陳世豪 張偉堅 李珍瑤 李亮

隨著人口老齡化的進(jìn)程加速，原發(fā)性高血壓發(fā)病人數(shù)和發(fā)病率逐年增加，由此帶來的并發(fā)癥也增多，而早期的腎損害十分常見，高血壓腎?。℉N）已成為糖尿病外造成終末期腎病（ESRD）的第二大原因[1]。尋找特異和敏感的標(biāo)志物有助于早期的診斷和評估治療，EH患者腎小管功能損害多先于腎小球功能損害，近年來中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（NGAL）作為腎小管損傷的標(biāo)志物逐漸受到重視，被認(rèn)為是最有應(yīng)用前景的腎損傷標(biāo)志物之一[2-3]。本研究通過對尿NGAL水平的檢測，探討其與EH腎損傷的程度的關(guān)系，同時評估其相關(guān)性，從而對早期EH腎損傷患者進(jìn)行有效干預(yù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年1-10月在本院心內(nèi)科住院的已確診為原發(fā)性高血壓（EH組）患者65例，入選對象均符合我國2010年制定的高血壓防治指南中對高血壓的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，排除繼發(fā)性高血壓、自身免疫性疾病、肝腎異常、糖尿病、惡性腫瘤等，并簽署知情同意書。入選患者至少兩周內(nèi)未接受降壓藥及治療腎損傷藥物，其中男35例，女30例，年齡42~80歲，平均（56.3±7.2）歲。根據(jù)尿白蛋白排泄率（UAER）標(biāo)準(zhǔn)分為三組，正常白蛋白尿（NA組， UAER<30 mg/24 h）23例，微量白蛋白尿（MA組，UAER介于30~300 mg/24 h）27例，臨床白蛋白尿（CN組，UAER>300 mg/24 h）15例，另隨機(jī)選取本院體檢中心健康人群25例為對照組，其中男13例，女12例，平均年齡（53.3±6.3）歲。各組年齡和性別比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 研究對象空腹12 h后，采集肝素鋰抗凝靜脈血4.0 mL，留取晨尿10 mL。以2000×g離心5 min分離血清以及尿液上清液，檢測標(biāo)本于-70 ℃凍存。另外病患組以甲苯防腐留取24 h尿量，并記錄尿量。

1.2.2 NGAL、CysC、UAER和肌酐的檢測 NGAL和CysC采用免疫透射乳膠凝聚法檢測，肌酐采用速率法，NGAL試劑盒購自武漢生之源公司，CysC試劑購自北京利德曼公司，其他檢測項目均為羅氏原裝試劑盒，檢測項目均用羅氏800全自動分析系統(tǒng)進(jìn)行檢測。

根據(jù)Cockroff-Gault公式計算GFRCcr（mL/min）=[（140-年 齡 ）× 體 重（kg）×（0.85女 性 ）/72×Scr（mg/dl）]；UAER=UmAlb（mg/L）×24 h 尿總量（L）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)均使用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，正態(tài)分布的計量資料比較采用t檢驗，非正態(tài)分布定量資料比較采用非參數(shù)秩和檢驗M，組間差異比較采用Kruskal-Wallis H檢驗；NGAL與eGFR和CysC相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 EH組和對照組尿NGAL、eGFR、CysC水平比較 EH組患者尿NGAL、CysC水平較對照組高，而eGFR水平較對照組低，比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。見表1。

表1 EH組和對照組尿NGAL、eGFR、CysC水平比較

2.2 尿NGAL與UAER、eGFR和CysC的關(guān)系 尿NGAL在NA組中為83.6（63.7~111.2）ng/mL，在MA組中為137.3（93.7~163.8）ng/mL，在CN組為271.2（236.6~336.9）ng/mL，三組比較差異有明顯統(tǒng)計學(xué)意義（H=31.021，P<0.01）。與NA組比較，MA、CN組尿NGAL濃度明顯升高，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。

Pearson相關(guān)性分析顯示，EH患者尿NGAL與eGFR呈負(fù)相關(guān)（r=-0.729，P<0.01），與血清CysC呈正相關(guān)（r=0.773，P<0.01）。見圖1和2。

圖1 尿NGAL與eGFR水平相關(guān)性分析

圖2 尿NGAL與血清CysC水平相關(guān)性分析

3 討論

高血壓腎損傷是原發(fā)性高血壓常見的并發(fā)癥，占老年人腎功能不全發(fā)病原因的第一位[5]，作為金標(biāo)準(zhǔn)的腎活組織檢查帶有損傷性而不能用于常規(guī)檢查，早期診斷腎損傷以及判斷腎功能改變的程度對于防止病變?yōu)榻K末期腎病有重大意義。NGAL是在激活的人中性粒細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的相對分子量為25 000的分泌性蛋白，是lipocalin家族的成員，尿液NGAL主要源于腎小管受到損傷刺激后由腎小管上皮大量分泌[2-3]，高血壓患者腎小管功能損害多先于腎小球功能損害尿NGAL變化能有效反映腎小管損傷程度。有研究表明，尿NGAL在急性和慢性期等疾病導(dǎo)致腎損傷中已明顯升高[6-8]；且有報道顯示NGAL可先于肌酐、CysC等腎損傷標(biāo)志物發(fā)生改變，是最具有應(yīng)用前景的早期腎損傷標(biāo)志物[9-10]。

長期高血壓引起的小動脈硬化病變可以遍及全身，但以腎臟最明顯，其病變則出現(xiàn)蛋白尿，早期一般是輕到中度，且通常無明顯臨床癥狀。本研究證實了尿NGAL水平與UAER嚴(yán)重程度密切相關(guān)，由于高血壓患者動脈結(jié)構(gòu)和功能的改變是心腦腎等各重要器官損害的基礎(chǔ)，過高的血壓會引起腎臟的進(jìn)行性損傷，所以檢測尿NGAL水平明顯升高，說明病情越重，腎功能損傷程度越顯著。臨床上對微量白蛋白的檢測通常收集24 h的尿液進(jìn)行測定，由于測定時間間隔較長，樣本容易受到外界因素影響，從而導(dǎo)致測定結(jié)果受到干擾[11]。筆者測定NGAL僅留取晨尿或者隨機(jī)尿，能很好地避免這種不良因素。尿NGAL與eGFR相關(guān)性分析中，尿NGAL與eGFR呈負(fù)相關(guān)，eGFR越低，尿NGAL水平越高。作為腎小管損傷的早期標(biāo)志物，由于臨床上慢性腎臟病常把GFR作為分期的依據(jù)，檢測尿NGAL有利于對腎損傷程度進(jìn)行分層。

本研究結(jié)果顯示，在尿NGAL與血清CysC相關(guān)性分析中，兩者呈明顯的正相關(guān)，而CysC是研究認(rèn)為檢測腎小球濾過功能的理想的內(nèi)源性指標(biāo)，不受年齡、性別、肌肉量、飲食、炎癥、膽紅素、溶血、腫瘤及三酰甘油等因素的影響[12]，反映腎功能的靈敏度和特異性都優(yōu)于受腎外影響的尿素氮、肌酐等指標(biāo)，因而被作為評價GFR新的敏感指標(biāo)。國內(nèi)劉紅春等[13]研究認(rèn)為聯(lián)合血肌酐和CysC方程評估GFR在慢性腎臟?。–KD）不同階段內(nèi)的計算結(jié)果比單一估算較為準(zhǔn)確，由此為筆者在今后研究提供方向，收集更廣泛病例數(shù)據(jù)研究CKD打下基礎(chǔ)。同時在既往研究已證明CysC是不良預(yù)后的強(qiáng)的預(yù)測因子，被認(rèn)為是心血管疾病的危險因素的指標(biāo)[14]。由此說明NGAL與CysC同樣具有反映腎損傷穩(wěn)定性的特點，對心腦血管的危險發(fā)生有一定的預(yù)警作用。然而當(dāng)前國內(nèi)外對NGAL研究較多反映出對于急慢性腎損傷中先于CysC發(fā)生變化，如有研究顯示在糖尿病腎損傷中血清NGAL診斷效能高于血清CysC[15]。但本研究由于實驗局限，對血清和尿NGAL、CysC等指標(biāo)單一和聯(lián)合應(yīng)用診斷效能在今后研究再進(jìn)一步評價。

目前，NGAL檢測已研究推廣免疫比濁法應(yīng)用于大型全自動生化分析儀，適合大批量標(biāo)本操作，方法靈敏重復(fù)性好，應(yīng)用于日常檢測對于早期原發(fā)性高血壓患者早期腎損害的診斷以及病程的進(jìn)展能有積極的意義。

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