梁　　娜，秦清娟，鄒　　勇，鐘超健，周　　斌，鐘　　耕，3，*

（1.西南大學食品科學學院，重慶400716；2.重慶市糧油質(zhì)量監(jiān)督檢驗站，重慶404000；3.西南大學食品科學與工程國家級實驗教學示范中心，重慶400716）

魔芋葡甘聚糖對小鼠的防醉解酒作用

梁娜1，秦清娟1，鄒勇2，鐘超健1，周斌2，鐘耕1，3，*

（1.西南大學食品科學學院，重慶400716；2.重慶市糧油質(zhì)量監(jiān)督檢驗站，重慶404000；3.西南大學食品科學與工程國家級實驗教學示范中心，重慶400716）

目的：以乙醇致醉的醉酒小鼠為對象，研究魔芋葡甘聚糖（KGM）對小鼠的防醉解酒作用。方法：通過解酒、防醉、攀附、檢測小鼠全血乙醇含量的實驗，探究KGM對小鼠的防醉解酒作用。結(jié)果：魔芋葡甘聚糖可顯著（p＜0.05）延長小鼠對酒精的耐受時間，縮短醉酒的維持時間。在小鼠全血乙醇含量檢測中，醉酒小鼠血液乙醇高峰在酒后60min出現(xiàn)，且中、高KGM組較模型組乙醇濃度顯著（p＜0.05）縮小，因此KGM可明顯降低醉酒小鼠血液中乙醇濃度。結(jié)論：魔芋葡甘聚糖具有良好的解酒防醉效果。

魔芋葡甘聚糖，防醉解酒，小鼠

我國酒文化歷史悠久，適量飲酒可活血通絡(luò)、強心提神、消除疲勞、促進睡眠。但過度嗜酒，則引起機體生理功能紊亂，從而造成疾病危害人體健康，以致給社會和家庭帶來重大損失和痛苦。在全世界許多地方，酒精中毒是重要的社會、經(jīng)濟和公共衛(wèi)生問題［1］。由酒精引起的死亡率和發(fā)病率，高于吸煙，是麻疹和瘧疾的總和［2］。在美國，攝取過量酒精引起的肝臟疾患已成為男性的第四大主要死亡原因。面對如此高的酒精中毒死亡率和傷殘率，在酒已經(jīng)成為人們?nèi)粘Ｉ钜徊糠值那闆r下，有效預防醉酒，早醒酒、早解毒（酒）是非常值得研究的健康問題。安全、副作用小、作用迅速，既能抗醉又能解酒，保護肝臟的解酒產(chǎn)品將有廣闊的市場前景。

魔芋［3］（konjac）別名磨芋、蒟蒻，屬天南星科（Araceae）魔芋屬（Amorphophallus Blume），植物，具有較高的藥用、食用價值，其主要功能活性成分是一種高分子水溶性多糖［4］—魔芋葡甘聚糖（Konjac glucomannan，KGM），被廣泛用于醫(yī)藥、食品、化工、建材等領(lǐng)域。醫(yī)學領(lǐng)域上，KGM對人體具有輔助降血脂、降血糖、降血清膽固醇、減肥、抗癌、通便等多種功效［5］。在KGM的性質(zhì)以及酒精在機體內(nèi)吸收代謝過程［6-8］的研究中顯示，魔芋葡甘聚糖在一定程度上抗宿醉作用明顯，同時也有研究表明，KGM能對CCl4所致小鼠實驗性肝損傷［9］和大鼠酒精性脂肪肝［10］有保護和預防作用。本文以乙醇致醉的醉酒小鼠為對象，研究KGM對小鼠的防醉解酒的作用，為開發(fā)優(yōu)質(zhì)的解酒產(chǎn)品奠定堅實的基礎(chǔ)。

1　材料與方法

1.1材料與儀器

昆明系小鼠健康正常，雌雄各半，體重25～30g，重慶騰鑫比爾實驗動物銷售有限公司提供，許可證號：SCXK（渝）2012-0003；白酒乙醇體積濃度為52%，重慶本地生產(chǎn)，購自超市；魔芋粉，四川魔力科技有限公司提供；無水乙醇、異丙醇色譜純，成都市科龍化工試劑廠；其余試劑均為分析純。

Agilent 7890B氣相色譜儀美國安捷倫公司；Model 5810臺式高速離心機德國Eppendorf公司；SHA-C往復式水浴恒溫振蕩器江蘇正級儀器有限公司；HH-4恒溫水浴鍋金壇市富華儀器有限公司；DJIC增力攪拌器金壇大地自動化儀器廠；DHG-9240A電熱恒溫鼓風干燥箱上海齊欣科學儀器有限公司；FA 1004電子天平上海盛磁儀器有限公司。

1.2實驗方法

1.2.1魔芋葡甘聚糖水溶液的制備魔芋粉經(jīng)超微粉碎、微波輔助乙醇洗滌處理［11-12］，得到KGM樣品，KGM含量大于93%，其1%溶液的粘度值為42000mPa·s以上。分別取KGM 1.39、0.93、0.63g，加入適量蒸餾水溶解，再定容至100mL，得到濃度分別為1.39、0.93、0.63g/100mL的KGM水溶液，密封冷藏備用。

1.2.2解酒實驗小鼠40只，體重25～30g，雌性各半，隨機分成4組，每組10只，實驗前禁食不禁水12h。各組小鼠均用白酒0.13mL/10g體重灌服，30min后，模型組小鼠灌服蒸餾水，低、中、高劑量組小鼠分別灌服0.63、0.93、1.39g/100mL的KGM水溶液，灌服量均為0.25mL/10g體重，觀察小鼠活動情況［13-16］。以小鼠爬行不穩(wěn)、后腹拖地、毛松散、閉眼不動為醉酒指標。以小鼠活動自如、精神、行為靈活、毛順滑為醒酒指標。記錄小鼠入睡（醉酒）時間和蘇醒（醒酒）時間，計算維持時間（從入睡到蘇醒的時間），并觀察記錄醉酒小鼠只數(shù)［17］。

1.2.3防醉實驗小鼠40只，體重25～30g，雌雄各半，隨機分成4組，每組10只，實驗前禁食不禁水12h。模型組小鼠灌服蒸餾水，低、中、高劑量組小鼠分別灌服0.63、0.93、1.39g/100mL的KGM水溶液，灌服量均為0.25mL/10g體重。30min后各組灌服白酒，灌服量均為0.13mL/10g體重，觀察小鼠活動情況［14-16，18］。以小鼠爬行不穩(wěn)、后腹拖地、毛松散、閉眼不動為入睡（醉酒）指標，以小鼠活動自如、精神、行為靈活、毛順滑為蘇醒（醒酒）指標。記錄小鼠入睡（醉酒）時間蘇醒（醒酒）時間，計算出耐受時間（從灌酒到入睡的時間）及維持時間（從入睡到蘇醒時間），并觀察記錄醉酒小鼠只數(shù)［17］。

1.2.4攀附實驗小鼠40只，體重25～30g，雌性各半，隨機分成4組，每組10只，實驗前禁食不禁水12h。模型組小鼠灌服蒸餾水，低、中、高劑量組小鼠分別灌服0.63、0.93、1.39g/100mL的KGM水溶液，灌服量均為0.2mL/10g體重。30min后，各組灌服白酒0.1mL/10g體重，然后立即將小鼠放在垂直的金屬網(wǎng)上［19］，觀察小鼠活動情況，記錄小鼠攀附在網(wǎng)上的時間［17］。

1.2.5全血乙醇濃度實驗

1.2.5.1獲取醉酒小鼠全血樣品及其處理40只小鼠，體重在27～35g，雌雄各半，隨機分成4組，每組10只，實驗前禁食12h。模型組小鼠灌胃蒸餾水，低劑量、中劑量、高劑量組小鼠分別灌服0.63、0.93、1.39g/ 100mL的KGM水溶液，灌胃量均為0.25mL/10g體重。30min后，各組小鼠灌胃白酒，灌胃量均為0.1mL/10g體重。分別于灌胃白酒后第30、60、90、120、150min對小鼠進行眼眶后靜脈叢取血，為防止小鼠取血過多導致死亡，每次隨機對每組中5只小鼠取血，每只小鼠取血2次，同一只小鼠取血間隔60min左右。

取原血樣100μL，于自制肝素鈉抗凝管（肝素鈉抗凝管制作：取0.1mL 1%肝素生理鹽溶液于試管內(nèi)，旋轉(zhuǎn)試管，使溶液均勻浸濕試管內(nèi)壁，放入80～100℃烘箱烤干即可）加內(nèi)標物質(zhì)（異丙醇溶液：1mg/mL）500μL，3000r/min離心5min，取上清液注入進樣瓶（上清液注入進樣瓶結(jié)合使用1mL一次性注射器和0.45μm濾膜）。待測樣品用氣相色譜法測定全血乙醇濃度［20-23］。

1.2.5.2氣相色譜分析條件色譜柱：PEG-20M融硅石英毛細管柱；進樣口溫度190℃；分流進樣；檢測器（FID）溫度240℃；氣體流速：空氣400mL/min，氫氣60mL/min；毛細管柱：柱流量1mL/min，進樣量2μL；柱溫：程序升溫，50℃保持7min，再以10℃/min升溫至70℃，然后以40℃/min升溫至110℃。

1.2.5.3標準曲線配制濃度為1mg/mL的異丙醇溶液，并且配制濃度梯度為39.5、63、79、158、237mg/100mL的無水乙醇溶液。取各梯度無水乙醇溶液各100μL，分別加內(nèi)標液（異丙醇溶液）500μL，配成標準溶液，采用氣相色譜法進樣檢測。以色譜圖乙醇峰面積與異丙醇峰面積比值為橫坐標X，乙醇濃度（mg/100mL）為縱坐標Y，繪制標準曲線。

1.2.6數(shù)據(jù)處理方法采用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計分析，各組數(shù)據(jù)以±s的形式表示，多重比較采用LSD法。

2　結(jié)果與分析

2.1魔芋葡甘聚糖的解酒作用

KGM的解酒實驗結(jié)果見表1，各組小鼠在灌胃白酒后，高劑量、低劑量組10只小鼠全部醉酒，模型組、中劑量組均有9只醉酒。高、中、低劑量組小鼠維持時間較模型組均極顯著縮短（p＜0.01）。同時，高、中、低劑量組實驗小鼠之間的維持時間差異顯著（p＜0.05）。由此可見，KGM具有良好的解酒作用，能明顯縮短醉酒小鼠的昏睡時間，其解酒作用隨濃度的增加而增強。

表1　實驗小鼠解酒實驗結(jié)果Table 1　Results of experiment on relieving alcoholism in mice

2.2魔芋葡甘聚糖的防醉作用

KGM的防醉實驗結(jié)果見表2，各組小鼠在灌胃白酒后，高、低劑量組各有1只小鼠未醉酒，中劑量組、模型組10只均醉酒。并且，高、中劑量組小鼠的耐受時間比模型組極顯著增長（p＜0.01），低劑量組小鼠耐受時間與模型組并無顯著差異。從維持時間來看，與模型組小鼠相比，高、中、低劑量組均極顯著縮短（p＜0.01），但中、高劑量組小鼠維持時間并無顯著差異。由此可見，KGM具有顯著的防醉作用，能有效縮短小鼠昏睡時間。

表2　實驗小鼠防醉實驗結(jié)果Table 2　Results of experiment on preventing drunkenness in mice

2.3小鼠攀附實驗

小鼠攀附實驗結(jié)果如表3所示，灌胃白酒后，高劑量組小鼠有3只未從金屬網(wǎng)上掉落，中劑量組有1只小鼠未從金屬網(wǎng)上掉落，模型組、低劑量組10只小鼠均掉落。與模型組小鼠相比，高劑量組小鼠攀附時間極顯著延長（p＜0.01），中劑量組小鼠的攀附時間顯著延長（p＜0.05），而低劑量組小鼠攀附時間較模型組無顯著性差異。由此可知，魔芋葡甘聚糖能有效的延長小鼠的攀附時間，具有良好的防醉作用。

表3　實驗小鼠攀附實驗結(jié)果Table 3　Results of clings experiment of the mice

2.4魔芋葡甘聚糖對小鼠全血乙醇濃度的影響

2.4.1標準曲線標準曲線圖見圖1，得標準曲線方程為：Y=794.19X－13.565，R2=0.9632。

圖1　標準曲線圖Fig.1　Standard curve map

2.4.2小鼠全血乙醇含量檢測結(jié)果由表4可知，各組小鼠全血乙醇含量均呈先增高后降低的變化趨勢，在酒后60min達到最高點，150min后小鼠基本上從醉酒狀態(tài)恢復。與模型組小鼠全血乙醇濃度相比，在酒后60、90min，高劑量組極顯著下降（p＜0.01），中劑量組顯著下降（p＜0.05）。在酒后120min時，高、低劑量組小鼠全血乙醇濃度較模型組極顯著降低（p＜0.01）。而在實驗的各個時間段內(nèi)，低劑量組、模型組小鼠全血乙醇濃度并無顯著差異。由此可見，KGM有效的阻礙了乙醇向小鼠血液中的擴散，降低了機體對乙醇的吸收，緩解全血乙醇濃度增高的趨勢，降低體內(nèi)全血乙醇濃度。

表4　實驗小鼠全血乙醇濃度測定結(jié)果Table 4　Results of detecting the ethanol concentration in the blood of the drunken mice

3　結(jié)論

本實驗對魔芋葡甘聚糖的防醉解酒作用進行了分析和評價，實驗結(jié)果表明，KGM對小鼠能起到一定的防醉解酒效果，能延長小鼠耐受時間，縮短維持時間，降低小鼠血液乙醇含量。中、高劑量KGM干預組小鼠血液乙醇濃度在60min后開始下降，且90、120min下降顯著（p＜0.05），尤其高劑量組小鼠血液在灌服白酒后一直保持較低水平乙醇含量，且其耐受時間、攀附時間顯著（p＜0.01）延長和維持時間的顯著（p＜0.01）縮短，顯示出KGM良好的防醉解酒效果。但其作用機理尚不明確，有待進一步研究。

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Study on the effect of konjac glucomannan on preventing drunkenness and relieving alcoholism of mice

LIANG Na1，QIN Qing-juan1，ZOU Yong2，ZHONG Chao-jian1，ZHOU Bin2，ZHONG Geng1，3，*
（1.School of Food Science，Southwest University，Chonqing 400716，China；2.Grain and Oil Quality Supervision and Inspection Station，Chongqing 404000，China；3.National Undergraduate Experiment Teaching Demonstration Center of Food Science and Engineering，Southwest University，Chongqing 400716，China）

objective：The study aimed to discuss the effect of konjac glucomannan on preventing drunkenness and relieving alcoholism of mice.Methods：The effect of konjac gluconannan on preventing drunkenness and relieving alcoholism of mice was explored through the methods of preventing alcoholism and relieving alcoholism and clings，and detecting the ethanol concentration in the blood of the drunken mice.Results：The konjac gluconannan could significantly（p＜0.05）postpone the tolerance time of mice to the alcohol，and shorten the duration of drunkenness obviously.Depending on the results of detecting the ethanol concentration in the blood of the drunken mice，the ethanol concentration peak of the drunken mice appeared around 60min，and the ethanol concentration of the middle and high dose KGM group was significantly（p＜0.05）lower than the model group. So konjac glucomannan could decrease the ethanol concentration in the blood of the drunken mice significantly. Conclusion：The konjac gluconannan had good effects on preventing drunkenness and relieving alcoholism.

konjac glucomannan；preventing prunkenness and relieving alcoholism；mice

TS239

A

1002-0306（2015）14-0366-04

10.13386/j.issn1002-0306.2015.14.067

2014－10－20

梁娜（1992-），女，本科生，研究方向：食品加工技術(shù)。

鐘耕（1964-），男，教授，研究方向：糧油加工及天然產(chǎn)物提取與功能分析。

西南大學2013年本科生科技創(chuàng)新項目（1317002）；西南大學食品科學學院2014年科技創(chuàng)新項目（SPY201413）。