陳利標(biāo)++馮崗++王順清++姚監(jiān)

摘 要 室內(nèi)測定了非洲楝提取物對(duì)斜紋夜蛾幼蟲的殺蟲活性。結(jié)果顯示，非洲楝提取物對(duì)斜紋夜蛾幼蟲具有很強(qiáng)的毒殺作用，10和14 d的LC50值分別為0.466和0.173 mg/mL；此外，非洲楝提取物對(duì)斜紋夜蛾幼蟲還表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制生長發(fā)育作用，與對(duì)照相比，幼蟲齡期和蛹期延長，蛹重減小，化蛹率和成蟲羽化率顯著降低。非洲楝具有防治斜紋夜蛾的潛力。

關(guān)鍵字 非洲 ；楝提取物 ；斜紋夜蛾 ；殺蟲活性

分類號(hào) S481+.1

非洲楝（Khaya senegalensis）屬楝科非洲楝屬植物，該植物原產(chǎn)非洲熱帶地區(qū)，在我國廣東、海南等地引種栽培。該植物具有較好的殺蟲作用，對(duì)其殺蟲活性進(jìn)行系統(tǒng)研究有望發(fā)現(xiàn)新的農(nóng)藥品種。該植物樹皮味苦，可防治感冒[1]，并具有驅(qū)蟲、催吐、通經(jīng)和抗菌等多種功效[2]。Samir等[3]研究發(fā)現(xiàn)，非洲楝中檸檬苦素類化合物對(duì)番茄灰霉病菌具有很強(qiáng)的抑制作用。Ademola等[4]報(bào)道，非洲楝提取物在離體和活體條件下對(duì)綿羊腸胃線蟲具有很強(qiáng)的殺線蟲活性，可作為獸用驅(qū)蟲藥使用。國內(nèi)外對(duì)該植物的研究主要集中在其化學(xué)成分、抗菌和獸用驅(qū)蟲[5-7]上。Samir[5]和Munehiro等[8]報(bào)道，非洲楝活性物質(zhì)khayanolides A對(duì)Spodoptera littoralis幼蟲具有一定的拒食作用，但有關(guān)非洲楝提取物對(duì)斜紋夜蛾幼蟲的殺蟲活性未見報(bào)道。為了進(jìn)一步系統(tǒng)研究非洲楝對(duì)斜紋夜蛾的殺蟲作用，本研究在室內(nèi)測定了非洲楝提取物對(duì)斜紋夜蛾幼蟲的拒食、毒殺和抑制生長發(fā)育活性，旨在為利用非洲楝植物資源開發(fā)新型植物源農(nóng)藥提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

非洲楝采自中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院南藥植物園，經(jīng)中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院品資所王祝年研究員鑒定后確認(rèn)。將其葉自然陰干后粉碎過40目篩，稱重后將10倍的乙醇浸泡7 d后過濾，反復(fù)提取3次，合并3次濾液后用旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)儀減壓濃縮至重量不再變化為止，稱重后用70%乙醇配制成不同濃度，存于4℃冰箱備用。

斜紋夜蛾卵采集海南?？诿捞m區(qū)桂林洋福云村未施藥的蓮藕葉上，經(jīng)室內(nèi)飼養(yǎng)多代，試驗(yàn)選取大小一致，健康活潑的初孵幼蟲供試。

1.2 方法

1.2.1 非洲楝提取物對(duì)斜紋夜蛾幼蟲的毒殺作用

毒殺作用參照吳文君的方法[9]，整個(gè)生測過程在12孔培養(yǎng)板中進(jìn)行。配制斜紋夜蛾半人工飼料，趁熱在每孔加入1 mL。待飼料凝固后，每孔加待測樣品20 μL，每個(gè)樣品加入10孔，重復(fù)3次。待溶劑揮發(fā)后，每孔接入1頭孵化后2 h的斜紋夜蛾初孵幼蟲，放入溫度為（25±1）℃、濕度80%的養(yǎng)蟲室內(nèi)飼養(yǎng)，以70%乙醇處理為對(duì)照。分別于接蟲后7、10和14 d檢查死亡率，計(jì)算死亡率和校正死亡率。并通過機(jī)率值分析法計(jì)算LC50值。

校正死亡率=[（處理死亡率-對(duì)照死亡率）/（100-對(duì)照死亡率）]×100%

1.2.2 非洲楝提取物對(duì)斜紋夜蛾幼蟲的抑制生長發(fā)育作用

同1.2.1的方法，將斜紋夜蛾幼蟲用混有非洲楝提取物的斜紋夜蛾半人工飼料飼喂7 d后，換喂正常飼料，直至成蟲羽化。記錄各處理幼蟲的幼蟲期和活蟲數(shù)，觀察幼蟲化蛹和成蟲羽化情況，記錄蛹期，并稱量蛹重，統(tǒng)計(jì)化蛹率和成蟲羽化率。

1.2.3 數(shù)據(jù)分析

上述結(jié)果采用SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，將校正死亡率轉(zhuǎn)化為幾率值，濃度轉(zhuǎn)換為對(duì)數(shù)后，采用機(jī)率值分析法對(duì)其進(jìn)行擬合。采用單因素方差分析DMRT法多重比較，P<0.05為具有差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 毒殺作用

結(jié)果顯示，非洲楝提取物對(duì)斜紋夜蛾幼蟲作用緩慢。在處理后第7天，除最高濃度10 mg/mL的死亡率在50%以上，其它濃度處理的死亡率均低于50%；隨著處理時(shí)間的延長，試蟲的死亡率呈上升趨勢(shì)，在最大供試濃度為10和5 mg/mL時(shí)，其對(duì)斜紡夜蛾幼蟲的死亡率分別為75%和51.85%；到處理后14 d，10 mg/mL處理組的死亡率高達(dá)90.56%，較高濃度處理組5和1 mg/mL死亡率也均在50%以上。對(duì)照藥劑川楝素對(duì)斜紡夜蛾幼蟲也具有較強(qiáng)的毒殺作用，其處理后7、10和14 d的死亡率分別為55.19%、72.59%和79.63%。采用機(jī)值分析法分別對(duì)其10和14 d的死亡率進(jìn)行擬合，得其LC50值分別為0.466和0.173 mg/mL。見表1。

2.2 抑制生長發(fā)育作用

2.2.1 對(duì)幼蟲生長期的影響

非洲楝提取物對(duì)斜紋夜蛾幼蟲生長期具有明顯的影響，可延長幼蟲生長期。對(duì)照試蟲約需21 d即可正?；迹幚斫M的幼蟲期均高于對(duì)照，在供試濃度為10和5 mg/mL處理組，幼蟲分別需要26和24 d才可進(jìn)入蛹期，比對(duì)照分別推遲了4.7和3.43 d；高濃度處理組（10 mg/mL）的幼蟲不能正?；肌Ｒ姳?。

2.2.2 對(duì)幼蟲化蛹、蛹重和羽化的影響

結(jié)果表明，在供試濃度分別為5、1、0.5和1 mg/mL時(shí)，斜紋夜蛾幼蟲的化蛹率和羽化率分別為24.44%、36.67%、56.40、65.19%和13.70%、26.67%、56.40%、65.19%；對(duì)照藥劑川楝素處理組存活幼蟲雖然可正?；迹谟计谌克劳?；對(duì)照試蟲蛹體飽滿，而處理組蛹體相對(duì)較小，在5和1 mg/mL處理下，蛹重分別為311.48和392.45 mg，分別為對(duì)照蛹重的56.91%和71.70%。見表3。

3 討論

一般認(rèn)為，植物源活性物質(zhì)對(duì)害蟲具有多種作用方式，如川楝素對(duì)害蟲具有拒食、胃毒、抑制生長發(fā)育等作用方式[10]。細(xì)辛醚對(duì)害蟲具有觸殺、熏蒸、忌避和種群抑制作用[11]。雷公藤總生物堿對(duì)粘蟲幼蟲具有拒食、毒殺和抑制生長發(fā)育作用[12]。本研究表明，非洲楝乙醇提取物對(duì)斜紋夜蛾幼蟲表現(xiàn)出明顯的毒殺和抑制生長發(fā)育作用，并且在處理后期，延長幼蟲生長期，化蛹和成蟲羽化也具有顯著的影響，蛹重明顯低于對(duì)照。這充分說明非洲楝提取物對(duì)害蟲的作用方式是多樣的。

斜紋夜蛾（Spodoptera litura）屬鱗翅目夜蛾科害蟲，是一種暴食性害蟲，在世界范圍內(nèi)大面積發(fā)生。在我國各地常間歇性大暴發(fā)。該蟲具有較強(qiáng)的隱蔽性，在夏秋高溫干旱季節(jié)具多發(fā)性、雜食性和偏嗜性等特點(diǎn)?？晌：闹髦参锒噙_(dá)99科290多種，其中喜食植物種類在90種以上[13]。目前有關(guān)斜紋夜蛾的防治主要以化學(xué)農(nóng)藥為主，但由于長期大量不合理使用化學(xué)殺蟲劑，使斜紋夜蛾對(duì)各種殺蟲劑產(chǎn)生極為嚴(yán)重的抗藥性[14]，致使田間用藥量不斷加大，一方面增加了藥劑在農(nóng)作物中的殘留，影響人體健康；另一方面，對(duì)害蟲天敵造成極大的毒害，同時(shí)，由于大量的農(nóng)藥施于田間，對(duì)環(huán)境污染嚴(yán)重[15]。因此，尋求有效且能減少環(huán)境污染的防治方法迫在眉睫。非洲楝為楝科非洲楝屬植物，其枝葉經(jīng)過煎煮可用作退燒藥和抗瘧疾藥，并具有抗菌、殺線蟲和等多種功效。本研究從開發(fā)植物源農(nóng)藥的角度，系統(tǒng)研究了非洲楝提取物對(duì)斜紋夜蛾幼蟲的殺蟲活性。結(jié)果表明，非洲楝提取物對(duì)斜紋夜蛾幼蟲具有多種作用方式，不但可直接毒殺幼蟲，并可在低濃度處理下表現(xiàn)出顯著的抑制生長發(fā)育作用，可顯著降低害蟲田間蟲口密度，對(duì)其下一代的種群生長造成極大影響，進(jìn)而對(duì)害蟲種群增長的控制具有重要意義。因此，非洲楝的殺蟲作用值得進(jìn)一步深入研究。

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