曹藏柱，殷尚炯，王志明，程月飛，杜秀玉，霍明霞

(1.中國人民解放軍251醫(yī)院神經(jīng)外科，河北 張家口 075000；2.中國人民解放軍251醫(yī)院麻醉科，河北 張家口 075000)

iNOS在大腦前交通囊性動脈瘤中的表達(dá)及意義

曹藏柱1，殷尚炯1，王志明1，程月飛1，杜秀玉1，霍明霞2

(1.中國人民解放軍251醫(yī)院神經(jīng)外科，河北 張家口 075000；2.中國人民解放軍251醫(yī)院麻醉科，河北 張家口 075000)

一氧化氮；誘導(dǎo)性一氧化氮合酶；大腦前交通囊性動脈瘤

顱內(nèi)動脈瘤是顱內(nèi)正常血管發(fā)生一系列病理生理改變后引起血管壁的瘤樣凸起，其中以囊性動脈瘤常見，梭形動脈瘤、水泡樣動脈瘤等少見。大腦前動脈瘤起源于前交通動脈區(qū)域，在顱內(nèi)動脈瘤中發(fā)病率較高，僅次于后交通動脈瘤。因顱內(nèi)動脈瘤的并發(fā)癥—蛛網(wǎng)膜下腔出血后果嚴(yán)重，國內(nèi)外學(xué)者對顱內(nèi)動脈瘤的基礎(chǔ)及臨床研究一直未停止過，單純對于前交通動脈瘤的研究相對較少。顱內(nèi)囊性動脈瘤發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚，曾有報道動脈瘤的發(fā)生與局部一氧化氮(NO)濃度增高有關(guān)，而NO在體內(nèi)的合成離不開一氧化氮合酶(NOS)的催化作用，所以顱內(nèi)囊性動脈瘤的發(fā)生可能與動脈局部NOS濃度過高、過度表達(dá)有關(guān)。我們對開顱術(shù)中留取的大腦前交通動脈瘤標(biāo)本與手術(shù)同步取得的正常顳淺動脈進(jìn)行了相關(guān)研究，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2013-01—2015-01月中國人民解放軍251醫(yī)院開顱術(shù)中留取的大腦前交通囊性動脈瘤瘤壁標(biāo)本，取材于12例經(jīng)翼點(diǎn)入路開顱手術(shù)中切除的部分動脈瘤，患者年齡33～71歲，平均47.6歲；女性7例，男性5例；動脈瘤直徑0.6～3.8 cm，平均1.7 cm，2.5 cm以下10例，2.5 cm以上2例；動脈瘤頸寬0.2～1.1 cm，平均0.4 cm。正常動脈標(biāo)本來源于翼點(diǎn)入路手術(shù)側(cè)顳淺動脈，共12例。上述標(biāo)本手術(shù)取材后，立即放入含0.1%DEPC的4%多聚甲醛溶液內(nèi)固定45 min，石蠟包埋。

1.2 方法

標(biāo)本行連續(xù)4 μm切片，分別給予HE染色、iNOS免疫組化染色。染色后光鏡下觀察組織學(xué)變化。iNOS免疫組化試劑盒購于武漢博士德生物制品公司。

2 結(jié) 果

光鏡下觀察：大腦前交通動脈瘤組織中彈性膜全部、內(nèi)皮層及內(nèi)彈性膜全部消失，瘤壁中膜缺失，彈力纖維斷裂。大的動脈瘤壁一般由厚度不均的結(jié)締組織構(gòu)成，而小的動脈瘤囊壁薄而透明，僅由無細(xì)胞的玻璃樣纖維組織組成。外膜和中膜管壁內(nèi)可見大量炎性細(xì)胞浸潤，其中主要為淋巴細(xì)胞，也有少量中性粒細(xì)胞和單核巨嗜細(xì)胞。瘤腔內(nèi)部形成不同程度的血栓，并有大量炎性細(xì)胞浸潤。

免疫組化染色：正常腦動脈組織內(nèi)均未發(fā)現(xiàn)iNOS陽性表達(dá)。大腦前交通動脈瘤囊壁外膜、中膜均有iNOS陽性表達(dá)，外膜尤其明顯。主要表達(dá)部位位于炎性浸潤區(qū)炎性細(xì)胞(如單核巨嗜細(xì)胞及淋巴細(xì)胞)胞漿內(nèi)。

3 討 論

1980年Robert等[1]美國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)NO是一種脂溶性、高反應(yīng)性的氣體分子，由一個氮原子和一個氧原子構(gòu)成，曾被Furchgott[2]命名為內(nèi)源型舒張因子，NO在體內(nèi)主要代謝產(chǎn)物是亞硝酸鹽(NO2-)和硝酸鹽(NO3-)。具有導(dǎo)致部分血管舒張，調(diào)節(jié)血壓、血流；調(diào)節(jié)血小板功能；抗血管平滑肌增生、抗脂蛋白氧化；在神經(jīng)系統(tǒng)中還可以作為神經(jīng)遞質(zhì)、神經(jīng)調(diào)質(zhì)進(jìn)一步完成相關(guān)信息傳遞的功能。更為重要的是，內(nèi)源性NO可以觸發(fā)血管活性物質(zhì)釋放，促進(jìn)血管生長及再生。Jason[3]等對大鼠造腹主動脈瘤模型研究后進(jìn)一步得出結(jié)論，腹主動脈瘤的擴(kuò)張程度，與血漿內(nèi)NO2-/NO3-成正相關(guān)。

生理狀態(tài)下NO主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，在NOS催化下，由左旋精氨酸和氧氣生成NO和瓜氨酸。目前發(fā)現(xiàn)人體內(nèi)NOS有3種，分別是：內(nèi)皮型NOS(eNOS)，分布于血管內(nèi)皮細(xì)胞；神經(jīng)型NOS(nNOS)，分布于神經(jīng)元細(xì)胞；誘導(dǎo)型NOS(iNOS)，分布于免疫細(xì)胞中。目前認(rèn)為，前兩種是“生理狀態(tài)”下表達(dá)的酶，iNOS為“病理狀態(tài)”下表達(dá)的酶，多在細(xì)胞受到刺激、損傷時方可表達(dá)。

殷尚炯[4-5]對50只SD大鼠進(jìn)行研究，A組造腦動脈瘤模型并給予氨基胍(選擇性iNOS抑制劑)適當(dāng)劑量每日腹腔內(nèi)注射，B組同樣造腦動脈瘤模型并給予生理鹽水適當(dāng)劑量每日腹腔內(nèi)注射，C組正常喂養(yǎng)，不做任何處理。結(jié)果表明，氨基胍可明顯抑制動脈瘤發(fā)生，并抑制血清硝酸鹽水平。

本研究中iNOS在正常腦血管組織中(本研究為顳淺動脈)未見表達(dá)，在大腦前交通囊性動脈瘤中有表達(dá)，與相關(guān)結(jié)論一致，考慮大腦前囊性動脈瘤的發(fā)生可能與iNOS有關(guān)。Yasuhisa[6]等通過小鼠動脈瘤模型發(fā)現(xiàn)，去除巨噬細(xì)胞后，小鼠動脈瘤發(fā)生率大大降低，與本研究中iNOS主要表達(dá)于動脈瘤囊壁中、外膜炎性浸潤區(qū)結(jié)果一致。因此我們認(rèn)為，大腦前交通囊性動脈瘤可能因各種誘發(fā)因素導(dǎo)致血管壁炎性損傷，引起iNOS在血管壁炎性反應(yīng)區(qū)表達(dá)，產(chǎn)生大量NO，NO參與大腦前囊性動脈瘤病理生理過程。

[1]王進(jìn),杜波,單愛軍.內(nèi)皮型一氧化氮合酶基因多態(tài)性對一氧化氮水平的影響[J].醫(yī)學(xué)綜述，2014，20(4)：580-583.

[2]Furchgoot R F,Zawadzki J V.The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acethylcholine[J].Nature,1980,288(5789):373-376.

[3]Jason M,Johanning M D,David P,et al.Inhibition of inducible nitric oxide synthsae limits nitric oxide production and experimental aneurysm expansion[J].J Vasc Surg,2001,33:579-586.

[4]殷尚炯,許百男,孫正輝.一氧化氮在實(shí)驗(yàn)性大鼠頸動脈瘤形成中的作用[J].解放軍醫(yī)學(xué)雜志,2005,30(9)：813-815.

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[責(zé)任編輯：李薊龍]

曹藏柱(1978-)，男，河北泊頭人，主治醫(yī)師，研究方向：重型顱腦損傷救治。

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10.3969/j.issn.1673-1492.2015.04.024

來稿日期：2015-06-01