摘 要： 目的：通過(guò)高效液相色譜法對(duì)天麻的普通粉體和不同粒徑的超微粉體中有效成分天麻素進(jìn)行溶出度的比較，為天麻超微粉體在臨床上的實(shí)際應(yīng)提供更有參考性的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：天麻；超微粉；天麻素；溶出度；高效液相色譜法

天麻始載于秦漢時(shí)期的《神農(nóng)本草經(jīng)》，為蘭科植物天麻（Gast rodia elataB lume） 的干燥塊莖， 古名赤箭[1]。傳統(tǒng)本草多記載，天麻有治療肝風(fēng)內(nèi)動(dòng)，驚癇抽搐、頭痛眩暈、肢體麻木、手足不遂及風(fēng)濕痹痛等癥。天麻的主要有效成分是天麻素，其藥動(dòng)學(xué)研究表明，健康人靜脈注射天麻素后，血藥濃度與時(shí)間曲線與其在動(dòng)物體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究結(jié)果具有一致性[2]。

通常臨床上認(rèn)為，藥物在人體內(nèi)的生物利用度和其藥物其主要治療作用成分的溶出量和主要成分的溶出速率方面，存在著在一定程度的相關(guān)性。而當(dāng)藥物在體內(nèi)的吸收限制因素是其溶出速率時(shí)，通過(guò)合理適當(dāng)?shù)闹扑幑に嚫母飦?lái)提高藥物的溶出速率，可從一定程度上提高藥物的臨床療效[3]。從理論角度上，排除其他體內(nèi)外因素，藥物的溶出快慢主要跟與顆粒表面積與液體溶劑的接觸大小有關(guān)、而表面積大小與顆粒粒度成反比[4]。所以有效成分溶出速度常與藥物粉碎度相關(guān)， 改善藥物的粉碎度， 能一定程度地提高中藥有效成分的溶出速率。

本實(shí)驗(yàn)主要通過(guò)對(duì)天麻進(jìn)行不同粒徑大小的制備，而后對(duì)制備所得不同粒徑溶出情況進(jìn)行比較研究，初步討論不同粒徑天麻的溶出特點(diǎn)，為天麻超微粉體的臨床應(yīng)用提供相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1.藥料、儀器

1.1藥材：天麻藥材采用購(gòu)于云南的散天麻片（20090502）

天麻普通粉：天麻藥材用微型植物粉碎機(jī)粉碎5min，過(guò)100目篩。編號(hào)天麻普通粉體待用。天麻超微粉：取天麻藥材經(jīng)微型植物粉碎機(jī)粉碎10min后用TC-10進(jìn)行超微粉碎，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速大小分別制得4種天麻超微粉體，分別編號(hào)天麻超微粉A、天麻超微粉B、天麻超微粉C和天麻超微粉D，待用。

將天麻普通粉和4種天麻超微粉分別用歐美克激光粒度分析儀（LS-POP（VI））測(cè)定其粒徑大小，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 天麻普通粉體和超微粉體粒徑大小

[項(xiàng)目＼&天麻普通粉體＼&天麻超微粉體A＼&天麻超微粉體B＼&天麻超微粉體C＼&天麻超微粉體D＼&D50（μm）＼&66.82＼&29.33＼&22.42＼&12.71＼&6.92＼&D90（μm）＼&152.15＼&68. 02＼&35.10＼&21.14＼&10.40＼&]

注：D50為占50%的粒徑顆粒所對(duì)應(yīng)的粒徑；D90為占90%的粒徑顆粒所對(duì)應(yīng)的粒徑。

1.2儀器：Agilent1100高效液相色譜儀、微型植物粉碎機(jī)、ZRS-8G、TC-10、歐美克激光粒度分析儀（LS-POP（VI））

1.3試劑：溶出介質(zhì)采用超聲脫氣的純化水、配制對(duì)照品乙腈為色譜純、其余溶劑皆為分析純。 天麻素對(duì)照品購(gòu)自中國(guó)藥品生產(chǎn)制品鑒定所（1112635-200806）

2.實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 天麻普通粉體和超微粉體得天麻素溶出試驗(yàn)

2.1.1天麻素的含量測(cè)定方法[5]

色譜條件：Diamosil C18（2）（5um，4.6mm×150mm）色譜柱、柱溫25℃；流動(dòng)相用乙腈：0.05%磷酸溶液（3：97），流速為1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為220，理論板數(shù)按天麻素峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。

2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)貯備液制備

精密稱取在80℃減壓干燥1小時(shí)的天麻素對(duì)照品適量加流動(dòng)相制成每1ml中含0.108mg天麻素的標(biāo)準(zhǔn)貯備液。

2.1.3 線性關(guān)系考察

精密吸取以上標(biāo)準(zhǔn)貯備液0.2、0.6、1.0、1.2、1.4 ml，分別置于10 ml量瓶中，加蒸餾水定容，搖勻。進(jìn)樣，測(cè)峰面積，橫坐標(biāo)為進(jìn)樣量（μg），縱坐標(biāo)為峰面積，用Excel做回歸性分析，得回歸方程式： Y = 2 411 014X + 40 326 （ r = 0. 999 ） ，結(jié)果可見(jiàn)：天麻素的濃度在本實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.1.4對(duì)照品溶液制備

精密量取天麻素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液配制成每1ml含50μg的貯備液，即得。

2.1.5供試品溶液的制備

將天麻藥材的普通及不同粒徑的粉體分別精密稱定0.8g，移置具塞的錐形瓶，精密量取50ml稀乙醇50ml，加熱回流，3小時(shí)，放冷后再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足其減失重量，濾過(guò)，并取濾液10ml，濃縮至近干，殘?jiān)右译?水（3：97）混合溶液溶解，并移至10ml容量瓶，用乙腈-水（3：97）稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.1.6樣品測(cè)定

將對(duì)照品溶液與供試品溶液，分別精密吸取10ml，進(jìn)樣于液相色譜儀，測(cè)定。結(jié)果為：普通粉0.72g/100g，超微粉體A 0.79g/100g，超微粉體B 0.84g/100g，超微粉體C0.89g/100g，超微粉體D 0.91g/100g。

2.1.7各粒徑天麻素溶出度檢測(cè)

圖一 天麻各種粉體的天麻素累計(jì)溶出變化曲線

利用漿狀攪拌器法，以200ml水為溶出介質(zhì)，溶置杯內(nèi)，加溫使溶出介質(zhì)恒溫于37℃（±0。5℃）后，轉(zhuǎn)速為60r/min，各個(gè)不同大小粒徑的粉末取樣2g，精密稱定，自粉末接觸溶出介質(zhì)起立即計(jì)時(shí)采樣。（2min、5min、10min、20min、30min）各時(shí)間點(diǎn)采樣8ml，補(bǔ)充溶出介質(zhì)，過(guò)濾，精密量取5ml過(guò)濾液，加熱水浴蒸干，用適量稀乙醇溶解殘?jiān)?，?ml量瓶，加稀乙醇至刻度，搖勻，用0.45nm濾膜濾過(guò)后按前述條件測(cè)定。見(jiàn)圖一。

2.2 數(shù)據(jù)處理

采用威布爾分布函數(shù)處理數(shù)據(jù)。以㏑t、㏑[-㏑（1-F）]為變量得出相應(yīng)回歸方程，參數(shù)見(jiàn)表2。

表2 天麻各種粉體的天麻素溶出度參數(shù)

[參數(shù)＼&普通粉體＼&超微粉體A＼&超微粉體B＼&超微粉體C＼&超微粉體D＼&Td＼&19.38＼&11.71＼&7.91＼&5.83＼&5.44＼&M＼&0.3979＼&0.3583＼&0.4000＼&0.4423＼&0.4532＼&]

注：以超微粉體D的天麻素溶出量測(cè)定結(jié)果為100%溶出。Td為累積溶出63.2%的時(shí)間，m為曲線的形狀參數(shù)。

3.討論

3.1 天麻普通粉體和超微粉體的溶出情況

臨床使用的常見(jiàn)情況是由于細(xì)胞屏障很多植物藥細(xì)胞中的化學(xué)成分都很難完全提取。

本實(shí)驗(yàn)中天麻有效成分的溶出度，普通粉體為0.72%，超微粉體為0.79%、0.84%、0.89%和0.91% ?？梢?jiàn)超微粉中的天麻素的溶出量比普通粉的溶出量明顯增加。由此可推論由于受到細(xì)胞壁的限制，天麻素的溶出難度大，細(xì)胞內(nèi)部的天麻素更是難以被提取。采用新型制備工藝，將天麻制成超微粉后，破壞了藥物的細(xì)胞壁，有效成分的溶出不再受到其的阻礙，有效成分溶出量明顯增多。當(dāng)然，本實(shí)驗(yàn)中四種天麻超微粉細(xì)胞壁受到的破壞程度也可能存在不同，但只要細(xì)胞壁被破壞，則其溶出限制被解除。本實(shí)驗(yàn)利用加熱回流促使細(xì)胞內(nèi)的天麻素被充分提取，故此4種不同粒徑的超微粉體在提取時(shí)其溶出量差異并不大。

試驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)將天麻常規(guī)粉末制備成超微粉后，其溶出速率增高。中藥材有效成分的釋放、溶出及吸收過(guò)程都與粉體顆粒大小密切相關(guān)。因此，利用超微技術(shù)可使中藥粉末有效成分的溶出發(fā)生有效的改變，從而有利于人體對(duì)藥物有效成分的吸收利用。

參考文獻(xiàn)

[1]謝宗萬(wàn).中藥材品種論述（上冊(cè)） [M ].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社， 1990：367- 368.

[2]羅軍，吳中亮，王惠先.天麻素注射液人體藥動(dòng)學(xué)的研究[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)，2006，22 （5） ：39123931.

[3]奚念朱..藥劑學(xué)[M] .北京：人民衛(wèi)生出版社，1994， 3.

[4] 宋輝，張周萍. 粉碎度對(duì)中藥煎出量影響的探討[J].中國(guó)藥房，1994，5 （1） ：48.

[5] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[M].，北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010版（一部）：103.

作者簡(jiǎn)介：謝斯瑩（1987-），女，廣東廣州人，本科，廣州科技職業(yè)技術(shù)學(xué)院助教，從事中藥學(xué)研究。endprint