李 婷

(武漢市中醫(yī)醫(yī)院，湖北 武漢 430014)

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中藥海桐揮發(fā)性化學(xué)成分分析

李 婷

(武漢市中醫(yī)醫(yī)院，湖北 武漢 430014)

目的：觀察海桐揮發(fā)性化學(xué)成分的組成。方法：分別采用水蒸氣蒸餾法(SD)和頂空固相微萃取法(HS-SPME)提取海桐，結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)對(duì)其揮發(fā)性成分進(jìn)行分析。結(jié)果：采用兩種分析方法共鑒定海桐揮發(fā)性成分35種，其中含量較高的有α-蒎烯、β-蒎烯、D-檸檬烯、大根香葉烯D等。結(jié)論：首次將SD-GC/MS和HS-SPME-GC/MS共同用于海桐果實(shí)揮發(fā)性化學(xué)成分的分析，為全面分析海桐揮發(fā)性成分提供科學(xué)依據(jù)。

水蒸氣蒸餾；頂空固相微萃取；氣相色譜-質(zhì)譜；海桐；揮發(fā)性成分

海桐為海桐科植物海桐(Pittosporumtobira(Thunb.) Ait.)的成熟果實(shí)，生于山坡林下或庭院栽培，主要分布于我國廣東、福建、江蘇、浙江等地，原產(chǎn)于印度及大洋洲海洋林[1-2]。海桐種子、果實(shí)可供藥用，對(duì)黃疸、腎炎均有一定療效，并有消炎消腫、止咳喘的功效[3]。目前，國內(nèi)外對(duì)海桐揮發(fā)性化學(xué)成分的研究多單獨(dú)采用水蒸氣蒸餾法(SD)，該方法由于提取溫度高、加熱時(shí)間長易使部分揮發(fā)性成分破壞，且提取效率較低。頂空固相微萃取(HS-SPME)作為一種新型的樣品前處理方法，對(duì)藥材中揮發(fā)性成分有較高的選擇性，對(duì)成分無破壞，樣品用量少，操作方法簡便。

本文首次將SD和HS-SPME共同用于分析海桐果實(shí)揮發(fā)性化學(xué)成分，聯(lián)用GC-MS技術(shù)，將兩種分析結(jié)果進(jìn)行比較，得到更全面、完整的化學(xué)成分信息，為海桐的進(jìn)一步開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 6890/5973型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國安捷倫公司)；手動(dòng)固相微萃取(SPME)進(jìn)樣器裝置(美國Supelco公司)。

1.2 試藥

實(shí)驗(yàn)用海桐采于湖北中醫(yī)藥大學(xué)(黃家湖校區(qū))。經(jīng)湖北中醫(yī)藥大學(xué)生藥教研室鑒定為海桐科植物海桐(Pittosporumtobira(Thunb.) Ait.)的成熟果實(shí)。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品處理

2.1.1 水蒸氣蒸餾法(SD)提取條件 取海桐果實(shí)100g，粉碎，加8倍量水，浸泡2h，按《中國藥典》(2010版)附錄XD揮發(fā)油測定法提取揮發(fā)油，連續(xù)提取8h，得油狀物0.2mL，加乙醚定容至1mL作為供試品溶液。

2.1.2 頂空固相微萃取(HS-SPME) 取海桐果實(shí)粉末2.0g置樣品瓶中，插入裝有100μmPDMS萃取纖維頭的手動(dòng)進(jìn)樣器，110℃下保溫30min，頂空萃取30min，取出，立即插入色譜儀進(jìn)樣口，脫附5min。

2.2 GC-MS條件

2.2.1 色譜條件 色譜柱：HP-FFAP (30m×0.25mm×0.25μm)石英毛細(xì)管色譜柱；程序升溫：①SD法升溫條件：初始溫度40℃保持3min，以10℃·min-1升溫至110℃，以1℃·min-1升溫至130℃，再以2℃·min-1升溫至150℃，以5℃·min-1升溫至230℃，保持3min；②HS-SPME法升溫條件：初始溫度30℃，以2℃·min-1升溫至60℃，保持2min，以5℃·min-1升溫至150℃，再以10℃·min-1升溫至210℃，保持5min；

2.2.2 質(zhì)譜條件 載氣：高純氦氣；流速：1.0mL·min-1；進(jìn)樣口溫度：250℃。離子源：EI源，電子能量：70eV；離子源溫度：230℃；四極桿溫度：150℃；倍增管電壓：1.2kV；接口溫度：280℃；質(zhì)量范圍：35～550m·z-1。

2.3 試驗(yàn)結(jié)果

分別按照“2.1”和“2.2”項(xiàng)條件，分析海桐揮發(fā)性化學(xué)成分，經(jīng)HP MSD化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理及用面積歸一化法從各總離子流圖(見圖1、2)計(jì)算各組分相對(duì)百分含量，按各峰質(zhì)譜圖經(jīng)NIST譜庫檢索，并結(jié)合相關(guān)質(zhì)譜圖文獻(xiàn)，確定各個(gè)組分含量。結(jié)果見表1。

3 討論

采用兩種分析方法共鑒定出海桐揮發(fā)性成分35種，通過這兩種技術(shù)共同鑒定出揮發(fā)性成分共5種，分別為α-蒎烯、β-蒎烯、D-檸檬烯、α-蓽澄茄烯、(E)-β-金合歡烯。結(jié)果表明，海桐主要含有萜類、醇類、烷烴類及脂肪酸類化合物。

圖1 海桐揮發(fā)油GC-MS總離子流

圖2 海桐揮發(fā)性成分SPME-GC-MS總離子流

峰號(hào)保留時(shí)間(min)化合物中文名化合物英文名化學(xué)式相對(duì)百分含量(%)SPMESD11．96壬烷NonaneC9H200．47?22．8α?蒎烯a?pineneC10H1672．38?33．18β?蒎烯β?pineneC10H16?6．443．33檜烯SabineneC10H16?0．5953．89月桂烯β?myrceneC10H16?2．0864．0β?蒎烯β?pineneC10H163．75?74．27β?松油烯β?TerpineneC10H160．59?84．47D?檸檬烯D?LimoneneC10H16?4．4794．48十一烷UndecaneC11H241．07?106．11D?檸檬烯D?LimoneneC10H160．32?1112α?蓽澄茄烯α?cubebeneC15H24?1．861212．59正十五烷n?pentadecaneC15H32?0．74

表1 海桐揮發(fā)性化學(xué)成分分析結(jié)果(續(xù))

比較水蒸氣提取法與頂空固相微萃取兩種前處理方法，兩者對(duì)樣品中揮發(fā)性成分選擇性相差較大。SPME法更適合于萜類、醇類等能被纖維萃取頭吸附的揮發(fā)性物質(zhì)的分析，SD法則適用于能隨水蒸氣揮發(fā)有機(jī)物質(zhì)的分析，特別對(duì)萜類、醛酮類、有機(jī)酸類化合物有較強(qiáng)的選擇性。兩種方法均適于中藥中揮發(fā)性成分的分析，將兩種方法結(jié)合起來可共同分析海桐中揮發(fā)性化學(xué)成分，得到更為完整、全面的信息。

[1] 馬元俊,王克勤,劉啟宏,等.湖北中藥資源名錄[M].北京:科學(xué)出版社,1990:144.

[2] 南京中醫(yī)藥大學(xué).中藥大辭典(下冊(cè))[M].第2版.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2006:2748.

[3] 鄭萬鈞.中國樹木志.[M].第3卷.北京:中國林業(yè)出版社,1997:2665-2680.

(責(zé)任編輯：李嵐春)

2015-01-07

李婷(1987-)，女，武漢市中醫(yī)醫(yī)院藥師，研究方向?yàn)橹兴幖捌溆行С煞盅芯俊?/p>

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1673-2197(2015)10-0033-03

10.11954/ytctyy.201510014