程曉光 張振華 王長(zhǎng)泰 俞 舒 李 旭

·臨床醫(yī)學(xué)·

乙型肝炎表面抗原定量與原發(fā)性肝癌的相關(guān)性研究

程曉光 張振華 王長(zhǎng)泰 俞 舒 李 旭

目的 比較慢性乙型肝炎(CHB)與HBV相關(guān)性原發(fā)性肝癌患者中乙肝表面抗原(HBsAg)和HBV DNA 載量情況。方法 采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)403例CHB及肝細(xì)胞肝癌(HCC)患者血清乙型肝炎病毒標(biāo)志物滴度，采用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)患者血清HBV DNA載量。403例患者按照臨床診斷分為CHB組(209例)和HCC組(194例)。結(jié)果 CHB組:血清HBsAg 滴度≥250 IU/mL 者占89.00%; HBV DNA≥1 000 copies /mL 者占88.40%。HCC 組: 血清HBsAg 滴度≥250 IU/mL 者占79.90%; HBV DNA≥1 000 copies /mL 者占67.70%。兩組HBsAg≥250 IU/mL患者的比例差異、HBV DNA≥1 000 copies/mL 患者的比例差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 與CHB相比，HBV相關(guān)性原發(fā)性肝癌患者HBsAg、HBV DNA載量較低。

乙型肝炎表面抗原；慢性乙型肝炎；原發(fā)性肝癌；HBV-DNA載量

原發(fā)性肝癌是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在我國(guó)的惡性腫瘤死亡順位中僅次于胃癌、食管癌[1]。在中國(guó),90%以上的原發(fā)性肝癌為肝細(xì)胞肝癌(hepa tocellular carcinoma,HCC)。乙型肝炎病史是我國(guó)原發(fā)性肝癌最主要的病原學(xué)因素[2]。乙肝表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)是用于檢測(cè)患者長(zhǎng)期預(yù)后的重要生物學(xué)指標(biāo)[3，4]。為進(jìn)一步了解HBsAg和HCC之間的關(guān)系，我院對(duì)403例CHB患者及乙肝相關(guān)性HCC患者HBsAg和HBV DNA載量進(jìn)行了相關(guān)檢測(cè)分析，以探討 HBsAg與HBV DNA在乙肝相關(guān)的HCC發(fā)生、發(fā)展中的變化，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院感染科2013年2月至 2014年5月經(jīng)臨床確診的慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)與HCC患者403例，其中男性334例，女性69例，年齡15～82歲，平均45.45歲。按照臨床診斷分為CHB組和HCC組，所有患者之前均未行有效抗病毒治療，且于我院行乙肝五項(xiàng)定量檢查示HBsAg陽(yáng)性。CHB組患者209例，其中男性164例，女性45例，年齡15～80歲，平均36.95歲，診斷標(biāo)準(zhǔn)符合《慢性乙型肝炎防治指南》[5]。HCC組患者194例， 男性170例，女性24例，年齡21～82歲，平均54.60歲，診斷均符合2001年9月第八屆全國(guó)肝癌學(xué)術(shù)會(huì)議上由中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)肝癌專(zhuān)業(yè)委員會(huì)所修訂出的《原發(fā)性肝癌的臨床診斷與分期標(biāo)準(zhǔn)》所規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)[6]。所有病例均排除了自身免疫性肝病、血吸蟲(chóng)病、胃腸道疾病等相關(guān)疾病的干擾。

1.2 試劑與儀器 乙肝五項(xiàng)定量采用德國(guó)羅氏公司提供的Cobas 6000全自動(dòng)分析儀測(cè)定，試劑由羅氏公司提供；HBV DNA載量水平的測(cè)定由上海之江有限公司提供的儀器和試劑測(cè)定。

1.3 方法與結(jié)果判定 以患者第1次入院確診時(shí)檢測(cè)的血清HBV DNA 及乙肝五項(xiàng)定量時(shí)的指標(biāo)為研究指標(biāo)。 所有患者HBsAg定量均為陽(yáng)性(>0.05 IU/mL)，并且以HBsAg≥250 IU/mL為高滴度狀態(tài)，同時(shí)HBV DNA≥1 000 copies/mL為陽(yáng)性。 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以百分比表示，統(tǒng)計(jì)分析采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者HBsAg 滴度比較 CHB組中，HBsAg≥250 IU/mL 患者186例，占89.00%；HCC組中，HBsAg≥250 IU/mL患者155例，占79.90%。CHB組與HCC組比較，HBsAg≥250 IU/mL和HBsAg<250 IU/mL的患者比例差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組患者中HBsAg 滴度比較[例(%)]

2.2 兩組患者與HBsAg滴度狀態(tài)相關(guān)指標(biāo)比較 CHB組HBsAg≥250 U/mL 的患者中，HBeAg陽(yáng)性112例，HBV DNA陽(yáng)性169例，抗-HBe陽(yáng)性81例，與HBsAg<250 U/mL患者HBeAg、HBV DNA、抗-HBe陽(yáng)性比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。HCC組HBsAg≥250 U/mL 患者中，HBeAg陽(yáng)性42例，HBV DNA陽(yáng)性110例，抗-HBe陽(yáng)性104例，與HBsAg<250 U/mL患者HBeAg陽(yáng)性、HBV DNA陽(yáng)性、抗-HBe陽(yáng)性比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表2。

表2 兩組患者與HBsAg滴度狀態(tài)相關(guān)指標(biāo)結(jié)果比較(例)

2.3 兩組患者乙肝相關(guān)標(biāo)志物陽(yáng)性病例比較 CHB組中，HBV DNA≥10 000 copies/mL的患者163例，HBV DNA≥1 000 copies/mL的患者183例，HBeAg陽(yáng)性118例，抗-HBe陽(yáng)性101例；HCC組中，HBV DNA≥10 000 copies/mL的患者95例，HBV DNA≥1 000 copies/mL的患者130例，HBeAg陽(yáng)性47例，抗-HBe陽(yáng)性137例。CHB組與HCC組患者HBV DNA≥10 000 copies/mL、HBV DNA≥1 000 copies/mL、HBeAg陽(yáng)性、抗-HBe陽(yáng)性患者數(shù)進(jìn)行比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表3。

3 討論

宿主感染HBV后臨床經(jīng)過(guò)可分為免疫耐受期、免疫清除期、低水平復(fù)制期及再活動(dòng)期[7]。HBsAg滴度水平在免疫耐受期最高，低水平復(fù)制期時(shí)最低，尤其低水平復(fù)制期HBsAg滴度水平明顯低于免疫耐受期、免疫清除期[8]。裴彥禎等[9]認(rèn)為HBsAg滴度水平在CHB、HCC患者中逐漸降低，且與HBV DNA載量的水平呈正相關(guān)性。本研究發(fā)現(xiàn)，與CHB相比，HCC患者HBsAg和HBV DNA載量較低，而且在未抗病毒的情況下，高達(dá)32.99%的患者HBV DNA陰性，20.10%患者HBsAg<250 IU/L，比CHB患者高1倍。HBsAg滴度水平在免疫耐受期最高，其后開(kāi)始逐漸下降[10]，可能有以下兩點(diǎn)原因：病毒復(fù)制的宿主是正常的肝臟細(xì)胞，而隨著肝臟炎癥活動(dòng)的反復(fù)進(jìn)行，越來(lái)越多的肝臟細(xì)胞會(huì)受到損害，發(fā)展到肝癌階段時(shí)，已有很多的肝臟組織及細(xì)胞受損，再加上腫瘤細(xì)胞的侵襲，使得肝臟細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)一步減少，因?yàn)樗拗鲾?shù)量的明顯減少，直接地影響了病毒復(fù)制的頻率，從而降低了HBsAg的水平；在免疫清除期階段，病毒復(fù)制及肝臟炎癥活動(dòng)一直在反復(fù)在發(fā)生，而這一長(zhǎng)期的刺激過(guò)程可促進(jìn)肝臟本身纖維化的加重形成肝硬化，甚至可以引發(fā)正常細(xì)胞及組織發(fā)生突變從而變成肝癌。

表3 兩組患者乙肝相關(guān)標(biāo)志物陽(yáng)性病例比較[例(%)]

本研究發(fā)現(xiàn)CHB組中HBsAg滴度和HBV DNA載量有關(guān)，而且HBsAg滴度高者，HBeAg陽(yáng)性率也明顯升高，在HCC組似乎也有這種趨勢(shì)，但是差異不顯著，推測(cè)可能受到了年齡、性別、病毒變異尤其是BCP區(qū)、前C區(qū)變異的影響。

本研究發(fā)現(xiàn)在HCC組HBeAg陽(yáng)性率僅僅為24.23%，而抗-HBe陽(yáng)性率達(dá)到70.62%，HBeAg的缺失將導(dǎo)致機(jī)體免疫耐受被破壞，誘導(dǎo)炎癥活動(dòng)的產(chǎn)生；同時(shí)HBeAg又是細(xì)胞毒性T細(xì)胞的靶抗原，所以HBeAg的缺失會(huì)使變異株逃避宿主的免疫清除，在組織再生時(shí)HBeAg 缺失的肝細(xì)胞可大量增生，肝臟的纖維化程度可逐漸加重，使得發(fā)生癌變的幾率增加[11]。HBeAg陰性CHB感染者的主要特點(diǎn)即是檢出的HBV DNA水平和生化指標(biāo)的不斷變化。 而隨著HBV DNA和ALT水平的不斷起伏，肝臟內(nèi)的慢性炎癥會(huì)一直存在，持續(xù)損傷著肝細(xì)胞，導(dǎo)致肝臟纖維化甚至發(fā)生肝癌。根據(jù)相關(guān)研究可知，HBeAg陰性的CHB患者發(fā)生肝硬化的風(fēng)險(xiǎn)明顯要高于HBeAg陽(yáng)性的CHB患者[12，13]，也易引起肝癌的發(fā)生。

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(2014-12-31收稿 2015-07-02修回)

Association between hepatitis B virus surface antigen quantification and HBV-related hepatocellular carcinoma

ChengXiaoguang,ZhangZhenhua,WangChangtai,etal

DepartmentofInfectiousDiseases,theFirstAffiliatedHospitalofAuhuiMedicalUniversity,Hefei230022,China

Objective To compare the HBsAg and HBV DNA load between chronic Hepatitis B (CHB) and HBV-related hepatocellular carcinoma (HCC) patients. Methods A total of 403 patients with chronic Hepatitis B (CHB) and HCC were enrolled. HBV serological markers were tested by chemoluminescence method, and serum HBV-DNA level was detected by fluorescent quantitation PCR technology. All patients were divided into CHB group(209 patients)and HCC group(194 patients)according to clinical diagnosis. Results In CHB group, 89.00% patients had serum HBsAg titers≥250 IU/mL and 88.40% patients had HBV DNA≥1 000 copies/mL. In the meantime,79.90% and 67.70% patients with HCC had serum HBsAg titers≥250 IU/mL and HBV DNA≥1 000 copies/mL, respectively. The differences in HBsAg≥250 IU/mL, HBV DNA≥1 000 copies/mL between the two groups was significant (P<0.05). Conclusion Compared with chronic hepatitis B, the patients of HBV-related hepatocellular carcinoma has lower HBsAg and HBV DNA load.

Hepatitis B surface antigen;Chronic Hepatitis B;Hepatocelluar carcinoma;Hepatitis B viral load

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào)：81273142)；安徽省衛(wèi)生廳科研基金(項(xiàng)目編號(hào)：2010C053)

230022 合肥 安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院感染科

李旭，aaylixu@qq.com

10.3969/j.issn.1000-0399.2015.09.003