河北省唐山市人民醫(yī)院血液科(唐山063000) 馮志剛 劉東芳 紫建杰 劉艷芬

腫瘤性貧血患者血清Hepcidin和IL-6及血清鐵的表達(dá)及意義*

河北省唐山市人民醫(yī)院血液科(唐山063000) 馮志剛 劉東芳 紫建杰 劉艷芬

目的：探討腫瘤性貧血患者外周血鐵調(diào)素(Hepcidin)水平變化及其與白介素-6(IL-6)、血清鐵(SI)水平變化的相關(guān)性，了解其在腫瘤性貧血中的作用，為臨床治療提供依據(jù)。 方法：將腫瘤性貧血患者100例作為觀察組，另選擇同期來我院體檢的人員20例作為對(duì)照組。采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測(cè)患者血清中Hepcidin、IL-6，亞鐵嗪終點(diǎn)比色法測(cè)定SI濃度，了解Hepcidin與貧血、IL-6的相關(guān)性。結(jié)果：腫瘤性貧血患者外周血Hepcidin、IL-6濃度均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，SI濃度低于對(duì)照組(P<0.05)。隨著貧血程度加重，外周血Hepcidin、IL-6濃度升高(P<0.05),SI濃度降低(P<0.05)。腫瘤性貧血患者血清Hepcidin與IL-6成正相關(guān)(r=0.33，P<0.05)，血清Hepcidin與SI水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.24,P<0.05)，血清IL-6與SI水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.21，P<0.05)。結(jié)論：腫瘤性貧血患者外周血中Hepcidin、IL-6濃度明顯升高，Hepcidin與IL-6成正相關(guān)，Hepcidin及IL-6在腫瘤性貧血發(fā)病中起重要作用，及早降低Hepcidin、IL-6濃度,有助于阻止貧血的發(fā)展，為腫瘤性貧血的治療提供新的策略。

貧血是腫瘤患者的常見合并癥,大約有50%的腫瘤患者發(fā)生貧血,在晚期腫瘤患者及接受化療或放療的患者中,貧血的發(fā)生率高達(dá)90%。腫瘤和腫瘤治療相關(guān)性貧血已越來越受到重視,貧血不僅影響腫瘤的治療，更為嚴(yán)重的是嚴(yán)重影響這部分患者的生活質(zhì)量，其發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚[1]，鐵調(diào)素(Hepcidin)可以通過抑制腸道鐵的吸收及單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)鐵的釋放，對(duì)鐵代謝起負(fù)調(diào)控作用，在腫瘤性貧血的發(fā)病機(jī)制中起最關(guān)鍵作用。白介素-6(IL-6)是目前認(rèn)為刺激Hepcidin合成的最主要的炎癥因子，可通過刺激Hepcidin的合成調(diào)節(jié)鐵的代謝，造成貧血的發(fā)生。本研究中我們探討Hepcidin、IL-6與腫瘤性貧血的關(guān)系，以進(jìn)一步揭示腫瘤性貧血的發(fā)病機(jī)制，為臨床治療提供理論依據(jù)。

資料與方法

1 臨床資料

1.1 資料來源：觀察組：100例，選擇我院2012年9月至2014年10月確診的腫瘤性貧血患者，其中輕中度型貧血(B組)85例，重型貧血(C組)15例。對(duì)照組：20例，為我院健康體檢者。

1.2 標(biāo)本采集：空腹抽取靜脈血6ml，其中2ml置入生化管中，采用亞鐵嗪終點(diǎn)比色法測(cè)定血清鐵，其余4ml放入血清生化管中室溫凝固，離心后收集血清，于-80℃超低溫冰箱中保存。

1.3 試劑：人Hepcidin ELISA 檢測(cè)試劑盒，人IL-6 ELISA檢測(cè)試劑盒,鐵四項(xiàng)試劑均購(gòu)于上海生工生物有限公司。

1.4 儀器：IMMULITE全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀，680型酶標(biāo)儀等。

2 檢測(cè)方法 采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測(cè)患者血清中Hepcidin、IL-6，亞鐵嗪終點(diǎn)比色法測(cè)定血清鐵濃度亞鐵嗪終點(diǎn)比色法測(cè)定血清鐵，按試劑說明書操作。

結(jié) 果

1 腫瘤性貧血患者與正常組的IL-6、Hepcidin、血清鐵水平比較 見表1。腫瘤性貧血患者外周血IL-6、Hepcidin濃度均明顯高于對(duì)照組 (P<0.05),血清鐵濃度低于對(duì)照組(P<0.05)。

表1 腫瘤性貧血與正常對(duì)照組IL-6、Hepcidin、血清鐵比較

注：*與對(duì)照組比較，P<0.05

2 腫瘤性貧血患者不同程度貧血組IL-6、Hepcidin、血清鐵水平比較 見表2。隨著貧血程度加重，外周血IL-6、Hepcidin濃度升高(P<0.05)，血清鐵濃度降低(P<0.05)。

表2 腫瘤性貧血不同程度患者IL-6、Hepcidin、血清鐵比較

注：*與對(duì)照組比較，P<0.05

3 腫瘤性貧血患者血清Hepcidin、IL-6、血清鐵的關(guān)系 腫瘤性貧血患者血清Hepcidin與IL-6水平呈正相關(guān)(r=0.33,P<0.01)；腫瘤性貧血患者血清Hepcidin與血清鐵水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.24,P<0.05)；腫瘤性貧血患者血清IL-6與血清鐵水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.21,P<0.05)。

討 論

腫瘤相關(guān)性貧血是指腫瘤直接破壞引起的和腫瘤對(duì)機(jī)體的侵害和消耗而間接引起的以及在抗腫瘤治療過程中因藥物導(dǎo)致的貧血。惡性腫瘤引起貧血,主要表現(xiàn)為正細(xì)胞正色素或小細(xì)胞低色素貧血，網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)正?；驕p低，血清鐵降低，鐵蛋白增高或正常，骨髓鐵染色示細(xì)胞內(nèi)鐵減少而細(xì)胞外鐵增多[1]，這些表現(xiàn)主要與等負(fù)調(diào)控因子抑制內(nèi)源性生成，抑制紅系造血及影響鐵代謝等有關(guān)。其發(fā)病機(jī)制是多種因素對(duì)紅細(xì)胞生成抑制所致。其發(fā)病機(jī)制大致分為四類：①促紅細(xì)胞生成素(EPO)分泌相對(duì)不足及作用鈍化；②紅細(xì)胞破壞、壽命縮短；③鐵代謝異常及鐵限制性紅細(xì)胞生成；④紅系前體細(xì)胞增殖受損。以上各類均與細(xì)胞因子有關(guān)。大量研究顯示：IL-6在腫瘤相關(guān)性貧血的發(fā)生和發(fā)展中起一定作用，但其機(jī)制不甚清楚。

Hepcidin是近期發(fā)現(xiàn)的鐵調(diào)節(jié)蛋白，Sasu等[2]認(rèn)為Hepcidin濃度與貧血患者的炎癥標(biāo)志物相關(guān)，是診斷貧血和判斷療效的有效指標(biāo)，是鐵轉(zhuǎn)運(yùn)的負(fù)性調(diào)節(jié)劑[2]。隨著對(duì)IL-6及鐵代謝研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)IL-6在腫瘤相關(guān)性貧血發(fā)病中起一定作用，IL-6可能通過多種途徑誘發(fā)貧血的發(fā)生：①腫瘤性貧血中多種細(xì)胞因子可誘導(dǎo)Hepcidin升高，研究發(fā)現(xiàn)IL-6是影響Hepcidin最重要的因素。IL-6基因敲除的小鼠中，在用礦物油處理的炎癥過程中未出現(xiàn)Hepcidin升高及低鐵血癥。體外培養(yǎng)的肝細(xì)胞中IL-6可有效誘導(dǎo)Hepcidin產(chǎn)生，而IL-1或TNF-α并不參與這一反應(yīng)。在健康受試者中輸注IL-6后數(shù)小時(shí)內(nèi)可誘導(dǎo)Hepcidin產(chǎn)生并導(dǎo)致低鐵血癥。IL-6-Hepcidin軸在炎癥相關(guān)性低鐵血癥中起重要作用[3]。②血清鐵濃度依賴于巨噬細(xì)胞及肝細(xì)胞的鐵釋放，缺乏Hepcidin或Hepcidin過表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠中發(fā)現(xiàn)Hepcidin是鐵釋放的抑制因子，可同時(shí)抑制腸道鐵吸收，炎癥狀態(tài)下，IL-6誘導(dǎo)Hepcidin生成，隨之Hepcidin抑制鐵釋放導(dǎo)致血清鐵降低Hepcidin與細(xì)胞膜的轉(zhuǎn)鐵蛋白分子結(jié)合，并且誘導(dǎo)其內(nèi)化及降解，后者是鐵釋放的唯一輸出方式。Hepcidin濃度越高，濃度則越低，腸細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及肝細(xì)胞中鐵輸出就越少。③腸道鐵吸收在炎癥狀態(tài)下被抑制，可能是IL-6及Hepcidin介導(dǎo)的。正常人體內(nèi)儲(chǔ)存鐵有400～1000mg，每日造血需要的鐵僅1～2mg來源于飲食。真正的鐵缺乏可能最終在慢性疾病中出現(xiàn)，尤其在鐵儲(chǔ)備有限而IL-6水平非常高的兒童患者。④Kemna等研究發(fā)現(xiàn)脂多糖(LPS)和IL-6可刺激Hepcidin的表達(dá)，在LPS注射人體后可出現(xiàn)IL-6升高，在3～4h后Hepcidin分泌達(dá)到了高峰[4]，Lee等通過體外細(xì)胞培養(yǎng)證實(shí)了IL-6可介導(dǎo)Hepcidin mRNA表達(dá)增加，認(rèn)為L(zhǎng)PS刺激了IL-6表達(dá)，繼而導(dǎo)致Hepcidin表達(dá)的增加，Hepcidin又通過鐵代謝的異常最終引起貧血[5]。

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明：腫瘤性貧血患者外周血中Hepcidin、IL-6濃度明顯升高，血清鐵濃度降低，Hepcidin與IL-6成正相關(guān)，與血清鐵成負(fù)相關(guān)，Hepcidin及IL-6在腫瘤性貧血發(fā)病中起重要作用，及早降低Hepcidin、IL-6濃度,有助于阻止貧血的發(fā)展，為腫瘤性貧血的治療提供了新策略。

[1] Demarmel S， Biasiutti F.Anemia of chronicdisorder pathogenesis,clinical presentation and treatment [J].Ther Umsch,2010,67(2):225-228.

[2] Sasu BJ,Li H,Rose MJ,etal.Serum Hepcidin but not proHepcidin may be an effective maker for anemia of inflammation(AI)[J].Blood Cell Mol DIS,2010,45(2):238-245.

[3] Guenter W,Lawrence T， Goodnoug H.Anemia of chronic disease[J].N Engl J Med,2005,352(10):1011-1023.

[4] Guidi GC,Lech I， Santonastaso C.Advancements in anemias related to chronic andition [J].Clinchem Lab Med,2010,48(13):1217-1226.

[5] Kanda J,Uchiyama T,Tomosugi N,etal.Oncostation M and Leukemia inhibitory factor increase Hepcidin expressin in hepatoma cell lines [J].Int J Hematol,2009,90(6):545-552.

(收稿：2015-01-19)

Clinical significance of serum Hepcidin level and the relationships between Hepcidin level and IL-6,Serum iron levels in patients with cancer-related amemia

Department of Hematology，Tangshan People Hospital of Hebei Province(Tangshan 063000)

Feng Zhigang Liu Dongfang Zi Jianjie et al

Objective:To investigate the clinical significance of serum Hepcidin level and the relationships between Hepcidin level and IL-6,Serum iron levels in patients with cancer-related amemia (CAR) ,and provide experimental evidence for prevention and treatment of CAR. Methods:100 cases in our hospital from September 2012 to October 2014 patients with cancer-related anemia were treated,was set to the observation group, and the other options over the same period 20 cases to the hospital medical staff, served as controls. Serum Hepcidin and IL-6 levels were assayed by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA),Serum SI levels were assayer by ferrozine .Results:①The levels of serum Hepcidin and IL-6 compared with the control group increased,but the levels of serum SI decreased, the difference was statistically significant (P<0.05).②Along with the degree of anemia increased,the level of Hepcidin and IL-6 has been rised obviously,but the level of SI has been reduced(P<0.05).③In patients with cancer-related anemia,Hepcidin level were positively correlated with IL-6 level(P<0.05),and Hepcidin and IL-6 levels were negative clrrelated with SI level(P<0.05).Conclusion:The levels of serum Hepcidin and IL-6 compared with the control group increased . Hepcidin level were positively correlated with IL-6 level.The Hepcidin and IL-6 plays an important role in the disease in CAR,and reducing the level of NO as soon as possible,is assist for prevent the progress of anemia.that will provide a new strategy of therapy for CAR.

Neoplasms/complication Anemia/etiology Anemia/blood Iron/metabolism Interleukin-6/metabolism Immunoenzyme techniques

*河北省衛(wèi)生廳醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題(20130676)

腫瘤/并發(fā)癥 貧血/病因?qū)W 貧血/血液 鐵/代謝 白細(xì)胞介素6/代謝 免疫酶技術(shù)

R730.6

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2015.05.029