葉玲，陳樹東，區(qū)碩俊，羅曼妮，陸智峰

(廣州質量監(jiān)督檢測研究院 國家加工食品質量監(jiān)督檢驗中心(廣州)，廣東 廣州 511447)

熒光增白劑(FWAs)在我國洗滌劑、紙張、紡織品等工業(yè)中有很廣泛的應用，由于含有芳香胺基結構和苯乙烯基結構，長期接觸或者攝入會有致癌的危險。為了保證消費者健康安全，歐盟、美國和中國都將熒光增白劑作為食品接觸性塑料制品的添加劑進行監(jiān)管［1］。同時也規(guī)定了相關的限用量和/或特定遷移量［2-5］，例如FWA184，歐盟法規(guī)2002/72/EC和GB 9685—2008 都規(guī)定了其特定遷移量(SML)為0.6 mg/kg，GB 9685—2008 還規(guī)定了聚苯乙烯塑料制品中的最大使用量為0.02%，美國則針對不同用途的塑料產品，規(guī)定FWA184 的加入量不得超過0.015%［6］。由于增白劑的效果顯著，因此存在多行業(yè)濫用或違法添加的情況。因此，建立一種快速同時測定紙制包裝材料中多種熒光增白劑的有效方法，對食品及各類非食品產品的安全監(jiān)測具有積極的意義。

目前，國內外對熒光增白劑的檢測方法研究主要集中于紫外檢測法［7］、熒光檢測法［8］、超高效液相和液相質譜法［9-11］。前兩者基本難以準確定量，而后兩者則需要較高的檢測成本，一般實驗室難以滿足。高效液相色譜法具有成本相對便宜，適用性廣等優(yōu)點［12-13］，但要同時檢測10 種以上熒光增白劑，提取和分離難度較大。

本文根據食品接觸性紙制品包裝材料的特性，選擇適當的方法將熒光增白劑進行提取，使用熒光檢測器測定熒光增白劑的最大激發(fā)波長和最大發(fā)射波長［6］，建立了同時測定食品接觸性紙制包裝材料中的11 種熒光增白劑含量的方法。

1 實驗部分

1.1 材料與儀器

糕點接觸性紙制包裝材料;11 種熒光增白劑標準品;甲醇、乙腈均為色譜純;三氯甲烷、四丁基溴化銨均為分析純;去離子水。

Waters 2695 高效液相色譜儀(配2475 熒光檢測器);RF-5310PC 熒光分光光度計;MS3 basic 漩渦混合器;KQ-250DV 型數控超聲波清洗儀;Milli-Q 去離子水發(fā)生器。

1.2 標準溶液的配制

將各固體標準品用三氯甲烷配制成1 000 mg/L的標準儲備液，吸取11 種標準儲備液用甲醇稀釋配成混合標準系列溶液，各單標濃度分別為0. 05，0.10，0.50，1.0，5.0，20.0，50.0，100.0，200.0 μg/L。

1.3 樣品的前處理

將紙制包裝材料制成約0.5 cm×0.5 cm 大小，混合均勻。準確稱取5.0 g 樣品于50 mL 具塞比色管中，加入30 mL 三氯甲烷，在功率250 W，40 ℃條件下超聲提取。冷卻至室溫后用三氯甲烷定容，搖勻。移取1.0 mL 樣品溶液于另一支10 mL 比色管中，于渦漩振蕩器上邊渦漩邊緩慢滴加甲醇，并用甲醇定容，搖勻，靜置。取上清液過0.22 μm 有機濾膜，待測。

1.4 色譜條件

色譜柱為 Phenomenex Gemini C18色譜柱(4.6 mm×250 mm，5 μm);柱 溫20 ℃;進 樣 量10 μL;流 量1. 0 mL/min;最 大 激 發(fā) 波 長λex=360 nm，最大發(fā)射波長λem=430 nm;流動相A(乙腈)，流動相B(水)，采用梯度洗脫，具體設置見表1。

表1 洗脫梯度程序Table 1 The HPLC gradient elution condition

2 結果與討論

2.1 流動相的選擇

考慮到標準物質的極性與FWA85、FWA351 具有陽離子，應選用極性相當的液體作為流動相，并嘗試在流動相中配備離子對試劑［14］。在上述色譜條件下，用不同比例甲醇-水、甲醇-3 mmol/L 四丁基溴化銨、乙腈-水3 種組合流動相作梯度洗脫。結果表明，用甲醇-水和甲醇-3 mmol/L 四丁基溴化銨作流動相時，有部分目標物不出峰，且出峰的目標物出現拖尾現象，用乙腈-水作流動相時，峰型有改善，保留時間相對適中。

2.2 浸泡液的選擇

甲醇、乙腈、三氯甲烷對FWAs 的溶解性，見圖1。

圖1 浸泡液對回收率的影響Fig.1 The effects of extraction solution on the average recovery

由圖1 可知，三氯甲烷對11 種FWAs 的溶解性最好，因此選取三氯甲烷作為提取溶劑。甲醇和乙腈對于部分FWAs 溶解度較低，但用甲醇作為定容液具有較好的沉淀凈化效果。

2.3 柱溫對分析效果的影響

實驗比較了柱溫在20，25，30 ℃時，11 種熒光增白劑的分離效果、柱效、峰形對稱性和儀器的穩(wěn)定性。結果表明，在25，30 ℃時，標準品分離效果較差，柱效也較低;20 ℃時，柱效較高，標準品峰型對稱性好，能達到最好的分離度，且儀器仍能保持穩(wěn)定狀態(tài)［15］，見圖2。

圖2 11 種熒光增白劑分離效果圖Fig.2 The HPLC chromatogram of the 11 FWA1.FWA85，2.FWA 351，3.FWA 52，4.FWA 135，5.FWA 199，6.FWA 185，7.FWA 367，8.FWA 393，9.FWA 378，10.FWA 368，11.FWA 184

2.4 線性關系、檢出限和定量限

配制標準工作曲線混合標準溶液，按本實驗儀器條件測定，以目標組分的峰面積y 對相應的質量濃度x(μg/L)進行線性回歸，結果見表2。

由表2 可知，在0.05 ～200 μg/L 濃度范圍內，相關系數在0.999 2 ～0.999 8 之間，表明被分析物濃度和相應的峰面積呈良好的線性關系。檢出限和定量限分別以目標化合物所產生的色譜峰與色譜背景噪音的比值的3 倍(S/N=3)和10 倍(S/N=10)計算。11 種目標物的方法檢測限為1.0 ～8.0 μg/kg;定量限為4.0 ～24.0 μg/kg，表明方法具有較高的靈敏度。

表2 11 種FWA 標準曲線的線性方程、相關系數、方法檢出限和方法定量限Table 2 The linear equation，correlation coefficient，limit of detection and limit of quantification

2.5 方法的回收率和精密度

方法回收率和精密度通過陰性樣品的添加回收試驗(n=6)進行日內考察，即分別在陰性試樣中添加低(2 倍檢出限)、中(5 倍檢出限)、高(10 倍檢出限)3 個濃度水平［16］，方法回收率和相對標準偏差(RSD)見表3。

續(xù)表3

表3 樣品添加回收和精密度實驗Table 3 The recovery and precision experiment

由表3 可知，回收率在88.2% ～96.6%，相對標準偏差在2.02% ～4.71%，說明方法的準確度和精密度達到分析要求。

3 結論

本實驗所建立的方法具有操作簡單，檢測成本低的優(yōu)點，且靈敏度高、分離效果好、定量準確。11種熒光增白劑的回收率在88.2% ～96.6%，相對標準偏差在2. 02% ～4. 71%，方法定量限為4. 0 ～24.0 μg/kg。說明方法的準確度和精密度達到分析要求，是測定紙制包裝材料中上述熒光增白劑的有效方法，適用于檢測機構的日常檢驗，對行業(yè)的監(jiān)管能起到積極的防范作用。

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