劉峰祖?zhèn)髅胤娇诜茉兴幍募毙远拘院涂股饔醚芯?/h1>
2015-10-25 07:41:15許雄偉許韓波葉雁波林培英
中國醫(yī)藥指南 2015年22期
許雄偉* 范 強(qiáng) 許韓波 葉雁波 林培英
（1 廣東省生物制品與藥物研究所，廣東 廣州 510300；2 廣東省計(jì)劃生育科研所，廣東 廣州 510000；3 普寧市人民醫(yī)院，廣東 揭陽 515300）
劉峰祖?zhèn)髅胤娇诜茉兴幍募毙远拘院涂股饔醚芯?/p>
許雄偉1*范 強(qiáng)2許韓波3葉雁波1林培英1
（1 廣東省生物制品與藥物研究所，廣東 廣州 510300；2 廣東省計(jì)劃生育科研所，廣東 廣州 510000；3 普寧市人民醫(yī)院，廣東 揭陽 515300）
目的 探討劉峰祖?zhèn)髅胤娇诜茉兴幖毙远拘院涂股饔?。方法通過小鼠急性毒性試驗(yàn)、抗著床試驗(yàn)、抗早孕試驗(yàn)及對(duì)生育力影響的試驗(yàn)，研究其急性毒性和抗生育作用。結(jié)果小鼠急性毒性試驗(yàn)均未有動(dòng)物死亡及病理解剖未發(fā)現(xiàn)異常?？怪苍囼?yàn)中劑量和高劑量生育抑制率分別為60%、80%，胎兒數(shù)明顯減少?？乖缭性囼?yàn)生育抑制率分別為60%、80%，胎兒數(shù)也明顯減少。對(duì)生育力影響試驗(yàn)，生育抑制率分別為70%、80%，胎兒數(shù)明顯減少。結(jié)論劉峰祖?zhèn)髅胤娇诜茉兴幮∈蠹毙远拘栽囼?yàn)LD50＞5000 mg/kg BW，有明顯的抗生育作用。
劉峰祖；口服；避孕藥；急性毒性；抗生育
劉峰祖?zhèn)髅胤娇诜茉兴幨羌冎兴幣员茉兴?，由紅花、牛膝、木香、燈心草等十二味中藥組成。其主要成分含有多星鹽、香豆素、木香堿、元胡甲素、佘荼酚等。臨床上應(yīng)用此方已有40多年，每用顯效。但此方未有安全數(shù)據(jù)資料和作用效果評(píng)價(jià)，本文鑒于此做了此方急性毒性和抗生育作用研究。
1 材料與方法
1.1材料：秘方藥材均購自廣州清平市場(chǎng)。將紅花、牛膝、木香、燈心草等十二味中藥共1050 g，水煮后過濾濃縮成100 mL×5瓶，放冰箱備用。其他試劑均為國產(chǎn)分析純。動(dòng)物購自南方醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心健康昆明種小鼠。按要求飼養(yǎng)于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室。
1.2方法
1.2.1小鼠急性毒性試驗(yàn)：采用一次限量法。健康昆明小鼠20只，雌雄各半，體質(zhì)量18～22 g，實(shí)驗(yàn)前禁食過夜約16 h，然后采用一次經(jīng)口灌胃方式灌喂，灌胃容量為0.2 mL/10 g BW，5000 mg/kg BW秘方濃縮液。每天觀察動(dòng)物中毒癥狀，連續(xù)觀察14 d。記錄動(dòng)物體質(zhì)量變化、死亡情況及死亡時(shí)間，對(duì)染毒后死亡和觀察期內(nèi)存活的動(dòng)物均作大體解剖檢查。
1.2.2抗著床試驗(yàn)：健康昆明種小鼠，體質(zhì)量28～35 g，雌鼠40只，雄鼠20只。將雌鼠與雄鼠合籠，2雌鼠配1雄鼠。每天檢查雌鼠有無陰栓，檢查雌鼠陰道涂片有無精子。發(fā)現(xiàn)有陰栓或精子當(dāng)天作為妊娠第1天。將孕鼠隨機(jī)分成對(duì)照、秘方低劑量組、秘方中劑量組、秘方高劑量組，每組10只。于妊娠第1～4天給藥，每日給一次。對(duì)照組給予純水，秘方低劑量組給予50 mg/kg BW，秘方中劑量組給予100 mg/kg BW，秘方高劑量組給予300 mg/kg BW。于妊娠第12天處理動(dòng)物，記錄胚胎數(shù)及懷孕動(dòng)物的百分率。
表1 急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)動(dòng)物體質(zhì)量變化和死亡情況
表2 小鼠抗著床作用
表3 抗早孕實(shí)驗(yàn)
表4 對(duì)生育力的影響
1.2.3抗早孕實(shí)驗(yàn)：同抗著床實(shí)驗(yàn)，雌鼠給藥在妊娠第6～9天。于妊娠第12天處理動(dòng)物，記錄胚胎數(shù)和死胎數(shù)。
1.2.4對(duì)生育力的影響：同抗著床實(shí)驗(yàn)。雌鼠給藥在妊娠第1～9天，于妊娠第12天處理動(dòng)物。統(tǒng)計(jì)各組孕鼠數(shù)、胎兒數(shù)和受孕率。
2 結(jié)果和分析
2.1小鼠急性毒性試驗(yàn)：2周觀察期未見動(dòng)物出現(xiàn)明顯的中毒癥狀。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)動(dòng)物大體解剖觀察未見明顯的病理改變。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體質(zhì)量變化以及死亡情況見表1。
2.2抗著床試驗(yàn)：見表2。低劑量組處理組小鼠的著床率沒有改變，中劑量組和高劑量組處理組的子宮內(nèi)著床位點(diǎn)明顯減少，著床率明顯降低，分別為：4/10、2/10，其生育抑制率分別為：60%、80%；中劑量處理濃度開始，小鼠所懷的胎兒數(shù)平均值明顯降低，總胎兒數(shù)量明顯減少。
2.3抗早孕實(shí)驗(yàn)：見表3。從中劑量處理濃度開始，小鼠懷孕率明顯降低，生育抑制率顯著提高；小鼠懷孕的胎兒數(shù)隨著處理濃度的增加而減少；少量有著床位點(diǎn)的處理組雌鼠與對(duì)照組的雌鼠子宮雖同呈串珠狀，但給藥組處理組的子宮普遍色澤暗淡；處理組雖然表現(xiàn)出明顯的受孕跡象，但與對(duì)照組比較胎兒的發(fā)育狀況較差；從胎盤的解剖結(jié)構(gòu)看，胎盤處血管少，顯然營養(yǎng)供給不足，可預(yù)見胎兒很難成功生產(chǎn)。
2.4對(duì)生育力的影響：見表4。與對(duì)照組比較，低劑量處理組小鼠受孕率降低不明顯，但是小鼠所孕胎兒總數(shù)有一定的減少；中劑量、高劑量兩個(gè)處理濃度小鼠受孕率明顯降低，其生育抑制率分別達(dá)到：70%、80%（與對(duì)照組比較，P＜0.01），個(gè)體所孕的胎兒數(shù)也明顯減少；方差分析表明：對(duì)小鼠的生育抑制作用有一定的量效關(guān)系。
3 討 論
本文研究通過對(duì)劉峰祖?zhèn)髅胤娇诜茉兴庍M(jìn)行小鼠毒性急性試驗(yàn)、抗著床試驗(yàn)、抗早孕試驗(yàn)及對(duì)生育力影響試驗(yàn)，顯示其基本上無毒及有較好的抗生育作用。劉峰祖?zhèn)髅胤娇诜茉兴幨羌冎兴幣员茉兴?，他在臨床上應(yīng)用此方已有40多年，每用顯效。全球育齡女性眾多，人口統(tǒng)計(jì)我國約有四億育齡女子，隨著人們對(duì)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、文化生活水平的不斷提高，人類需要有計(jì)劃地選擇性生育，所以特別需要一種安全、長效、輕松、方便的避孕措施［1-2］。劉峰祖?zhèn)髅胤娇诜茉兴帲鳛榧冎兴幣员茉兴?，是有一定開發(fā)前景。
［1］藥物單次給藥毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則［S］.2014.
［2］張均田.現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)方法［M］.北京:北京醫(yī)科大學(xué)中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1998.
R282.710.5
B
1671-8194（2015）22-0051-02
廣東省建設(shè)中醫(yī)藥強(qiáng)省科研基金（20111139）
E-mail：xxw163@163.com
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劉峰祖?zhèn)髅胤娇诜茉兴幍募毙远拘院涂股饔醚芯?/p>
許雄偉1*范 強(qiáng)2許韓波3葉雁波1林培英1
（1 廣東省生物制品與藥物研究所，廣東 廣州 510300；2 廣東省計(jì)劃生育科研所，廣東 廣州 510000；3 普寧市人民醫(yī)院，廣東 揭陽 515300）
目的 探討劉峰祖?zhèn)髅胤娇诜茉兴幖毙远拘院涂股饔?。方法通過小鼠急性毒性試驗(yàn)、抗著床試驗(yàn)、抗早孕試驗(yàn)及對(duì)生育力影響的試驗(yàn)，研究其急性毒性和抗生育作用。結(jié)果小鼠急性毒性試驗(yàn)均未有動(dòng)物死亡及病理解剖未發(fā)現(xiàn)異常?？怪苍囼?yàn)中劑量和高劑量生育抑制率分別為60%、80%，胎兒數(shù)明顯減少?？乖缭性囼?yàn)生育抑制率分別為60%、80%，胎兒數(shù)也明顯減少。對(duì)生育力影響試驗(yàn)，生育抑制率分別為70%、80%，胎兒數(shù)明顯減少。結(jié)論劉峰祖?zhèn)髅胤娇诜茉兴幮∈蠹毙远拘栽囼?yàn)LD50＞5000 mg/kg BW，有明顯的抗生育作用。
劉峰祖；口服；避孕藥；急性毒性；抗生育
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1 材料與方法
1.1材料：秘方藥材均購自廣州清平市場(chǎng)。將紅花、牛膝、木香、燈心草等十二味中藥共1050 g，水煮后過濾濃縮成100 mL×5瓶，放冰箱備用。其他試劑均為國產(chǎn)分析純。動(dòng)物購自南方醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心健康昆明種小鼠。按要求飼養(yǎng)于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室。
1.2方法
1.2.1小鼠急性毒性試驗(yàn)：采用一次限量法。健康昆明小鼠20只，雌雄各半，體質(zhì)量18～22 g，實(shí)驗(yàn)前禁食過夜約16 h，然后采用一次經(jīng)口灌胃方式灌喂，灌胃容量為0.2 mL/10 g BW，5000 mg/kg BW秘方濃縮液。每天觀察動(dòng)物中毒癥狀，連續(xù)觀察14 d。記錄動(dòng)物體質(zhì)量變化、死亡情況及死亡時(shí)間，對(duì)染毒后死亡和觀察期內(nèi)存活的動(dòng)物均作大體解剖檢查。
1.2.2抗著床試驗(yàn)：健康昆明種小鼠，體質(zhì)量28～35 g，雌鼠40只，雄鼠20只。將雌鼠與雄鼠合籠，2雌鼠配1雄鼠。每天檢查雌鼠有無陰栓，檢查雌鼠陰道涂片有無精子。發(fā)現(xiàn)有陰栓或精子當(dāng)天作為妊娠第1天。將孕鼠隨機(jī)分成對(duì)照、秘方低劑量組、秘方中劑量組、秘方高劑量組，每組10只。于妊娠第1～4天給藥，每日給一次。對(duì)照組給予純水，秘方低劑量組給予50 mg/kg BW，秘方中劑量組給予100 mg/kg BW，秘方高劑量組給予300 mg/kg BW。于妊娠第12天處理動(dòng)物，記錄胚胎數(shù)及懷孕動(dòng)物的百分率。
表1 急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)動(dòng)物體質(zhì)量變化和死亡情況
表2 小鼠抗著床作用
表3 抗早孕實(shí)驗(yàn)
表4 對(duì)生育力的影響
1.2.3抗早孕實(shí)驗(yàn)：同抗著床實(shí)驗(yàn)，雌鼠給藥在妊娠第6～9天。于妊娠第12天處理動(dòng)物，記錄胚胎數(shù)和死胎數(shù)。
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2 結(jié)果和分析
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2.2抗著床試驗(yàn)：見表2。低劑量組處理組小鼠的著床率沒有改變，中劑量組和高劑量組處理組的子宮內(nèi)著床位點(diǎn)明顯減少，著床率明顯降低，分別為：4/10、2/10，其生育抑制率分別為：60%、80%；中劑量處理濃度開始，小鼠所懷的胎兒數(shù)平均值明顯降低，總胎兒數(shù)量明顯減少。
2.3抗早孕實(shí)驗(yàn)：見表3。從中劑量處理濃度開始，小鼠懷孕率明顯降低，生育抑制率顯著提高；小鼠懷孕的胎兒數(shù)隨著處理濃度的增加而減少；少量有著床位點(diǎn)的處理組雌鼠與對(duì)照組的雌鼠子宮雖同呈串珠狀，但給藥組處理組的子宮普遍色澤暗淡；處理組雖然表現(xiàn)出明顯的受孕跡象，但與對(duì)照組比較胎兒的發(fā)育狀況較差；從胎盤的解剖結(jié)構(gòu)看，胎盤處血管少，顯然營養(yǎng)供給不足，可預(yù)見胎兒很難成功生產(chǎn)。
2.4對(duì)生育力的影響：見表4。與對(duì)照組比較，低劑量處理組小鼠受孕率降低不明顯，但是小鼠所孕胎兒總數(shù)有一定的減少；中劑量、高劑量兩個(gè)處理濃度小鼠受孕率明顯降低，其生育抑制率分別達(dá)到：70%、80%（與對(duì)照組比較，P＜0.01），個(gè)體所孕的胎兒數(shù)也明顯減少；方差分析表明：對(duì)小鼠的生育抑制作用有一定的量效關(guān)系。
3 討 論
本文研究通過對(duì)劉峰祖?zhèn)髅胤娇诜茉兴庍M(jìn)行小鼠毒性急性試驗(yàn)、抗著床試驗(yàn)、抗早孕試驗(yàn)及對(duì)生育力影響試驗(yàn)，顯示其基本上無毒及有較好的抗生育作用。劉峰祖?zhèn)髅胤娇诜茉兴幨羌冎兴幣员茉兴?，他在臨床上應(yīng)用此方已有40多年，每用顯效。全球育齡女性眾多，人口統(tǒng)計(jì)我國約有四億育齡女子，隨著人們對(duì)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、文化生活水平的不斷提高，人類需要有計(jì)劃地選擇性生育，所以特別需要一種安全、長效、輕松、方便的避孕措施［1-2］。劉峰祖?zhèn)髅胤娇诜茉兴帲鳛榧冎兴幣员茉兴?，是有一定開發(fā)前景。
［1］藥物單次給藥毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則［S］.2014.
［2］張均田.現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)方法［M］.北京:北京醫(yī)科大學(xué)中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1998.
R282.710.5
B
1671-8194（2015）22-0051-02
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