華潔 吳燕平 徐欣 李媛媛

（浙江中醫(yī)藥大學·杭州 310000）

慢性盆腔炎（ChronicPelvicInflammatory，CPID）是女性內(nèi)生殖器、周圍結(jié)蹄組織及盆腔腹膜所發(fā)生的慢性炎癥，是婦科常見病，常反復發(fā)作，遷延難愈，是異位妊娠和不孕癥的常見病因。近年來，隨人工流產(chǎn)、宮腔內(nèi)操作次數(shù)增多及性傳播疾病的泛濫，CPID呈上升趨勢，約占婦科疾病的14.7%[1]西醫(yī)非手術(shù)治療多使用抗生素，但臨床效果不甚理想，更因致病菌耐藥性的產(chǎn)生愈發(fā)容易反復感染。二藤湯為全國名老中醫(yī)裘笑梅醫(yī)師所創(chuàng)，以清熱解毒、祛瘀化濕為主效，經(jīng)后代醫(yī)師長期實踐逐步化裁形成本實驗用方加減二藤湯，在臨床觀察中效果顯著[2]。本研究從組織形態(tài)學及血液流變學的角度分析探討加減二藤湯治療慢性盆腔炎的治療作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

SPF級雌性SD大鼠60只，鼠齡8～10周，重量180～220g，由浙江中醫(yī)藥大學動物研究實驗中心提供，購自上海西普爾-必凱實驗動物有限公司，許可證號:SCXK(滬)2013-0016。在符合清潔標準的實驗室（T18-24℃，濕度50%-70%）分籠飼養(yǎng)，自由飲水進食。飼料均來源于浙江中醫(yī)藥大學動物研究實驗中心。

1.2 試劑與藥品

苯酚膠漿溶液，由液化苯酚5ml，西黃茂膠1g，甘油4ml[3]（由浙江中醫(yī)藥大學藥理學教研室提供）比例組成，濃度根據(jù)預實驗定為25%。加減二藤湯，由忍冬藤、紅藤、敗醬草、蛇舌草、制元胡、川楝子、紫丹參、大青葉、威靈仙、土茯苓、制大黃等11味中藥組成，由浙江省中醫(yī)院提供飲片，濃煎為100ml/劑后4℃保存待用。婦炎消膠囊溶液，由婦炎消膠囊（貴州百祥制藥有限責任公司產(chǎn)品，規(guī)格:0.45g/粒），每10粒加入100ml0.9%NaCl中形成45g/L溶液。10%水合氯醛，由浙江中醫(yī)藥大學藥理學教研室提供。

1.3 主要儀器

全自動血流變測試儀型號：FASCO13020B。

1.4 模型制備

隨機抽取10只大鼠為假手術(shù)對照組（簡稱假手術(shù)組）。將大鼠用10%水合氯醛麻醉后，仰臥固定，于下腹部手術(shù)部位去毛，常規(guī)消毒，沿腹中線于尿道口上方1cm處向上切口約0.8～1.0cm，暴露左側(cè)子宮。于距離卵巢2cm處用5號針頭小心進針，相同力量機械劃傷同側(cè)子宮5次后，向卵巢方向緩慢注人苯酚膠漿溶液0.05ml，手術(shù)完畢，分層關(guān)腹，消毒術(shù)區(qū)[4]。假手術(shù)組切開暴露后直接進行關(guān)腹消毒處理。術(shù)后常規(guī)飼養(yǎng)14d。

1.5 分組給藥

造模第15d將除假手術(shù)組外50只大鼠隨機分為5組，分別為模型對照組（簡稱模型組）、陽性藥物對照組（婦炎消膠囊溶液4ml/d，簡稱為陽性組）、加減二藤湯高、中、低劑量組（分別為2ml/100g、1ml/100g、0.5ml/100g，簡稱高、中、低劑量組），劑量全部根據(jù)根據(jù)“體表面積與劑量換算”[5]理論計算，灌胃時中、低劑量組予適量0.9%NaCl至4ml/只進行。假手術(shù)組及模型組予0.9%NaCl4ml/d，連續(xù)灌胃21d。各組均正常飼養(yǎng)。

1.6 標本采集及觀察測定

每周稱體質(zhì)量1次，末次給藥24h后，將大鼠以10%水合氯醛麻醉處理。

1.6.1 肉眼觀察 肉眼觀察盆腔內(nèi)生殖器變化。盆腔積液或充血，炎性腫脹，分輕、中、重度，計1,2,3分；盆腔內(nèi)有纖維組織粘連，分輕、中、重度，計1.2,3分；輸卵管狹窄、變硬、扭曲，分輕、中、重度，計1.2.3分，未見以上內(nèi)容記0分。[5]

1.6.2 子宮腫脹程度和輸卵管通暢情況檢測 分離大鼠雙側(cè)子宮，除去脂肪組織后用電子天平稱重，計算子宮腫脹程度。

腫脹抑制率（%）=（模型組平均腫脹度—給藥組腫脹度）/模型組平均腫脹度x100%

1.6.3 病理學觀察 將摘取的雙側(cè)子宮及卵巢置于福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，HE染色，制作子宮及卵巢病理切片：按照表1進行評分。[6]

表1 病理積分標準

1.6.4 血液流變學測定 每只大鼠心臟采血3～4ml，送至浙江中醫(yī)藥大學動物研究實驗中心生化實驗室測定。

1.7 統(tǒng)計學處理

2 結(jié)果

2.1 大體觀察

2.1.1 子宮情況 結(jié)果表明（表2），模型組與假手術(shù)組比較，子宮重量明顯增加；陽性組與各藥物組子宮重量均小于模型組，且有抑制子宮腫脹的趨勢，差異有統(tǒng)計學意義。同時，腫脹程度隨藥物劑量升高而降低，且高劑量組在抑制子宮腫脹方面略優(yōu)于陽性組。

表2 子宮情況

2.1.2 盆腔情況 結(jié)果表明（表3），與假手術(shù)組相比，其余各組的盆腔均受到不同程度的影響，模型組尤甚，肉眼可觀察到腹腔內(nèi)有一定量渾濁液體，子宮表面充血膨大，“Y”型兩支明顯增粗，內(nèi)似有透明液體，部分分支與盆腔壁、腸管粘連，輸卵管處有腫大包塊；陽性組與各藥物組間無明顯差異，輸卵管及子宮表現(xiàn)隨藥物濃度增加而減輕。

表3 肉眼觀察加減二藤湯對盆腔的影響

2.2 病理組織觀察

結(jié)果表明（表4），假手術(shù)組與陽性組、模型組有顯著差異，陽性組與各藥物組無明顯差異。模型組在光鏡下顯示上皮細胞部分脫落壞死，內(nèi)膜充血水腫明顯，慢性炎細胞數(shù)量多甚充斥全層。假手術(shù)組只有少量炎細胞散在存在。

表4 加減二藤湯對病理組織的影響

2.3 血液流變學影響

結(jié)果顯示（表5），模型組較假手術(shù)組各項指標均有顯著升高，說明模型大鼠呈現(xiàn)出“粘、聚”的狀態(tài)，而陽性組與各藥物組和模型組相比有不同程度的減輕凝血狀態(tài)；在改善全血黏度、血漿黏度方面，陽性組略優(yōu)于藥物組。

表5 血液流變學

3 討論

慢性盆腔炎包括慢性子宮內(nèi)膜炎、慢性輸卵管炎、慢性盆腔結(jié)締組織炎等，其中子宮內(nèi)膜炎可以上行感染，引起盆腔其他臟器的炎癥。大鼠子宮在盆腔生殖器官中占有較大比例，所以一般認為大鼠子宮內(nèi)膜炎基本可以反映盆腔的炎性癥狀。[7]

在西醫(yī)理論中，慢性盆腔炎因急性盆腔炎治療不及時、不徹底、患者體質(zhì)虛弱，病情遷延而成，有時也并無急性盆腔炎史。裘老認為西醫(yī)的“盆腔炎”、“附件炎”、“子宮內(nèi)膜炎”等疾病，中醫(yī)辨證大多屬濕熱下注、氣血郁結(jié)，其病因病機為濕邪侵襲，郁而化熱，聚于子宮胞絡，瘀血內(nèi)生，或因濕熱余邪未盡，正氣未復，氣血阻滯，濕熱瘀內(nèi)結(jié)，二者皆可致沖任帶脈功能失調(diào)。治療上因以清熱利濕、活血化瘀為主。方中忍冬藤、紅藤為君藥，取其清熱化濕通絡之功；蛇舌草利濕、敗醬草活血、大青葉涼血，三者皆有清熱解毒之能，為臣藥；威靈仙、土茯苓除濕通絡止痛，大黃泄血中之熱而導穢濁出，紫丹參佐敗醬草、大青葉活血涼血以控制熱毒蔓延擴散[8]，制元胡、川楝子行氣活血止痛，為佐藥；甘草為使，清熱解毒，調(diào)和諸藥。合之而成清熱祛濕，涼血化瘀止痛之劑。

結(jié)合裘老的理論和本實驗結(jié)果，分析如下：一方面，濕熱是本病的主要病因，在臨床研究中多與慢性炎癥相關(guān)聯(lián)[9]，實驗發(fā)現(xiàn)各藥物組較模型組子宮形態(tài)學改變少，更接近于假手術(shù)組，故加減二藤湯具有減輕炎癥反應的作用。另一方面，血瘀為本病的主要病機，而血瘀證與西醫(yī)的血液流變學存在一定關(guān)系[10]，大量臨床試驗研究也證實CPID患者大都存在著不同程度的血液流變學的異常，即血液都處于濃、豁、凝、聚狀態(tài)[11]。本實驗中各藥物組的血液流變學指標明顯較模型組低，表明加減二藤湯可以改善慢性盆腔炎大鼠的高凝狀態(tài)。綜上所述，加減二藤湯對慢性盆腔炎大鼠有較好治療作用。

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