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無創(chuàng)產前檢測在產前篩查染色體高風險后續(xù)診斷中的應用

馮明杰, 褚光萍, 查建梅

(江蘇省張家港市婦幼保健所 群體保健科, 江蘇 張家港, 215600)

關鍵詞:產前篩查; 高風險; 無創(chuàng)產前檢測; 侵入性產前診斷

中國是新生兒出生缺陷的高發(fā)國家之一，每年出生人口中先天畸形達80～120萬人[1]。其中唐氏綜合征(DS)和愛德華氏綜合征(ES)是最常見的胎兒染色體病及出生缺陷，目前尚無有效的治療方法[2]。產前篩查與產前診斷是減少出生缺陷的有效預防措施[3-4]。目前臨床上廣泛開展的產前篩查，是通過對母體血清學標志物的檢測來篩選可能患有DS、ES的高風險孕婦，然后對其進行產前診斷，包括絨毛活檢、羊水穿刺、臍靜脈血穿刺。這三種技術為侵入性產前診斷(IPD)，有時可引起流產和感染等并發(fā)癥。近年來，隨著母體外周血中胎兒游離DNA的發(fā)現(xiàn)[5]，無創(chuàng)產前檢測(NIPT)胎兒非整倍體技術得到了迅速的發(fā)展和廣泛的臨床應用，為廣大孕婦的產前篩查與診斷模式提供了新的選擇。本文對2012年1月—2014年12月在本所進行孕中期產前篩查孕婦的隨訪，對1 371例產前篩查染色體高風險孕婦的后續(xù)診斷進行回顧性分析。

1資料與方法

1.1　一般資料

2012年1月—2014年12月在本所接受產前篩查的孕15～20+6周、預產年齡17～35歲的孕婦32 459例，篩查出染色體高風險1 371例，包括DS高風險1 301例、ES高風險70例。

1.2　方法

1.2.1產前篩查：抽取孕婦空腹靜脈血2～3 mL，采用時間分辨法檢測血清中AFP、free-β-HCG濃度，應用PE公司1420型半自動時間分辨儀，使用其配套試劑盒，結合孕婦年齡、孕周、體質量、吸煙史、糖尿病史、異常妊娠史等臨床資料，應用PE公司2T分析軟件評估胎兒患DS、ES和NTD的風險值。

1.2.2NIPT：采集孕12～24周孕婦外周血5 mL，提取其中游離DNA，采用第二代高通量測序技術進行覆蓋度測序[6]，最后通過生物信息分析，得出胎兒患染色體非整倍體疾病的風險率[7]。若該方法檢測為高風險，仍需進行PID。

1.2.3IPD：孕15～24周者在B超引導下行羊膜腔穿刺術抽取羊水20～30 mL，>24 周者在B超引導下抽取臍血0.5～1 mL, 進行細胞染色體核型分析。

1.3　產前篩查高風險評估標準及后續(xù)診斷

DS高風險的截斷值為1/270，ES高風險的截斷值為1/350，NTD高風險的截斷值為1/300，大于等于以上截斷值的都定為高風險。對篩查出的高風險孕婦，通過電話召回，由本所產科門診醫(yī)生專人對其進行優(yōu)生咨詢，指導高風險孕婦進行后續(xù)診斷。經知情同意，DS高風險及ES高風險孕婦可直接選擇IPD，包括羊水穿刺、臍靜脈血穿刺對羊水細胞或胎兒血細胞培養(yǎng)后進行染色體核型分析以明確診斷，也可先行NIPT，結果為高風險再行IPD。以上明確診斷者建議終止妊娠。

1.4　隨訪

由本所群體保健科專人負責對所有產前篩查對象的妊娠結局進行隨訪，充分利用三級婦幼保健網及婦幼信息管理系統(tǒng)收集相關信息，并重點對高風險孕婦的后續(xù)診斷情況及妊娠結局進行電話追蹤隨訪，隨訪結果定期收集匯總。

2結果

1 371例染色體高風險(包括DS高風險1 301例，ES高風險70例)孕婦中，選擇NIPT415例，選擇IPD335例。415例NIPT中，有3例提示三體高風險：1例提示DS，后經羊水染色體核型分析確診DS；另1例提示DS，行B超引導下羊水穿刺時發(fā)現(xiàn)為死胎，后予引產，胎兒外觀吻合DS表型；1例提示ES，后經羊水染色體核型分析確診ES。335例直接行IPD孕婦中，檢出DS3例、ES1例。以上共確診5例DS、2例ES，均得以及時終止妊娠。412例NIPT低風險孕婦均已分娩，通過對已出生新生兒的隨訪，未發(fā)現(xiàn)有DS或ES患兒。

3討論

本研究結果顯示，1371例染色體高風險(包括DS高風險1301例，ES高風險70例)孕婦中，有415例選擇了NIPT，占30.27%；335例選擇了IPD，占24.43%。相比傳統(tǒng)的IPD，更多的孕婦選擇NIPT，其原因可能是：羊水和臍血染色體核型分析雖然是相對安全可靠的產前診斷方法[8]，但仍然是有創(chuàng)傷性技術，可能會引起流產、感染、死胎等并發(fā)癥，這使得孕婦及家屬在選擇時有所顧慮。而NIPT只需抽取孕婦靜脈血，通過擴增孕婦血中游離胎兒DNA片段，采用高通量測序技術對其進行測序和計數(shù)，通過生物信息技術的處理，來判斷胎兒是否存在染色體異常。與IPD相比，NIPT具有無創(chuàng)，快速的特點，可有效減少對孕婦身體的創(chuàng)傷和心理精神負擔。Lau等[9]研究顯示，NIPT進行唐氏檢查能夠使95%的孕婦焦慮情緒得到緩解。

研究[10-12]已證實孕婦血中游離DNA高通量測序用于胎兒常見染色體非整倍體的無創(chuàng)性產前檢測具有較高的檢測敏感性和特異性。目前，國內專家[13]將其定位于“近似于產前診斷水平的”目標疾病指向精確的產前篩查技術。本文中接受NIPT的415例孕婦中，提示高風險3例，2例經羊水染色體核型確認，結果一致；1例提示DS，行羊水穿刺時B超發(fā)現(xiàn)死胎，予引產，胎兒外觀吻合DS表型；412例低風險者經隨訪未發(fā)現(xiàn)有DS或ES患兒出生。

NIPT除了在本文中應用于產前篩查高風險的后續(xù)診斷，還可將其臨床應用延伸到產前篩查臨界風險值及單項值異常孕婦中。由于目前臨床上普遍采用的產前篩查存在較高的假陽性率和漏檢率，孕中期二聯(lián)血清學篩查在5%的假陽性率前提下，只有60%～65%的檢出率 ，所以對臨界風險值及單項值異常的處理得到越來越多的關注。既往這些孕婦在權衡時往往考慮技術風險和并發(fā)癥的發(fā)生而對IPD接受度很低，自從開展NIPT后，臨界風險、單項值異常者選擇NIPT人數(shù)明顯增多，有效地提高了產前篩查與診斷的效率，降低出生缺陷發(fā)生。

NIPT除了上述在產前篩查高風險、臨界風險及單項值異常孕婦中的應用，還有很多的適宜對象。隨著社會經濟的發(fā)展，城市中高齡產婦比例逐年上升，近2年國家二胎政策的放開，也一定程度上增加了高齡婦的比例，這些都將增加對產前診斷的需求。而傳統(tǒng)的IPD技術存在診斷通量低下、專業(yè)人員缺乏、人員培訓和實驗室建設周期長、報告時限過長等諸多問題，NIPD的臨床應用，必將有效地緩解這一現(xiàn)狀。NIPT的適宜孕周為孕12～24周，對于一些有高危因素的孕婦(孕期接受過致畸因素或生育過DS患兒)在孕早期采用NIPT能實現(xiàn)早期診斷，而對于錯過產前篩查孕周的孕婦，NIPT也不失為一種理想的選擇。

參考文獻

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收稿日期:2015-05-10

中圖分類號:R 714.53

文獻標志碼:A

文章編號:1672-2353(2015)24-107-02

DOI:10.7619/jcmp.201524040