尹亮

(安徽省計(jì)量科學(xué)研究院 安徽合肥 230000)

在我國各個(gè)行業(yè)應(yīng)用到液相色譜儀時(shí),其在檢測(cè)過程中展現(xiàn)了優(yōu)點(diǎn)。這種優(yōu)點(diǎn)是符合現(xiàn)在社會(huì)發(fā)展所需的。在不影響正常分析質(zhì)量的情況下,能夠提高分析速度,增加分析效率。同時(shí)還可以把檢測(cè)樣板中的各種物質(zhì)分析的更加分析到位。但是在檢測(cè)過程中,由于減少了一些麻煩的步驟,就更加需要在使用儀器中注意規(guī)定的檢定方法,這樣才能保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性。同時(shí)有關(guān)的注意事項(xiàng)也要仔細(xì)觀看,并注意按照其步驟進(jìn)行,減少損失。

1 液相色譜儀的原理

高壓泵利用高壓把流動(dòng)相壓進(jìn)系統(tǒng)中,然后樣品溶液從進(jìn)入到流動(dòng)相中,并跟隨流動(dòng)相運(yùn)動(dòng),最終進(jìn)入色譜柱中,由于樣品溶液的各個(gè)組成物質(zhì)具有不同的性質(zhì),在色譜柱中運(yùn)動(dòng)時(shí)會(huì)有一定的差異,經(jīng)過一段時(shí)間的運(yùn)動(dòng)以后,運(yùn)動(dòng)速度差異會(huì)變得越來越大,這樣就被分成多個(gè)部分分別從色譜柱中流出,這樣在檢測(cè)器中就記錄下了這些樣品組分的濃度,然后以圖譜的形式呈現(xiàn)出來。

2 液相色譜儀的組成

液相色譜儀主要由加入樣品系統(tǒng)、輸送樣品系統(tǒng)、分離樣品系統(tǒng)、檢測(cè)結(jié)果系統(tǒng)和結(jié)果分析處理系統(tǒng)組成。

2.1 樣品加入系統(tǒng)

一般是用安裝有隔膜的注射器或者是利用高壓來加進(jìn)樣品,為了提高所分析樣品的重復(fù)性,要在加樣時(shí)注意使每次加入的樣品量保持相同。

2.2 樣品輸送系統(tǒng)

高壓泵、流動(dòng)相貯存器和梯度儀三部分組成了輸送樣品系統(tǒng)。高壓泵高的壓強(qiáng)可以使待分析樣品液體以相當(dāng)大的速度通過層析柱,較大速度可降低樣品在層析柱中向四周擴(kuò)散。貯存器和密度梯度儀的作用是使樣品流動(dòng)相隨著所用固定相和樣品的變化而變化,具體包括改變洗脫液的吸水性、陰陽離子濃度、PH值,這樣就可使各種樣品成分最終都可以實(shí)現(xiàn)有效的分離,增強(qiáng)分離的效果。

2.3 樣品分離系統(tǒng)

首先,長度一般為1dm～5dm,內(nèi)徑為0.2cm～0.5cm的色譜柱、有時(shí)候需要有連接管和保持溫度恒定的儀器等組成了樣品分離系統(tǒng)。色譜柱的材料是不銹鋼,厚壁玻璃管、鈦合金等。色譜柱內(nèi)是半徑為2.5μm～5μm的固定相,固定相中的基質(zhì)材料是樹脂或硅膠。

其次,固定相中所裝的物質(zhì)粒度小,柱床特別容易達(dá)到均勻、致密的狀態(tài),這樣就可以極大地降低擴(kuò)散效應(yīng)。

最后,恒溫器可以使儀器內(nèi)的溫度使從25℃升高到60℃左右,溫度越高,樣品在層析柱中傳輸?shù)乃俣纫簿驮酱?分析時(shí)間也就減少,從而提高液相色譜儀的分析分離效率。

3 液相色譜儀各部分的檢定方法和注意事項(xiàng)

由于我國在應(yīng)用液相色譜儀的領(lǐng)域越來越多,所以對(duì)其在檢測(cè)方面的要求也越來越多,并且為了保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確無誤,更需要對(duì)它在使用過程中的注意事項(xiàng)加以詳細(xì)的闡述,來保證液相色譜儀使用的正確性,和延長使用壽命。

3.1 泵流量設(shè)定量誤差Ss和流量穩(wěn)定性誤差SR

3.1.1 檢定方法

泵流量的檢測(cè)是根據(jù)液相色譜儀上標(biāo)定的流量標(biāo)準(zhǔn)來設(shè)定好標(biāo)準(zhǔn)流量,然后打開儀器,按照正確的操作步驟進(jìn)行操作,等到壓力趨于穩(wěn)定以后在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)收集流動(dòng)相于處理過可以直接使用的容量瓶中,同時(shí)由同一個(gè)人計(jì)時(shí),在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)收集好流動(dòng)相,然后在分析天平上稱量所收集的流動(dòng)相的質(zhì)量。

3.1.2 注意事項(xiàng)

在收集數(shù)據(jù)的同時(shí)要注意把相關(guān)的實(shí)驗(yàn)材料保管好。由于相關(guān)的實(shí)驗(yàn)材料是易揮發(fā)液體,所以要掌握好實(shí)驗(yàn)的速度和時(shí)間。并且在實(shí)驗(yàn)過程還要有條不紊的進(jìn)行每一個(gè)步驟的安排,以便減少實(shí)驗(yàn)過程的失誤和一定的經(jīng)濟(jì)損失。并且要把詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)記錄進(jìn)行整理,確保實(shí)驗(yàn)記錄的可靠性。

3.2 色譜柱溫箱溫度的檢定

3.2.1 檢定方法

在色譜柱溫箱內(nèi)固定一個(gè)溫度計(jì),使溫度計(jì)的探頭能夠測(cè)量色譜柱的溫度。分別選擇35℃和45℃作為檢測(cè)溫度進(jìn)行檢定。按照液相色譜儀的操作規(guī)程操作,等到溫度穩(wěn)定在一定值時(shí),記錄下溫度計(jì)的讀數(shù),與此同時(shí)開始用秒表計(jì)時(shí),每隔10min記一次讀數(shù),總共記錄7組數(shù)據(jù),然后求出算術(shù)平均數(shù),算數(shù)平均數(shù)與所設(shè)定的35℃或45℃的差值就是柱溫箱溫度設(shè)定值誤差ΔTs,而讀數(shù)中最高溫度與最低溫度的差值是控溫穩(wěn)定性Tc。

3.2.2 注意事項(xiàng)

溫度的升高在通常情況下會(huì)加大理論塔板數(shù),峰和峰之間的距離變小,但是要保證每個(gè)峰的面積不變,所以在峰距變小的情況下,峰的高度就會(huì)增高,所以溫度升高會(huì)使保留的時(shí)間變短,而溫度降低正好相反。

3.3 基線噪聲與基線漂移的檢定

3.3.1 檢定方法

在進(jìn)行這個(gè)項(xiàng)目的檢定時(shí),用C18作為色譜柱的材料,用無水甲醇作為液相色譜儀中的流動(dòng)相,設(shè)定適當(dāng)?shù)母邏菏沽魉贋?.0dm3/min,并且使儀器處于最靈敏的狀態(tài),記錄紙的移動(dòng)速度設(shè)定為0.5～1cm/min。按照正確的操作步驟操作,待穩(wěn)定運(yùn)行半小時(shí)后,根據(jù)檢測(cè)器的衰減倍數(shù)和對(duì)應(yīng)的標(biāo)度來算基線噪聲。所用的公式是Nd=KB?；€漂移的值是在一個(gè)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)器基線偏離坐標(biāo)原點(diǎn)的距離。

3.3.2 注意事項(xiàng)

在進(jìn)行此項(xiàng)目鑒定時(shí),儀器中不能有無水甲醇以外的其他物質(zhì)作為流動(dòng)相;如果基線處于非正常狀態(tài),那么需要排除故障使儀器處于正常工作狀態(tài),這樣測(cè)定的值才具有真實(shí)性;在測(cè)得基本的數(shù)據(jù)以后,要注意在計(jì)算過程中換算各個(gè)數(shù)據(jù)的單位,否則所得結(jié)果將是不正確的。

4 結(jié)語

我國由于快速的發(fā)展,使用液相色譜儀的領(lǐng)域越來越廣泛。但是液相色譜儀在使用過程中的檢定方法是需要十分重視的,因?yàn)椴话凑找?guī)定的使用方法,是會(huì)導(dǎo)致液相色譜儀在使用過程中產(chǎn)生檢測(cè)誤差,影響檢測(cè)結(jié)果。并且在使用過程中,還需要對(duì)注意事項(xiàng)加以查看,以免在使用過程中由于不注意而導(dǎo)致結(jié)果不同。所以要詳細(xì)分析鑒定方法。

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