吳健廣 郭思佳 郝正華 劉 偉 劉恩順 封繼宏

(1 天津市東麗區(qū)中醫(yī)醫(yī)院，天津，300300；2 天津中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院，天津，300150；3 天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津，300193)

清喉利咽顆粒聯(lián)合養(yǎng)陰清肺糖漿對氨水及SO2誘導(dǎo)小鼠咳嗽的影響作用

吳健廣1郭思佳2郝正華3劉 偉2劉恩順2封繼宏2

(1 天津市東麗區(qū)中醫(yī)醫(yī)院，天津，300300；2 天津中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院，天津，300150；3 天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津，300193)

目的：觀察清喉利咽顆粒、養(yǎng)陰清肺糖漿及二藥聯(lián)合應(yīng)用對氨水及SO2誘導(dǎo)小鼠咳嗽的止咳作用。方法：分別將健康清潔級雄性昆明小鼠60只隨機等分為對照組、養(yǎng)陰清肺糖漿組、清喉利咽顆粒組、清喉利咽顆粒聯(lián)合養(yǎng)陰清肺糖漿組、孟魯司特鈉組、甘草合劑組。對照組給予生理鹽水灌胃，其余各組給予相應(yīng)藥物治療，1次/d，連續(xù)7 d，末次給藥1 h后將小鼠放入YLS-8A型多功能誘咳引喘儀中，分別采用氨水及SO2刺激小鼠咳嗽，自動記錄小鼠咳嗽潛伏時間及3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)。結(jié)果：與對照組比較，養(yǎng)陰清肺糖漿、清喉利咽顆粒組及二藥聯(lián)合應(yīng)用組能明顯延長氨水和SO2誘導(dǎo)小鼠咳嗽的潛伏時間(P<0.05)，并減少其咳嗽次數(shù)(P<0.05)；與對照組、養(yǎng)陰清肺糖漿組、甘草合劑組和孟魯司特鈉組比較，二藥聯(lián)合應(yīng)用組在延長氨水和SO2誘咳小鼠咳嗽潛伏時間及減少咳嗽次數(shù)方面作用更為顯著(P<0.05)；與清喉利咽顆粒組比較，二藥聯(lián)合應(yīng)用組僅在延長氨水和SO2誘咳小鼠咳嗽潛伏時間方面效果更好(P<0.05)。結(jié)論：清喉利咽顆粒、養(yǎng)陰清肺糖漿均具有良好的止咳作用，二藥聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用，能夠延緩咳嗽的發(fā)生，增強止咳作用。

清喉利咽顆粒；養(yǎng)陰清肺糖漿；咳嗽

表1 清喉利咽顆粒聯(lián)合養(yǎng)陰清肺糖漿對氨水誘導(dǎo)小鼠咳嗽的影響

注：與清喉利咽顆粒聯(lián)合養(yǎng)陰清肺糖漿聯(lián)合組比較，△P<0.05；與對照組進行比較,*P<0.05。

表2 清喉利咽顆粒聯(lián)合養(yǎng)陰清肺糖漿對SO2誘導(dǎo)小鼠咳嗽的影響

注：與清喉利咽顆粒聯(lián)合養(yǎng)陰清肺糖漿聯(lián)合組比較，△P<0.05；與對照組進行比較,*P<0.05。

清喉利咽顆粒是《中華人民共和國藥典》所載的一首成方，具有清熱利咽，寬胸潤喉的作用。主治因外感風(fēng)熱引起的咽干、咽痛、咳嗽、咳痰等癥，適用于急慢性咽炎，扁桃體炎。養(yǎng)陰清肺糖漿是由清·鄭梅澗《重樓玉鑰》所載的養(yǎng)陰清肺湯化裁而來，具有養(yǎng)陰潤肺，清熱利咽的作用。主治陰虛肺燥引起的咽干、咽痛、干咳少痰或無痰。適用于急慢性咽炎，支氣管炎。二方共用具有清利咽喉，潤肺止咳作用。為了探求二藥共用的療效，現(xiàn)進行清喉利咽顆粒聯(lián)合養(yǎng)陰清肺糖漿治療小鼠咳嗽的實驗研究。

1 材料與方法

1.1 實驗藥品和試劑 養(yǎng)陰清肺糖漿(120 mL/瓶，天津中新藥業(yè)集團股份有限公司樂仁堂制藥廠，批號Z12020619)；清喉利咽顆粒(5 g/袋，天津中新藥業(yè)集團股份有限公司樂仁堂制藥廠，批號Z12020452)；孟魯司特鈉咀嚼片(5 mg/片，Merck Sharp&Dohme Ltd.(UK)，批號J012036)；甘草合劑糖漿(100 mL/瓶，馬應(yīng)龍藥業(yè)集團股份有限公司，批號140202)；氨水(27%，天津市化學(xué)試劑三廠)；濃硫酸(北京化工廠)；亞硫酸氫鈉(天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司)

1.2 實驗動物 健康清潔級雄性昆明小鼠120只，購自中國食品藥品檢定研究院，許可證號：SCXK(京)2009-0017，體重(20±2) g，飼養(yǎng)條件：清潔級，室內(nèi)溫度18～22 ℃，相對濕度50%～70%，光照時間固定，每天晝夜各12 h，晝間照明時間為8:00 am—8:00 pm，水、食物自由攝取。購入后適應(yīng)性飼養(yǎng)1周進行實驗。

1.3 儀器 電子天平(順德拓普域電子有限公司)；YLS-8A型多功能誘咳引喘儀(濟南益延科技發(fā)展有限公司)。

2 方法

2.1 分組及給藥 取清潔級雄性昆明小鼠120只，隨機分成6組，每組20只，即對照組(給予等體積的蒸餾水)、養(yǎng)陰清肺糖漿組、清喉利咽顆粒組、清喉利咽顆粒聯(lián)合養(yǎng)陰清肺糖漿組、孟魯司特鈉片組、甘草合劑組。分別按表1劑量[1]溶于0.5 mL蒸餾水中灌胃給藥，1次/d，連續(xù)7 d。

2.2 誘咳方法 末次給藥后1 h后，分別采用氨水和SO2誘導(dǎo)小鼠咳嗽[2-4]，方法如下。各組隨機抽取10只小鼠放入YLS-8A型多功能誘咳引喘儀中，噴入27%氨水3 s，刺激小鼠咳嗽，自動記錄小鼠咳嗽潛伏時間及3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)；各組隨機抽取10只小鼠放入YLS-8A型多功能誘咳引喘儀中，將0.5 g亞硫酸氫鈉放入YLS-8A型多功能誘咳引喘儀的霧化杯中并向其中滴加50%硫酸5 mL，自動記錄小鼠咳嗽潛伏時間及3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)。

3 結(jié)果

3.1 清喉利咽顆粒聯(lián)合養(yǎng)陰清肺糖漿對氨水誘導(dǎo)小鼠咳嗽的結(jié)果 養(yǎng)陰清肺糖漿組、清喉利咽顆粒組及二藥聯(lián)合應(yīng)用組與對照組比較，在咳嗽次數(shù)和咳嗽潛伏時間方面差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；養(yǎng)陰清肺糖漿聯(lián)合清喉利咽顆粒組與對照組、養(yǎng)陰清肺糖漿組、甘草合劑組、孟魯司特鈉組比較，在咳嗽次數(shù)和咳嗽潛伏時間方面差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；養(yǎng)陰清肺糖漿聯(lián)合清喉利咽顆粒組與清喉利咽顆粒組比較，在咳嗽潛伏時間方面差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。說明養(yǎng)陰清肺糖漿、清喉利咽顆粒均能夠減少氨水誘咳小鼠的咳嗽次數(shù)及延長其咳嗽潛伏時間，二藥聯(lián)合應(yīng)用在延長氨水誘咳小鼠的咳嗽潛伏時間方面有協(xié)同作用(見表1)。

3.2 清喉利咽顆粒聯(lián)合養(yǎng)陰清肺糖漿對SO2誘導(dǎo)小鼠咳嗽的結(jié)果 結(jié)果見(表2)，養(yǎng)陰清肺糖漿組、清喉利咽顆粒組及二藥聯(lián)合應(yīng)用組與對照組比較，在咳嗽次數(shù)和咳嗽潛伏時間方面差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；養(yǎng)陰清肺糖漿聯(lián)合清喉利咽顆粒組與對照組、養(yǎng)陰清肺糖漿組、甘草合劑組、孟魯司特鈉組比較，在咳嗽次數(shù)和咳嗽潛伏時間方面差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；養(yǎng)陰清肺糖漿聯(lián)合清喉利咽顆粒組與清喉利咽顆粒組比較，在咳嗽潛伏時間方面差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。說明養(yǎng)陰清肺糖漿、清喉利咽顆粒均能夠減少SO2誘咳小鼠的咳嗽次數(shù)及延長其咳嗽潛伏時間，二藥聯(lián)合應(yīng)用在延長SO2誘咳小鼠的咳嗽潛伏時間方面有協(xié)同作用。

4 討論

咳嗽的分子調(diào)控機制尚不明確，目前還沒有統(tǒng)一的認識，部分學(xué)者認為TERV1受體(瞬時感受器電位香草酸受體1)在咳嗽的發(fā)生起著重要作用[5-7]。TERV1受體存在于呼吸道黏膜感覺神經(jīng)末梢上，H+等異物能夠直接刺激呼吸道黏膜末梢上的TERV1受體，促進IL-6，IL-8，腫瘤壞死因子等炎癥介質(zhì)的釋放，這些炎性介質(zhì)又能進一步激活TERV1受體，釋放SP(P物質(zhì))[8-9]。SP通過神經(jīng)激肽-2受體加強支氣管收縮，從而引起咳嗽[10-11]。氨水和SO2誘導(dǎo)咳嗽也屬于這種機制。清喉利咽顆粒聯(lián)合養(yǎng)陰清肺糖漿能夠延緩咳嗽的發(fā)生，具有良好止咳作用，二藥的止咳機制可能是降低TERV1受體的活性，從而抑制SP的釋放，降低對支氣管平滑肌的刺激，從而達到止咳作用。但二藥通過何種機制來降低TERV1受體的活性有待進一步的研究。

本實驗結(jié)果顯示養(yǎng)陰清肺糖漿、清喉利咽顆粒均能夠減少小鼠的咳嗽次數(shù)及延長其咳嗽潛伏時間，清喉利咽顆粒聯(lián)合養(yǎng)陰清肺糖漿在減少小鼠咳嗽次數(shù)方面優(yōu)于養(yǎng)陰清肺糖漿組，但與清喉利咽顆粒組比較差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義，說明二藥聯(lián)合應(yīng)用在減少小鼠咳嗽次數(shù)方面清喉利咽顆粒發(fā)揮主要作用。二藥聯(lián)合應(yīng)用在延長小鼠咳嗽潛伏時間方面優(yōu)于二藥單獨應(yīng)用，說明二藥在延緩小鼠咳嗽發(fā)生方面有協(xié)同作用。養(yǎng)陰清肺糖漿原方主要由生地黃、麥冬、玄參、川貝母、白芍、牡丹皮、薄荷和甘草等組成，生地黃、麥冬、川貝母、甘草滋陰潤肺止咳，玄參、白芍、牡丹皮清熱涼血，薄荷疏風(fēng)清熱利咽，八藥共奏滋陰清熱，潤肺止咳之功，針對肺陰虧耗引起的內(nèi)傷咳嗽較好；清喉利咽顆粒由黃芩、西青果、桔梗、竹茹、胖大海、橘紅、枳殼、桑葉、香附(醋制)、紫蘇子、紫蘇梗、沉香等組成，黃芩、西青果清熱解毒，竹茹、胖大海、橘紅清熱化痰止咳，枳殼、香附、理氣化痰，桑葉疏風(fēng)清熱利咽，桔梗宣發(fā)肺氣，紫蘇子、紫蘇梗、沉香肅降肺氣，一宣一降，肺氣調(diào)暢，喘咳自平。十二藥共奏清熱利咽，理氣止咳之功，針對外感熱病咳嗽效果較好。《景岳全書·咳嗽》云：“咳嗽之要，止惟二證。何為二證，一曰外感，一曰內(nèi)傷而盡之矣”。氨水和SO2誘導(dǎo)的咳嗽屬于急性外感引起的咳嗽，故減少咳嗽次數(shù)發(fā)方面清喉利咽顆粒效果較好。二方均具有固護肺氣，抵御外邪侵襲作用，因此在延緩咳嗽方面有疊加作用?，F(xiàn)代藥理研究證實不僅川貝母生物堿、薄荷腦、甘草甜素及甘草次酸等具有止咳作用[12-14]，黃芩苷、桔梗皂苷、紫蘇子油等也具有止咳作用[15-17]。本實驗研究也證實了清喉利咽顆粒、養(yǎng)陰清肺糖漿均具有良好的止咳作用，二藥聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用，能夠延緩咳嗽的發(fā)生，增強止咳作用。這為清喉利咽顆粒聯(lián)合養(yǎng)陰清肺糖漿更好的應(yīng)用臨床提供了藥理學(xué)依據(jù)。

[1]章元沛.藥理學(xué)實驗[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1996:238.

[2]尹玲桃,王宇紅,莫韋皓,等.兒感康口服液祛痰、止咳和平喘藥學(xué)作用研究[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報,2014,20(5):95-97.

[3]康健,陳莉娜,趙進,等.茼蒿提取液鎮(zhèn)咳祛痰作用研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2014,25(1):8-9.

[4]梁雪,潘若凡,丁瑩,等.麻杏枇杷顆粒對咳喘模型小鼠的影響[J].中醫(yī)藥信息,2013,30(3):38-40.

[5]趙祥安,王瑞,朱佳.TRPV1在感染后咳嗽中的作用機制及其藥物治療前景[J].臨床肺科雜志,2015,20(1):125-128.

[6]Couto M,de Diego A,Perpini M,et al.Cough reflex testing with inhaled capsaicin and TRPV1 activation in asthma and comorbid conditions[J].Journal of investigational allergology&clinical immunology,2013,23(5):289-301.

[7]Kou YR,Kwong K,Lee LY.Airway inflammation and hypersensitivity induced by chronic smoking[J].Respiratory physiology&neurobiology,2011,178(3):395-405.

[8]Veronesi B,Oortgiesen M,Roy J,et al.Vanilloid(capsaicin)receptors influence inflammatory sensitivity in response to particulate matter[J].Toxicol Appl Pharmacol,2000(169):66-76.

[9]Lee LY,Gu Q,Xu F,et al.Acid-sensing by airway afferentnerves[J].Pulmonary pharmacology&therapeutics,2013,26(5):491-497.

[10]Gatti R,Andre E,Amadesi S,et al.Protease-activated receptor-2 activation exaggerates TRPV1-mediated cough in guinea pigs[J].J Appl Physiol,2006(101):506-511.

[11]Ye XM,Zhong NS,Liu CL,et al.A guinea pig model of respiratory syncytial virus infection for cough and its neurogenic inflammatory mechanism[J].National Medical Journal of China,2011,91(24):1708-1712.

[12]曹新偉,張萌,李軍,等.川貝母生物堿類成分的研究[J].中草藥,2009,40(1):15-17.

[13]楊彬,劉丹,杜超,等.治咳川貝枇杷滴丸中薄荷腦大鼠體內(nèi)藥物動力學(xué)及體內(nèi)外相關(guān)性研究[J].中國中藥雜志,2013,38(9):1421-1425.

[14]雷紅偉,江南,丁莉.甘草酸二銨鎮(zhèn)咳作用的研究[J].數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志,2007,20(3):372-373.

[15]羅誠浩,宋旭艷,魏敏,等.黃芩苷、木犀草素混合物鎮(zhèn)咳祛痰平喘作用的實驗研究[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志,2012,7(3):212-214.

[16]孫荏苒,張滿云,陳勤.桔梗皂苷膠囊抗炎止咳平喘作用研究[J].中藥藥理與臨床,2010,26(4):27-29.

[17]馬屏南.紫蘇子鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘作用的藥理研究[J].中國實用醫(yī)藥,2015,10(10):159-160.

(2015-01-27收稿 責(zé)任編輯：張文婷)

The Effect of Qinghou Liyan Granules and Yangyin Qingfei Syrup on the Cough Caused by Ammonia Water and SO2in Mice

Wu Jianguang1, Guo Sijia2, Hao Zhenghua3, Liu Wei2, Liu Enshun2, Feng Jihong2

(1DongliTraditionalChineseMedicineHospitalofTianjin,Tianjin300300,China; 2TheSecondAffiliatedHospitalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine,Tianjin30015,China；3TianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine,Tianjin300193,China)

Objective:To observe the effects of Qinghou Liyan granules, Yangyin Qingfei syrup and Qinghou Liyan granules combined with Yangyin Qingfei syrup in the treatment of cough in mice caused by ammonia water and sulphur dioxide gas. Methods:Sixty of healthy, clean and male mice were randomly divided into six groups：control group, Yangyin Qingfei Granules group， Qinghou Liyan syrup group, Yangyin Qingfei granule combined with Qinghou Liyan group, Montelukast group and Mixture Glycyrrhiza group. The control group were given water, and the other groups were given drugs. The treatment term lasted for seven days, and drugs were given everyday. Around an hour after giving the drug, mice were placed in YLS-8A device and ammonia water and sulphur dioxide gas were used to induce cough in mice respectively. Recorded were potential cough and the times of cough in three minutes. Results:Compared with the control group, other groups have more obvious effects on extending the incubation period of cough in mice and reducing the times of cough in mice caused by ammonia water and sulfur dioxide gas(P<0.05; Compared with the control group, Yangyin Qingfei syrup group, Gancao mixture group and Montelukast Sodium Tablets group, Qinghouliyan granules combined with Yangyinqingfei syrup group has a better effect on extending the incubation period of cough in mice and reducing the times of cough in mice caused by ammonia water and sulfur dioxide gas(P<0.05; Compared with Qinghou Liyan granules group, Qinghouliyan granules combined with Yangyinqingfei syrup group has a larger effect on extending the incubation period of cough in mice caused by ammonia water and sulfur dioxide gas(P<0.05). Conclusion:Both Qinghou Liyan granules and Yangyin Qingfei syrup have a effect on inhibiting cough. And Qinghou Liyan granules combined with Yangyin Qingfei syrup can enhance the effects of inhibiting cough and extending the incubation period of cough.

Qinghou Liyan granules; Yangyin Qingfei syrup; Cough; Experimental study

吳健廣(1988—)，男，醫(yī)學(xué)碩士，醫(yī)師，研究方向：主要從事中西醫(yī)結(jié)合防治呼吸系統(tǒng)疾病的臨床及科研工作

郭思佳(1985—)，男，醫(yī)學(xué)博士，主治醫(yī)師，研究方向：主要從事中西醫(yī)結(jié)合防治呼吸系統(tǒng)疾病的臨床、科研及教學(xué)工作，Tel：(022)60335393，E-mail：379541418@qq.com

R285.5

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2015.11.033