韓永超 曾祥國 向發(fā)云 陳豐瀅 顧玉成

摘要：采用田間試驗和人工接種的方法對‘晶玉、‘晶瑤、‘豐香和‘甜查理的炭疽病以及灰霉病抗性進行了鑒定和比較。結(jié)果表明，草莓（Fragaria ananassa Duch.）新品種‘晶玉對炭疽病具有中等抗性水平，其抗性水平低于‘甜查理，但高于‘晶瑤和‘豐香；‘晶玉對灰霉病具有一定的耐病性，具有花不易感灰霉病和果實發(fā)病率顯著低于‘甜查理的優(yōu)點。

關(guān)鍵詞：草莓（Fragaria ananassa Duch.）；炭疽病；灰霉??；抗性

中圖分類號：S668.4；S432.4+2；S432.4+4 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2015）13-3153-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.13.021

Resistance Identification of Strawberry Cultivar Jingyu to

Anthracnose and Gray Mold

HAN Yong-chao， ZENG Xiang-guo， XIANG Fa-yun， CHEN Feng-ying， GU Yu-cheng

（Institute of Industrial Crops， Hubei Academy of Agricultural Sciences， Wuhan 430064， China）

Abstract： Resistance of strawberry cultivars ‘Jingyu、‘Jingyao、‘Toyonoka and ‘Sweet Charlie to anthracnose and gray mold were identificated by field trials and artificial inoculation. The results indicated that strawberry cultivar ‘Jingyu was medium resistance against anthrancnose， which resistance was lower than ‘Sweet Charlie and higher than ‘Jingyao and ‘Toyonoka； ‘Jingyu was tolerance to gray mold， which blossom was highly resistance to gray mold and the incidence of botrytis fruit rot was significantly lower than ‘Sweet Charlie.

Key words： strawberry（Fragaria ananassa Duch.）； anthracnose； gray mold； resistance

近年來，草莓（Fragaria ananassa Duch.）的種植面積不斷擴大，而草莓炭疽病和灰霉病的危害卻越來越嚴重。每年6～9月育苗期間，炭疽病大量發(fā)生，嚴重影響草莓生產(chǎn)苗繁育的數(shù)量和質(zhì)量。2012年湖北省育苗期草莓炭疽病平均發(fā)病率高達45.4%[1]。目前已報道的能引起草莓根頸腐爛病的炭疽病菌主要有3種，分別為膠孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）、尖孢炭疽菌（C. acutatum）和草莓炭疽菌（C. fragariae）[2-4]。研究者通過病原菌的形態(tài)和ITS 序列對病原菌進行分類鑒定，認為中國草莓炭疽病的主要病原物為膠孢炭疽菌[5，6]。但由于炭疽菌屬各種病原菌的形態(tài)差異小以及ITS序列保守度高，膠孢炭疽菌和尖孢炭疽菌事實上是復(fù)合種[7-9]。引起湖北省武漢市草莓根頸腐爛病的主要病原為膠孢炭疽復(fù)合種內(nèi)的C. siamense[10]。草莓炭疽病是高溫病害，主要在育苗期和緩苗期發(fā)生，但結(jié)果期很少發(fā)生。灰霉病是草莓結(jié)果期的主要病害。

灰霉病是最具毀滅性的氣傳病害之一，存在于200多種植物上[11]，在全球廣泛分布。病原灰葡萄孢（Botrytis cinerea Pers.）是富克葡萄孢盤菌（Botryotinia fuckeliana Whetzel.）的無性型，是一種非?；缘乃荔w病原菌。在氣候溫暖潮濕的環(huán)境下，灰葡萄孢的侵染會導(dǎo)致一些作物，物別是果實、蔬菜和觀賞花卉的品質(zhì)和產(chǎn)量嚴重下降[12]?；颐共≡谡麄€草莓生產(chǎn)季節(jié)都可發(fā)病，可以侵染草莓的花、果實、葉片等部位。果實是草莓上最具經(jīng)濟價值的器官。由于沒有果皮，草莓果實容易受到物理損傷和病原菌侵染，是最容易腐爛的果實之一。果實灰霉病的發(fā)生嚴重影響果實的產(chǎn)量，是草莓采收前和采收后最影響經(jīng)濟價值的重要病害[11-13]。

抗病育種是病害防治最經(jīng)濟有效的辦法，‘晶玉草莓是以‘甜查理為母本，‘晶瑤為父本雜交育成的早熟草莓新品種[14]。在生產(chǎn)過程中表現(xiàn)出高產(chǎn)、抗病等優(yōu)良特性，本研究將通過田間試驗以及人工接種的方式對‘晶玉的灰霉病和炭疽病抗性進行鑒定。

1 材料與方法

1.1 植物材料

用于田間鑒定與人工接種鑒定的草莓品種有‘晶玉、‘晶瑤、‘豐香和‘甜查理。

1.2 炭疽病菌株及分生孢子制備

炭疽病菌株Nj-2，分離自江蘇省南京市發(fā)病草莓植株上，經(jīng)鑒定屬于膠孢炭疽復(fù)合種內(nèi)的C. siamense。從菌落邊緣取菌絲塊，接種于新的PDA平板中央，將平板置于28 ℃和近紫外燈（12 h光照/12 h黑暗）下培養(yǎng)。7 d后用無菌水將平板上的分生孢子洗下來，測定分生孢子的濃度，并將分生孢子濃度稀釋至約106個/mL備用。

1.3 炭疽病人工接種鑒定

于2014年6月下旬用裝有人工基質(zhì)（草炭∶珍珠巖=1∶1）的塑料缽接種匍匐莖苗。待匍匐莖苗在塑料缽基質(zhì)內(nèi)扎根約20 d后，從母株處剪斷匍匐莖，將匍匐莖苗用于抗性鑒定。在取人工接種20 d前停止施用殺菌劑。于2014年7月，將試驗地土壤翻松并在其上方搭建小拱棚。每個草莓品種選擇9棵長勢良好，沒有明顯病害的匍匐莖苗用于接種。將長有草莓苗的塑料缽置于翻好的土壤中，將塑料缽下部約1/3埋于翻松的土壤中，澆透水。待草莓葉表面的水分干燥后，將濃度為106個/mL的分生孢子懸浮液倒入噴壺中。用噴壺向草莓植株的各個部位均勻噴霧，每株草莓噴分生孢子液約20 mL。用塑料膜將拱棚蓋住。白天有陽光時，將塑料膜從兩邊各開一個小口通風(fēng)口，使棚內(nèi)溫度保持在28 ℃左右。晚上將塑料膜完全蓋嚴，以保濕。

1.4 炭疽病抗性田間鑒定

草莓品種對炭疽病的田間抗性鑒定于2014年在湖北省武漢市東西湖區(qū)東山農(nóng)場草莓育苗基地進行。于2014年4月初定植于未種植過草莓的地塊，每品種50株，株距為0.5 m，所有供試材料在試驗結(jié)束前均未進行任何藥劑防治。

1.5 灰霉病抗性田間鑒定

灰霉病抗性的田間鑒定于2014年在湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院試驗基地進行。于2013年10月將5個草莓品種的生產(chǎn)苗定植于連作地塊，每品種100株，株距為18 cm，所有供試材料在開始調(diào)查前1個月內(nèi)不施用殺菌劑。其他水肥等管理措施均為常規(guī)管理。

1.6 病害調(diào)查

炭疽病抗性人工接種鑒定在接種后第7天時，分別逐棵調(diào)查植株上所有葉片、葉柄、匍匐莖的病情指數(shù)。草莓炭疽病分級標(biāo)準主要以病斑的長度或直徑為依據(jù)（表1），計算每個草莓品種9株植株的平均病情指數(shù)。

炭疽病田間抗性鑒定在2014年8月25日草莓炭疽病發(fā)病高峰期，調(diào)查不同草莓品種的炭疽病病情指數(shù)，病情指數(shù)分級方法同人工接種鑒定。

2014年2月灰霉病發(fā)病高峰期，調(diào)查草莓果實和花灰霉病發(fā)病情況。草莓灰霉病分級標(biāo)準如表2。

2 結(jié)果與分析

2.1 炭疽病抗性人工接種鑒定

采用菌株Nj-2的分生孢子接種7 d后‘晶玉和‘豐香葉片炭疽病發(fā)病率和病情指數(shù)顯著高于‘晶瑤和‘甜查理。不同草莓品種葉柄的炭疽病病情指數(shù)差異不顯著（表3），其中‘晶玉和‘甜查理的葉柄、匍匐莖上形成大量長度小于1 mm的病斑，數(shù)量較多，但是擴展慢；‘晶瑤和‘豐香的葉柄、匍匐莖上病斑數(shù)量較少，但是病斑長度一般都大于10 mm，且環(huán)繞葉柄和匍匐莖一周，導(dǎo)致葉柄折斷或未扎根的匍匐莖子苗死亡。

2.2 炭疽病抗性田間鑒定

在草莓炭疽病發(fā)病高峰期統(tǒng)計草莓炭疽病的田間發(fā)病率。田間鑒定中‘晶玉和‘甜查理的葉片、葉柄和匍匐莖對炭疽病的抗性都顯著低于‘晶瑤與‘豐香（表3）。

2.3 灰霉病抗性田間鑒定

草莓品種‘晶瑤和‘豐香果實灰霉病的發(fā)病率分別為4.8%和4.0%，顯著低于‘晶玉和‘甜查理；‘甜查理果實灰霉病發(fā)病率和病情指數(shù)都顯著高于其他三個品種，發(fā)病果實占總果實數(shù)量的比例為28.2%，病情指數(shù)為11%（表4）。

草莓的花器官受灰霉菌侵染發(fā)病會影響坐果率從而影響最終產(chǎn)量。由表4可以看出，草莓品種‘晶瑤和‘豐香的花器官易感灰霉病，而‘晶玉和‘甜查理的花不易感染灰霉?。ㄌ镩g有極少量花感染灰霉病，但隨機調(diào)查數(shù)據(jù)無感染花器官）（表4）。

3 結(jié)論與討論

炭疽病和灰霉病分別是草莓育苗期和生產(chǎn)期的主要病害，是草莓產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要問題之一。在育苗期，炭疽病在田間的危害主要是通過侵染匍匐莖和葉柄影響子苗的發(fā)苗量，對葉片的侵染會對植株的光合作用造成影響，但并不會造成植株立即死亡；在生產(chǎn)期，草莓灰霉病主要發(fā)生在冬春季低溫潮濕環(huán)境下，灰葡萄孢主要侵染草莓的花朵和果實造成嚴重的產(chǎn)量損失。草莓新品種‘晶玉是由湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟作物研究所選育的優(yōu)良品種，在田間具有優(yōu)質(zhì)、抗病、香味濃郁等[14，15]特性。本研究通過田間和人工接種對‘晶玉的抗性水平進行進一步明確。

炭疽病的抗性鑒定結(jié)果顯示，在田間鑒定試驗中，草莓品種‘晶玉和‘甜查理的葉片、葉柄、匍匐莖炭疽病的病情指數(shù)顯著低于‘晶瑤和‘豐香。人工接種C. siamense菌株Nj-2后，不同草莓品種葉片、葉柄和匍匐莖炭疽病抗性表現(xiàn)有差異?！в竦娜~片炭疽病病情指數(shù)顯著高于‘甜查理和‘晶瑤；葉柄和匍匐莖的抗性規(guī)律與田間表現(xiàn)一致，‘晶玉和‘甜查理的葉柄、匍匐莖對炭疽病的抗性顯著高于‘豐香和‘晶瑤。一般認為‘晶瑤易感炭疽病[16]，與本研究的結(jié)果相符。葉片炭疽病抗性在田間試驗和人工接種試驗中表現(xiàn)不一致可能與田間的環(huán)境條件影響有關(guān)。一般認為葉柄和匍匐莖感染炭疽病對植株的直接危害較為嚴重，葉柄和匍匐莖炭疽病易造成母株根莖感染炭疽病死亡，同時匍匐莖感染炭疽病還會導(dǎo)致尚未扎根的匍匐莖子苗死亡[4]。綜合分析不同草莓品種葉片、葉柄、匍匐莖在人工接種和田間試驗中的炭疽病病情指數(shù)，所測定的4個草莓品種對炭疽病的抗性水平由大到小依次為：‘甜查理、‘晶玉、‘豐香、‘晶瑤。

灰霉病可以侵染草莓花、果實、葉片、葉柄等部位，但其中花和果實感染灰霉病會直接導(dǎo)致果實減產(chǎn)或失去經(jīng)濟價值[11-13]。為此本研究主要分析了不同草莓品種田間生產(chǎn)過程中花和果實的灰霉病發(fā)病率和病情指數(shù)，以此反映不同草莓品種對灰霉病的抗性水平。田間試驗的結(jié)果顯示，‘甜查理的果實發(fā)病率達到28.2%，顯著高于其他三個品種?！в竦墓麑嵃l(fā)病率為14.6%，‘豐香和‘晶瑤果實灰霉病發(fā)病率最低。而不同草莓品種萼片對灰霉病的抗性水平卻不同，在田間試驗過程中，‘晶玉和‘甜查理只有極少部分花感染灰霉病，以致于在隨機調(diào)查過程中沒有統(tǒng)計到發(fā)病的花朵?！в裢瑫r具有花高抗灰霉病和果實灰霉病發(fā)病率較低的優(yōu)點，在田間生產(chǎn)中較耐灰霉病。

草莓的葉片與其他部位對炭疽病的抗性存在明顯差異，其抗性水平差異的原因有待進一步研究。草莓果實和花對灰霉病抗性存在明顯差異，在抗性鑒定和抗病育種過程中應(yīng)將兩者結(jié)合起來分析。對田間試驗和人工接種試驗結(jié)果進行綜合分析表明，草莓新品種‘晶玉具有中抗炭疽病和耐灰霉病的特性。

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