張吉麗，司鴻飛，李冰，周緒正，張繼瑜

(中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州畜牧與獸藥研究所 農(nóng)業(yè)部獸藥創(chuàng)制重點實驗室，蘭州 730050)

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五氯柳胺的研究進展

張吉麗，司鴻飛，李冰，周緒正，張繼瑜*

(中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州畜牧與獸藥研究所 農(nóng)業(yè)部獸藥創(chuàng)制重點實驗室，蘭州 730050)

五氯柳胺是水楊酰苯胺類抗寄生蟲類化學藥物，主要用于治療牛、羊的肝片吸蟲感染引起的疾病，對絳蟲和線蟲也有良好的治療效果。本文主要對五氯柳胺的理化性質(zhì)、作用機制、臨床藥效、毒理及殘留等方面的研究進展與展望進行了綜述，以期對五氯柳胺上市制劑的研究和開發(fā)提供參考。

五氯柳胺；理化性質(zhì)；作用機制；臨床藥效；藥物殘留

寄生蟲類疾病的流行不僅阻礙著畜牧業(yè)的發(fā)展，危害著人類的健康，也造成了嚴重的經(jīng)濟損失。隨著科學技術的進步，整體生活環(huán)境的提高，寄生蟲類疾病得到了一定的控制，但在我國部分地區(qū)由于經(jīng)濟條件、飲食習慣的影響，寄生蟲感染的發(fā)病率仍然較高，其中蠕蟲感染最為常見。2011年底至2012年初，云南省賓川縣出現(xiàn)大片形吸蟲的消息引起了國家、省、市、縣領導高度重視[1]。據(jù)調(diào)查，在我國29個省市仍然有豬帶絳蟲感染，特別是在農(nóng)村地區(qū)更為流行。據(jù)統(tǒng)計，我國肝吸蟲病的平均感染率逐年上升，在廣東、廣西、吉林等地區(qū)上升幅度最為明顯，分別為182%、164%、630%，經(jīng)濟損失巨大[2]。在全球約20億人受到蠕蟲感染，廣泛分布在熱帶和亞熱帶地區(qū)，撒哈拉以南非洲、美洲和東亞地區(qū)感染數(shù)最多[3]。五氯柳胺作為一種抗蠕蟲感染的化學合成藥物，具有廣譜，低毒，低殘留等優(yōu)良特性，在治療吸蟲、絳蟲等蠕蟲感染中效果顯著，且至今為止沒有相關耐藥性的報道，是臨床抗蠕蟲感染的首選。國外對于五氯柳胺的研究較早，特別是在印度、英國、美國等寄生蟲感染的高發(fā)病地區(qū)，已有大量研究表明該藥具有較好的驅(qū)蟲效果，應用十分廣泛。國內(nèi)尚未對該藥進行系統(tǒng)研究和相關報道。本文主要通過對五氯柳胺的理化性質(zhì)、作用機制、臨床應用效果以及其毒性、殘留等方面進行綜述，以期為該藥在我國開展相關研究與臨床應用提供參考資料。

1 五氯柳胺的理化性質(zhì)及合成過程

五氯柳胺也稱羥氯柳胺、羥氯柳苯胺和羥氯扎胺等，是水楊酰苯胺類抗寄生蟲類化學藥物，其分子式為C13H6Cl5NO3，如圖1所示，化學名為：2,3,5,-三氯-N-(3,5-二氯-2-羥基苯基)-6-羥基苯甲酰胺。五氯柳胺的粉末為米白色或米色，無味或幾乎無味。它不溶于水，易溶于丙酮，溶于乙醇(96%)，微溶于氯仿。在制劑生產(chǎn)過程中，要充分考慮到該藥的水不溶性等特性，國外常常采用混懸制劑，既解決了上述問題，也在一定程度上提高了該藥的生物利用度。五氯柳胺的熔點較高，在208 ℃左右。在紫外區(qū)300 nm處有最大光吸收，吸光度為0.76，為其含量測定提供了參考。五氯柳胺的合成過程并不復雜，如圖2所示，劉祥宜等[4]通過2,4-二氯苯酚為原料，經(jīng)稀硝酸硝化得到2,4-二氯-6-硝基苯酚后，再經(jīng)水合肼還原得到2-氨基-4,6-二氯苯酚，該物質(zhì)在氯化亞砜作用下,與3,5,6-三氯水楊酸縮合可以得到五氯柳胺粗品。然后，在甲醇中精制得到五氯柳胺成品。

圖1 五氯柳胺化學結構

圖2 五氯柳胺的合成過程

2 五氯柳胺的作用機制

在20世紀中后期，國外關于五氯柳胺作用機制的研究工作陸續(xù)開展，并相繼報道了五氯柳胺作為一種氧化磷酸化解偶聯(lián)劑，在治療牛、羊的吸蟲感染引起的疾病中呈現(xiàn)良好治療效果。此外，該藥對絳蟲也有很好的驅(qū)殺作用。同其他的水楊酰苯胺類抗寄生蟲藥一樣，五氯柳胺是一種氧化磷酸化解偶聯(lián)劑，其主要的作用機理是通過阻斷蟲體的氧化磷酸化過程，抑制蟲體線粒體中的三磷酸腺苷(ATP)即能量的產(chǎn)生，從而導致蟲體因能量代謝紊亂而死亡[5]。Edwards等[6]初步設想五氯柳胺是氧化磷酸化的解偶聯(lián)劑，可以提高膽管中肝片吸蟲耗氧能力，使ATP水平下降，有時還會引起肝片吸蟲的神經(jīng)毒性損傷。Corbett等[7]在用氧電極法進行大鼠肝線粒體測試時發(fā)現(xiàn)五氯柳胺的最小解偶聯(lián)濃度是3×10-6～4×10-6mol/L。

3 五氯柳胺的臨床藥效學

多年來，國內(nèi)外的專家學者利用牛、羊等動物對五氯柳胺進行了大量的臨床實驗，證明五氯柳胺在抗蠕蟲感染過程中，具有良好的療效，特別是在治療肝片吸蟲感染方面效果顯著，并且未出現(xiàn)耐藥性現(xiàn)象，是抗蠕蟲藥物的首選[8]。

Sanabria等[9]在用五氯柳胺治療Paramphistomumleydeni自然感染的成年羊時，以20 mg/kg.bw給藥，在治療后的3 d和5 d，分別取糞便樣品，通過糞便蟲卵計數(shù)來評價藥效。治療后，治療組與對照組對比顯示：五氯柳胺治療組蟲體減少99%，可見，五氯柳胺對Paramphistomumleydeni感染非常有效。

Galdhar等[10]將感染前后盤吸蟲病的12頭水牛隨機分為兩個組。一組用五氯柳胺劑量為10 mg/kg.bw治療；第二組不給予治療。在治療后0、7、14、21 d后，分別取糞便樣品，通過糞便蟲卵計數(shù)的減少量，臨床癥狀的消失以及各項生化指標的改善來評價藥效。結果同樣表明，五氯柳胺在對抗Paramphistome感染水牛的治療中效果較好，治療后水牛的臨床生化參數(shù)最終恢復到正常值。

Paraud等[11]用五氯柳胺治療Calicophorondaubney感染的山羊，在感染后第10天，蟲卵未成熟階段，用22.5 mg/kg.bw劑量的五氯柳胺治療，蟲體減少82%。在蠕蟲感染后的131 d的成熟階段，分別以劑量15 mg/kg.bw和22.5 mg/kg.bw治療，觀察效果。以劑量為15 mg/kg.bw的五氯柳胺治療時，蠕蟲減少95.6%；同時，以劑量為22.5 mg/kg.bw的五氯柳胺治療時，蟲體減少了95.9%，可見兩個劑量間沒有明顯差異。實驗證明五氯柳胺在治療Calicophorondaubney感染山羊的成熟階段非常有效。

Athar等[12]在用五氯柳胺治療牛蠕蟲感染時，第14天后治療的效果較好，糞便中蟲卵數(shù)明顯降低，水牛糞便蟲卵減少了96.66%，黃牛糞便中的蟲卵數(shù)減少了95.64%。并且在治療后，兩種牛的體重均升高。

此外，大量文獻顯示，五氯柳胺在與其他抗蠕蟲藥物進行對比治療中，表現(xiàn)出良好的治療效果，還可用于治療對其他藥物具有耐藥性的蠕蟲感染。Arias等[13]在治療抗Calicophoron(Paramphistomum)daubneyi感染的牛時，分別采用的四種藥物進行對比治療，五氯柳胺的效果最好，驅(qū)蟲效果達到90%以上。Mooney 等[14]采用多種抗寄生蟲藥對比治療肝片吸蟲感染羊的過程中，在感染后7、14、21、56 d分別收集糞便樣品，進行處理，發(fā)現(xiàn)在用五氯柳胺治療第14天后，糞便中蟲卵數(shù)減少到100%。實驗證明在治療對三氯苯達唑等有耐藥性的寄生蟲感染時，五氯柳胺治療組的效果顯著。Coles等[15]在用四種藥物治療對三氯苯達唑具有耐藥性的吸蟲感染中，五氯柳胺和左旋咪唑聯(lián)合應用效果最好。Verma等[16]以劑量10 mg/kg.bw的五氯柳胺和和10 mL/50 kg.bw的三氯苯達唑治療后，貧血癥狀消除，白細胞、中性粒細胞、嗜酸性粒細胞增多現(xiàn)象得到恢復。五氯柳胺治療組在第28天的治愈率為100%，治療效果比三氯苯達唑好。Piňeiro等[17]分別用萘托比胺和五氯柳胺治療感染吸蟲的牛時，7頭牛作為對照組，14頭牛用萘托比胺治療，15頭用五氯柳胺治療，治療后的第13周檢查糞便中蟲卵數(shù)發(fā)現(xiàn)，五氯柳胺治療組幾乎痊愈，萘托比胺治療組蟲卵減少了64%。Hopkins等[18]實驗證明五氯柳胺在低劑量為4 mg/kg可以驅(qū)除鼠膽管中的小口膜殼絳蟲。

4 五氯柳胺的毒理及殘留

五氯柳胺毒性較低，幾乎無殘留。歐洲醫(yī)藥產(chǎn)品評價機構對五氯柳胺的總結報告中顯示：五氯柳胺在牛中的推薦使用劑量為10～15 mg/kg.bw，綿羊和山羊的使用劑量為15 mg/kg.bw。大鼠急性口服五氯柳胺的半數(shù)致死量(LD50)為3519 mg/kg.bw。急性癥狀為：腹瀉，呼吸加快，嗜睡，剖檢中可見多個器官充血，還有肝中毒癥狀。歐盟委員會要求五氯柳胺在動物肌肉和脂肪中的殘留量為20 μg/kg，在腎臟中的殘留量為100 μg/kg，肝臟中的殘留量在500 μg/kg以下。澳大利亞藥品以及食品法典委員會均已制定了五氯柳胺用于牛和羊的肌肉、脂肪、腎臟以及肝臟中的殘留限度，與歐盟委員會所制訂的殘留標準相同[19]。國外試驗表明,綿羊?qū)ξ迓攘返淖畲竽褪芰靠蛇_60 mg/kg.bw。牛按60～75 mg/kg.bw劑量投藥，有可能引起死亡。國外按13.1～28.5 mg/kg.bw的劑量口服治療鹿肝片吸蟲感染時，不僅能殺滅吸蟲，對鹿也無任何的毒副作用[20]。

Takeba等[21]將牛奶樣品經(jīng)處理后，用高效液相色譜法和雙電極電量檢測法測定牛奶中的殘留范圍為0.01～0.1 μg/kg。Whelan等[22]將六頭患病奶牛在用五氯柳胺治療長達16 d，牛奶樣品用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析，五氯柳胺的殘留量小于25 μg/kg，低于一般殘留限度。王偉等[23]在采用高效液相色譜法檢測液態(tài)奶中的五氯柳胺的殘留在 5～500 μg/kg 范圍內(nèi)線性關系良好，相關系數(shù)均不低于0.99；檢出限和定量限均低于歐盟的 MRL值，滿足殘留檢測的要求。Sakamoto等[24]實驗證明利用液質(zhì)聯(lián)用方法檢測五氯柳胺等藥物在牛奶中的殘留含量在5～600 μg/kg，低于日本的最低殘留限量。Jo等[25]用高效液相色譜法檢測牛奶和牛肉中的五氯柳胺殘留量，利用反向色譜測得牛奶和牛肉中的五氯柳胺含量在分別為9.7 μg/kg和9.8 μg/kg，殘留量極低。五氯柳胺給藥消退期在肌肉和臟器的消退期在28 d，牛奶中消退期是72 h。

其次，五氯柳胺的副作用較輕微，在正常給藥劑量時，可能會出現(xiàn)牛、羊的糞便輕微的軟化，極個別的動物可能會出現(xiàn)排便次數(shù)增多，短暫性的食欲不振等現(xiàn)象。對于奶牛等經(jīng)濟動物可能會出現(xiàn)產(chǎn)奶量少量下降，但隨著療程的結束，各種癥狀均會消失，患畜的各項指標均會恢復正常。此外，五氯柳胺可用于幼畜、孕期及哺乳期動物。五氯柳胺口服給藥后，24 h血漿中濃度緩慢上升。該藥主要通過糞便排泄，藥物消除過程通過膽汁排泄。

5 展望

動物寄生蟲病是動物常發(fā)且造成巨大損失的傳染病，藥物防治是寄生蟲病防控的關鍵，并將長期伴隨畜牧養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。隨著一些廣譜、低毒、高效的抗寄生蟲藥物的應用，使寄生蟲類疾病得到了較好的控制，與此同時，耐藥性的出現(xiàn)，也成為了臨床用藥的重要障礙。五氯柳胺作為化學合成類抗寄生蟲藥物，具有性質(zhì)穩(wěn)定，療效顯著等優(yōu)點，是新型、高效、安全的抗蠕蟲藥物，且該藥具備無污染、低殘留等良好的理化性質(zhì)，與其他具有相似作用的三氯苯達唑、氯苯碘柳胺、阿苯達唑等藥物相比，五氯柳胺至今未出現(xiàn)耐藥性的相關報道，并憑借其顯著的治療效果在國外廣泛使用。

五氯柳胺是當前抗蠕蟲的必然選擇，具有良好的應用前景。國外對五氯柳胺的研究工作自上世紀五十年代開始，至今為止，已經(jīng)上市的制劑有五氯柳胺片劑：OKZAN-F，口服混懸劑(Oxyclozanide Oral Suspension)：ZANIL Fluke Drench 34 mg/mL Oral Suspension，以及與其他藥物復方制劑如：Oxyclozanide 3%W/V & Levamisole 1.5%W/V Suspension、Levamisole+Oxyclozanide Tablets等。而目前國內(nèi)對五氯柳胺的研究僅停留在原料藥方面，還沒有上市的制劑。為了適應國內(nèi)獸醫(yī)臨床對五氯柳胺的需求，開發(fā)和研制一種或幾種五氯柳胺的制劑，克服其水不溶性，使其在臨床應用過程中，更好的發(fā)揮其治療作用，是科研工作者的努力方向。

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(編輯：侯向輝)

Progress in Research of Oxyclozanide

ZHANG Ji-li，SI Hong-fei，LI Bing，ZHOU Xu-zheng，ZHANG Ji-yu*

(KeyLaboratoryofVeterinaryPharmaceuticalDevelopment,MinistryofAgriculture,LanzhouInstituteofHusbandryandPharmaceuticalSciencesofCAAS,Lanzhou730050,China)

Oxyclozanide is a chemical anti-parasite drug of Salicylanilide,it can treat the disease of cattles and sheep infected with fasciola,and has a good treatment to against tapeworms and nematodes.The physical and chemical properties, mechanism of action, clinical application, toxicology and residue of oxyclozanide were reviewed in this paper to provide a reference listed onoxyclozanide formulations research and development.

oxyclozanide;physical and chemical properties;mechanism of action；clinical application;drug residue

國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術體系專項(CAR-38)；“十二五”國家科技支撐計劃項(2015BAD1101)

張吉麗，碩士在讀，從事動物抗寄生蟲藥研究。

張繼瑜。E-mail: infzjy@sina.com

2015-10-16

A

1002-1280 (2015) 11-0065-05

S859.795