（Ⅱ）中，各為5 min，以溶去切片上的石蠟。②復水。是將脫蠟后的切片經各級濃度酒精逐漸下降到水的過程，即將二甲苯（Ⅱ）中取出的切片移入無水酒精→95%酒精→80%酒精→70%酒精→蒸餾水，各級中停留1～5 min。③染色。將蒸餾水洗滌后的切片移入Harris蘇木精液中5～10 min，使細胞核著色。用自來水洗去切片上殘余的染液，用1%鹽酸酒精分色數分鐘。入1%氨水或自來水浸洗，使之返藍，在蒸餾水中浸片刻。0.5%伊紅酒精溶液中染色2～5 min，使細胞質著色。④脫水。切片依次入95%酒精（Ⅰ）→95%酒精（Ⅱ）→無水酒精（Ⅰ）→無水酒精（Ⅱ），各級中停留1～5 min。⑤透明。切片入無水酒精與二甲苯→二甲苯（Ⅰ）→二甲苯（Ⅱ），各級停留1～5 min。⑥封藏。將切片從二甲苯（Ⅱ）中取出，用紙或布擦去材料周圍的二甲苯。在材料中央滴一小滴樹膠，然后，用鑷子加蓋蓋玻片。待干燥后即可用于觀察。⑦染色結果。細胞核呈現(xiàn)鮮艷的藍色，細胞質及細胞間質呈粉紅至紅色。

1.2.2 免疫組織化學 ①脫蠟與水化：將切片置于60 ℃孵箱中干烤約40 min，再將其置于二甲苯中浸泡20 min之后將其置于無水酒精→95%酒精→80%酒精→70%酒精→蒸餾水，各級中停留1～5 min；②抗原修復：采用含有EDTA的濃度為0.25%的胰蛋白酶進行消化，約10 min；③SP染色：將切片置于3%的雙氧水中，室溫浸泡10 min，從而達到將內源性過氧化物酶活性阻斷的效果，采用山羊血清進行封閉，15 min后加入TSH受體的單克隆抗體，4 ℃孵育過夜，之后加入含有生物素標記的二抗，最后進行顯色觀察[2]。

1.3 統(tǒng)計方法

該研究中所有數據均通過SPSS 20.0軟件進行處理，計數資料采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 正常人群與甲狀腺腫瘤患者相比

檢測結果表明促甲狀腺激素受體在正常甲狀腺組織和甲狀腺癌患者甲狀腺組織中均有表達，但后者著色明顯要淺，表達部位均位于細胞膜的基地側。在正常甲狀腺組織中的陽性表達率為100.00%（30/30），顯著高于甲狀腺腫瘤患者的84.84%（28/33）和甲狀腺癌患者的68.75%（22/32），差異有統(tǒng)計學意義（χ2=4.39，P=0.03<0.05；χ2=5.37，P=0.02<0.05），見表1。

2.2 甲狀腺腫瘤患者于甲狀腺癌患者相比

甲狀腺腫瘤患者的陽性率顯著高于甲狀腺癌患者，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=4.14，P=0.03 <0.05），見表1。

3 討論

甲狀腺癌（Thyroid carcinoma）是一種發(fā)生于頭頸部位的內分泌性的常見惡性腫瘤，其中以分化型的甲狀腺癌較為常見，約占90%，中青年女性是該病的高發(fā)人群[3]。與機體其它部位的惡性腫瘤患者相比而言，甲狀腺癌患者特殊的組織學特性以及生物學行為將對其臨床治療的效果產生較大的影響。根據美國國立綜合癌癥網（National Cancer Network，NCCN）2010年頒發(fā)的甲狀腺腫瘤治療指南中指出[4]，該疾病患者臨床治療的首選方式仍然為外科手術，此外，左旋甲狀腺素的抑制性治療目前對于分化型甲狀腺癌還是十分必要的，該方法的基本理論基礎在于機體的下丘腦-垂體-甲狀腺軸負反饋系統(tǒng)的工作網絡。臨床上對于甲狀腺癌患者給予左旋甲狀腺素進行治療，能夠有效地抑制機體促甲狀腺素的分泌和釋放，有效降低血清中TSH含量，進而降低異常刺激對于殘余甲狀腺組織上的TSH受體的刺激作用，最終達到抑制甲狀腺癌患者的病灶增長以及去分化的發(fā)生、發(fā)展[5]。臨床上主要對分化較好的甲狀腺癌患者采用抑制治療，而對于分化程度較低或者未分化的甲狀腺癌患者，由于其機體對下丘腦-垂體-甲狀腺軸的依賴性相對較差，因此不能實施TSH抑制療法[6-7]。

甲狀腺激素受體是G蛋白偶聯(lián)受體的超家族成員之一。其基本生理功能是調節(jié)機體甲狀腺的合成以及釋放[8]。其結構上是由α、β兩條多肽鏈部分組成。在生理情況下，當有甲狀腺激素與甲狀腺激素受體結合后，細胞膜發(fā)生G蛋白的α亞基偶聯(lián)，通過G蛋白的介導，快速激活腺苷酸環(huán)化酶的活性，導致機體內cAMP的含量持續(xù)升高，此外，該途徑還可以通過二磷酸肌醇循環(huán)，激活機體其它的生物學反應途徑[9]。

該研究結果表明在正常甲狀腺組織中的陽性表達率為100.00%，顯著高于甲狀腺腫瘤患者的84.84%和甲狀腺癌患者的68.75%。并且甲狀腺腫瘤患者的陽性率顯著高于甲狀腺癌患者，這一數據與黃靜等報道結果接近[7]。臨床在正常的甲狀腺組織中促甲狀腺激素受體具有較高表達，隨著甲狀腺組織分化程度的降低其表達率明顯下降，這一結論為臨床上分化型甲狀腺癌患者的TSH抑制療法提供了重要的數據參考，同時通過對促甲狀腺激素受體檢測能夠對患者甲狀腺腫瘤惡性程度進行預測。

[參考文獻]

[1] 徐校成，王可敬.分化型甲狀腺癌術后應用促甲狀腺激素抑制療法的價值探討[J].中華全科醫(yī)學，2015（5）：740-742.

[2] 蔣倩倩，文芳，曹仁賢.甲狀腺激素受體β突變在甲狀腺癌轉移中的研究進展[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2014（2）：228-230.

[3] Araki N， Iida M， Amino N， et al.Rapid bioassay for detection of thyroid-stimulating antibodies using cyclic adenosine monophosphate-gated calcium channel and aequorin[J].Eur Thyroid J，2015，4（1）：14-19.

[4] 姚韓.血清促甲狀腺激素受體抗體（TRAb）測定在甲狀腺疾病臨床診斷中的應用價值[J].吉林醫(yī)學，2013（31）：6513-6514.

[5] 方毅，龍亞紅，左向華.ECLIA法檢測血清促甲狀腺激素受體抗體在自身免疫性甲狀腺疾病中的診斷價值[J].中華臨床醫(yī)師雜志：電子版，2013（12）：5629-5630.

[6] 曲莉，萬曉艷，羅艷華.促甲狀腺激素受體抗體和甲狀腺過氧化物酶抗體檢測對Gravse病的診斷意義[J].中國地方病防治雜志，2013（6）：429-430.

[7] 黃靜，張文靜，吳靖芳，等.促甲狀腺激素、甲狀腺球蛋白抗體、過氧化物酶抗體對甲狀腺疾病的診斷價值[J].重慶醫(yī)學，2013（32）：3875-3877，3880.

[8] Giménez-Barcons M， Colobran R， Gómez-Pau A， et al.Graves' Disease TSHR-Stimulating Antibodies （TSAbs） Induce the Activation of Immature Thymocytes： A Clue to the Riddle of TSAbs Generation？[J].Journal of Immunology，2015，194（9）：4199-4206.

[9] 關紅軍，關紅偉，魯俊華，等.我國人群血清促甲狀腺激素水平與甲狀腺癌的Meta分析[J].環(huán)境與健康雜志，2013（12）：1115-1116.

（收稿日期：2015-06-25）