海 榮 周鐵寶
(1.內(nèi)蒙古興安盟蒙醫(yī)醫(yī)院,內(nèi)蒙古 烏蘭浩特 137400; 2.內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院,內(nèi)蒙古 通遼 028000)
腦水腫是血腦屏障受損、腦缺氧、顱內(nèi)靜脈壓增高等因素導(dǎo)致腦組織中水分的運(yùn)輸和平衡失調(diào),水電解質(zhì)在腦細(xì)胞膜內(nèi)外的分布失衡而引起水分病理性蓄積,導(dǎo)致腦體積增加和顱內(nèi)壓增高綜合征。顱腦創(chuàng)傷因中樞神經(jīng)系統(tǒng)解剖的特異性及其功能的重要性,具有高死亡率和高致殘率[1]。目前西醫(yī)對(duì)腦水腫的治療主要有高滲性脫水劑,利尿劑,糖皮質(zhì)激素以及外科手術(shù)減壓等,副作用大,藥量控制難,治療不方便。古代蒙醫(yī)用瀉下療法治療腦水腫,蒙醫(yī)瀉下療法理論體系完整、邏輯嚴(yán)謹(jǐn)、內(nèi)容詳細(xì)且真實(shí),得到了長期實(shí)踐和歷史的檢驗(yàn),也取得了突出的臨床療效,但缺乏現(xiàn)代化研究。本實(shí)驗(yàn)研究阿格希日嘎-7 的降低腦水腫作用,對(duì)以后的臨床應(yīng)用及實(shí)驗(yàn)研究提供參考。
1.1 動(dòng)物 選用SD 大鼠許可證號(hào):SCXK-吉20110004,購于吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,選擇體重在230 ±20g,雌雄各半,雌鼠不孕。
1.2 儀器ZH-ZYQ 型自由落體腦損傷模型打擊器(安徽正華生物儀器設(shè)備有限公司);JH -755B 型紫外可見分光光度計(jì)(上海菁華科技儀器有限公司);BGZ -146 型電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠);BG10 -3A 型低溫高速冷凍離心機(jī)(北京時(shí)代北利離心機(jī)有限公司)。
1.3 藥品 阿格希日嘎-7,組成:藜蘆6g 巴豆6g 蓽茇6g臘腸果15g 干漆15g 白豆蔻3g 白硇砂6g,由內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院提供。
2.1 分組與模型建立 將160 只SD 大鼠按其性別、體重隨機(jī)分為給藥高劑量組、給藥低劑量組、模型組、空白組,各組40 只。適應(yīng)性喂養(yǎng)3d,采用改良的Feeney 氏[2]法自由落體打擊制作腦水腫模型。用10%水合氯醛(3.5mL/kg)行腹腔注射麻醉,俯臥位固定于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)臺(tái),常規(guī)消毒鋪巾,剪去頂部皮毛,消毒皮膚后沿矢狀正中線切開頭皮,分離骨膜,暴露前囟、冠狀縫、矢狀縫及頂骨。在人字縫前方3mm,中線左側(cè)2mm 顱頂骨處,將撞桿置于硬膜外,撞桿突出螺旋筒3mm,用100g 重的砝碼從30cm 高處自由下落打擊致急性腦水腫,然后尾靜脈注入EB25mg/kg。
2.2 給藥:大鼠造模后,給藥高劑量組灌胃0.6g/kg;給藥低劑量組灌胃0.3g/kg;模型組和空白組灌胃同體積蒸餾水,體積為2mL/100g,2 次/d 灌胃。按6、24、48、72、96h 逐一斷頭處死,棄小腦,稱大腦干濕重,測量腦含水量及EB含量。
2.3 指標(biāo)檢測:⑴腦含水量測定:大鼠斷頭取腦后,以濾紙吸去表面體液,用電子分析d 平秤稱4 組大鼠大腦的濕重(室溫15 ~20℃,濕度70% ~90%)。然后將腦組織在電熱烤箱(95℃)中放置24h 烘干,再逐一稱干重(再次烘干4h后,干重相差小于5μg 為止)。按照Elliot 公式計(jì)算含水量:腦含水量(%)=(濕重-干重)/濕重×100%。(2)測量EB 染色范圍:在手術(shù)顯微鏡下測量腦表面EB 染色直徑。(3)測定EB 含量:以氨水乙醇液(1:2)將EB 先配成濃度(C)為0.1、0.5、1.0、1.5 和2.0ug/mL 的標(biāo)準(zhǔn)測定液,用紫外線分光光度儀測定各標(biāo)準(zhǔn)液的吸收度(A)。兩次測定的吸收度結(jié)果與濃度經(jīng)回歸處理得標(biāo)準(zhǔn)直線方程C =22.73909A-0.00781(r =0.9999)。按Young 氏[3]法提取和測定EB 含量。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS17.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以 ±S 表示,進(jìn)行組間比較采用了F 檢驗(yàn),P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 大鼠的腦含水量 空白組與給藥模型組比較腦含水量有顯著性差異(P<0.05);模型組與給藥組比較腦含水量有顯著性差異(P<0.05);兩給藥組比較腦含水量無顯著性差異(P>0.05),見表1。
表1 腦組織的含水量百分比(n,%,x±S)
2.2 大鼠的EB 染色范圍 與空白組相比較,其余3 組可見腦外觀藍(lán)染區(qū),藍(lán)染大小2.5 ×3.5mm2左右。
2.3 大鼠腦組織EB 含量測定 空白組與給藥模型組比較EB 含量有顯著性差異(P<0.05);模型組與給藥組比較EB含量有顯著性差異(P<0.05);兩給藥組比較EB 含量無顯著性差異(P>0.05),即兩個(gè)劑量組藥物降腦組織EB 含量的作用相同,治療腦水腫療效相同,見表2。
表2 阿格希日嘎-7 對(duì)腦組織EB 含量(ng/mL)的影響(n,x±S)
中醫(yī)認(rèn)為腦水腫屬中風(fēng)臟腑之痰熱藴蓄腸腑、蒙蔽清竅證、清竅閉塞、神明被擾、痰濁瘀血藴蓄、腸腑結(jié)實(shí),總結(jié)出瘀是根本原因[4],因則肝陽暴亢、瘀阻腦府、瘀則生水立論,化瘀利水治療。蒙醫(yī)學(xué)認(rèn)為受傷等原因下胃腑之消化希拉和調(diào)火赫依之功能紊亂,導(dǎo)致胃火衰敗,赫依血運(yùn)行受阻,精華與糟粕之分解失常,致使精華不能完全被吸收而渾濁,水液增積,潴留于病變部位—腦。臨床上給予調(diào)理胃火,抑制赫依,疏通脈道,利水燥濕治療。蒙醫(yī)著作《藍(lán)琉璃》里記載“……精華渾濁、水液增積成黃水病者中期可施瀉下療法[5]。而本實(shí)驗(yàn)中的阿格希日嘎-7 通過刺激消化道,通利大便,蕩滌胃腸,排除積滯及水分,從而降低血漿滲透壓使減輕腦水腫、降顱壓,治療急性創(chuàng)傷性腦水腫經(jīng)濟(jì)低廉,副作用小,能夠有效提高臨床療效,并彌補(bǔ)西藥治療的不足之處,減少其不良反應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)為減輕腦水腫、降低顱內(nèi)壓的治療提供新的藥物理論依據(jù),為蒙藥在臨床中應(yīng)用奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
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