李云婷，張曉琳，王麗芳

（河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院檢驗科，河北石家莊 050800）

Beckman Coulter LH750血細胞分析儀異常結果標本白細胞分類的可靠性評價

李云婷，張曉琳，王麗芳△

（河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院檢驗科，河北石家莊 050800）

目的探討美國Beckman Coulter LH750五分類血細胞分析儀對異常結果標本白細胞分類的可靠性，為臨床提供準確的診斷依據(jù)和進行病情監(jiān)測。方法分別用儀器法和手工鏡檢法對單核細胞百分率（MO%）在15%～20%和大于20%的血液標本進行白細胞分類，通過對兩種方法進行比較分析，驗證儀器法白細胞分類與人工分類是否一致，進而對儀器法的可靠性作出評價。結果健康對照組血標本儀器法和手工分類法的5種白細胞結果比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；MO%在15%～20%的血標本，儀器法和手工分類法分類的中性粒細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞結果比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），但淋巴細胞和嗜堿性粒細胞的結果比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；對MO%＞20%的血標本，儀器法所測MO%結果高于手工分類法（P＜0.01），其他細胞兩種分類方法結果比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結論Beckman Coulter LH750五分類血細胞分析儀對結果正常的血標本白細胞分類準確，但對MO%＞15%的血標本需手工復檢。

血細胞分析儀； 白細胞分類； 可靠性

隨著醫(yī)學科學技術的飛快發(fā)展，醫(yī)學檢驗技術也有了明顯的進步，血細胞計數(shù)由原來的以顯微鏡為主要檢測工具發(fā)展為血細胞自動分析儀，并且自動化程度不斷提高，由三分類發(fā)展為五分類。目前，血細胞分析儀是一種較為理想的過篩工具。Beckman Coulter LH750血細胞分析儀是一臺全自動五分類血細胞分析儀，具有良好的計算機分析功能，它采用VCS技術同時對單個細胞進行細胞體積（V）、電導（C）、激光散射（S）的分析，各種白細胞由于體積大小、顆粒性質(zhì)及大小、核形態(tài)與核漿比等性質(zhì)的差異，在X、Y、Z三維空間對接近自然狀態(tài)下的白細胞進行精確的分析。但是由于儀器檢測本身的缺陷、非儀器因素對測試的干擾、患者的個體差異等因素，往往導致儀器檢測結果出現(xiàn)異常。因此，筆者對異常結果標本的篩查結果是否具有可靠性進行了研究。將日常工作中儀器測定結果單核細胞百分率（MO%）15%～20%及大于20%的血液標本進行手工顯微鏡檢查，并對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，進而對異常結果標本儀器法檢測的可靠性進行評價。

1 材料與方法

1.1 標本來源 均選自河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院門診、急診、住院患者的血液標本，總計2 602份。其中MO%在15%～20%的血液標本28份，MO%＞20%的標本20份，隨機選擇儀器檢測各參數(shù)均正常的標本10份作為健康對照組。

1.2 儀器與試劑 貝克曼庫爾特公司生產(chǎn)Beckman Coulter LH750全自動血液分析儀及其配套試劑，乙二胺四乙酸二鉀（EDTA－K2）真空采血管，顯微鏡，LH750血細胞分析儀配套的校正品和質(zhì)控物，Wright－Giemsa染液（按每1.0 g Wright染料添加0.3 g Giemsa染料［1］）。

1.3 方法

1.3.1 標本采集 所有受試者均采血2 m L于加有15%EDTA－K2抗凝劑的干燥塑料試管中，充分混勻，并在2 h內(nèi)測定完畢［2］。

1.3.2 檢測方法 用LH750血細胞分析儀配套的校正品對五分類血細胞分析儀進行校正，標本測定前做全血質(zhì)控，確認儀器處于正常工作狀態(tài)，采血后，2 h內(nèi)完成對標本的檢測。手工鏡檢將檢測后的血常規(guī)標本制成血涂片，瑞－姬染色后由兩位具有形態(tài)學診斷經(jīng)驗的技師雙盲鏡檢，先瀏覽全片，觀察有無異常，再在血片體尾交界處用油鏡分類200個白細胞，求得各種白細胞的百分比。

1.4 統(tǒng)計學處理 分別對健康對照組、MO%15%～20%組、MO%＞20%組中的五類白細胞用儀器法和手工法所得出的數(shù)據(jù)進行比較，所得計量資料采用表示，兩種方法檢測結果比較采用配對t檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 儀器法檢測結果異常標本的科室來源 48份儀器檢測異常標本主要來自血液內(nèi)科、放療科、核醫(yī)學科、呼吸內(nèi)科，分別為22、7、4、3份，其中血液內(nèi)科異常標本數(shù)約占檢出總數(shù)的一半；其次為心臟內(nèi)科、免疫風濕科、急診科，均為2份；腫瘤病區(qū)、消化內(nèi)科、內(nèi)分泌內(nèi)科、心臟外科、中醫(yī)內(nèi)科、小兒內(nèi)科最少，均為1份。在用手工法對該48份標本進行細胞分類時，檢出存有異常淋巴細胞的標本3份，其中MO%在15%～20%組2份，MO%＞20%組1份；檢出存有幼稚細胞的標本10份，其中MO%在15%～20%組3份，MO%＞20%組7份，且在這7份標本中有2份幼稚細胞所占比例較高，分別為19%和65%，而儀器未檢出。

2.2 健康對照組血標本兩種方法白細胞分類結果比較 健康對照組血標本儀器分類法與手工分類法測得中性粒細胞百分率（NE%）、淋巴細胞百分率（LY%）、MO%、嗜酸性粒細胞百分率（EO%）及嗜堿性粒細胞百分率（（BA%）比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1。

2.3 MO%為15%～20%組血標本兩種方法白細胞分類結果比較 在MO%為15%～20%組中采用儀器法與手工法白細胞分類計數(shù)結果中NE%、MO%、EO%比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；LY%、BA%比較差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），儀器法檢測結果高于手工法。見表2。

2.4 MO%＞20%組血標本兩種方法白細胞分類結果 在MO%＞20%組中采用儀器法與手工法白細胞分類計數(shù)結果中NE%、LY%、EO%及BA%比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；MO%比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），儀器法檢測結果高于手工法。見表3。

表1 正常對照組白細胞儀器法和手工法分類結果比較（）

－:無數(shù)據(jù)。

方法n NE%LY%MO%EO%BA%儀器分類法10 59.38±7.14 29.98±6.06 4.00±1.03 1.45±1.00 0.45±0.20手工分類法10 59.40±7.89 30.10±8.81 4.80±1.39 1.50±2.00 0.00±1.00 t －0.269 2 0.020 8 1.548 7 0.927 4 0.828 5 P－＞0.05＞0.05＞0.05＞0.05＞0.05

表2 MO%為15%～20%組白細胞儀器法和手工法分類結果比較（）

－:無數(shù)據(jù)。

方法n NE%LY%MO%EO%BA%儀器分類法10 54.27±11.44 25.99±11.82 16.99±1.38 1.25±2.30 0.55±0.40手工分類法10 60.5±6.07 19.43±5.90 18.21±2.32 0.50±3.00 0.00±0.01 t －0.999 8 4.092 2 0.998 8 2.043 1 3.571 4 P－＞0.05＜0.01＞0.05＞0.05＜0.01

表3 MO%＞20%組白細胞儀器法和手工法分類結果比較（）

－:無數(shù)據(jù)。

方法n NE%LY%MO%EO%BA%儀器分類法28 35.91±15.13 26.95±16.20 35.12±16.31 0.75±3.00 0.40±0.50手工分類法28 36.80±16.82 29.00±17.27 28.45±16.01 1.00±3.00 0.00±0.02 t －0.732 4 1.846 5 4.752 5 1.172 7 1.608 3 P－＞0.05＞0.05＜0.01＞0.05＞0.05

3 討 論

Beckman Coulter LH750血細胞分析儀利用電阻抗技術檢測細胞體積，利用電導技術對細胞大小和內(nèi)部結構（細胞化學成分和胞核體積）進行檢測，采用光散射技術檢測細胞內(nèi)的顆粒性、核分葉性和細胞表面結構。其利用VCS技術對白細胞進行分類檢測，可在20 s內(nèi)對8 192個白細胞進行分析，這與手工鏡檢法相比，更為精確、均勻，細胞狀態(tài)更自然。但某些疾病的患者血標本，由于各種原因會影響VCS技術的分析結果，在儀器上使白細胞分類出現(xiàn)異常結果。筆者將儀器分類結果MO%在15%～20%和大于20%的標本用手工法分類，將其所得數(shù)據(jù)與儀器法進行比較分析。研究結果表明，健康對照組血標本儀器分類計數(shù)和手工法分類的五種白細胞百分率比較均無明顯差異（P＞0.05）；MO%在15%～20%的血標本儀器分類計數(shù)和手工法分類中，LY%、BA%儀器法檢測結果均高于手工法；MO%＞20%的血標本儀器分類計數(shù)和手工法分類中，MO%儀器法檢測結果高于手工法。對于結果異常的標本，儀器法的可靠性低于手工法可能是由于:（1）某些疾病或藥物可能使細胞表面所帶電荷發(fā)生變化，在加入穩(wěn)定劑時不能使白細胞從腫脹狀態(tài)快速恢復到原態(tài)，這與正常血標本相比，其細胞體積會增大［3］；（2）血液病標本中，原始、幼稚細胞和其他一些異常細胞在溶血素處理下，它們的體積大小、胞漿顆粒及染色質(zhì)疏松程度與單核細胞有部分相似，儀器誤將這些細胞計數(shù)到單核系統(tǒng)中，導致儀器法單核細胞計數(shù)偏高［4］；（3）單核細胞群和淋巴細胞群VCS技術下的特征主要在于單核細胞群相對淋巴細胞群的體積較大，因此儀器對大淋巴細胞與單核細胞在體積相似的情況下分辨率較低［5］，可出現(xiàn)單核偏高的現(xiàn)象。

綜上所述，VCS技術對正常結果的血標本白細胞分類結果準確，但當儀器法檢出MO%＞15%時，用儀器法所得結果可靠性較差，此類標本應當結合臨床和其他檢測參數(shù)綜合分析，采用手工復檢確診，以免漏診、誤診。

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10.3969/j.issn.1673－4130.2015.10.050

A

1673－4130（2015）10－1433－02

2015－03－12）

△通訊作者，E－mail:wanglf2h＠163.com。