張媛 戚磊 韓方偉 崔力兵 黃紹華 朱愛華

摘 ?要：為了解徐州地區(qū)雞群白血病的感染情況，從2013年3月到2013年12月在徐州部分地區(qū)的雞場隨機采樣500份，通過酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測gp27抗原陽性率以及J亞型白血?。ˋLV-J）和AB亞型白血?。ˋLV-AB）的抗體陽性率。調(diào)查顯示，徐州大多數(shù)雞場均存在白血病的感染，其中ALV-J為陽性的雞場有8所，ALV-J最高陽性率達28.6%，ALV-AB最高陽性率為23.3%，ALV-AB感染的年齡段存在一定差異，感染率最高的年齡段是75周齡;肉雞ALV-J、ALV-AB感染率較高，蛋雞也存在ALV-J感染的情況，說明ALV-J的宿主范圍正在擴大。

關(guān)鍵詞：禽白血病;ELISA;血清;gp27

中圖分類號：S858.31 ? ? 文獻標(biāo)識碼：B ? ? 文章編號：1673-1085（2015）03-0048-03

禽白血?。?Avian leucosis，AL） 是由禽白血病/肉瘤病毒群的病毒引起的禽類（主要是雞）各種良性和惡性腫瘤的一群疾病[1]。白血病病毒（ALV）是反轉(zhuǎn)錄病毒，目前發(fā)現(xiàn)有10種亞群，其中A、B、C、D、E和J亞群常見于雞，A亞群、B亞群和J亞群是最為常見的外源性病毒，也是危害養(yǎng)雞業(yè)最大的三個亞群。

J亞群禽白血?。ˋL-J）是由J亞群禽白血病病毒（ALV-J）引起的以骨髓細(xì)胞瘤為特征的雞的種源性傳染病[2]，J亞群禽白病病毒是20世紀(jì)80年代末 Payne等[3]首先從肉用型雞中分離鑒定出來的禽白血病病毒新的亞群，也是發(fā)現(xiàn)最晚的亞群。AL可通過兩種方式傳播感染雞群，水平方式和垂直方式。雞群感染此病會導(dǎo)致嚴(yán)重的經(jīng)濟損失，一是產(chǎn)生腫瘤，導(dǎo)致雞的死亡;二是生產(chǎn)指標(biāo)下降，表現(xiàn)為產(chǎn)生非腫瘤綜合征[4]。如性成熟推遲、母雞產(chǎn)蛋率下降、蛋重下降、受精率下降和孵化率下降，由此嚴(yán)重影響?zhàn)B雞業(yè)的經(jīng)濟效益。

本實驗采用ELISA法檢測樣本，因為ELISA法能高效檢測到蛋清中的ALSV抗原，具有敏感、簡便、快捷、適用于大面積檢測的特點，在種群凈化中得到了廣泛的應(yīng)用。在對抗原的檢測中，我們檢測的是所有亞群病毒所共同擁有的核衣殼蛋白gp27。不論外源性病毒或內(nèi)源性的E亞群病毒都可以產(chǎn)生gp27，而且在一些雞的基因組中還可能含有能表達gp27的基因片段，也能產(chǎn)生gp27，從而干擾了檢測結(jié)果。但如果我們同時結(jié)合抗體檢測，則可確定該雞群確實發(fā)生或有過相應(yīng)的外源性禽白血病感染;另一方面，ELISA診斷試劑盒在我國還未實現(xiàn)商品化。隨著我國養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展以及科研、生產(chǎn)和檢疫的需要，建立高效、實用的禽白血病檢測方法，研究和控制禽白血病將是今后的重要任務(wù)。

因此，無論從經(jīng)濟角度考慮，還是從人的健康出發(fā)，研究和控制禽白血病都是至關(guān)重要的。

1 ?材料與方法

1.1 ?樣本來源 ?由徐州疾病預(yù)防控制中心的工作人員在徐州各養(yǎng)殖場采集的樣本。采集了徐州賈汪區(qū)、銅山縣、云龍區(qū)、泉山區(qū)、鼓樓區(qū)、睢寧縣、邳州市、新沂市、開發(fā)區(qū)、遠大雞場的10個品種（ 系）、1～75周齡的雞群共采集血液樣本500 份，分離后取血清，置于-20℃冰柜中保存，記錄其來源、品種（系）、周齡、發(fā)病等情況。

1.2 ?檢測方法 ?采用ELISA對采集的血清樣本先進行g(shù)p27抗原檢測，將檢測結(jié)果為陽性的血清樣品再進行ALV-J檢測，試劑盒由美國IDEXX公司生產(chǎn)，ALV-J、ALV-AB批號分別為09268-AG448、09257-EG278，具體操作方法嚴(yán)格按照檢測試劑盒的說明書執(zhí)行。

2 ?結(jié)果

2.1 ?不同周齡雞群ALV-AB的感染情況 ?經(jīng)過調(diào)查我們知道遠大雞場提供的100份樣品是肉種雞的血清，由表1可知，17周齡以下的30份血清中，AB亞型陽性數(shù)2份，陽性率為6.7%;18～47 周齡的40份血清中，AB亞型陽性數(shù) 5份，陽性率為12.5%;在75 周齡的30份血清中，AB亞型陽性數(shù)7份，陽性率為23.3%。不同周齡的雞群感染情況存在著較大的差異。

■

2.2 ?不同縣區(qū)感染gp27檢測結(jié)果的比較 ?共檢測徐州鼓樓區(qū)、賈汪區(qū)、銅山縣、邳州市、泉山區(qū)、云龍區(qū)、睢寧縣、新沂市、開發(fā)區(qū)，9個地區(qū)400份血清樣本。由表2可知，每個雞場都感染過gp27抗原，雞場感染最高陽性率達38.3%，雞場感染最低陽性率達15.6%，從表格數(shù)據(jù)也可以看出規(guī)?；B(yǎng)殖的地區(qū)的禽白血病陽性率普遍偏高，因此我們認(rèn)為養(yǎng)殖規(guī)模也是影響禽白血病感染的重要因素。

■

2.3 ?不同縣區(qū)感染ALV-J檢測結(jié)果的比較 ?通過檢測將gp27呈陽性的血清挑選出來并標(biāo)記，再用gp85試劑盒檢測，若結(jié)果呈陽性，則為ALV-J亞型，由表3可知，在徐州部分地區(qū)ALV-J陽性率最高的地區(qū)是開發(fā)區(qū)達到了23.8%，泉山區(qū)的為0，說明禽白血病的感染情況有地區(qū)差異。

■

3 ?討論

從檢測結(jié)果可以看出徐州地區(qū)普遍存在禽白血病的感染，但感染的情況并不一致。同一種雞在不同周齡的情況下比較其感染程度，從結(jié)果看出，不同周齡都出現(xiàn)了感染情況，有關(guān)資料表明自然病例可于14周齡后的任何時間發(fā)病， 但通常以性成熟時的發(fā)病率最高[5]。

比較不同品種雞的 ALV-J感染情況，由實驗結(jié)果可知這與國內(nèi)近期研究結(jié)果相一致，即 ALV-J主要發(fā)生于肉用型雞[6-10]。但是此次調(diào)查也表明，徐州市的一些蛋雞已經(jīng)發(fā)生了ALV-J的感染，說明 ALV-J的宿主范圍正在擴大[11]。

此次調(diào)查的雞為祖代雞，是優(yōu)質(zhì)遺傳資源。盡管部分雞感染ALV-J后在臨床上未出現(xiàn)病狀，肉眼能觀察到的典型病變也很少，但對生產(chǎn)性能有十分顯著的影響，已逐漸成為制約地方品種雞產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的瓶頸問題之一。因此，有必要盡快采取凈化等綜合防控措施來控制其發(fā)展，為做好徐州地方品種雞的保種和選育工作奠定基礎(chǔ)。

參考文獻：

[1] ?喬彩霞，關(guān)云濤，陳洪巖. 禽白血病研究進展[J].動物醫(yī)學(xué)進展，2003，24（6）：18-21.

[2] ?崔治中.雞白血病及其鑒別診斷和預(yù)防控制[J].中國家禽，2010，32（8）：1-12.

[3] ?PAYNE L N， BROWN S R， BUMSTEAD N， et al. A novelsubgroup of exogenous avian leukosis virus in chickens [J].Gen Virol，1991，72：801-807.

[4] ?馬秀麗.雞病毒性免疫抑制病的發(fā)展趨勢與防制措施 [J].山東畜牧獸醫(yī)，2000，（2）：37.

[5] ?張勝斌，吳天威，韋平，等.地方優(yōu)良雞種禽白血病病毒感染調(diào)查及凈化[J].中國家禽，2010.32（12）：11-16.

[6] ?高玉龍，邵華斌，羅青平，等.2009年我國部分地區(qū)禽白血滴分子流行病學(xué)調(diào)查[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報，2010，32（1）：33-35.

[7] ?崔治中.我國雞群中禽白血病的流行現(xiàn)狀和對策[J].中國家禽，2009，31（13）：1-3.

[8] ?張丹俊，潘孝成，趙瑞宏，等.黃羽肉種雞 J 亞群白血病病例診斷初報[J].中國畜牧獸醫(yī)，2008，35（2）：119-120.

[9] ?楊玉瑩，粱雄燕，余連喜，等.湖北蛋雞群血管瘤型ALV-J血清學(xué)檢測和PCR診斷[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，50（6）：1211-1213.

[10] ?秦立廷，高玉龍，潘偉，等.我國部分地區(qū)蛋雞群 ALV-J及于REV、MDV、CAV混合感染檢測[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報，2010，32（2）：90-93.

[11] ?齊新永，孫泉云，陳關(guān)明，等.上海地區(qū)蛋雞 J 亞群禽白血病的血清學(xué)調(diào)[J].動物醫(yī)學(xué)進展，2007，28（11）：110-111