喬艷明，陳文強*，2，鄧百萬，2，彭浩，2，解修超，2，張輝，潘嘉偉

（1.陜西理工學院生物科學與工程學院，陜西漢中723000；2.陜西省食藥用菌工程技術研究中心，陜西漢中723000；3.陜西省南鄭中學，陜西南鄭723100）

Box-Behnken響應面設計法優(yōu)化微波輔助提取豬苓多糖工藝

喬艷明1，陳文強*1，2，鄧百萬1，2，彭浩1，2，解修超1，2，張輝3，潘嘉偉3

（1.陜西理工學院生物科學與工程學院，陜西漢中723000；2.陜西省食藥用菌工程技術研究中心，陜西漢中723000；3.陜西省南鄭中學，陜西南鄭723100）

為了優(yōu)化豬苓多糖的微波提取工藝，采用Box-Behnken響應面設計法，研究液料比、pH、微波功率、提取時間、提取次數(shù)及其交互作用對多糖提取率的影響。應用Design Expert和響應面分析相結合的方法，模擬得到回歸方程的預測模型和可信度，分析得到最佳提取工藝條件為：液料比30∶1（mL/g），pH 6.6，微波功率614 W，提取時間2.5 min，提取次數(shù)2次。在此條件下，多糖提取率達到6.75%。利用Box-Behnken響應面設計法優(yōu)化得到的豬苓多糖提取條件參數(shù)，為豬苓多糖工業(yè)化生產(chǎn)提供技術支持。

豬苓；微波輔助提?。欢嗵?；Box-Behnken設計；響應面分析

豬苓（Polyporus umbellatus），俗稱豬屎苓、野豬糞等。屬真菌門、擔子菌綱、多孔菌目、多孔菌科、豬苓（地花）屬。豬苓主要分布于河北、陜西、四川等地［1］，其菌核含麥角甾醇、粗蛋白質、可溶性糖分、多糖及X-羥基二十四碳酸等成分［2-3］。現(xiàn)代藥理學研究表明，豬苓提取物中多糖成分具有抗氧化［4］、增強免疫功能［5］和保護肝臟［6］等作用，臨床應用也取得了較好療效。

近年來，真菌多糖的提取技術已由傳統(tǒng)的溶劑提取法逐漸轉向運用超聲波［7-8］和微波輔助提取［9-10］新技術。與傳統(tǒng)方法相比，微波輔助提取真菌多糖具有速度快、選擇性高、提取率高、溶劑消耗少、操作簡便等特點［11-13］，同時可以防止提取物在長時間、高溫條件下發(fā)生降解和褪色。響應面法（Response Surface Methodology，RSM）是可通過回歸方程的分析來尋求最優(yōu)工藝參數(shù)，解決多變量問題，具有周期短、精度高、實用價值高等特點，已廣泛應用于化學工業(yè)、生物學、食品學、工程學等領域，在真菌多糖微波輔助提取條件優(yōu)化研究中也取得了良好效果［14］。2011年，曾維才［15］等采用響應面法優(yōu)化微波輔助提取黑木耳多糖工藝，黑木耳多糖提取率可達16.53%；2012年，Zhao［16］等用響應面分析法優(yōu)化微波輔助提取梭柄松苞菇多糖，梭柄松苞菇多糖提取率為（7.83±0.19）%；2012年，Chen［17］等用響應面法優(yōu)化微波輔助提取銀耳多糖，銀耳多糖提取率為（65.07±0.99）%；2013年，楊開［18］等用響應面法優(yōu)化了微波輔助提取松木層孔菌多糖，松木層孔菌多糖提取率為3.88%；2014年，岳春［19］等用響應面法優(yōu)化了微波輔助提取蟲草多糖，蟲草多糖提取率為12.1%。

目前，響應面法用于優(yōu)化微波輔助提取豬苓多糖的工藝尚未見研究報道，本研究中采用微波輔助提取豬苓多糖，并通過響應面分析法優(yōu)化提取工藝，借助Design Expert軟件，采用Box-Behnken模式對各主要影響因素之間的單一和交互作用等進行了研究，得出最佳提取工藝參數(shù)，為從豬苓菌核中提取多糖的工業(yè)化生產(chǎn)提供了理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1試驗材料豬苓菌核由陜西天美綠色產(chǎn)業(yè)有限公司提供。

1.1.2主要試劑無水乙醇、葡萄糖、苯酚、硫酸、氯仿等均為分析純，試驗用水為純化水。

1.1.3主要儀器723N型可見分光光度計，上海精密科學儀器有限公司制造；FW177型高速萬能粉碎機，北京市永光明醫(yī)療儀器廠制造；101A-1型鼓風干燥箱，上海試驗儀器總廠制造；RV10基本型V旋轉蒸發(fā)儀，廣州儀科試驗室技術有限公司制造；WD700型微波爐，樂金電子電器有限公司制造；WF-2000型微波快速反應系統(tǒng)，上海屹堯分析儀器有限公司制造；BSA8201型電子天平，賽多利斯科學儀器有限公司制造；PHS-3C型精密酸度計，上海大普儀器有限公司制造。

1.2方法

1.2.1材料預處理將新鮮豬苓菌核除雜，60℃烘干至恒質量，24 000 r/min粉碎1 min，40目過篩，備用。

1.2.2微波提取方法精確稱取豬苓粉末5.0 g，按照一定的液料比加入純化水，調節(jié)pH，在一定的微波功率下提取一定時間，抽濾，按照此法提取若干次，合并濾液真空濃縮，室溫下定容至200 mL。

1.2.3多糖的測定方法苯酚-硫酸法［20］。

1.2.4單因素試驗按照1.2.2提取步驟，研究提取次數(shù)、液料比、pH、微波功率、提取時間5個因素對豬苓多糖提取率的影響。

1）提取次數(shù)試驗：準確稱取豬苓粉末5.0 g，分別選擇不同提取次數(shù)，其他條件不變，進行單因素試驗。

2）液料比試驗：準確稱取豬苓粉末5.0 g，分別選擇不同液料比，其他條件不變，進行單因素試驗。

3）pH試驗：準確稱取豬苓粉末5.0 g，分別選擇不同pH，其他條件不變，進行單因素試驗。

4）微波功率試驗：準確稱取豬苓粉末5.0 g，分別選擇不同微波功率，其他條件不變，進行單因素試驗。

5）提取時間試驗：準確稱取豬苓粉末5.0 g，分別選擇不同提取時間，其他條件不變，進行單因素試驗。

1.2.5微波提取最佳工藝的響應面法優(yōu)化在單因素試驗的基礎上，根據(jù)Box-Behnken的中心組合試驗設計原理，選取液料比（X1）、pH（X2）、微波功率（X3）、提取時間（X4）、提取次數(shù)（X5）為考察對象，以豬苓多糖提取率（Y）為響應值，采用5因素3水平響應面分析法確定最佳提取工藝條件。試驗因素水平編碼見表1。

表1　5因素3水平試驗設計Table 1　Experiment design of 5 factors and 3 levels

2　結果與分析

2.1微波輔助提取豬苓多糖的單因素試驗

2.1.1提取次數(shù)對多糖提取率的影響準確稱取豬苓粉末5.0 g，在液料比25∶1（mL/g）、pH 6.5、微波功率420 W、提取時間3 min的條件下，研究不同提取次數(shù)（1，2，3，4次）對多糖提取率的影響，結果見圖1。

圖1　提取次數(shù)對多糖提取率的影響Fig.1　Effect of extraction number on extraction rate of polysaccharide

圖1結果表明，隨著提取次數(shù)的增加，多糖提取率也逐漸增大。當提取2次時，提取率為5.06%。當提取次數(shù)大于2次時，多糖提取率增加緩慢，基本趨于穩(wěn)定。增加提取次數(shù)，會增加提取成本，同時會造成溶劑和能源的浪費。綜合考慮提取效果和經(jīng)濟節(jié)約等因素，因此，選擇微波提取豬苓多糖的提取次數(shù)為2次。

2.1.2液料比對多糖提取率的影響準確稱取豬苓粉末5.0 g，在pH 6.5、微波功率420 W、提取時間3 min、提取次數(shù)2次的條件下，研究不同液料比15∶1，20∶1，25∶1，30∶1，35∶1（mL/g）對多糖提取率的影響，結果見圖2。

圖2　液料比對多糖提取率的影響Fig.2　Effect of the ratio of liquid to solid on extraction rate of polysaccharide

圖2結果表明，豬苓多糖提取率隨著液料比的增大呈現(xiàn)先增大后減小的趨勢，在液料比為30∶1（mL/g）時達到最大，提取率為5.08%。因此，選擇微波提取豬苓多糖的液料比為30∶1（mL/g）。

2.1.3pH對多糖提取率的影響準確稱取豬苓粉末5.0 g，在液料比30∶1（mL/g）、微波功率420 W、提取時間3 min、提取次數(shù)2次的條件下，研究不同pH（5.5，6.0，6.5，7.0，7.5）對多糖提取率的影響，結果見圖3。

圖3　pH對多糖提取率的影響Fig.3　Effect of pH on extraction rate of polysaccharide

圖3結果表明，多糖提取率在pH為6.5時達到最大，提取率為5.81%，增大或減小pH均會導致多糖提取率降低。因此，選擇微波提取豬苓多糖的pH為6.5。

2.1.4微波功率對多糖提取率的影響準確稱取豬苓粉末5.0 g，在液料比30∶1（mL/g）、pH 6.5、提取時間3 min、提取次數(shù)2次的條件下，研究不同微波功率（140，280，420，560，700 W）對多糖提取率的影響，結果見圖4。

圖4　微波功率對多糖提取率的影響Fig.4　Effect of microwave power on extraction rate of polysaccharide

圖4結果表明，多糖提取率隨著微波功率的增大呈現(xiàn)先增加后減小的趨勢，在微波功率為560 W時達到最大，提取率為6.39%。因此，選擇微波提取豬苓多糖的微波功率為560 W。

2.1.5提取時間對多糖提取率的影響準確稱取豬苓粉末5.0 g，在液料比30∶1（mL/g）、pH 6.5、微波功率560 W、提取次數(shù)2次的條件下，研究不同提取時間（1、2、3、4、5 min）對多糖提取率的影響，結果見圖5。

圖5　提取時間對多糖提取率的影響Fig.5　Effect of extraction time on extraction rate of polysaccharide

圖5結果表明，多糖提取率隨著提取時間的增加呈現(xiàn)先增加后減小的趨勢，在提取時間為2 min時達到最大，提取率為6.48%。因此，選擇微波提取豬苓多糖的提取時間為2 min。

2.2Box-Behnken設計優(yōu)化主要影響因素水平

采用5因素3水平響應面分析法進行研究，考慮各因素間的交互作用以及各因素對多糖提取率的影響。試驗結果見表2。

表2　Box-Behnken設計和試驗結果Table 2　Box-Behnken design and experimental result

續(xù)表2

經(jīng)Design Expert軟件對46個試驗點的多糖提取率進行回歸統(tǒng)計分析，得出二次模型回歸統(tǒng)計分析表（表3）。

多糖提取率的回歸方程如下：

表3　回歸分析結果Table 3　Result of regression analysis

表3結果表明，X2、X2X4、X3X4、X3X54項顯著；X1、X3、X4、X5、X2X3、X12、X22、X32、X42、X5210項極顯著，其他X1X2、X1X3、X1X4、X1X5、X2X5、X4X5不顯著。模型P值小于0.000 1，可信度水平大于99.99%，說明該模型有意義?；貧w模型的R2=0.983 4，R2Adj=0.970 2，說明多糖提取率的試驗值和預測值之間具有良好的擬合度。該模型失擬項P值為0.610 3＞0.05，失擬項差異不顯著，說明試驗操作可信，試驗理論可使用。另外從F值可看出單因素對多糖提取率的影響順序：X4＞X5＞X3＞X1＞X2，即影響順序依次為：提取時間＞提取次數(shù)＞微波功率＞液料比＞pH。

2.3響應面及最佳優(yōu)化條件的驗證

根據(jù)回歸方程繪制多糖提取率隨各因素變化的響應曲面圖。由響應曲面圖可知，液料比、pH、微波功率、提取時間、提取次數(shù)5個因素對多糖提取率的影響（圖6—15）。每個響應曲面分別代表著兩個獨立因素間的相互作用，其余兩個因素保持在編碼水平的0水平。

由圖6—9可知，液料比與其它各因素之間的交互作用對多糖提取率的影響均不顯著。

圖6　Y=f（X1，X2）響應曲面Fig.6　Response surface of Y=f（X1，X2）

圖7　Y=f（X1，X3）響應曲面Fig.7　Response surface of Y=f（X1，X3）

圖8　Y=f（X1，X4）響應曲面Fig.8　Response surface of Y=f（X1，X4）

圖9　Y=f（X1，X5）響應曲面Fig.9　Response surface of Y=f（X1，X5）

由圖10可知，微波功率和pH的交互作用十分顯著；在低微波功率條件下隨著pH的增大，多糖提取率會逐漸升高，最后趨于平穩(wěn)；而在高微波功率條件下，隨著pH的增大，多糖提取率會先緩慢升高然后迅速下降。

圖10　Y=f（X2，X3）響應曲面Fig.10　Response surface of Y=f（X2，X3）

由圖11可知，pH和提取時間的交互作用顯著；在一定pH條件下，隨著提取時間的增加，多糖提取率會迅速升高至平穩(wěn)，然后略有下降。

圖11　Y=f（X2，X4）響應曲面Fig.11　Response surface of Y=f（X2，X4）

由圖12可知，提取次數(shù)和pH的交互作用不顯著。

圖12　Y=f（X2，X5）響應曲面Fig.12　Response surface of Y=f（X2，X5）

由圖13可知，微波功率和提取時間的交互作用顯著；在低微波功率條件下，多糖提取率會隨著提取時間的延長，先升高至平穩(wěn)，后略有下降；在高微波功率條件下，隨著提取時間的延長，起初升高較快，后來比較緩慢，逐漸趨于平穩(wěn)。

圖13　Y=f（X3，X4）響應曲面Fig.13　Response surface of Y=f（X3，X4）

由圖14可知，微波功率和提取次數(shù)的交互作用顯著；在一定的微波功率條件下，隨著提取次數(shù)增加和微波功率的增大，多糖提取率都是起始升高較快，最后趨于平穩(wěn)。

圖14　Y=f（X3，X5）響應曲面Fig.14　Response surface of Y=f（X3，X5）

由圖15可知，提取時間和提取次數(shù)的交互作用不顯著；按照一定的提取次數(shù)，隨著提取時間的增加，多糖提取率起始升高較快，最后趨于平穩(wěn)。

圖15　Y=f（X4，X5）響應曲面Fig.15　Response surface of Y=f（X4，X5）

綜上所述，由回歸模型得到影響豬苓多糖提取率的各因素最優(yōu)值為液料比30∶1（mL/g），pH 6.6，微波功率614 W，提取時間2.5 min，提取次數(shù)2次，此時豬苓多糖提取率的最大預測值為6.68%。為了檢驗該最佳提取工藝的可靠性，采用上述最優(yōu)提取條件進行驗證試驗，得到多糖提取率的驗證值為6.75%。由于多糖提取率的驗證值與最大估計預測值非常接近，因此，利用Box-Behnken響應面法優(yōu)化微波輔助提取豬苓多糖的工藝是有效可行的。

3　結語

通過單因素和Box-Behnken響應面試驗得到微波輔助提取豬苓多糖的最佳工藝條件為：液料比30∶1（mL/g），pH 6.6，微波功率614 W，提取時間2.5 min，提取次數(shù)2次。在此工藝條件下，獲得豬苓多糖的提取率為6.75%。

近年來，利用微波輔助提取豬苓多糖的研究報道甚少。2012年，李志洲［21］用二次回歸正交試驗優(yōu)化微波輔助提取豬苓多糖工藝，提取率僅2.86%；2012年，孫纓［22］等用正交試驗優(yōu)化微波輔助提取豬苓多糖工藝，提取率為3.663%。

與李、孫的研究相比，本研究中采用Box-Behnken響應面法優(yōu)化微波輔助提取豬苓多糖的工藝，其提取率顯著高于現(xiàn)有文獻報道。一方面由于多糖檢測方法（苯酚-硫酸法）的穩(wěn)定性和準確性較好［23］；另一方面是基于響應面法可在更廣泛的范圍內(nèi)考慮因素的組合，預測響應值，比其他分析方法更為高效［14］。利用Box-Behnken響應面法優(yōu)化得到的豬苓多糖提取工藝參數(shù)準確可靠，可為豬苓多糖的工業(yè)化生產(chǎn)提供必要的技術支持。

［1］陳文強，鄧百萬，彭浩，等.藥用真菌豬苓的研究現(xiàn)狀及應用展望［J］.中國食用菌，2012，31（1）：1-4.

CHEN Wenqiang，DENG Baiwan，PENG Hao，et al.The status and application prospects of Polyporus umbellatus［J］.Edible Fungi of China，2012，31（1）：1-4.（in Chinese）

［2］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［M］.2005版.北京：化學工業(yè)出版社，2005：222.

［3］陳文強，鄧百萬.秦巴山區(qū)野生與栽培豬苓菌核主要成分的測定［J］.無錫輕工大學學報，2003，22（6）：96-98.

CHEN Wenqiang，DENG Baiwan.Determination of main components of sclerotia in wild and cultivated Polyporus umbellatus in Mt.Qinling and Mt.Bashan regions［J］.Journal of Wuxi University of Light Industry，2003，22（6）：96-98.（in Chinese）

［4］朱月，李彩霞，畢曉丹.豬苓多糖分級純化及對羥自由基清除作用的研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學，2011，39（30）：18553-18555.

ZHU Yue，LI Caixia，BI Xiaodan.Research on graded purification of polysaccharides of Polyporus and its scavenging effects on ·OH［J］.Journal of Anhui Agricultural Sciences，2011，39（30）：18553-18555.（in Chinese）

［5］陶娟，李濤，薛國平，等.豬苓多糖在血液透析患者乙肝疫苗免疫接種中的應用研究［J］.中國醫(yī)藥指南，2013，11（22）：7-8.

TAO Juan，LI Tao，XUE Guoping，et al.PUPS in hemodialysis patients with hepatitis B vaccine immunization application research［J］.Guide of China Medicine，2013，11（22）：7-8.（in Chinese）

［6］杜金梁，賈睿，曹麗萍，等.豬苓多糖對四氯化碳誘導建鯉肝損傷的保護作用［J］.南方農(nóng)業(yè)學報，2013，44（9）：1564-1570.

DU Jinliang，JIA Rui，CAO Liping，et al.Protective effects of Polyporus umbellatus polysaccharide on liver injury induced by carbon tetrachloride in Cyprinus carpio var.jian［J］.Journal of Southern Agriculture，2013，44（9）：1564-1570.（in Chinese）

［7］陳文強，鄧百萬，劉開輝，等.豬苓多糖超聲提取工藝條件優(yōu)化［J］.食品與生物技術學報，2008，27（4）：53-57.

CHEN Wenqiang，DENG Baiwan，LIU Kaihui，et al.Study on the optimization of ultrasonic extraction technique of polysaccharide from Polyporus umbellatus［J］.Journal of Food and Biotechnology，2008，27（4）：53-57.（in Chinese）

［8］楊潤亞，李維煥，呂芳芳.秀珍菇子實體多糖的提取工藝優(yōu)化及體外抗氧化性［J］.食品與生物技術學報，2012，31（10）：1093-1099.

YANG Runya，LI Weihuan，LV Fangfang.Optimization of extraction technique and the antioxidant activity of polysaccharides from Pleurotus geesteranus［J］.Journal of Food and Biotechnology，2012，31（10）：1093-1099.（in Chinese）

［9］Hang S Q，Ning Z X.Extraction of polysaccharide from Ganoderma lucidum and its immune enhancement activity［J］. International Journal of Biological Macromolecules，2010，47（3）：336-341.

［10］賴譜富，沈恒勝，陳君琛，等.大杯蕈菇柄多糖微波提取工藝優(yōu)化［J］.福建農(nóng)業(yè)學報，2014，29（3）：271-275.

LAI Pufu，SHEN Hengsheng，CHEN Junchen，et al.Optimization of microwave extraction of polysaccharides from Clitocybe maxima stem［J］.Fujian Journal of Agricultural Science，2014，29（3）：271-275.（in Chinese）

［11］史碧波.微波輔助提取雞油菌多糖的工藝研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學，2011，39（30）：18533-18535.

SHI Bibo.Study on microwave assisted extraction of polysaccharides from Cantharelles cibarius［J］.Journal of Anhui Agricultural Sciences，2011，39（30）：18533-18535.（in Chinese）

［12］郭永月，陶明煊，趙云霞，等.白玉菇多糖提取方法的比較和優(yōu)化［J］.南京大學學報，2013，36（3）：87-92.

GUO Yongyue，TAO Mingxuan，ZHAO Yunxia，et al.Comparison and optimization among extraction technologies of polysaccharide from Pleurotus nebrodensis［J］.Journal of Nanjing Normal University，2013，36（3）：87-92.（in Chinese）

［13］張穎.對茯苓多糖提取方法的比較研究［J］.中國實用醫(yī)藥，2012，7（4）：249-250.

ZHANG Ying.Comparison among extraction technologies of polysaccharide from Poria cocos［J］.China Practical Medical，2012，7（4）：249-250.（in Chinese）

［14］慕運動.響應面方法及其在食品工業(yè)中的應用［J］.鄭州工程學院學報，2001，22（3）：91-94.

MU Yundong.Response surface methodology and its application in food industry［J］.Journal of Zhengzhou Institute of Technology，2001，22（3）：91-94.（in Chinese）

［15］曾維才，張曾，賈利蓉.響應面法優(yōu)化微波輔助提取黑木耳多糖工藝的研究［J］.食品與發(fā)酵科技，2011，47（5）：45-48.

ZENG Weicai，ZHANG Zeng，JIA Lirong.Optimization of microwave-assisted extraction of polysaccharides from Auricularia auricular with response surface methodology［J］.Food and Fermentation Technology，2011，47（5）：45-48.（in Chinese）

［16］Zhao L，Wang K Y，Wang D X，et al.Response surface methodology（RSM）for optimization of the microwave-assisted extraction of polysaccharides from Catathelasma ventricosum［J］.Agricultural Journal，2012，7（4）：255-259.

［17］Chen Y Z，Zhao L，Liu B G，et al.Application of response surface methodology to optimize microwave-assisted extraction of polysaccharide from Tremella［J］.Physics Procedia，2012，24（A）：429-433.

［18］楊開，薛介豐，金月忠，等.松木層孔菌多糖的微波提取和體外活性研究［J］.食藥用菌，2013（2）：45-49.

YANG Kai，XUE Jiefeng，JIN Yuezhong，et al.Study on microwave extraction and evaluation in vitro of Phellinus pini polysaccharides［J］.Edible and Medicinal Mushrooms，2013（2）：45-49.（in Chinese）

［19］岳春，李靖靖，方永遠.蟲草多糖微波輔助提取工藝的優(yōu)化［J］.食品與機械，2014（1）：192-195.

YUE Chun，LI Jingjing，F(xiàn)ANG Yongyuan，et al.Optimization of microwave-assisted extraction on polysaccharides from Cordyceps militaris［J］.Food&Machinery，2014（1）：192-195.（in Chinese）

［20］李志洲.豬苓多糖的提取及其鋅配合物抗氧化性研究［J］.食品研究與開發(fā)，2011，32（2）：45-49.

LI Zhizhou.Study on extraction conditions of polysaccharide from Polyporus umbellatus and the anti-oxidation of polysaccharide zinc［J］.Food Research and Development，2011，32（2）：45-49.（in Chinese）

［21］李志洲.回歸正交試驗設計優(yōu)化豬苓多糖的提取工藝［J］.光譜試驗室，2012，29（5）：3047-3050.

LI Zhizhou.Optimization of extraction technology of polysaccharide in Polyporus by regression orthogonal test design［J］.Chinese Journal of Spectroscopy Laboratory，2012，29（5）：3047-3050.（in Chinese）

［22］孫纓，趙懿清，鮑佳春，等.豬苓多糖微波輔助提取工藝的正交實驗法優(yōu)選［J］.時珍國醫(yī)國藥，2012，23（10）：2624-2625.

SUN Ying，ZHAO Yiqing，BAO Jiachun，et al.Microwave-assisted extraction of polysaccharides from Polyporus umbellatus optimized by orthogonal method［J］.Lishizhen Medicine and Materia Medica Research，2012，23（10）：2624-2625.（in Chinese）

［23］姜瓊，謝妤.苯酚-硫酸法測定多糖方法的改進［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學，2013，41（12）：316-318.

JIANG Qiong，XIE Yu.Improvement of phenol-sulfuric acid method for determination of polysaccharides［J］.Jiangsu Agricultural Sciences，2013，41（12）：316-318.（in Chinese）

Microwave-Assisted Extraction of Polysaccharides from Polyporus umbellatus Optimized by Box-Behnken Design-Response Surface Methodology

QIAO Yanming1，CHEN Wenqiang1，2，DENG Baiwan1，2，PENG Hao1，2，XIE Xiuchao1，2，ZHANG Hui3，PAN Jiawei3
（1.School of Biological Science and Engineering，Shaanxi University of Technology，Hanzhong 723000，China；2. Shaanxi Engineering Research Center of Edible and Medicated Fungi，Hanzhong 723000，China；3.Nanzheng Middle School of Shaanxi，Nanzheng 723100，China）

To optimize the microwave-assisted extraction technique of polysaccharide from Polyporus umbellatus，the effects of the liquid to solid ratio，pH，microwave power，extraction time，extraction number and their interaction on extaction were studied by Box-Behnken design.The predictive model and reliability were developed by Design Expert software and response surface analysis（RSM）.The optimal extraction conditions were achieved and listed as follows：liquid-to-solid ratio 30∶1 mL/g，pH 6.6，microwave power 614 W，extraction time 2.5 mins，extraction number 3 times.Under these conditions，the extraction yield of polysaccharide was up to 6.75%.The extraction conditions achieved by RSM provided technical support for the industrialproduction of polysaccharide from Polyporus umbellatus.

Polyporusumbellatus，microwave-assisted extraction，polysaccharides，Box-Behnken design，response surface analysis

Q 949.329.7

A

1673—1689（2015）09—0986—09

2014-10-07

陜西省“春筍計劃”研究項目（2014-2015）。

陳文強（1956—），男，陜西洋縣人，教授，碩士研究生導師，主要從事微生物資源的保護與利用研究。E-mail：wenqiangc@126.com