呂永磊 焦修鳳

(河南省紅十字血液中心 河南鄭州 450012)

人類T淋巴細(xì)胞病毒(Human T－cell lymphotropic virus，HTLV)是一種以產(chǎn)生逆轉(zhuǎn)錄酶為特征的RNA病毒，稱之為逆轉(zhuǎn)錄病毒或反轉(zhuǎn)錄病毒，與HIV病毒具有類似的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)機(jī)制，同時(shí)又具有潛伏期更長、基因組更穩(wěn)定等特性。目前將HTLV分為兩個(gè)型，即HTLV－Ⅰ和HTLV－Ⅱ，分別為引起T細(xì)胞白血病(ATL)和毛細(xì)胞白血病的病原體。HTLV－Ⅰ主要通過性接觸、輸血、注射等途徑傳播，還可通過胎盤、產(chǎn)道以及母乳喂養(yǎng)等方式垂直傳播。由于HTLV－Ⅰ/Ⅱ可以通過血液傳播，涉及到血液安全和受血者的健康等問題，現(xiàn)已得到世界范圍內(nèi)的高度關(guān)注。美國的一項(xiàng)研究顯示，在開展獻(xiàn)血者HTLV－Ⅰ/Ⅱ篩查之前，每輸注10萬單位的血液就有12人感染HTLV－Ⅰ/Ⅱ，篩查實(shí)施后，感染風(fēng)險(xiǎn)下降為1.4/10萬單位，以后逐漸下降為0.16/10萬單位［1］。因此對(duì)無償獻(xiàn)血者進(jìn)行HTLV－Ⅰ/Ⅱ檢測，在確保血液安全和受血者健康、控制病毒感染及傳播方面具有重要意義。中國大陸目前尚未明確必須在無償獻(xiàn)血者中進(jìn)行HTLV－Ⅰ/Ⅱ的常規(guī)檢測，為了解鄭州地區(qū)無償獻(xiàn)血者HTLV－Ⅰ/Ⅱ的感染情況，為安全用血提供科學(xué)的參考依據(jù)，本研究隨機(jī)對(duì)鄭州地區(qū)無償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本進(jìn)行了HTLV－Ⅰ/Ⅱ檢測，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查材料 研究對(duì)象為2014年12月河南省紅十字血液中心無償獻(xiàn)血者全血及機(jī)采血小板血樣，共計(jì)8 800人份，所有無償獻(xiàn)血者均符合GB18467－2011《獻(xiàn)血者健康檢查要求》的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。全血標(biāo)本為初篩干式生化法篩查ALT、金標(biāo)法聯(lián)合試紙條篩查HBsAg和抗－TP，機(jī)采血小板標(biāo)本增加抗－HCV和抗－HIV快速初篩，初篩合格參加無償獻(xiàn)血所留樣本。

1.2 試劑與儀器 人類T淋巴細(xì)胞白血病病毒(HTLV－Ⅰ/Ⅱ)抗體診斷試劑盒(雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法，北京萬泰)，MP Diagnostics HTLV Blot 2.4試劑盒(免疫印跡法);Hamilton Microlab Star全自動(dòng)加樣儀(煙臺(tái)澳斯邦生物工程有限公司)、Hamilton Microlab FAME全自動(dòng)酶免分析儀(煙臺(tái)澳斯邦生物工程有限公司)、酶標(biāo)儀Zenyth 340RT(奧地利安圖斯公司)。

1.3 方法 標(biāo)本采用3 000 r/min離心10 min，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行編程全自動(dòng)加樣器加樣，后處理FAME24/20全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)進(jìn)行檢測。

1.3.1 ELISA試驗(yàn) 依據(jù)試劑盒說明書設(shè)置臨界值(Cut－off)標(biāo)準(zhǔn)，標(biāo)本的OD值與Cut－off比值S/CO＜1判斷為陰性結(jié)果，S/CO≥1判斷為陽性結(jié)果，陽性標(biāo)本再用原試劑進(jìn)行雙孔復(fù)篩，結(jié)果仍為陽性的判斷為初篩陽性。

1.3.2 WB試驗(yàn) 初篩陽性標(biāo)本分離白膜層采用蛋白印跡法(WB)進(jìn)行結(jié)果確認(rèn)，WB主要用于血清篩選后的確證試驗(yàn)，也是鑒別診斷HIV和HTLV的主要方法之一，WB操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，無任何區(qū)帶出現(xiàn)判定為確認(rèn)陰性，GD21、p19、p24、rgp46－Ⅰ和rgp46－Ⅱ任一條帶顯色，即判定確認(rèn)結(jié)果陽性。

2 結(jié)果

2.1 基本情況 隨機(jī)抽查河南省血液中心2014年12月份無償獻(xiàn)血人群8 800份標(biāo)本，其中男性5 197名(59.05%)，女性3 603名(40.94%)。年齡為18～55歲，身體健康，按照GB18467－2011《獻(xiàn)血者健康檢查要求》的要求兩次復(fù)檢ALT、HBsAg、抗－HCV、抗－TP、HIV陰性標(biāo)本，陰性標(biāo)本再進(jìn)行HBV、HCV、HIV的病毒核酸檢測。

2.2 抗體篩查和確認(rèn)試驗(yàn) 8 800份標(biāo)本采用ELISA法共計(jì)篩查出HTLV－Ⅰ/Ⅱ陽性標(biāo)本14份，雙孔復(fù)檢后初篩陽性標(biāo)本8份，初篩HTLV－Ⅰ/Ⅱ陽性率為0.09%。其中男3名，女5名。8份初篩陽性標(biāo)本采用蛋白印跡法確認(rèn)結(jié)果均為HTLV－Ⅰ/Ⅱ陰性。

3 討論

本次初篩無償獻(xiàn)血者標(biāo)本8 800人份，初篩陽性標(biāo)本8份，初篩陽性率為0.09%，初篩陽性標(biāo)本經(jīng)WB確認(rèn)全部為陰性，與國內(nèi)外其他非流行區(qū)域或低流行區(qū)域調(diào)查報(bào)告相符。

輸血傳播HTLV－Ⅰ/Ⅱ主要引起HTLV－Ⅰ/Ⅱ相關(guān)脊髓病、熱帶痙攣性下肢輕癱(TSP)和脊髓病(HAM)，感染一般無任何癥狀，且存在親密接觸者傳播，輸血感染HTLV－Ⅰ潛伏期較短，可在輸注被感染的血液后1個(gè)月～4 a發(fā)病，而自然感染者通常在數(shù)年甚至數(shù)十年發(fā)病。為確保血液安全，預(yù)防HTLV－Ⅰ/Ⅱ的經(jīng)輸血傳播，日本于1986年開始對(duì)獻(xiàn)血者增加HTLV－Ⅰ/Ⅱ的常規(guī)檢測，美國于1988年開始對(duì)獻(xiàn)血者增加HTLV－Ⅰ/Ⅱ的檢測，目前國際上已有日本、美國、加拿大、法國、巴西、韓國和我國的香港、臺(tái)灣等國家和地區(qū)將HTLV－Ⅰ/Ⅱ列入獻(xiàn)血者常規(guī)篩查項(xiàng)目。近年來，有關(guān)HTLV－Ⅰ/Ⅱ所致疾病及各地區(qū)獻(xiàn)血者的HTLV－Ⅰ/Ⅱ感染情況越來越受到學(xué)者的關(guān)注。各地區(qū)也對(duì)當(dāng)?shù)孬I(xiàn)血者的HTLV－Ⅰ/Ⅱ感染情況做了不少研究。目前美國估計(jì)輸血傳播HTLV－Ⅰ的風(fēng)險(xiǎn)為1/64.1萬，法國為1/600萬，加拿大為1/430萬，資料顯示我國大陸人群的HTLV－Ⅰ/Ⅱ感染主要集中流行于福建沿海等地區(qū)。研究資料顯示HTLV流行地區(qū)和非流行地區(qū)的人群感染率不同，國外關(guān)于輸血傳播HTLV－Ⅰ的報(bào)道較多，國外流行區(qū)感染率達(dá)0.4%［2］。在流行地區(qū)，無癥狀的病毒攜帶者抗體陽性率明顯高于非流行地區(qū)，如日本北部Hokkaido非流行地區(qū)的抗體陽性率為0%，而西南部Nagasaki和Kagoshima流行地區(qū)人群抗體陽性率分別為16%和15%，并有明顯的聚集發(fā)病趨勢，但是隨著各地之間的交流日益頻繁，HTLV－Ⅰ/Ⅱ的傳播很可能由高流行區(qū)向低流行區(qū)甚至非流行區(qū)擴(kuò)散［2］。另外HTLV－Ⅰ/Ⅱ感染還與受血者的免疫力、輸注血液的種類、輸血次數(shù)、輸血多少存在有內(nèi)在關(guān)系。由于我國大部分地區(qū)獻(xiàn)血人群是HTLV－Ⅰ/Ⅱ低發(fā)區(qū)［3］，感染率較低，另外基于血液檢測成本考慮，我國大陸尚未將HTLV－Ⅰ/Ⅱ檢測列入獻(xiàn)血者常規(guī)篩查項(xiàng)目，僅在福建沿海等地開展無償獻(xiàn)血篩查。本次隨機(jī)檢測鄭州地區(qū)8 800名無償獻(xiàn)血者，沒有檢測出HTLV－Ⅰ/Ⅱ確認(rèn)陽性，應(yīng)該與鄭州地區(qū)屬于非流行區(qū)域有關(guān)，另外與調(diào)查樣本量和范圍有一定關(guān)系。本研究與近年來我國其他非流行區(qū)域檢測調(diào)查情況較為一致。

輸血傳播作為HTLV－Ⅰ/Ⅱ傳播的主要途徑，研究資料表明有15%～16%的患者通過輸血感染。目前預(yù)防HTLV－Ⅰ/Ⅱ經(jīng)輸血傳播有效的措施，一方面是加強(qiáng)無償獻(xiàn)血者HTLV－Ⅰ/Ⅱ的常規(guī)篩查工作，淘汰HTLV－Ⅰ/Ⅱ陽性血液，盡量避免通過輸血傳播HTLV－Ⅰ/Ⅱ的病例發(fā)生;另一方面由于HTLV－Ⅰ/Ⅱ病毒僅僅感染淋巴細(xì)胞，不會(huì)存在于血漿中，輸血傳播HTLV－Ⅰ和HTLV－Ⅱ均與輸注細(xì)胞成分有關(guān)，而輸注非細(xì)胞成分一般不會(huì)感染HTLV－Ⅰ/Ⅱ，因此使用濾除白細(xì)胞的血漿制品會(huì)大大減少輸血傳播HTLV－Ⅰ/Ⅱ的風(fēng)險(xiǎn)，通過去除血液中的白細(xì)胞成分可以阻止HTLV－Ⅰ/Ⅱ的傳播。所以對(duì)全血或濃縮細(xì)胞成分進(jìn)行濾白，特別是對(duì)細(xì)胞成分的濾白已取得很好的結(jié)果［3］。研究還表明，HTLV－Ⅰ/Ⅱ的感染力與血液儲(chǔ)存時(shí)間成反比，輸注存放14 d以上的血液成分不會(huì)傳播HTLV－Ⅰ/Ⅱ［2］。從此次調(diào)查分析來看，基于血液的安全性和血液檢測費(fèi)用的增加等多方面綜合因素考慮，在HTLV－Ⅰ/Ⅱ感染的低流行區(qū)域或非流行區(qū)域，沒有開展無償獻(xiàn)血者的HTLV－Ⅰ/Ⅱ常規(guī)檢測的地區(qū)，建議使用去白細(xì)胞的血液成分或存放14 d以上的血液成分，可有效預(yù)防或減少HTLV－Ⅰ/Ⅱ的經(jīng)輸血傳播，有效保障血源安全，確保受血者身體健康。

［1］付涌水.臨床輸血［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1998:306－307.

［2］徐冬峰，李海華，湯純柳.寧德市無償獻(xiàn)血人群HTLV－Ⅰ/Ⅱ感染情況調(diào)查［J］.中國輸血雜志，2015，28(1):64.

［3］劉煒，王芳，王雪妹，等.沈陽地區(qū)9050名無償獻(xiàn)血者HTLV－Ⅰ/Ⅱ感染狀況調(diào)查［J］.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2014，(4):590.