付強 王兆濤 張茂營 徐如祥

·基礎研究·

拉莫三嗪對小鼠脊髓背側(cè)半橫斷損傷的保護作用

付強1王兆濤2張茂營2徐如祥2

目的探討拉莫三嗪在小鼠脊髓損傷修復中的作用。方法雌性C57BL/6小鼠80只采用脊髓背側(cè)半橫斷損傷模型，隨機分為模型組：單純脊髓損傷；治療組：脊髓損傷后每天給予腹腔注射拉莫三嗪，按照25 mg/kg的計量，連續(xù)7 d；對照組：脊髓損傷后每天給予腹腔注射0.9%生理鹽水，按照25 mg/kg的計量，連續(xù)7 d。術后分別在1 d、7 d、14 d對各組小鼠行BBB評分，并分別在1 d、7 d、14 d在各組隨機抽取6只小鼠，進行免疫熒光染色觀察膠質(zhì)細胞變化，并在術后第7天各組取6只小鼠組織行ELISA檢測，觀察炎癥因子表達情況。結果損傷后7、14 d治療組小鼠BBB評分明顯高于模型組和對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；脊髓損傷后矢狀切面損傷灶下游的GFAP+(星形膠質(zhì)細胞的標記)細胞的免疫熒光面積百分比，發(fā)現(xiàn)術后7 d和14 d治療組(9.87± 0.96，4.79±1.02)的明顯低于模型組(12.34±1.72，7.46±1.28)和對照組(11.89±1.70，7.53±1.70)，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。ELISA檢測術后7 d小鼠T9～T11的IL-1、IL-10、TNF-α表達情況，IL-1、IL-10的表達治療組明顯低于模型組和對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結論拉莫三嗪可以改善脊髓損傷小鼠的運動功能，通過前期減少炎癥因子的分泌降低膠質(zhì)細胞的活化來實現(xiàn)的。

脊髓損傷；拉莫三嗪；膠質(zhì)細胞；炎癥因子

脊髓損傷(spinal cord injury，SCI)常常會導致不可逆轉(zhuǎn)的感覺、運動、反射及括約肌功能障礙。脊髓損傷早期的炎癥反應以及膠質(zhì)瘢痕的形成影響了中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)抑制神經(jīng)元再生的微環(huán)境，從而很大程度上延緩了脊髓損傷的恢復[1]，膠質(zhì)細胞(星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞)被證明會導致?lián)p傷后神經(jīng)性疼痛[2-4]，而神經(jīng)性疼痛會通過疼痛傳導的物質(zhì)進一步激活膠質(zhì)細胞[5-6]。拉莫三嗪(lamotrigine，LTG)作為抗癲癇藥物，是一種封閉電壓應用-依從性的鈉離子高通道阻滯劑，同時也被發(fā)現(xiàn)它的止痛作用被用來各種神經(jīng)性疼痛的止痛劑，而鞘內(nèi)注射和腹腔內(nèi)注射LTG被證明可以減弱神經(jīng)性疼痛[7]，而神經(jīng)性疼痛的減弱可以抑制神經(jīng)膠質(zhì)細胞的激活，或許可以促進損傷的修復。本實驗應用TLG治療小鼠脊髓背側(cè)半橫斷損傷模型，觀察小鼠脊髓損傷后運動功能和組織形態(tài)的變化，探討TLG對脊髓損傷的修復作用，為臨床治療提供依據(jù)。

材料與方法

一、實驗動物

健康雌性SPF級8周齡C57BL/6小鼠80只(購自北京維通利華實驗動物技術有限公司)。體質(zhì)量20～22 g。

二、試劑與儀器

拉莫三嗪(Sigma公司)，二亞基亞砜(DMSO) (Amresco公司)；0.9%生理鹽水(石家莊四藥有限公司)，注射用青霉素鈉，80萬單位/支；Mouse-anti-GFAP(Abcam公司)，Rabbit-anti-Iba1(Wako公司)，Alexa Fluor 488-conjugated donkey anti-mouse (invitrogen公司)，Alexa Fluor 555-conjugated donkey anti-rabbit(invitrogen公司)，DAPI(invitrogen公司)，ELISA試劑盒(北京博奧通科科技有限公司)；手術顯微鏡(Leica公司)，恒冷冰凍切片機(Leica公司)，共聚焦顯微鏡(Leica公司)。

三、實驗方法

1.脊髓背側(cè)半橫斷模型的制作和分組：小鼠用3.6%水合氯醛腹腔注射麻醉，無菌條件下俯臥固定，行T10切除術。切口以T10為中點，行長的背部正中切口，鈍性分離皮下組織和肌肉，顯露T9～T11棘突和椎板，用蚊式鉗咬除除T10棘突和椎板，用虹膜剪橫斷脊髓背側(cè)半0.8mm(剪刀刃上提前標記)，術后小鼠雙下肢癱瘓，下肢關節(jié)不能自主活動，提示造模成功。造模后觀察到79只造模成功，按照隨機數(shù)字表法分為3組：模型組(SCI)、治療組(SCI+ LTG)、對照組(SCI+0.9%saline)。

2.小鼠給藥及管理：小鼠造模后給予給藥處理，拉莫三嗪用DMSO助溶，用0.9%生理鹽水制備成10μg/μl的濃度[8]。分組給藥：模型組(SCI組)：脊髓損傷后不予特殊其他處理；治療組(SCI+LTG組)：術后1天起給予腹腔注射拉莫三嗪，按照25 mg/kg的計量，連續(xù)7 d[9]；對照組(SCI+0.9%saline)：術后1天起給予腹腔注射0.9%生理鹽水，按照25 mg/kg的計量，連續(xù)注射7 d。術后每天腹腔注射青霉素鈉，并于每天兩次膀胱區(qū)按摩，防止泌尿系感染。

3.行為學評分：于術后1 d、7 d、14 d將各組小鼠置于邊長為2 m的方形桌面上自由爬行3 min，由兩名觀察者分別按照BBB評分標準，分別觀察小鼠的臀、膝、踝關節(jié)的行走情況、軀干運動及其協(xié)調(diào)情況，為小鼠運動功能評分，評分從0～21分，0分表示無可見后肢運動，21分表示后肢運動功能正常，將二人的評分求平均值得到該小鼠的BBB評分[10]。

4.制作冰凍切片：脊髓組織切片造模后分別在術后1 d、7 d、14 d行為學評價結束后，各組分別隨機取6只小鼠，腹腔注射3.6%水合氯醛麻醉后，開胸并經(jīng)左心室心臟插管，用200 ml 0.9%生理鹽水快速灌注，右心耳流出透明液體后用4?C 4%多聚甲醛(pH7.2～7.4)300 ml灌注用以固定。解剖T9～T11的脊椎椎管，取出損傷的脊髓，并于4?C條件下依次置于4%多聚甲醛(pH7.2～7.4)固定24 h、20%蔗糖溶液中脫水24 h、30%蔗糖溶液中脫水24 h，至組織沉入容器底部。取距離橫斷損傷處頭、尾端各0.5 cm范圍的脊髓并用OCT包埋，用恒冷冰凍切片機矢狀位連續(xù)切片，貼于粘附在玻片上，標注頭端和尾端，片厚10μm，每份標本制作20套切片，按照順序依次編號為1～20，存放于-80?C冰箱里。

5.免疫熒光染色及拍攝：取各組的6只小鼠的相同編號的切片，5張用于星形膠質(zhì)細胞的染色，取出切片后，在室溫下自然干燥10 min，在組織上滴加0.3%Triton-X100室溫下30 min，再滴加10%BSA室溫下60 min，之后在組織上滴加Mouse-anti-GFAP (1:500稀釋)在4?C條件下孵育過夜(12～18 h)，在室溫下復溫30 min后用PBS緩沖液(pH7.2～7.4)洗滌3次X10min，再用Donkey-anti-Mouse488(1:1000稀釋)在室溫下孵育2 h后，用PBS緩沖液洗滌3次X 10 min，用在組織上滴加DAPI，用蓋玻片封片，4?C條件下保存。再取5張用于小膠質(zhì)細胞的染色，在室溫下自然干燥10 min，在組織上滴加0.3% Triton-X100室溫下30 min，再滴加10%BSA室溫下60 min，之后在組織上滴加Rabbit-anti-Iba1(1:500稀釋)在4?C條件下孵育過夜(12～18 h)，在室溫下復溫30 min后用PBS緩沖液(pH7.2～7.4)洗滌3次× 10 min，再用Donkey-anti-Rabbit555(1:1 000稀釋)在室溫下孵育2 h后，用PBS緩沖液洗滌3次×10 min，用在組織上滴加DAPI，用蓋玻片封片，4?C條件下保存。用Leica顯微鏡放大20倍拍攝損傷灶尾端的星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞的圖像[11]。

5.細胞計數(shù)：將術后1 d、7 d、14 d每組6只小鼠，每只小鼠選擇相同編號的4個組織，將所拍的熒光圖片用Image J(National Institutes of Health, Bethesda,MD,USA)軟件進行分析GFAP+細胞在圖片中所占的熒光面積百分比[12]；人工計數(shù)Iba1+細胞，計算相對面積下的Iba1+細胞數(shù)量[13]。

6.ELISA檢測：各組取術后7 d小鼠各6只，取T9-T11節(jié)段的組織，迅速置于速凍管內(nèi)，稱重后，按照1 g對應9 ml的比例用PBS(PH7.4)緩沖液加入組織中，用勻漿器將標本勻漿充分，仔細收集上清，儲存于離心管內(nèi)。用ELISA方法分別檢測各組的IL-1、IL-10、TNF-α的表達水平。

四、統(tǒng)計學處理

采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析，BBB評分及Iba1+數(shù)目等計量資料，采用均數(shù)±標準差(x±s)的形式表示，模型組、治療組及對照組組間比較行重復測量的是用方差分析，兩兩比較則采用LSD-t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

結果

一、動物功能評分(Basso Beattie Bresnahan，BBB)結果

為了證實拉莫三嗪是否會在小鼠脊髓損傷后的病理反應中起到的的影響，我們首先觀察了在運動功能的恢復方面各組小鼠在不同時間點拉莫三嗪所起的作用，損傷后第1天所有小鼠的BBB評分各組間幾乎無差異(P＞0.05)；術后7 d，治療組的小鼠的評分(5.17±0.41)高于模型組的的小鼠(4.00±0.63)和對照組的小鼠(3.83±0.41)，而后兩組間無明顯差異；至術后14 d，治療組的小鼠的BBB評分(6.50±0.55)仍然高于模型組(5.50±0.55)和對照組(5.33±0.52)，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，即拉莫三嗪處理后的小鼠運動功能恢復更好(表1)。

圖1 免疫熒光染色三組小鼠GFAP+(星形膠質(zhì)細胞)數(shù)量變化

圖2 免疫熒光染色三組小鼠Iba1+(小膠質(zhì)細胞)數(shù)量變化

表1 各組小鼠不同時間點BBB評分(

表1 各組小鼠不同時間點BBB評分(

與模型組和對照組相比較，aP＜0.05

組別模型組治療組對照組F值P值鼠數(shù)(例) 20 20 20第1天2.17±0.48 2.33±0.52 2.17±0.41 0.278 0.761第7天4.00±0.63 5.17±0.41a3.83±0.41 12.955 0.001第14天5.50±0.55 6.50±0.55a5.33±0.52 8.269 0.004

二、星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞的計數(shù)結果

活性星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞可以分泌炎性因子和趨化因子，從而導致神經(jīng)和突觸的機能障礙、細胞凋亡、繼發(fā)性神經(jīng)退行性變，早期對炎癥反應的治療可以明顯促進脊髓損傷病情的恢復。因此，我們對各組小鼠在各時間點的炎癥細胞的表達做了計數(shù)，驗證拉莫三嗪是否會抑制炎癥細胞的增殖。我們計算了脊髓損傷后矢狀切面損傷灶下游的GFAP+(星形膠質(zhì)細胞的標記)細胞的免疫熒光面積百分比，發(fā)現(xiàn)術后7 d和14 d治療組(9.87±0.96，4.79±1.02)的統(tǒng)計明顯低于模型組(12.34±1.72，7.46±1.28)和對照組(11.89±1.70，7.53±1.70)，而后兩者差異不明顯(表2)(圖1)；而計算相同位置的Iba1+(小膠質(zhì)細胞的標記)細胞的相對面積下的數(shù)量，發(fā)現(xiàn)治療組的統(tǒng)計數(shù)量(285.68±25.90，152.86±12.77)明顯低于模型組(355.47±23.94，172.92±21.12)和對照組(379.17±52.73，178.91±21.08)，而后兩者差異不明顯(表3)(圖2)。即拉莫三嗪處理后小鼠的炎癥反應明顯減弱。

表2 各組小鼠不同時間點GFAP+熒光面積百分比(%)

表2 各組小鼠不同時間點GFAP+熒光面積百分比(%)

與模型組和對照組相比較，aP＜0.05

第14天7.46±1.28 4.79±1.02a7.53±1.70 31.664 0.000組別模型組治療組對照組F值P值鼠數(shù)(例) 6 6 6第1天18.07±1.98 18.42±1.91 18.40±2.37 0.217 0.806第7天12.34±1.72 9.87±0.96 11.89±1.70 18.444 0.000

三、ELISA結果

為了驗證拉莫三嗪通過減少炎癥因子的分泌而減少對膠質(zhì)細胞的激活，對IL-1、IL-10、TNF-α進行檢測，結果顯示IL-1和IL-10在術后7 d表達治療組(27.757±2.070，92.557±8.859)低于模型組(33.738± 0.642，120.791±6.238)和對照組(33.691±0.587，120.807±3.486)，而模型組和對照組間無明顯差異。TNF-α在三組中的表達無明顯差異(P＞0.05)(表4)。即拉莫三嗪有效地抑制炎癥因子的表達和分泌。

討論

急性脊髓損傷大多源于運動傷、暴力傷、交通傷，損傷后多會出現(xiàn)不可逆性的感覺及運動功能喪失，并且迄今沒有確定的治療方法。脊髓損傷恢復困難歸因于軸突的有限的自身再生能力及周圍膠質(zhì)環(huán)境抑制了軸突的再生[9]，其中膠質(zhì)環(huán)境對神經(jīng)再生的抑制作用在早期起著比較重要的作用。

拉莫三嗪是一種廣泛應用的抗癲癇藥物，近年來因為其對神經(jīng)性疼痛的抑制作用而應用于糖尿病性神經(jīng)疼痛、皰疹后神經(jīng)痛、三叉神經(jīng)痛、HIV相關的神經(jīng)疼痛、術后或創(chuàng)傷后神經(jīng)痛[12]，但對于脊髓損傷的研究非常缺乏。如果可以將拉莫三嗪的抑制疼痛的作用應用于脊髓損傷，又可以起到抑制神經(jīng)膠質(zhì)細胞激活的作用，可以對損傷的恢復起到正向的作用。鑒于拉莫三嗪的這種作用，而疼痛和膠質(zhì)細胞之間又有相互激活的作用，課題用脊髓半橫斷損傷后腹腔注射拉莫三嗪作為治療組，同時腹腔注射同樣計量的生理鹽水作為對照組，不予任何處理作為模型組，探討拉莫三嗪在脊髓損傷后對于行為學和早期病理學變化的影響。

機體神經(jīng)損傷后，感覺末梢會分泌并釋放神經(jīng)傳遞物質(zhì)，這些物質(zhì)會激活星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞，而激活的膠質(zhì)細胞又可以產(chǎn)生并分泌IL-1、IL-10、前列腺素E2、三磷酸腺苷等，這些物質(zhì)會通過調(diào)節(jié)突觸前釋放神經(jīng)遞質(zhì)或者調(diào)節(jié)突觸后的興奮性而促進神經(jīng)性疼痛[14]。拉莫三嗪作為一種電壓依從性鈉離子通道阻滯劑[15]，在體內(nèi)可以抑制GABA介導的神經(jīng)傳遞[16]，而這種抑制也可以降低谷氨酸鹽和天冬氨酸在神經(jīng)系統(tǒng)的表達[15]，同時對細胞膜和突觸前膜的穩(wěn)定作用也可抑制神經(jīng)炎癥因子如谷氨酸鹽、P物質(zhì)、三磷酸腺苷和疼痛傳遞因子的釋放，而IL-1、IL-6、IL-10、TNF-α被抑制也會對其他神經(jīng)因子的釋放起到抑制作用，其中對AMPA/ kainate受體和對疼痛相關傳遞體的抑制直接導致膠質(zhì)細胞的活化被抑制[17-19]。也有很多文獻報道拉莫三嗪在脊髓中可以抑制谷氨酸鹽的釋放和減弱神經(jīng)易感狀態(tài)，這種抑制作用可抑制膠質(zhì)細胞的活化，實驗中持續(xù)使用拉莫三嗪一周后星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞在損傷灶下游的分布明顯少于模型組和對照組，而模型組和對照組無明顯差異，而術后兩周治療組星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞的分布仍減少，而炎癥因子IL-1和IL-10的表達同樣在治療組較少，說明使用拉莫三嗪有效地抑制了星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞的活化和增殖。同時，在脊髓損傷后一周和兩周的行為學評分中可以看得出使用拉莫三嗪后小鼠的BBB評分高于模型組和對照組，而模型組和對照組間無明顯差異，說明拉莫三嗪在抑制膠質(zhì)細胞活化增殖的基礎上更好地促進了脊髓損傷的運動功能的恢復，從而增加了拉莫三嗪對脊髓損傷有效治療的說服力。但對于拉莫三嗪是否促進軸突的再生及其機制有待進一步研究。

表3 各組小鼠不同時間點Iba1+相對面積下數(shù)目(cells/mm2)

表3 各組小鼠不同時間點Iba1+相對面積下數(shù)目(cells/mm2)

與模型組和對照組相比較，aP＜0.05

組別模型組治療組對照組F值P值鼠數(shù)(例) 6 6 6第1天206.51±61.11 207.81±56.03 205.73±59.32 0.008 0.992第7天355.47±23.94 285.68±25.90a379.17±52.73 44.488 0.000第14天172.92±21.11 152.86±12.77a178.91±21.08 12.783 0.000

表4 第7天炎癥因子在各組小鼠表達情況

表4 第7天炎癥因子在各組小鼠表達情況

與模型組和對照組相比較，aP＜0.05

組別模型組治療組對照組F值P值鼠數(shù)(例) 6 6 6 IL-1(ng/L) 33.74±0.64 27.76±2.07a33.69±0.59 15.000 0.002 IL-10(pg/mL) 120.79±6.24 92.56±8.86a120.81±3.49 36.936 0.000 TNF-α(ng/L) 121.87±11.15 120.41±10.45 118.82±7.93 0.141 0.870

[1]鄒明明,薛興森,朱海濤,等.姜黃素促進大鼠脊髓損傷恢復的病理及行為學研究[J].第三軍醫(yī)大學學報,2011,33(8): 765-770.

[2]Popiolek-Barczyk K,Kolosowska N,Piotrowska A,et al. Parthenolide Relieves Pain and Promotes M2 Microglia/Macrophage Polarization in Rat Model of Neuropathy[J].Neural Plasticity,2015,2015.

[3]Tsuda M.[Mechanisms underlying the pathogenesis of neuropathic pain revealing by the role of glial cells][J].Nihon shinkei seishin yakurigaku zasshi=Japanese journal of psychopharmacology,2015,35(1):1-4.

[4]Clark AK,Gruber-Schoffnegger D,Drdla-Schutting R,et al. Selective Activation of Microglia Facilitates Synaptic Strength [J].The Journal of Neuroscience,2015,35(11):4552-4570.

[5]Berliocchi L,Maiarù M,Varano GP,et al.Spinal autophagy is differently modulated in distinct mouse models of neuropathic pain[J].Molecular pain,2015,11(1):3.

[6]Yin Q,Fan Q,Zhao Y,et al.Spinal NF-κB and Chemokine Ligand 5 Expression during Spinal Glial Cell Activation in a Neuropathic Pain Model[J].PloS one,2015,10(1):e0115120.

[7]Choi YS,Jun IG,Kim SH,et al.Intrathecal Lamotrigine Attenuates Mechanical Allodynia and Suppresses Microglial and Astrocytic Activation in a Rat Model of Spinal Nerve Ligation[J].Yonsei medical journal,2013,54(2):321-329.

[8]Dag E,Dag ZO,Baydas G,et al.Effects of lamotrigine and topiramate on brain maturation and cognitive functions in offspring of pregnant rats-preliminary study[J].Advances in clinical and experimental medicine:official organ Wroclaw Medical University,2014,23(5):691.

[9]Floriddia EM,Rathore KI,Tedeschi A,et al.p53 Regulates the neuronal intrinsic and extrinsic responses affecting the recovery of motor function following spinal cord injury[J].The Journal of Neuroscience,2012,32(40):13956-13970.

[10]Zhang MY,Zheng CY,Zou MM,et al.Lamotrigine attenuates deficits in synaptic plasticity and accumulation of amyloid plaques in APP/PS1 transgenic mice[J].Neurobiology of aging, 2014,35(12):2713-2725.

[11]張鴻日,彭靜華,張茂營,等.2ME2對脊髓損傷大鼠運動功能及Tau蛋白磷酸化的影響[J].中華神經(jīng)醫(yī)學雜志,2014,13 (011):1127-1130.

[12]Nunes AF,Amaral JD,Lo AC,et al.TUDCA,a bile acid, attenuates amyloid precursor protein processing and amyloid-β deposition in APP/PS1 mice[J].Molecular neurobiology,2012, 45(3):440-454.

[13]Wiffen PJ,Derry S,Moore RA.Lamotrigine for acute and chronic pain[J].The Cochrane Library,2011.

[14]Marchand F,Perretti M,McMahon SB.Role of the immune system in chronic pain[J].Nature Reviews Neuroscience,2005, 6(7):521-532.

[15]Poonuru RR,Gonugunta CSR.Bimodal gastroretentive drug delivery systems of lamotrigine:Formulation and evaluation[J]. Indian journal of pharmaceutical sciences,2014,76(6):476.

[16]Kishimoto A,Goto Y,Hashimoto K.Post-traumatic Stress Disorder Symptoms in a Female Patient Following Repeated Teasing:Treatment with Gabapentin and Lamotrigine and the Possible Role of Sensitization[J].Clinical Psychopharmacology and Neuroscience,2014,12(3):240-242.

[17]Jun IG,Kim SH,Yoon YI,et al.Intrathecal lamotrigine attenuates antinociceptive morphine tolerance and suppresses spinal glial cell activation in morphine-tolerant rats[J].Journal of Korean medical science,2013,28(2):300-307.

[18]Perisic T,Zimmermann N,Kirmeier T,et al.Valproate and amitriptyline exert common and divergent influences on global and gene promoter-specific chromatin modifications in rat primary astrocytes[J].Neuropsychopharmacology,2010,35(3): 792-805.

[19]Guizzo R,Paques MW,Anhezini L,et al.Neuroprotective effects of oral lamotrigine administration on rabbit retinas after pars plana vitrectomy and silicone oil injection[J].Retina, 2008,28(4):638-644.

Protective effect of lamotrigine on mouse dorsal spinal cord injury

Fu Qiang1,Wang Zhaotao2, Zhang Maoying2,Xu Ruxiang2.
1Medical School of Chinese PLA,Beijing 100853,China

Xu Ruxiang,Email:zjxuruxiang@163.com

ObjectiveTo investigate the effect of lamotrigine(LTG)on recovery after spinal cord injury(SCI).MethodsA total of 80 female C57BL/6 mouses were made the model of spinal cord hemisection,and all of these were randomly divided into 3 group:SCIgroup,SCI+LTG group and SCI+0.9%saline group;mouses in SCI+LTG grouop were given interperitoneal injection of lamotrigine (25 mg/kg)for 7days,and mouses in SCI+0.9%saline group were given the same volume of 0.9%saline. Basso,Beatti,Bresnahan(BBB)scale was perfomed 1,7,14days after SCI;the number of glial cell were observed by immunofluorescence and the express of inflammatory factors were obseverd by ELISA (enzyme linked immunosorbent assay).ResultsOn the 7th,14th days after injury,the BBB scale scores in the SCI+LTG group were significantly higher than those in the SCI group and in the SCI+ 0.9%saline group(P＜0.05).On the 7th,14th days after injury,less percentage of GFAP+fluorenscent area and less number of Iba1+cells in the SCI+LTG group were distributed in the lesion area than those in the SCI group and in the SCI+0.9%saline group(P＜0.05).On the 7th day after spinal cord injury,the IL-1 and IL-10 expression in SCI+LTG group were obviously lower than those in the SCI group and in the SCI+0.9%saline group(P＜0.05).ConclusionLamotrigine improve the motor function after spinal cord injury by decrease the activation of the glial cells.

Spinal cord injury;Lamotrigine;Glialcell;Inflammatory factor

2015-04-23)

(本文編輯：楊藝)

10.3877/cma.j.issn.2095-9141.2015.03.009

軍隊十二五重大科技項目(BWS12J010)

100853北京，解放軍醫(yī)學院1；100700，北京軍區(qū)總醫(yī)院附屬八一腦科醫(yī)院2

徐如祥，Email：zjxuruxiang@163.com

付強,王兆濤,張茂營,等.拉莫三嗪對小鼠脊髓背側(cè)橫斷損傷的保護作用[J/CD].中華神經(jīng)創(chuàng)傷外科電子雜志,2015, 1(3):158-163.