翟勇進(jìn)　黃浩　白隆華　姚紹嫦

摘 要：為了比較牛大力多糖在不同地理種源、不同類型、不同植株部位和不同采收季節(jié)時(shí)間差異，對(duì)廣西欽州市、隆安縣、上林縣、天峨縣4個(gè)野生種源進(jìn)行多糖含量測(cè)定，以篩選出最佳牛大力種源、用藥部位和采收季節(jié)。結(jié)果表明，上林縣蔓生型牛大力多糖含量明顯多于其他3個(gè)縣直立型牛大力，其次為隆安縣直立型牛大力，天峨縣的多糖含量最少；多糖含量最高的部位為根部，莖次之，葉的含量最少；牛大力在冬季采收，多糖含量顯著高于夏季采收。

關(guān)鍵詞：牛大力 種源 化學(xué)成分 多糖

牛大力（Millettia speciosa Champ.）為豆科（Leguminosae）崖豆藤屬（Millettia Wight et Arn.）美麗崖豆藤的塊根，又稱山蓮藕、牛古大力、大蓮藕、倒吊金鐘等。為嶺南地區(qū)著名的藥食兩用植物 [1]，主要成分為牛大力多糖，具有補(bǔ)肺滋腎、清熱止咳、舒筋活絡(luò)、提高免疫、抗炎、抗氧化和清除自由基作用和抗疲勞的作用[2-4]，主治肺虛咳嗽、咳血、腎虛、腰膝酸痛、遺精、白帶、風(fēng)濕痹痛、跌打損傷、慢性肝炎等[6-9]，同時(shí)毒副作用小，性質(zhì)穩(wěn)定、不易變性失活[10]，主要分布于廣西、海南和廣東等省區(qū) [11]，有直立和蔓生2種類型 [12]。隨著市場(chǎng)需求的不斷增大，種植面積成倍增加，選育優(yōu)良牛大力種源和類型成為當(dāng)前急需解決的關(guān)鍵問題，但相關(guān)研究報(bào)道極少。牛大力多糖是評(píng)價(jià)牛大力品質(zhì)的一個(gè)重要指標(biāo)，因此，擬研究通過對(duì)不同種源的牛大力多糖含量測(cè)定，為牛大力的選育和人工栽培提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料分別為廣西欽州市、隆安縣、上林縣、天峨縣4個(gè)市（縣）5年生及以上的野生牛大力，其中上林縣種源有蔓生和直立型2種類型，其他3個(gè)市（縣）均為直立型牛大力。采收時(shí)間為2014年8月和12月。洗凈臟物和泥土，自然曬干后用高速粉碎機(jī)將植株的根、莖、葉分別打粉，選取過40目標(biāo)準(zhǔn)篩后的粉末作為提取材料。

試驗(yàn)材料經(jīng)廣西壯族自治區(qū)藥用植物園白隆華研究員鑒定，為豆科崖豆藤屬牛大力（Millettia speciosa Champ.）。

1.2 主要儀器與試劑

主要儀器：北京博醫(yī)康實(shí)驗(yàn)儀器有限公司FD-1A-50冷凍干燥器；北京醫(yī)用離心機(jī)廠LG16-W離心機(jī)；Perkin Elmer Lamb-da35紫外光譜儀；Mettler Toledo AL204分析天平。

主要試劑：乙酸乙酯、正丁醇、苯酚、濃硫酸和葡萄糖，均為天津大茂化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，純度為分析純；蒸餾水。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 多糖提取和待測(cè)液制備

精確稱取牛大力根、莖、葉粉末樣品500 g，在60℃水浴條件下，用85 %乙醇溶液提取5次，每次0.6 L。合并提取液，減壓濃縮至80 mL，依次用乙酸乙酯和正丁醇萃取，冷凍干燥，最后獲得棕紅色浸膏即為牛大力多糖，置于干燥器中備用。

精確稱取上述制得的牛大力多糖各20.8 mg，溶解并分別定容至250 mL，待測(cè)量。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

參照文獻(xiàn)方法[2] ，精確稱取葡萄糖10.0 mg，溶解后定容至250 mL作為標(biāo)準(zhǔn)液。分別吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8 mL標(biāo)準(zhǔn)液，再分別用蒸餾水補(bǔ)足至2 mL。再加入6 %苯酚溶液1.0 mL和濃硫酸5.0 mL，靜止10 min，搖勻，室溫下靜置20 min，然后在490 nm波長處測(cè)量吸光度。

以濃度為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：

Y=0.0080X+0.005 （r=0.997）

1.3.3 牛大力多糖測(cè)量

分別吸取0.2、0.6、1.2 mL牛大力樣品溶液，用蒸餾水補(bǔ)足至2 mL（對(duì)照用2 mL蒸餾水），再加入6 %苯酚溶液1.0 mL和濃硫酸5.0 mL，靜止10 min，搖勻，室溫下靜置20 min，然后在490 nm波長處測(cè)量吸光度。按標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算平均濃度值，再按以下公式計(jì)算多糖含量：

多糖含量（%）=[（C×8）/V] ×250÷20.8 ×100

C：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程算出平均濃度

V：樣品體積

2 結(jié)果與分析

2.1 不同牛大力種源根部多糖含量差異

對(duì)2014年12月采收的4個(gè)種源，進(jìn)行牛大力多糖含量測(cè)定，結(jié)果見表1。不同牛大力種源根的多糖含量差異明顯，來源為隆安和上林的含量較高，分別為 17.8 %和17.2 %，天峨縣的最低，只有5.5 %，約為隆安和上林產(chǎn)牛大力塊根多糖含量的1/3左右，差異達(dá)顯著水平。

2.2 不同植株類型、部位牛大力多糖含量的差異

直立型牛大力和蔓生型藤本牛大力是目前栽培的2個(gè)類型，2014年8月，分別取上林縣直立型和蔓生型2種藥材的根、莖和葉進(jìn)行多糖含量分析，結(jié)果見表2。從表中可看出，不管是直立型還是蔓生型類型，多糖含量高低的部位均依次為根、莖、葉，根部的量均不低于6.00 %，而莖在3.50 %左右，葉較低，均不超過1.60 %。而在不同植株類型中，蔓生型根、莖、葉中牛大力多糖的含量均高于直立型。

2.3 不同采收時(shí)期對(duì)多糖含量的影響

上林縣直立型和蔓生型2種植株在8月和12月采收的根部多糖含量結(jié)果見表3?？梢姴煌墒諘r(shí)間牛大力根部多糖的含量差異明顯（表3）。在冬季12月采收，直立型牛大力和蔓生型藤本牛大力2個(gè)類型的多糖含量分別為17.8 %和17.2 %，明顯高于8月份采收的含量（分別為6.08 %和6.58 %），即12月份的牛大力多糖含量顯著高于8月份。這可能與春、夏、秋初季節(jié)是植物營養(yǎng)生長時(shí)期，而冬季是植物營養(yǎng)成分積累時(shí)期有關(guān)。這與傳統(tǒng)根莖類藥材在冬季采收是一致的[12]。但在同一季節(jié)采集，直立型和蔓生型根部多糖含量差異不顯著。

3 結(jié)論

在試驗(yàn)的4個(gè)種源中，隆安縣和上林縣牛大力種源的多糖含量較高，表明原產(chǎn)地的土壤、濕度、光照、溫度、pH值等環(huán)境因素對(duì)牛大力多糖積累有明顯的影響，這與段左俊等[13]研究結(jié)果相同；而蔓生型和直立型的多糖含量差異不明顯。牛大力多糖含量在根、莖、葉均有分布，含量高低依次為根、莖、葉。盡管在莖和葉中，牛大力多糖的含量相對(duì)較低，但仍可加以利用 [14-15]。

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