蔡建秀，曾煒，陳姍龍，黃桂林（泉州師范學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，福建泉州362000）

紫菜多酚的超聲波輔助提取工藝及其抗氧化作用

蔡建秀，曾煒，陳姍龍，黃桂林
（泉州師范學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，福建泉州362000）

摘要：研究超聲波輔助提取紫菜多酚的工藝條件及其抗氧化活性。考察乙醇濃度、提取溫度、提取時間、料液比對紫菜多酚提取得率的影響，并對紫菜多酚的抗氧化能力進行了測定。結(jié)果表明，超聲波輔助提取最佳條件為乙醇體積分數(shù)為40%，超聲波溫度為35℃，超聲波時間15min，料液比為1∶125（g/mL）。多酚在0.005mg/mL～0.5mg/mL范圍內(nèi)，對DPPH·的清除率不斷升高，并且能夠顯著抑制小鼠肝肝組織勻漿MDA的生成和抑制H2O2誘導(dǎo)的小鼠紅細胞溶血；腹腔注射紫菜多酚對小鼠體內(nèi)肝組織MDA生成的抑制作用顯著高于空白組。紫菜多酚有很好的抗氧化作用。關(guān)鍵詞：多酚；自由基提?。豢寡趸?/p>

紫菜是紅藻門（Rhodophyta），紅藻綱（Rhodophyceae），紫球藻科（Porphyridiaceae）紫菜屬中葉狀藻體可食用的種群。紫菜含有高達29%～35%的蛋白質(zhì)以及碘、多種維生素和無機鹽類，是一種重要的經(jīng)濟藻類。廣泛分布于世界各地，但以溫帶為主?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)約70余種。

多酚（Polyphenols）又稱單寧，是多羥基酚類化合物的總稱，廣泛存在與蔬菜、水果、谷物、豆類等植物中。研究證明，多酚具有抗動脈硬化，防治冠心病與中風(fēng)等心腦血管疾病抗腫瘤抗氧化，以及具有抗菌消炎、抗過敏、防輻射、降血壓等多種生理功能[1]，在醫(yī)藥行業(yè)、食品、化妝品、日用化學(xué)品以及保健品等方面得到廣泛的應(yīng)用。紫菜多酚作為植物多酚的一種，同樣具有以上多種生理功能，但是目前國內(nèi)外對其研究尚少。因此，對紫菜多酚進行深入研究具有較大的意義，也是一個熱點問題。

1　材料

1.1原料

紫菜：采集自福建崇武沿海，經(jīng)粉粹并過60目篩得紫菜粗粉，密封備用。

1.2試驗動物

昆明種小鼠，SPF級，雄性，體質(zhì)量18 g～20 g，購自廈門大學(xué)實驗動物中心，許可證號為scxk-（閩）2008-2001。

1.3主要儀器

KQ-300VDE型雙頻數(shù)控超聲波清洗器：寧波新芝生物科技股份有限公司；3K-30高速冷凍離心機：上海安亭科技儀器廠；UV-1100型紫外可見分光光度計：北京普析通用儀器有限公司；SQ2119B多功能食品加工機：上海帥佳電子科技有限公司；TDL-40B飛鴿牌系列離心機、SH2-Ⅲ型循環(huán)水真空泵。

1.4試劑

焦性沒食子酸：AR，國藥上海化學(xué)試劑有限公司；丙二醛（MDA）測定試劑盒：南京建成生物工程研究所；福林酚試劑（福林酚試劑∶蒸餾水=1∶3）、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、碳酸鈉、2-硫代巴比妥酸、三氯乙酸、硫酸亞鐵、過氧化氫均為分析純。

2　紫菜多酚的提取工藝

2.1紫菜多酚提取的單因素試驗

2.1.1乙醇體積分數(shù)對多酚提取的影響

稱取紫菜樣品1 g（精確到0.000 1 g），加50mL乙醇溶液，超聲時間20min，頻率為80 kHz，料液比為1∶50（g/mL），在55℃條件下考慮時間對多酚提取的影響?？疾斓囊掖嫉捏w積分數(shù)分別為10%、25%、40%、55%、70%、85%。常壓過濾，吸取濾液0.005m L在10mL的試管內(nèi)，然后加入0.1mL福林酚試劑，2min～3min后加2%Na2CO32mL。后用蒸餾水定容到5mL，在25℃反應(yīng)30min后，在760 nm測吸光度值。

2.1.2溫度對多酚提取的影響

稱取紫菜樣品1g（精確到0.0001g），加50mL 40%乙醇，超聲時間20min，頻率為80kHz，料液比為1∶50 （g/mL），在此條件下考察提取溫度對多酚提取的影響。考察的提取溫度為25、35、45、55、65℃。處理方法同2.1.1。

2.1.3時間對多酚提取的影響

稱取紫菜樣品1g（精確到0.0001g），加50mL 40%乙醇，頻率為80 kHz，料液比為1∶50（g/mL），在35℃條件下考察時間對多酚提取的影響?？疾斓臅r間分別為5、10、15、20、25min。處理方法同2.1.1。

2.1.4料液比對多酚提取的影響

稱取紫菜樣品1 g（精確到0.000 1 g），加入40%乙醇，頻率為80 kHz，超聲時間15min，在35℃考察時間對多酚提取的影響?？疾斓牧弦罕确謩e為1∶25、1∶50、1∶75、1∶100、1∶125（g/mL）。處理方法同2.1.1[2]。

2.2紫菜多酚提取的正交試驗

根據(jù)單因素試驗結(jié)果，選擇乙醇體積分數(shù)、料液比、超聲頻率及提取時間作為考察因素，采用L9（34）進行正交方案設(shè)計。正交試驗的因素和水平見表1。

表1　優(yōu)化提取條件正交試驗因素水平Table 1　Factorsand levelsof orthogonal testof optim ization of extraction conditions

2.3標準曲線的制備

精密稱取焦性沒食子酸50mg，用甲醇定容在50mL的容量瓶中，制成1mg/mL的焦性沒食子酸標準溶液。取濃度為1mg/mL的焦性沒食子酸溶液0.001、0.002、0.003、0.004、0.005mL在10mL的試管內(nèi)，然后加入0.1mL福林酚試劑，等2min～3min后加2%Na2CO32mL。后用蒸餾水定容5mL，在25℃反應(yīng)30min后，在760 nm測吸光值[3]。以焦性沒食子酸的濃度X（mg/ m L）對吸光度Y進行回歸，得出回歸曲線的方程為Y=28.467X-0.022 1，R2=0.999 1，焦性沒食子酸在0.001mg/m L～0.005mg/m L的范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。

3　紫菜多酚的體外抗氧化試驗

3.1紫菜多酚對脂肪氧合酶（Lox）的影響

3.1.1脂肪氧合酶的制備

稱取40 g青豆浸泡于100 mL磷酸緩沖液（0.01 mol/L，pH=7.0）中，浸泡7 h后將青豆破碎。取10 mL破碎后的混合液溶于100 mL的磷酸緩沖液，浸泡1 h，后離心（4 000 r/min，15min），取得的上清液即為酶液。

3.1.2脂肪氧合酶活性的測定

取0.2mL酶液與0.05mL不同濃度的紫菜多酚溶液混合均勻，在25℃下保溫4min，加入0.8mL底物（含亞油酸1.32×10-3mL/L，0.5mL/L吐溫-20的0.2mL/L pH9.0的硼酸緩沖液），混勻后再保溫4min，后加入2 mL無水乙醇以終止反應(yīng)。后再加入1.95mL蒸餾水，混勻，在234 nm處比色，測得吸光度值（A234）[4]。多酚對脂肪氧合酶的抑制率，可由以下公式求得：

式中：A0為空白管的吸光度值；A1為樣品管的吸光度值。

3.2DPPH·清除能力的測定

3.2.1DPPH·（二苯基苦基苯肼）溶液配制

準確稱取7.9mg DPPH·，用無水乙醇溶解并定容于100mL棕色容量瓶中，搖勻，放置于冰箱中備用。

3.2.2DPPH·清除率的測定

取2m LDPPH·溶液及2m L不同濃度的紫菜多酚溶液于同一支具塞比色管中，充分的混合，靜置40min，在517 nm測定其吸光度。添加5mg/mL的VC作為陽性對照。每個樣品平行做3次[5]。自由基清除率可由以下公式計算：

清除率/%=[（Ac+Aj-Ai）/Ac]×100

式中：Ac為2mL無水乙醇加2mLDPPH·溶液的吸光度；Ai為2mL待測液與2mLDPPH·溶液反應(yīng)后的吸光度；Aj為2mL待測液加2mL乙醇的吸光度。

3.3紫菜多酚對體外H2O2誘導(dǎo)小鼠紅細胞氧化溶血的影響

3.3.10.5%紅細胞懸浮液的制備

小鼠眼眶取血，用檸檬酸制成抗凝血，于3 000 r/ min離心后得紅細胞，用預(yù)冷的生理鹽水洗3次，每次5min。除去上清液，將所得的紅細胞制備成0.5%小鼠紅細胞懸浮液[6]。

3.3.2紫菜多酚對體外H2O2誘導(dǎo)小鼠紅細胞氧化溶血的測定

取0.5%紅細胞懸液1mL，加到各試管，分為空白管、對照管、加藥管，加藥管分別加入不同濃度多酚0.5mL，混勻，37℃水浴10min。對照管、加藥管加入50mmol/LH2O20.5mL，空白管、對照管加生理鹽水補足到同一體積，搖勻37℃再水浴1 h，用生理鹽水稀釋5倍，3 000 r/min離心10min，取上清液在415 nm處測得吸光值A(chǔ)415[7]。其抑制率和溶血率的測定如下：

抑制率/%=[（A對管照-A加藥管）/（A對照管-A空白管）]×100

溶血度/%=[（A加藥管-A空白管）/（A對照管-A空白管）]×100

3.4紫菜多酚對小鼠肝勻漿自發(fā)性脂質(zhì)氧化產(chǎn)生MDA的抑制率的測定

3.4.1制備10%的肝勻漿

將小鼠頸椎脫臼處死。迅速分離出小鼠肝組織，用0.4℃的冷生理鹽水洗去殘血，濾紙吸干水分，稱重，減碎、冰浴下制得勻漿，用生理鹽水制成10%的懸浮液，3 000 r/min離心20min，取上清液備用。

3.4.2多酚樣液對小鼠肝勻漿自發(fā)性脂質(zhì)氧化產(chǎn)生MDA的抑制率的測定

取10%的小鼠肝勻漿懸浮液1mL，加入不同濃度的紫菜多酚樣品液0.2mL，在37℃溫育1 h后，加入15%的TCA（三氯乙酸）1mL終止反應(yīng)，再添加0.67% TBA（2-硫代巴比妥酸）1mL在沸水浴中顯色15min，冷卻后3 000 r/min離心10min，于532 nm處測得上清液吸光度值A(chǔ)[8]，以吸光度表示MDA的含量，吸光度越大，表明MDA的含量越多。試驗中取VC作為陽性對照。抑制率按下列公式計算：

抑制率/%=[（A0-A）/A0]×100

式中：A0為空白對照即不加樣品的吸光度；A樣品某濃度時的吸光度。

3.5紫菜多酚對小鼠肝勻漿Fe2+-H2O2誘導(dǎo)脂質(zhì)氧化產(chǎn)生MDA的抑制率的測定

采用楊小蘭等的方法略有改動。試驗設(shè)定4組，1-自發(fā)氧化組：10%小鼠肝勻漿。2-誘導(dǎo)氧化組：10%小鼠肝勻漿加Fe2+-H2O2。3-紫菜多酚組：10%小鼠肝勻漿加Fe2+-H2O2和不同濃度的紫菜多酚樣液。4-紫菜總黃酮組：10%小鼠肝勻漿加Fe2+-H2O2和不同濃度的紫菜總黃酮樣液。在37℃溫浴1 h后，加入15%TCA 1mL以終止反應(yīng)，再加入0.67%TBA 1mL，于沸水浴中顯色15min，靜置。冷卻后離心，于532 nm測其上清液吸光值A(chǔ)[9]。以吸光度表示MDA含量的多少。試驗中6 mmol/L FeSO4溶液的用量是0.1 m L，60 mmol/L H2O2溶液用量為0.1mL，小鼠肝勻漿為1mL，多酚體積為0.2mL，清除率的計算，以下列方程：

樣液的清除率/%=[（A1-An）/A1]×100

式中：A1為對照組的吸光度值；An為某濃度時的吸光值。

4　紫菜多酚的體內(nèi)抗氧化試驗

雄性小白鼠，體質(zhì)量18 g～20 g，隨機分成3組，每組10只。多酚作用組：0.05、0.5mg/m L紫菜多酚樣液溶在0.2mL生理鹽水中向鼠腹腔注射，紫菜多酚注射量為400mg/（kgbw·d），對照組注射等體積生理鹽水。動物自由飲水取食，動物喂養(yǎng)條件按常規(guī)[10]。給藥7 d后，取小鼠肝組織按3.4.2的方法測定A532。

5　結(jié)果與分析

5.1紫菜多酚的單因素提取試驗

5.1.1乙醇體積分數(shù)對紫菜多酚提取率的影響

乙醇體積分數(shù)對紫菜多酚提取率的影響見圖1?？芍S著乙醇的體積增加，多酚的提取率呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢，當(dāng)乙醇的體積為40%時，多酚的提取率最高。這可能是因為當(dāng)有機溶劑的體積分數(shù)較低時，不能破壞多酚與多糖、蛋白質(zhì)等有機物質(zhì)之間的氫鍵和疏水作用力[11]，所以有機溶劑的體積分數(shù)增大，可以使紫菜多酚的提取率增大。當(dāng)體積分數(shù)高于40%，多酚的提取率下降，這是由于紫菜中的色素，醇溶性物質(zhì)等成分的溶出量增加，這些成分與多酚類化合物競爭同乙醇-水分子結(jié)合，同時紫菜組織中的通透性下降，從而導(dǎo)致多酚的提取率下降[12]。

5.1.2超聲溫度對紫菜多酚提取率的影響

不同的溫度對紫菜多酚的提取效果影響見圖2。

圖1　乙醇體積分數(shù)對紫菜多酚提取的影響Fig.1　In fluence ofethanolconcentration on yield of laver total polyphenols

圖2 溫度對紫菜多酚提取的影響Fig.2　Influenceof tem peratureon yield of laver totalpolyphenols

由圖2可知，隨著溫度的升高，紫菜多酚的提取率是呈先上升后下降的趨勢，當(dāng)溫度為35℃時，多酚的提取率最高。當(dāng)提取溫度在25℃～35℃之間時，多酚的提取率不斷的升高。當(dāng)提取溫度大于35℃時，由于多酚類物質(zhì)本身的穩(wěn)定性不強，結(jié)構(gòu)遭到破壞，受熱分解而導(dǎo)致多酚的提取率下降。

5.1.3時間對紫菜多酚提取率的影響

不同時間對多酚提取效果的影響見圖3。

圖3 提取時間對得率影響Fig.3　Influence of timeon yield of laver totalpolyphenols

由圖3可知，隨著時間的不斷升高，紫菜多酚的提取率呈先升高后下降的趨勢，當(dāng)時間為15min時，紫菜多酚的提取率最高。當(dāng)時間5min～15min時，由于時間過短，多酚類化合物同乙醇-水分子結(jié)合不夠充分，導(dǎo)致提取率不高。當(dāng)時間過長時，由于萃取的時間過長，多酚類物質(zhì)受溫度的影響，結(jié)構(gòu)遭到破壞，多酚被氧化或者降解，而導(dǎo)致多酚的提取率下降。

5.1.4料液比對紫菜多酚提取的影響

不同的料液比對多酚提取效果的影響見圖4。

圖4 料液比對得率影響Fig.4　Influenceof liquid to solid ratio on yield of laver total polyphenols

由圖4可知，隨著料液比的不斷增大，多酚的提取率呈現(xiàn)不斷上升的趨勢，當(dāng)料液比為1∶125（g/mL）時，多酚的提取率最高。當(dāng)料液比在1∶25（g/mL）～1∶100（g/mL）之間時，溶劑對多酚未達到飽和狀態(tài)，繼續(xù)添加溶劑是，能夠顯著的提高多酚的提取率。

5.2紫菜多酚提取的正交試驗

由于影響紫菜多酚的提取率的因素很多，諸如提取溶劑的種類，浸提的時間，超聲波的功率等，在確定以乙醇為提取劑的基礎(chǔ)上，選取乙醇體積分數(shù)，時間，溫度，料液比為考察因素，采用四因素三水平的L9（34）以尋求最優(yōu)的工藝條件。試驗結(jié)果見表2。

表2　紫菜多酚的正交試驗表方案及結(jié)果Table2　Result of theorthogonalexperim entofextraction totalpolyphenols for laver

由表2、表3可知，在選定的試驗條件下，料液比影響的因素最大，其次是溫度，時間，乙醇的體積分數(shù)。料液比越低，越不利于紫菜中多酚的提取，說明了料液比較大有利于溶質(zhì)與溶液的接觸。乙醇的體積分數(shù)影響最小，25%與55%的乙醇體積分數(shù)對提取率的影響相差不大，反應(yīng)溫度的影響恰好相反，溫度從25℃升高到45℃，紫菜多酚的的提取率有明顯的升高，這表明升高溫度，有利于溶質(zhì)的擴散。同時，通過紫菜多酚的正交試驗得出較優(yōu)的試驗組合為A2B3C2D2。即乙醇的體積分數(shù)為40%，料液比為1∶125（g/mL），提取溫度為35℃，時間為15min。提取得率為11.32%。

5.3紫菜多酚的體外抗氧化試驗

5.3.1紫菜多酚對脂肪氧合酶（Lox）的影響

紫菜多酚對脂肪氧合酶（Lox）的影響見圖5。

表3　正交試驗方差分析表Table3　Varianceanalysisofexperimental result

圖5　多酚對脂肪氧合酶影響Fig.5　Effectof polyhenolextracts from laver on lipoxidase（Lox）activity

由圖5可知，4個不同濃度的紫菜多酚對脂肪氧合酶都有顯著的抑制作用，且隨著多酚的濃度不斷升高，抑制率呈現(xiàn)上升的趨勢。但4個濃度之間，顯示不出量—效關(guān)系。

5.3.2DPPH·清除能力的測定

DPPH·是一種很穩(wěn)定的氮中心的自由基，它的穩(wěn)定性主要來自共振穩(wěn)定作用的3個苯環(huán)的空間障礙，使夾在中間的氮原子上不成對的電子不能發(fā)揮其應(yīng)有的電子成對作用，可作為阻聚劑，也常用于抗氧化的體外抗氧化性評價。

見圖6可知多酚和VC對DPPH·的具有顯著的清除作用，且隨著濃度不斷增大，而體現(xiàn)更大的清除作用。在濃度為0.005mg/mL～0.05mg/mL之間，紫菜多酚對DPPH·的清除作用高于VC。而當(dāng)濃度大于0.05mg/mL時，VC對DPPH·的清除作用高于紫菜多酚。當(dāng)溶液中添加多酚時，由于與其單電子配對而使溶液顏色變淺，吸光度變小程度與自由基清除程度成線性關(guān)系，說明紫菜多酚有較強的抗氧化作用，但是不顯示量效關(guān)系。

5.3.3紫菜多酚對體外H2O2誘導(dǎo)小鼠紅細胞氧化溶血的影響

H2O2氧化紅細胞膜或紅細胞膜自主氧化，導(dǎo)致紅細胞中的血紅蛋白逸出，從而使溶液變紅。

圖6多酚對DPPH·清除作用Fig.6　Scavening effect of polyhenolextracts from laver on DPPH· freedom radical

表4　紫菜多酚對體外H2O2誘導(dǎo)小鼠紅細胞氧化溶血影響（x±S，n=3）Table 4　Effectof polyphenols from laver on RBCHemolysis Induced by H2O2（x±S,n=3）

由表4可見，4種濃度的紫菜多酚都能夠明顯的抑制小鼠紅細胞的溶血，當(dāng)紫菜多酚的濃吸光度值升高，表明溶液中血紅蛋白的含量增大，當(dāng)濃度為0.5mg/mL時，對紅細胞的溶血抑制率最高。

5.3.4紫菜多酚對小鼠肝勻漿自發(fā)性脂質(zhì)氧化產(chǎn)生MDA的抑制率的測定

MDA是自由基攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸而引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用的最終分解產(chǎn)物，其含量的多少可以反映組織中的脂質(zhì)過氧化速率或強度。MDA含量異常增高會引起細胞損傷。因此通過測定MDA值可以評價機體抗氧化能力。而反應(yīng)機制中，所測得的吸光度越大，MDA的含量越多。

由表5可知，紫菜多酚的4個不同濃度對肝組織勻漿自發(fā)性產(chǎn)生MDA都有抑制作用，但無量效關(guān)系。紫菜多酚試驗組，相對于空白組P<0.05，各組之間存在著顯著性的差異。說明在肝組織水平上，紫菜多酚的抗氧化保護性能好。

5.3.5紫菜多酚對小鼠肝勻漿Fe2+-H2O2誘導(dǎo)脂質(zhì)氧化產(chǎn)生MDA的抑制率的測定

紫菜多酚對小鼠肝勻漿Fe2+-H2O2誘導(dǎo)脂質(zhì)氧化產(chǎn)生MDA的抑制率見表6。

表5 紫菜多酚對小鼠肝勻漿自發(fā)性脂質(zhì)氧化產(chǎn)生MDA的抑制率（x±S，n=3）Table 5　Effectof polyphenols from laver on MDA production inliver homogenateInduced by anti-oxidation（x±S，n=3）

表6　紫菜多酚對小鼠肝勻漿Fe2+-H2O2誘導(dǎo)脂質(zhì)氧化產(chǎn)生M DA的抑制率的測定（x±S,n=3）Table6　Effectof polyphenols from laver on MDA production inliver hom ogenate Induced by Fe2+-H2O2（x±S，n=3）

由表6可知，紫菜多酚樣液對小鼠肝勻漿液Fe2+-H2O2誘導(dǎo)脂質(zhì)氧化產(chǎn)生MDA的抑制率隨樣液濃度的增加而增大。試樣在0.005mg/mL～0.1mg/mL的濃度范圍內(nèi)時，隨試樣濃度增大對MDA抑制率的增加很顯著。當(dāng)樣液濃度大于0.1mg/mL后，隨試樣濃度增大對MDA抑制率的增加比較緩慢。由表6可得，當(dāng)濃度等于0.005mg/mL，紫菜多酚對MDA的抑制率達35.77%顯著的高于紫菜總黃酮（抑制率為7.07%）。在0.05mg/mL～0.5mg/mL的濃度范圍內(nèi)時，紫菜多酚對MDA的抑制率高于紫菜總黃酮。

5.4紫菜多酚的體內(nèi)抗氧化試驗

紫菜多酚對小鼠體內(nèi)肝組織勻漿MDA的影響見表7。

圖7　不同成分對小鼠肝勻漿Fe2+-H2O2誘導(dǎo)脂質(zhì)氧化產(chǎn)生MDA的抑制率的測定Fig.7　Differentelementson MDA production in liver homogenate Induced by Fe2+-H2O2

表7 紫菜多酚對小鼠體內(nèi)肝組織勻漿M DA的影響（x±S，n=5）Table7　Effectofpolyphenols from laver inm ice liver invivo on MDA（x±S，n=5）

由于MDA是自由基攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸而引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用的最終分解產(chǎn)物，其含量的多少可以反映組織中的脂質(zhì)過氧化速率或強度。所測得的吸光度越大，MDA的含量越多。由表7可得，生理鹽水組的吸光度值顯著的大于紫菜多酚試驗組，說明紫菜多酚組的MDA與對照組相比，有明顯的下降，差異程度達到顯著（P<0.05）。因而，在動物個體水平上，紫菜多酚的抗氧化作用很明顯。

6　結(jié)果與討論

本文著重討論了紫菜多酚的超聲波提取工藝和體內(nèi)外的抗氧化作用。提取工藝實驗表明，最佳的提取工藝為乙醇的體積分數(shù)為40%，料液比為1∶125（g/mL），提取溫度為35℃，時間為15min。超聲波提取紫菜多酚的提取率最高為11.97%。

通過對紫菜多酚的抗氧化研究得出，紫菜多酚具有較強的清除DPPH·的能力，在0.005mg/m L～0.5mg/m L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，隨質(zhì)量濃度升高其清除DPPH·能力逐漸增強，當(dāng)0.5mg/mL時，DPPH·抑制率達89.07%，與VC的抑制作用相當(dāng)。

紫菜多酚具有較強的抗氧化能力，是一種天然的抗氧化成分，它有可能成為延緩人體衰老，抵抗疾病，增強人體抵抗能力的保健物質(zhì)。MDA可以激發(fā)引起細胞多方面的損傷，是脂質(zhì)氧化程度的重要指。該試驗在紫菜多酚的濃度為0.5mg/mL時，對產(chǎn)生MDA的抑

DO I：10.3969/j.issn.1005-6521.2015.21.014

基金項目：近海資源生物技術(shù)福建省高校重點實驗室（泉州師范學(xué)院）；泉州市科技局科技重點項目（2013Z126）；泉州師范學(xué)院海洋功能食品工程中心；福建省生物學(xué)重點學(xué)科專項經(jīng)費資助

作者簡介：蔡建秀（1957—），女（漢），教授，本科，研究方向：功能食品與藥用食品及天然產(chǎn)物提取與分析。自然生長的紫菜數(shù)量有限，產(chǎn)量主要來自人工養(yǎng)殖。

Study on Ultrasonic-assisted Extraction Technology of Polyphenols in Laver and the Oxidation Effect of Flavonoids

CAIJian-xiu，ZENGWei，CHENShan-long，HUANGGui-lin
（CollegeofChemistry and Life Science，Quanzhou NormalUniversity，Quanzhou 362000，F(xiàn)ujian，China）

Abstract：To investigate the process condition of ultrasonicwave-assisted extraction ofpolyphenols from laver and antioxidant effects in vitro and in vivo.We investigated the volume fraction of ethanol，ultrasonic temperature，ultrasonic time，the ratio of solid to liquid seaweed polyphenol extraction rate influence，and the laver food polyphenols antioxidant capacity were determined in experiment.The results showed that the optimuml conditions of Ultrasonic wave-assisted extraction as following：40%ethanol as extract solvent，ultrasonic temperature was 35℃，ultrasonic time was 15 min，solid-liquid ratio was 1∶125（g/m L）.The concentration of polyphenols ranges from 0.005 mg/mL to 0.5 mg/mL，the rate of removal was rising，and inhibited significantly themouse liver homogenate MDA generating and inhibited significantly of the hemolysis of red blood cells inducing by H2O2；Intraperitoneal injection of seaweed polyphenol onmice liver tissue MDA formation inhibition wassignificantly higher than thatof the blank group.

Keywords：polyphenols；free radical；extraction；antioxidantactivity