徐桂珍，李勝濤，史文元，朱軍民，彭小友，徐玉娟

（郴州市第一人民醫(yī)院兒童醫(yī)院檢驗科，湖南郴州 423000）

郴州地區(qū)兒童血培養(yǎng)病原菌構(gòu)成及耐藥性分析

徐桂珍，李勝濤，史文元，朱軍民，彭小友，徐玉娟

（郴州市第一人民醫(yī)院兒童醫(yī)院檢驗科，湖南郴州 423000）

目的了解郴州地區(qū)兒童血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥情況。方法采集來自本院血培養(yǎng)標(biāo)本檢出的各類細(xì)菌，并對標(biāo)本的送檢科室、來源的患兒年齡及各類細(xì)菌的藥敏實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果檢出各類病原菌共計413株，其中，革蘭陽性球菌216株、革蘭陰性桿菌176株、真菌21株。檢出細(xì)菌排名前5的病原菌分別為葡萄球菌屬、腸球菌屬、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、鏈球菌屬。檢出陽性菌株數(shù)量排前5名依次是新生兒重癥監(jiān)護(hù)病房（NICU）、新生兒科、呼吸科、兒科重癥監(jiān)護(hù)病房（PICU）、神經(jīng)內(nèi)科。檢出患兒年齡主要集中于3歲以下的兒童及嬰幼兒。革蘭陽性球菌對青霉素G和紅霉素的耐藥率較高，其次是喹諾酮類藥物，未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素葡萄球菌和腸球菌。革蘭陰性桿菌最敏感的藥物是亞胺培南和美洛培南。真菌對5種臨床常用抗真菌藥物靈敏度均較高。結(jié)論本院兒童血培養(yǎng)檢出病原菌以葡萄球菌為主，但是不同科室的構(gòu)成比例并不一致；3歲以下兒童血流感染的可能性大；本院真菌檢出率較高，占5.1%，與本院采用血培養(yǎng)真菌瓶有關(guān)；血培養(yǎng)分離菌株的耐藥性較高，合理使用抗菌藥物可以減少耐藥菌的產(chǎn)生。

血培養(yǎng)； 病原菌構(gòu)成； 耐藥性

近年來，隨著兒科醫(yī)療技術(shù)尤其是重癥監(jiān)護(hù)技術(shù)的不斷發(fā)展，新的醫(yī)療干預(yù)措施和侵入性診療措施的應(yīng)用，抗菌藥物的濫用，兒童血流感染的概率越來越大，而且兒童血流感染具有較高的致死和致殘率［1］，且治療費用較高。為了解本地區(qū)兒童血培養(yǎng)病原菌的分布及耐藥情況，為臨床合理應(yīng)用抗菌藥物，及早有效地控制感染提供可靠參考依據(jù)，筆者對本院的3 805份血培養(yǎng)標(biāo)本進(jìn)行了分析統(tǒng)計。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 標(biāo)本為2011～2012年本院住院部采集的嬰幼兒血液培養(yǎng)標(biāo)本3 805例。

1.2 儀器與試劑 法國生物梅里埃公司BACT/ALERT 240全自動血培養(yǎng)儀，其配套的樹脂兒童瓶均購自美國BD公司，真菌培養(yǎng)瓶購自長沙天地人生物技術(shù)有限公司；采用法國生物梅里埃ATB自動化細(xì)菌分析儀及配套的ID 32 E、ID 32 STAPH、ID 32 GN、ATB ID 32C鑒定條及ATB G 5、ATB STAPH 5、ATB PSE 5、ATB FUNGUS 3藥敏實驗測試條。血平板、SS平板、沙保弱平板購自鄭州安圖生物技術(shù)公司。

1.3 質(zhì)控菌株 金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC29522、肺炎克雷伯菌ATCC700603、銅綠假單胞菌ATCC27853和白色假絲酵母菌ATCC90028由衛(wèi)生部臨床檢驗中心提供，結(jié)果判讀按美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會（CLSI）推薦的紙片擴(kuò)散法進(jìn)行。

1.4 方法 用無菌方法采集小兒靜脈血1～3 mL注入兒童專用血培養(yǎng)瓶，及時放入BACT/ALERT 240全自動血培養(yǎng)儀進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)5 d后陰性瓶轉(zhuǎn)到哥倫比亞血平板培養(yǎng)24 h，確認(rèn)無菌后發(fā)出陰性報告。陽性瓶涂片染色鏡檢，并把鏡檢結(jié)果及時報告給臨床醫(yī)師，轉(zhuǎn)種到哥倫比亞血平板分離培養(yǎng)后進(jìn)行鑒定和藥敏實驗。全部操作按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1 血培養(yǎng)檢出病原菌的種類和構(gòu)成比例 血液培養(yǎng)標(biāo)本共3 805份，共檢出各類病原菌413株，陽性率為10.8%。其中革蘭陽性球菌216株占52.3%（216/413），革蘭陰性桿菌176株占42.6%（176/413），真菌21株占5.1%（21/413），見表1。

2.2 5個送檢科室的主要感染菌構(gòu)成 在本院各科室送檢血培養(yǎng)標(biāo)本當(dāng)中，檢出細(xì)菌較多的科室是新生兒重癥監(jiān)護(hù)病房（NICU），其次是新生兒科，主要以凝固酶陰性葡萄球菌為主，但不同的科室構(gòu)成有較大差別，見表2。

2.3 血培養(yǎng)陽性患兒的年齡分布 在本次研究當(dāng)中，3歲以下血培養(yǎng)陽性患兒占86.2%，血培養(yǎng)患兒年齡分布見表3。

2.4 革蘭陽性菌的耐藥情況 革蘭陽性菌對紅霉素、青霉素G的耐藥率最高，尚未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素的菌株，見表4。

2.2.2 革蘭陰性菌的耐藥情況 革蘭陰性菌對頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率最低，見表5。

2.2.3 真菌藥敏實驗結(jié)果及病因分析 21株真菌對氟康唑、5－氟胞嘧啶、兩性霉素B、伊曲康唑、伏立康唑的靈敏度均較高，最高為兩性霉素B（100.0%），最低為伊曲康唑（87.6%），見表6。

3 討 論

血培養(yǎng)陽性是臨床確診膿毒血癥的直接依據(jù)，兒童血流感染會造成嚴(yán)重的后遺癥并且病情兇險，所以在兒童專科醫(yī)院分析并總結(jié)血培養(yǎng)的結(jié)果對臨床醫(yī)治患兒意義重大。

本次統(tǒng)計分析顯示，2011～2012年本院兒童血流感染的主要病原菌是革蘭陽性菌，其中凝固酶陰性葡萄球菌檢出率最高，這與張勇等［2］的報道一致。但也有報道稱兒科病區(qū)患者血培養(yǎng)中檢出的致病菌以革蘭陰性桿菌為主［3］，筆者經(jīng)過分析，可能主要有以下一些方面會對結(jié)果造成影響。（1）不同地區(qū)間患者的構(gòu)成與疾病的種類不同，在省一級醫(yī)院主要以危急重癥為主，而本院主要還是以常見患者為主；同一醫(yī)院不同科室的患者也各有側(cè)重，如本院呼吸科檢出菌株以凝固酶陰性葡萄球菌為主，而神經(jīng)內(nèi)科以檢出真菌最多。（2）從實驗室來說對從血培養(yǎng)瓶報警的時間上來判斷，是否為真陽性有一定的可行性和可信度，如果還同時綜合其他指標(biāo)如降鈣素原（PCT）、C反應(yīng)蛋白（CRP）、血常規(guī)結(jié)果等，這樣有一個比較全面的患者檢測結(jié)果信息采集分析過程，可以得出較為可信的結(jié)果［4］。（3）從病原學(xué)的角度來說，凝固酶陰性葡萄球菌的感染同患者的免疫狀態(tài)有關(guān)［5］，一般患兒免疫力都是下降的，其他侵入因素，如中心靜脈導(dǎo)管置管、外傷、長時間手術(shù)暴露、拔牙等也會造成影響［6］；醫(yī)生詢問的臨床病史也能夠很大程度上輔助判斷凝固酶陰性葡萄球菌的陽性血培養(yǎng)的意義。

從本次分析的藥敏結(jié)果來看，血流感染的革蘭陽性球菌對青霉素G和紅霉素耐藥率最高；而陰性桿菌對氨芐西林、阿莫西林/克拉維酸等耐藥率較高；非發(fā)酵菌對氨芐西林和第2、3代頭孢菌素類藥物靈敏度較低，在臨床治療時不宜作為經(jīng)驗用藥的選擇，應(yīng)及時更換藥物；雖然非發(fā)酵菌在本次研究中比率不是最高，但因其耐藥機(jī)制較多，如產(chǎn)生金屬β－內(nèi)酰胺酶、OprD2外膜蛋白對亞胺培南的轉(zhuǎn)運及主動外排轉(zhuǎn)運系統(tǒng)等［7］，應(yīng)提醒臨床醫(yī)生更加重視此類感染細(xì)菌的藥敏實驗。本組資料顯示，肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌是引起本院患兒血流感染的主要革蘭陰性菌，其耐藥現(xiàn)象較為嚴(yán)重，其中大腸埃希菌對氨芐西林98.30%耐藥，除對頭孢西丁耐藥率為47.6%外，對其余頭孢菌素類抗菌藥物耐藥率均較高，而且只有對頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率較低（34.60%）；只有對亞胺培南、美洛培南等靈敏度高，而對于喹諾酮類抗菌藥物靈敏度較高，如左氧氟沙星，但該藥在兒童醫(yī)院的應(yīng)用受限。吳仕孝［8］調(diào)查發(fā)現(xiàn)喹諾酮類藥物在掌握原則情況下可適當(dāng)使用，故建議臨床醫(yī)生慎用。從本次分析年齡分布來看，小于3歲患兒的血培養(yǎng)陽性者占86.2%，這說明3歲以下兒童的生物屏障及人體的抵抗力都較差，不能夠有效地抗御微生物的侵襲，應(yīng)加強防范。

本次研究還發(fā)現(xiàn)血培養(yǎng)真菌檢出以白色假絲酵母菌為主，這與López等［9］的報道相一致。其中有6例真菌血培養(yǎng)陽性患兒具有免疫功能受損或抑制，均來自本院的血液科；3例為長期導(dǎo)管置管的患兒；馬爾尼菲青霉菌感染患兒為垂直HIV病毒傳播引起的；其余均為不明原因高熱在下級醫(yī)院無法確診時送來的患兒，這與劉學(xué)花等［10］的報道相符。真菌感染的患兒病程發(fā)展迅速，往往有與其他細(xì)菌共同感染的現(xiàn)象，對于此類患者診斷的金標(biāo)準(zhǔn)還是細(xì)菌培養(yǎng)，本院真菌檢出率較高，占5.1%，可能與本院一直堅持采取專用真菌瓶進(jìn)行培養(yǎng)有關(guān)。

綜上所述，兒童血液感染病情復(fù)雜，可引起嚴(yán)重的膿毒血癥和遷移性感染，因此及時的血培養(yǎng)和對病原菌進(jìn)行藥敏實驗可為臨床診斷、藥物選用提供重要的依據(jù)。

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Children′s blood culture pathogens composition and resistance analysis of Chenzhou

Xu Guizhen，Li Shengtao，Shi Wenyuan，Zhu Junmin，Peng Xiaoyou，Xu Yujuan
（Department of Clinical Laboratory，Children′s hospital，the First People′s Hospital of Chenzhou City，Chenzhou，Hunan 423000，China）

ObjectiveTo investigate the distribution of children′s blood culture pathogens and drug resistance in Chenzhou region.MethodsCollected all kinds of bacteria from blood culture，recorded the source department，the child patients′age，and drug sensitivity data of bacteria for analysis.ResultsA total of 413 strains were isolated，among them，216 strains were gram－positive cocci，176 strains were gram－negative bacilli，21 strains were fungi.The top four pathogenic bacteria in isolate number were Staphylococcus aureus，E.coli，Klebsiella pneumoniae，Streptococcus.The top five Department from which the most stains were isolated were NICU，neonatology department，pneumology department，PICU，department of neurology.The children′s ages were mainly under the age of three.The resistant rate of Gram positive cocci to penicillin G and erythromycin were very high，followed by quinolones，and vancomycin resistant staphylococcus and enterococcus was not found.The most sensitive drugs for the treatment of Gramnegative bacillus were imipenem and meropenem.The drug sensitivity of fungal to five kinds of commonly used clinical anti－fungal were high.ConclusionThe isolates of children′s blood culture were mainly staphylococcus，the proportion of different departments varied.Children under the age of three were most likely to have bloodstream infections.The detection rate of fungal in the hospital were 5.0%，which was relatively high and associated with the usage of blood culture bottle for fungi.The isolates from blood cultures were with high rate of drug resistance，and the rational use of antibiotics can reduce the generation of drug－resistant bacteria.

blood culture； composition of pathogenic bacteria； drug resistance

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.10.030

A

1673－4130（2015）10－1389－03

2015－03－02）

徐桂珍，女，主管檢驗師，主要從事臨床檢驗的相關(guān)研究。