鮑群麗，汪宏良，柯 俊,羅卓躍

(1.湖北省黃石市中心醫(yī)院檢驗科 435000;2.湖北省黃石市腎臟疾病發(fā)生與干預(yù)湖北省重點實驗室 435000)

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·論 著·

醫(yī)院內(nèi)外感染葡萄球菌的耐藥性分析*

鮑群麗1，汪宏良2△，柯 俊1,羅卓躍1

(1.湖北省黃石市中心醫(yī)院檢驗科 435000;2.湖北省黃石市腎臟疾病發(fā)生與干預(yù)湖北省重點實驗室 435000)

目的 分析醫(yī)院內(nèi)與院外感染葡萄球菌的耐藥性，為臨床用藥提供依據(jù)。方法 收集2011年1月至2013年12月黃石市中心醫(yī)院門診(院外)、住院(院內(nèi))患者各種標(biāo)本中分離的454株葡萄球菌，用VITEK-32專用卡GPI及血漿凝固酶試驗進(jìn)行鑒定，藥敏試驗按K-B瓊脂擴(kuò)散法進(jìn)行，根據(jù)美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會 2006對頭孢西丁的耐藥情況進(jìn)行分類分析，數(shù)據(jù)分析用WHONET 5.5藥敏分析軟件。結(jié)果 在379株金黃色葡萄球菌(SA)中，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)檢出率為41.2%，醫(yī)院內(nèi)、外標(biāo)本MRSA檢出率分別為44.1%和19.6%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；共檢出凝固酶陰性葡萄球菌75株，醫(yī)院內(nèi)、外標(biāo)本耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)檢出率分別為61.1%和38.1%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P<0．05)。未檢出萬古霉素、替考拉寧耐藥菌株。結(jié)論 耐甲氧西林葡萄球菌具有多重耐藥性；院外SA感染者首選藥物為慶大霉素、苯唑西林；若為院內(nèi)SA和對于MRCNS引起的不論是院內(nèi)或院外感染，均推薦首選萬古霉素或替考拉寧。

醫(yī)院內(nèi)； 醫(yī)院外； 金黃色葡萄球菌； 凝固酶陰性葡萄球菌； 耐藥性

近年來，有研究表明，葡萄球菌是引起醫(yī)院及社區(qū)獲得性感染的主要致病菌之一，同時亦發(fā)現(xiàn)引起醫(yī)院和社區(qū)感染的葡萄球菌耐藥性存在較大區(qū)別[1]。因此，加強黃石地區(qū)葡萄球菌的耐藥性監(jiān)測，對制訂經(jīng)驗治療方案及細(xì)菌耐藥性防治具有重要參考價值，對有效控制多重耐藥葡萄球菌的流行和傳播具有重要意義。為了探討黃石地區(qū)院內(nèi)與院外感染的葡萄球菌對某些常用抗菌藥物的耐藥性，作者對2011年1月至2013年12月在黃石市中心醫(yī)院住院與門診患者分離的葡萄球菌進(jìn)行藥敏試驗和耐藥性分析，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011年1月至2013年12月黃石市中心醫(yī)院各種標(biāo)本中分離的葡萄球菌共454株，均為非重復(fù)菌株，其中來自門診患者67株，住院患者387株；金黃色葡萄球菌379株，凝固酶陰性葡萄球菌75株。

1.2 儀器與試劑 全自動細(xì)菌鑒定儀VITEK-32系統(tǒng)和配套鑒定卡GPI(法國生物梅里埃公司產(chǎn)品)。M-H瓊脂購于杭州天和微生物試劑有限公司。藥敏紙片系Oxoid公司產(chǎn)品。質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌(ATCC 25923)由衛(wèi)生部臨床檢驗中心提供,所有藥敏質(zhì)控結(jié)果符合美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)最新頒布的藥敏質(zhì)控范圍。

1.3 細(xì)菌鑒定及藥敏試驗 細(xì)菌分離培養(yǎng)按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進(jìn)行[2]，用VITEK-32專用卡GPI及血漿凝固酶試驗進(jìn)行鑒定，嚴(yán)格按照操作說明進(jìn)行操作。耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)檢測：采用M-H培養(yǎng)基，K-B瓊脂擴(kuò)散法，結(jié)果判斷按CLSI 2006年版標(biāo)準(zhǔn)[3]。MRS判斷標(biāo)準(zhǔn)：用30 μg頭孢西丁藥敏紙片代替1 μg苯唑西林，抑菌環(huán)直徑小于或等于19 mm判為耐藥MRS，抑菌環(huán)直徑大于19 mm判為甲氧西林敏感葡萄球菌。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 用WHONET 5.5藥敏分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，統(tǒng)計方法采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 454株葡萄球菌中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)及MRS檢出結(jié)果 見表1。檢出金黃色葡萄球菌379株，其中院內(nèi)MRSA 147株,院外MRSA 9株；凝固酶陰性葡萄球菌75株，其中院內(nèi)MRCNS 33株,院外MRCNS 8株。檢出MRS 197株，其中院內(nèi)MRS 180株,院外MRS 17株，院外與院內(nèi)MRS檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；院外與院內(nèi)MRSA檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；院外與院內(nèi)MRCNS檢出率差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表1 454株葡萄球菌MRSA、MRCNS及MRS檢出結(jié)果[n(%)]

表2 14種抗菌藥物的耐藥率(%)

2.2 耐藥率結(jié)果 見表2。由表2可見，除萬古霉素、替考拉寧外，院內(nèi)與院外感染的葡萄球菌對其余12種抗菌藥物中絕大部分藥物耐藥率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．05)。院外金黃色葡萄球菌對14種抗菌藥物除青霉素G、紅霉素、復(fù)方磺胺甲噁唑、阿奇霉素耐藥率較高外，對其余抗菌藥物的耐藥率均小于30.0%，未發(fā)現(xiàn)萬古霉素和替考拉寧耐藥菌株。凝固酶陰性葡萄球菌耐藥性統(tǒng)計結(jié)果顯示其具有嚴(yán)重的多重耐藥性，院內(nèi)與院外凝固酶陰性葡萄球菌耐藥率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。所有凝固酶陰性葡萄球菌菌株對青霉素G耐藥率最高，達(dá)90.0%以上，MRS耐藥率小于40.0%者僅有慶大霉素、萬古霉素、替考拉寧3種抗菌藥物。

3 討 論

隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，出現(xiàn)了大量的臨床耐藥致病菌。MRSA和MRCNS都是醫(yī)院感染的重要致病菌，特別是MRSA，其對多種抗菌藥物產(chǎn)生耐藥性，它導(dǎo)致的各種感染治療困難，病死率較高，早已引起醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注[4]。本文分離的454株葡萄球菌中MRSA 156株，MRCNS 41株，MRSA分離株明顯高于MRCNS株數(shù)。MRCNS醫(yī)院感染率低于MRSA的主要原因可能是MRCNS的致病性相對較弱，其治療效果比MRSA感染者好，部分病例因經(jīng)驗治療有效而未能及時留取標(biāo)本送檢，可能存在漏診現(xiàn)象。另外，MRCNS感染者的病程相對較短，傳播他人的機會相對減少。

自發(fā)現(xiàn)MRS以來，我國近年來各地報道的MRS檢出率高低不一，在30%～95%，具有較大差異，但總體呈上升趨勢[5-7]。黃石市中心醫(yī)院MRS檢出率為43.4%，與文獻(xiàn)[6-8]報道有一定差異。國內(nèi)MRS檢出率的差異提示，不同時期和地域MRS感染與流行情況有較明顯的差別，造成這一差別的可能原因是各地對抗菌藥物使用情況不同，從而導(dǎo)致細(xì)菌的耐藥性變異不同[8]。

根據(jù)本研究統(tǒng)計結(jié)果可以看出，黃石市中心醫(yī)院住院患者M(jìn)RS檢出率(46.5%)明顯高于門診患者M(jìn)RS檢出率(25.4%)，其中金黃色葡萄球菌院內(nèi)與院外MRSA檢出率分別為44.1%和19.6%；院內(nèi)與院外MRCNS檢出率分別為61.1%和38.1%。這提示加強院內(nèi)感染的管理，積極采取各種消毒隔離措施，對預(yù)防MRS在醫(yī)院內(nèi)傳播和流行具有十分重要的意義。

從耐藥性檢測結(jié)果可見，除萬古霉素、替考拉寧外，院內(nèi)與院外感染的葡萄球菌對其余12種抗菌藥物中絕大部分藥物耐藥率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．05)。院外金黃色葡萄球菌對14種抗菌藥物除青霉素G、紅霉素、復(fù)方磺胺甲噁唑、阿奇霉素耐藥率較高外，對其余抗菌藥物的耐藥率均小于30.0%。未發(fā)現(xiàn)萬古霉素和替考拉寧耐藥菌株，這提示院外金黃色葡萄球菌的耐藥率較低，有別于院內(nèi)金黃色葡萄球菌和所有凝固酶陰性葡萄球菌菌株，且MRSA檢出率低。因此如果金黃色葡萄球菌為院外感染，首選藥物可為慶大霉素、苯唑西林等而不是萬古霉素。若為院內(nèi)金黃色葡萄球菌感染，由于MRSA檢出率較高，多重耐藥嚴(yán)重，推薦首選萬古霉素或替考拉寧。

凝固酶陰性葡萄球菌耐藥性統(tǒng)計結(jié)果顯示其具有嚴(yán)重的多重耐藥性，院內(nèi)與院外凝固酶陰性葡萄球菌耐藥率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。所有凝固酶陰性葡萄球菌菌株對青霉素G耐藥率最高，達(dá)90.0%以上，MRS耐藥率小于40.0%者僅有慶大霉素、萬古霉素、替考拉寧3種抗菌藥物，由此可見院內(nèi)與院外凝固酶陰性葡萄球菌耐藥性雖有部分差異，但均存在嚴(yán)重的多重耐藥或交叉耐藥。

因此，對于MRCNS引起的不論是院內(nèi)或院外感染，推薦首選的藥物都是萬古霉素或替考拉寧。

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Analysis of drug resistance of staphylococcus in patients infected inside and outside hospitals*

BAOQun-li1,WANGHong-liang2△，KEJun1，LUOZhuo-yue1

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,theCentralHospitalofHuangshiCity,Huangshi,Hubei435000,China;2.HubeiKeyLaboratoryofKidneyDiseasePathogenesisandInterventionofHuangshiCity，Huangshi,Hubei435000,China)

Objective To analyze the drug resistance of staphylococcus aureus(SA) in patients infected inside and outside hospitals in order to provide a basis for clinical drug use.Methods A total of 454 strains of staph were discreted from various kinds of examples of patients inside and outside hospitals in the hospital from Jan 2011 to Dec 2013，which were identified with GPI of VITEK-32 system and plasma-coagulase test，the disk diffusion method and classification analysis about drug fast of cefoxitin was performed according to guidelines of the CLSI (2006),WHONET 5.5 software was used to analyze the data.Results The detection rate of methicillin resistant staphylococcus aureus(MRSA) was 41.2% of all 379 strains SA，which was 44.1% and 19.6% of samples inside and outside hospitals,respectively,the difference was statistically significant(P<0.05)；in total,75 strains coagulase negative staphylococcus(CNS) were collected,the detection rate of methicillin resistant coagulase negative staphylococcus(MRCNS) was 61.1% and 38.1% of samples inside and outside hospitals,respectively,the difference was statistically significant(P<0．05).The drug resistant strain about vancomycin、teicoplanin wasn′t been detected.Conclusion MRS had multidrug resistance,the choice drug of patients infected outside hospitals by SA was gentamycin、oxacillin;if hospital onset of infection of SA and hospital onset of infection or community infection of MRCNS,the choice drug was vancomycin or teicoplanin.

inside hospitals; outside hospitals; staphylococcus aureus; coagulase negative staphylococcus; drug resistance

湖北省黃石市醫(yī)藥衛(wèi)生立項科研項目[黃科農(nóng)社(2011)1號]。

鮑群麗，女，碩士，主管技師，主要從事病原微生物快速檢測與耐藥方面的研究。

△通訊作者，E-mail：bql117@163.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.03.018

A

1672-9455(2015)03-0332-02

2014-08-07

2014-10-16)