于海佳

·綜述·

胰島素調(diào)控葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4轉(zhuǎn)位的研究進(jìn)展

于海佳

胰島素抵抗和糖代謝異常是II型糖尿病的主要病理特征。機(jī)體在正常情況下通過胰島素等相關(guān)激素能夠非常精準(zhǔn)地調(diào)控血液中的葡萄糖。伴隨著能量攝入，升高的血糖水平會刺激胰島β細(xì)胞分泌胰島素。血液中過量的葡萄糖被快速地轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞內(nèi)，從而使機(jī)體維持正常的血糖水平。胰島素調(diào)控葡萄糖攝取主要是通過葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4（glucose transporter 4，GLUT4）從細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)位到質(zhì)膜上來實(shí)現(xiàn)的。有關(guān)胰島素是如何介導(dǎo)GLUT4轉(zhuǎn)位和葡萄糖攝取的研究對于治療糖尿病和發(fā)展疾病早期診斷方法具有重要的意義。本文綜述了近年來在胰島素信號調(diào)控下GLUT4轉(zhuǎn)位方面的相關(guān)研究進(jìn)展。

1 GLUT4與糖穩(wěn)態(tài)調(diào)控

GLUT4是由SLC2A4基因編碼的糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，能夠以不依賴于ATP、協(xié)助運(yùn)輸?shù)姆绞竭\(yùn)送葡萄糖穿過細(xì)胞質(zhì)膜。GLUT4具有12次跨膜蛋白結(jié)構(gòu)域，廣泛分布于骨骼肌和脂肪組織等胰島素響應(yīng)性組織中［1-2］。除了GLUT4外，這些組織還表達(dá)其他的一些糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，例如GLUT1。與其他糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白不同的是，GLUT4在細(xì)胞內(nèi)的分布受到胰島素的調(diào)控。GLUT1等其他糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白主要在基礎(chǔ)狀態(tài)（血糖水平低）下介導(dǎo)細(xì)胞對葡萄糖的攝取，而GLUT4在基礎(chǔ)狀態(tài)主要存在于胞內(nèi)的各種膜結(jié)構(gòu)中，只有少于5%的GLUT4位于細(xì)胞膜上。當(dāng)機(jī)體進(jìn)食后血糖水平快速升高，葡萄糖會促進(jìn)胰島素分泌增加。胰島素促使GLUT4從胞內(nèi)膜結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜表面上，細(xì)胞表面上的GLUT4濃度在胰島素的刺激下可以增加到其在基礎(chǔ)狀態(tài)時(shí)的5～30倍［3］。GLUT4通過攝取和清除血液中的葡萄糖來維持血糖平衡。當(dāng)胰島素濃度降低時(shí)，GLUT4通過胞吞作用回到細(xì)胞內(nèi)，細(xì)胞表面的GLUT4重新恢復(fù)到基礎(chǔ)狀態(tài)時(shí)的水平。

GLUT4在機(jī)體糖穩(wěn)態(tài)調(diào)控過程中發(fā)揮著重要作用，在II型糖尿病患者的脂肪組織中，GLUT4在mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平上都有明顯減少［4］。在小鼠模型中，GLUT4蛋白表達(dá)水平降低使小鼠產(chǎn)生胰島素抵抗和糖尿病［5］。GLUT4在肌肉組織和脂肪組織中過量表達(dá)可以改善小鼠的血糖控制和糖耐受不良［6-7］。在細(xì)胞水平上，肌肉組織和脂肪組織中減少GLUT4的表達(dá)會引起肌肉細(xì)胞和脂肪細(xì)胞對葡萄糖的攝取減少并產(chǎn)生胰島素抵抗［8］。

2 胰島素調(diào)控GLUT4轉(zhuǎn)位的信號通路

對于胰島素調(diào)控骨骼肌和脂肪組織的葡萄糖攝取，目前研究者們認(rèn)為主要是通過磷酸肌醇3激酶（PI3K）信號通路來實(shí)現(xiàn)的（圖1）。胰島素從胰島β細(xì)胞分泌后，首先結(jié)合細(xì)胞表面上的跨膜胰島素受體（IR）并激活胰島素受體酪氨酸激酶。這會促使胰島素受體底物蛋白（IRS）酪氨酸磷酸化，激活PI3K。PI3K與二磷酸肌醇（PIP2）發(fā)生作用，使PIP2轉(zhuǎn)化為三磷酸肌醇（PIP3）［9］。PIP3的水平升高激活了含有PH結(jié)構(gòu)域的絲氨酸/蘇氨酸激酶PDK1和mTORC2，并隨后激活蛋白激酶AKT。

AKT有3個(gè)異構(gòu)體，但是只有AKT2在胰島素刺激GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)過程中起關(guān)鍵作用。George等［10］報(bào)道在胰島素抵抗和糖尿病中發(fā)現(xiàn)了AKT2突變。AS160（又稱為TBC1D4，分子量160 kD）是AKT2的一個(gè)重要底物，在脂肪和肌肉組織中過量表達(dá)AS160磷酸化位點(diǎn)突變體能抑制胰島素依賴的GLUT4轉(zhuǎn)位和葡萄糖攝取，敲除AS160和其類似功能蛋白TBC1D1，可顯著減少胰島素刺激的葡萄糖運(yùn)輸［11］。一份最新的報(bào)道發(fā)現(xiàn)格陵蘭人近年來持續(xù)升高的II型糖尿病發(fā)生率正是由于AS160發(fā)生了突變。研究人員證實(shí)了在2575個(gè)調(diào)查個(gè)體中有17%的AS160等位基因存在p.Arg684Ter突變，同時(shí)伴隨有胰島素抵抗和血糖升高［12］。AS160含有一個(gè)GTP酶激活蛋白（GAP）結(jié)構(gòu)域，其能特異地作用于G蛋白Rab。Rab是一類能促進(jìn)囊泡運(yùn)輸?shù)腉TP結(jié)合蛋白，通過與GDP結(jié)合的失活狀態(tài)向其活化狀態(tài)轉(zhuǎn)化來催化膜運(yùn)輸。作為一個(gè)負(fù)調(diào)控因子，AS160在基礎(chǔ)狀態(tài)下處于去磷酸化狀態(tài)，能通過GTP酶將GTP轉(zhuǎn)化成GDP。這使Rab蛋白處于失活狀態(tài)，從而抑制了GLUT4囊泡在細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)輸。在胰島素刺激下，AS160的五個(gè)氨基酸殘基Ser318、Ser570、Ser588、Thr642和Ser751被AKT2磷酸化而喪失了GAP活性［13］，使Rab蛋白可以與GTP結(jié)合，促進(jìn)GLUT4囊泡運(yùn)輸和GLUT4的膜轉(zhuǎn)位。在基礎(chǔ)狀態(tài)下的脂肪細(xì)胞中敲低AS160的表達(dá)，會使部分GLUT4囊泡運(yùn)輸至細(xì)胞表面，從而增加了細(xì)胞表面的GLUT4水平［14］。Rab10是AS160一個(gè)重要下游結(jié)合Rab蛋白。在脂肪細(xì)胞中敲低Rab10的表達(dá)會抑制胰島素引起的GLUT4轉(zhuǎn)位。在敲低AS160的同時(shí)敲低Rab10則會減弱基礎(chǔ)狀態(tài)時(shí)由于AS160缺失所引起的表面GLUT4增多現(xiàn)象［15］。另外，文獻(xiàn)報(bào)道的AS160的下游Rab蛋白除Rab10外，還有Rab8、Rab13和Rab14等［16-17］。

圖1 胰島素調(diào)控GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)的分子機(jī)制

除PI3K信號通路外，胰島素還能激活c-Cbl/CAP和G蛋白TC10通路（圖1）。胰島素受體酪氨酸激酶被激活后，原癌基因c-Cbl與Cbl復(fù)合蛋白（CAP）形成的復(fù)合物與另一個(gè)胰島素受體底物蛋白APS結(jié)合，可以促使c-Cbl酪氨酸磷酸化［18］。磷酸化的c-Cbl/CAP復(fù)合物從胰島素受體脫離并轉(zhuǎn)移到脂筏區(qū)域，與蛋白CrkII和C3G作用。C3G激活Rho家族的小G蛋白TC10，TC10通過與其下游蛋白之間的相互作用來調(diào)控GLUT4的轉(zhuǎn)位過程［1-2］。

3 GLUT4的胞內(nèi)循環(huán)與運(yùn)輸

受血糖水平和胰島素濃度的影響，胰島素響應(yīng)組織通過胞吐和胞吞來調(diào)節(jié)GLUT4在胞內(nèi)和細(xì)胞膜上的分布。研究胰島素調(diào)控下GLUT4在細(xì)胞內(nèi)各膜結(jié)構(gòu)與質(zhì)膜之間的穿梭過程對我們認(rèn)識胰島素功能有重要的意義。

在基礎(chǔ)狀態(tài)下，GLUT4主要分布在反式高爾基網(wǎng)、GLUT4囊泡等胞內(nèi)區(qū)隔中，在內(nèi)體中只檢測到少量的GLUT4存在［19］。在胰島素的刺激下，可檢測到的GLUT4囊泡數(shù)量明顯減少，而GLUT4在內(nèi)體中的含量則迅速提高［20］。這說明GLUT4在這些胞內(nèi)膜結(jié)構(gòu)以及細(xì)胞質(zhì)膜之間的循環(huán)受胰島素信號的調(diào)控而不停地重新分布。在胰島素信號消失后，大量的GLUT4通過分選過程從內(nèi)體與質(zhì)膜的循環(huán)中分離出來形成GLUT4囊泡或者通過內(nèi)體逆向運(yùn)輸?shù)椒词礁郀柣W(wǎng)。反式高爾基網(wǎng)上的GLUT4會進(jìn)一步的生成GLUT4囊泡滯留在細(xì)胞內(nèi)從而脫離再循環(huán)。在胰島素信號的刺激下，滯留的GLUT4囊泡迅速運(yùn)動到細(xì)胞皮層，通過與質(zhì)膜直接融合使GLUT4到達(dá)細(xì)胞表面［3］。

那么GLUT4囊泡是如何到達(dá)細(xì)胞皮層并拴系到細(xì)胞膜上的呢？有報(bào)道認(rèn)為在脂肪組織中，大量存在的微管網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)能通過驅(qū)動蛋白KIF5B運(yùn)送GLUT4囊泡［21-22］。到達(dá)皮層附近的GLUT4囊泡通過一些大的多蛋白復(fù)合物或伸長的桿狀分子將囊泡拴系到質(zhì)膜上。Exocyst復(fù)合物是一個(gè)由八個(gè)亞蛋白（Sec3、Sec5、Sec6、Sec8、Sec10、Sec15、Exo70和Exo84）組成的拴系分子，其中的四個(gè)亞蛋白含有伸長的桿狀結(jié)構(gòu)，將囊泡與質(zhì)膜可以在相對遠(yuǎn)的距離下連接起來［23］。在3T3L-1脂肪細(xì)胞中過量表達(dá)Exo70突變體，能抑制胰島素刺激的GLUT4上膜和葡萄糖攝取，但是并不影響GLUT4到質(zhì)膜的運(yùn)輸［24］。電鏡結(jié)果顯示Exocyst可以形成一個(gè)“Y”形結(jié)構(gòu)，“Y”形的每一端通過不同的小G蛋白（如Rab10、TC10、RalA等）與質(zhì)膜和運(yùn)輸囊泡相互作用，將GLUT4囊泡拴系到細(xì)胞質(zhì)膜上［23，25］。Exocyst的拴系作用只可以發(fā)生在約15 nm的距離內(nèi)，所以人們相信肌動蛋白（actin）有可能是另一個(gè)在遠(yuǎn)距離下作用的拴系因子。在脂肪細(xì)胞中，肌動蛋白主要分布在細(xì)胞皮層附近，其聚合和穩(wěn)定性影響胰島素刺激下的GLUT4囊泡運(yùn)輸。GLUT4囊泡上的肌球蛋白馬達(dá)MYO5和MYO1C可以結(jié)合肌動蛋白，通過肌動蛋白將GLUT4囊泡與質(zhì)膜拴系在一起［3］。MYO5和MYO1C與小G蛋白（如Rab10、RAL等）也相互作用，這將肌動蛋白、Exocyst復(fù)合物、AS160與GLUT4囊泡聯(lián)系在一起，它們之間的相互作用構(gòu)成了胰島素調(diào)控下的GLUT4囊泡運(yùn)輸與拴系網(wǎng)絡(luò)［26］。

4 GLUT4的胞吐過程

胰島素調(diào)控GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)的最后一個(gè)重要步驟是GLUT4的胞吐。GLUT4囊泡被拴系因子連接到質(zhì)膜上后，通過蛋白質(zhì)調(diào)控下的錨定和膜融合過程將GLUT4釋放到細(xì)胞膜表面。與胰島素分泌、神經(jīng)遞質(zhì)釋放等其他胞吐過程一樣，GLUT4胞吐也需要其特定的可溶性N-乙基馬來亞胺敏感蛋白受體（soluble N-ethylmaleimide-sensitive factorattachment protein receptor，SNARE）蛋白以及SM（Sec-1/Munc18）蛋白等SNARE調(diào)控因子的作用。通過全內(nèi)反射熒光顯微鏡（total internal reflection fluorescence microscope，TIRF）等方法發(fā)現(xiàn)膜融合是胰島素作用于GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)的一個(gè)關(guān)鍵步驟［27］。一些SNARE調(diào)控蛋白如Munc18c、Synip等可以直接作為胰島素信號作用的終端分子來調(diào)控GLUT4轉(zhuǎn)位（圖1）。近年來，有關(guān)胰島素調(diào)控GLUT4胞吐的分子機(jī)制逐漸引起了人們的重視，研究GLUT4胞吐過程有可能為胰島素抵抗和II型糖尿病治療開辟新的藥物作用靶點(diǎn)。

4.1 SNARE蛋白

GLUT4囊泡與質(zhì)膜的融合過程需要通過SNARE蛋白來介導(dǎo)。膜融合是一個(gè)非自發(fā)的過程，需要外界提供一定的能量。位于質(zhì)膜上的t-SNARE（target-SNARE）蛋白和GLUT4囊泡上的v-SNARE（vesicle-SNARE）蛋白可以自發(fā)地聚合，形成非常穩(wěn)定的四螺旋束反式結(jié)構(gòu)SNARE復(fù)合物，將兩邊的膜拉近并促使膜融合的發(fā)生。目前在脂肪和肌肉組織中發(fā)現(xiàn)了11種的t-SNARE和6種v-SNARE蛋白，但是只有Syntaxin-4（t-SNARE）、SNAP23（t-SNARE）和VAMP2（v-SNARE）三種蛋白參與GLUT4囊泡與細(xì)胞質(zhì)膜的融合過程。Syntaxin-4和VAMP2各含有一個(gè)SNARE蛋白結(jié)構(gòu)域，而SNAP23有兩個(gè)SNARE結(jié)構(gòu)域。體外重組實(shí)驗(yàn)顯示，SNARE蛋白能夠自發(fā)地促進(jìn)不同膜結(jié)構(gòu)的融合，從而也說明這一過程還需要其他蛋白的介入以抑制或激活SNARE蛋白的聚合。胰島素信號通過調(diào)控SNARE與其結(jié)合蛋白的相互作用而達(dá)到對GLUT4囊泡與質(zhì)膜融合過程的調(diào)控。

4.2 Munc18c

SM蛋白是一類調(diào)控膜融合的分子量為60～70 kD的親水性蛋白。同SNARE蛋白一樣，SM蛋白在膜融合過程中也是不可缺少的。所以也有學(xué)者認(rèn)為SNARE蛋白復(fù)合物和SM蛋白是組成所有膜融合過程的最基本蛋白質(zhì)機(jī)器［28］。Munc18c是參與GLUT4胞吐的主要SM蛋白［29］，最初對Munc18c功能的研究是通過在脂肪細(xì)胞中過量表達(dá)來進(jìn)行的。研究者們發(fā)現(xiàn)Munc18c過量表達(dá)會抑制胰島素刺激引起的GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)和葡萄糖攝取，因此Munc18c被認(rèn)為是GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)的負(fù)調(diào)控因子。Munc18c可以與t-SNARE蛋白Syntaxin-4結(jié)合從而抑制Syntaxin-4與SNAP23和VAMP2形成復(fù)合物。隨后的Munc18c基因敲低或敲除實(shí)驗(yàn)卻證明Munc18c在胰島素調(diào)控的GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)和葡萄糖攝取過程中是必不可少的［30］。體外實(shí)驗(yàn)也顯示Munc18c能夠通過有效地促進(jìn)GLUT4囊泡相關(guān)SNARE復(fù)合物的形成來加快膜融合的速度［31］。一些學(xué)者認(rèn)為Munc18c的表達(dá)水平會影響其在GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)中的功能，Munc18c表達(dá)量過高或過低都會引起不同程度的胰島素抵抗［29］。

作為胰島素受體的下游靶分子，Munc18c能以不依賴于PI3K信號通路的方式被胰島素受體直接磷酸化［32］。酪氨酸殘基Tyr219和Tyr521是在胰島素的刺激下被磷酸化的兩個(gè)位點(diǎn)［33］。Munc18c的磷酸化與Munc18c/Syntaxin-4的作用有關(guān)，磷酸化會促使Munc18c從Syntaxin-4解離。自由的Syntaxin-4與其他SNARE蛋白一起引發(fā)膜融合反應(yīng)，而Munc18c通過促進(jìn)SNARE復(fù)合物的形成將進(jìn)一步調(diào)控GLUT4囊泡與質(zhì)膜融合［31，33］。最近的一項(xiàng)研究也報(bào)道了胰島素信號會促進(jìn)Syntaxin-4相關(guān)SNARE復(fù)合物的形成，并且這一過程與胰島素引發(fā)Munc18c磷酸化相關(guān)［34］。另外，有文獻(xiàn)報(bào)道磷酸化的Munc18c是酪氨酸磷酸酶PTPIB的一個(gè)底物，PTPIB缺失會使Munc18c磷酸化水平升高和從Syntaxin-4解離［35］。

4.3 鈣結(jié)合蛋白

胰島素信號能通過氧化應(yīng)激和三磷酸肌醇激活鈣離子通道增加細(xì)胞質(zhì)膜附近鈣離子的濃度，并影響GLUT4的轉(zhuǎn)位過程［36］。DOC2B（double C2-like domains beta）蛋白結(jié)合鈣離子后與t-SNARE和帶負(fù)電荷的磷脂作用，促進(jìn)了SNARE復(fù)合物的形成［37］。DOC2B與SNARE蛋白的相互作用受胰島素信號的調(diào)控。在脂肪細(xì)胞中通過RNA干擾減少DOC2B的表達(dá)能夠抑制胰島素調(diào)控的葡萄糖攝取，胰島素功能在DOC2B敲除的小鼠中也有明顯減弱［38-39］。也有報(bào)道認(rèn)為DOC2B可以調(diào)節(jié)Munc18c的功能。在胰島素信號作用下，磷酸化的Munc18c蛋白從Syntaxin-4解離，與DOC2B結(jié)合在一起［40］。

Esyt1（extended synaptotagmin like protein 1）具有五個(gè)C2結(jié)構(gòu)域，其中有兩個(gè)C2結(jié)構(gòu)域可以結(jié)合鈣離子。在胰島素的刺激下，Esyt1能作為激酶CDK5的底物被磷酸化，并與GLUT4一起定位［41］。Esyt1在GLUT4轉(zhuǎn)位中的作用還需要進(jìn)一步驗(yàn)證。最近報(bào)道的另一個(gè)鈣結(jié)合蛋白CDP138是Akt2的一個(gè)底物，敲低CDP138會抑制胰島素引起的GLUT4轉(zhuǎn)位和葡萄糖攝取。CDP138主要作用于GLUT4的胞吐，通過磷酸化S197位氨基酸和結(jié)合鈣離子來實(shí)現(xiàn)其調(diào)控功能［42］。而CDP138和Esyt1是否與SNARE蛋白直接作用以及如何調(diào)控GLUT4膜融合還需要進(jìn)一步的研究。

4.4 Synip和Tomosyn

Synip和Tomosyn是胰島素調(diào)控GLUT4轉(zhuǎn)位的兩個(gè)負(fù)調(diào)控因子。作為Akt2的底物，Synip在基礎(chǔ)狀態(tài)時(shí)特異地結(jié)合Syntaxin-4和SNAP23，阻止錨定和膜融合的進(jìn)行［43］。Akt2在胰島素信號下磷酸化Synip釋放Syntaxin-4，從而有利于SNARE復(fù)合物的形成、促進(jìn)GLUT4轉(zhuǎn)位［44］。Tomosyn是一個(gè)非特異性的GLUT4轉(zhuǎn)位調(diào)控因子，除GLUT4轉(zhuǎn)位外還可以調(diào)控許多膜融合過程，如胰島素分泌、神經(jīng)遞質(zhì)釋放等。Tomosyn的C端有一小段類似v-SNARE結(jié)構(gòu)的區(qū)域，可以有效地結(jié)合t-SNARE并抑制其與v-SNARE聚合。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明Tomosyn的調(diào)控作用不僅需要其C端v-SNARE結(jié)構(gòu)域，還需要其N端WD40重復(fù)片段區(qū)域［45］。至于Tomosyn的功能如何受胰島素的調(diào)控至今還是一個(gè)尚未解決的問題。

5 展望

糖尿病的發(fā)病原因至今尚未完全清楚。中國近幾十年來糖尿病發(fā)病率持續(xù)升高，使糖尿病的治療成為一個(gè)亟需解決的問題。II型糖尿病占糖尿病比例的90%左右，對胰島素調(diào)控GLUT4轉(zhuǎn)位的研究將有助于理解胰島素抵抗的發(fā)生機(jī)制，并針對各個(gè)環(huán)節(jié)設(shè)計(jì)和篩選治療糖尿病的藥物。目前以調(diào)控GLUT4表達(dá)、胰島素信號通路的各個(gè)環(huán)節(jié)為靶點(diǎn)，已成功發(fā)現(xiàn)了許多能夠增強(qiáng)GLUT4轉(zhuǎn)位并促進(jìn)葡萄糖吸收的小分子化合物。隨著GLUT4轉(zhuǎn)位分子機(jī)制的深入研究，一些受胰島素調(diào)控的關(guān)鍵蛋白將可能成為治療胰島素抵抗新的干涉位點(diǎn)。

目前對GLUT4轉(zhuǎn)位的研究主要集中于胰島素信號通路以及GLUT4胞吐過程中的調(diào)控等過程，而對GLUT4在細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)輸過程研究的較少。已有報(bào)道證明不同于GLUT4胞吐過程中的SNARE蛋白（如Syntaxin-6）、SM蛋白（如Vps45）和Rab蛋白（如Rab5）調(diào)控GLUT4在胞內(nèi)膜系統(tǒng)中的運(yùn)輸和分選，GLUT4如何在細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸以及胰島素對這一復(fù)雜過程的調(diào)控將是未來GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)研究的一個(gè)重點(diǎn)。盡管目前對GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)的研究取得了很大的進(jìn)展，但是與神經(jīng)遞質(zhì)釋放等胞吐過程的研究相比還有不小的距離，尤其是在已知調(diào)控因子的數(shù)量和作用機(jī)制方面。在基因和蛋白水平上對影響胰島素調(diào)控GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)過程中參與蛋白的篩選將是一個(gè)十分重要的研究方向。另外，對于其他轉(zhuǎn)運(yùn)和胞吐過程中發(fā)現(xiàn)的相對保守蛋白如Munc13蛋白等是否參與GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)過程也需要進(jìn)行重點(diǎn)研究。除RNA干擾外，TALEN、CRISPR/cas9等基因敲除和編輯技術(shù)的出現(xiàn)使科研人員能夠快速、定向地實(shí)現(xiàn)基因水平上的精確修飾。這些高效的基因編輯技術(shù)結(jié)合TIRF、冷凍電鏡等技術(shù)將給胰島素對GLUT4轉(zhuǎn)位的研究帶來新的發(fā)展機(jī)遇。

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10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2015.01.011

80309美國，科羅拉多大學(xué)博爾德分校分子細(xì)胞發(fā)育生物學(xué)系，Email：haijia@colorado.edu

2014-08-18