盧東升 張偉 黃新華 謝正萍

(信陽師范學院,信陽,464000)

豫南野生假蜜環(huán)菌生物學特征1)

盧東升 張偉 黃新華 謝正萍

(信陽師范學院,信陽,464000)

通過野外調查和室內試驗，對豫南野生假蜜環(huán)菌(Armillariellatabescens)形態(tài)及生態(tài)特征進行了研究。結果表明：野生假蜜環(huán)菌在豫南分布普遍，每年6至7月份發(fā)生于茶樹(Camelliasinensis)和板栗(Castaneamollissima)間作林內或其它闊葉林內。子實體棕褐色，多叢生，形態(tài)美，香味濃，具優(yōu)良商品性狀。菌體由菌蓋和菌柄組成，無菌托和菌環(huán)。菌蓋菌肉和菌柄菌肉均由菌絲組成，菌絲無色透明，具隔、具分枝，無鎖狀聯(lián)合現(xiàn)象。菌蓋表面鱗片由黃棕色菌絲構成，菌絲細胞壁有內凸增厚現(xiàn)象。菌褶延生，子實層由幼擔子、擔子及擔孢子組成。成熟擔子頂端產生4粒擔孢子。在不同培養(yǎng)基上，菌落及菌絲形態(tài)有明顯差異。在PSA綜合培養(yǎng)基上不產生菌索，暗處可產生較強熒光，并形成菌皮。菌皮由表面粗糙的菌絲和泡囊組成。

豫南；假蜜環(huán)菌；形態(tài)學；生態(tài)學

We studied the biological characteristic ofArmillariatabescensin the south area of Henan Province by field investigation and indoor test. The fungal specie distributed generally in the area. It occurred in the tea plants and Chinese chestnut stripping forests or other broad-leaved forests in June and July every year. Its sporocarps was dark brown, treeing, aesthetic and perfumed.Armillariatabescenswas with quality commodity property. The fruit body was compose of pileus and stipe, no volva and annulus. The pileus and stipe were all constituted with hyphas. The hyphas were colourless, transparence, embranchment and with septas. But it was with no lock connections. The scale of pileus was constituted with yellow brown hyphas and the hyphas cell wall thickened to cell cavity. The lamella was occurred and its hymenium consisted of young basidia, basidia and basidiospores. Every mature basidium produced four basidiospores at its top. The colony and mycelium morphology had obvious difference in the different culture media. The fungus did not produce rhizomorphs in the PSA synthetic medium. But it could form mycodermas, the mycoderma was formed by surface roughness hyphae and vesicles, and it emitted an stranger fluorescence in the dark.

假蜜環(huán)菌(Armillariellatabescens(Scop.:Fr.) Sing)又名亮菌、小蜜環(huán)菌，是真菌界，擔子菌門，傘菌綱，傘菌目，白蘑科，蜜環(huán)菌屬真菌[1]187。該菌為藥食兼用菌，研究表明，假蜜環(huán)菌可產生多糖、多肽、亮菌素、亮菌乙素等有效成分，可顯著提高機體免疫機能，對膽囊炎、急慢性肝炎、胃炎等均有一定的療效，并有抗腫瘤活性[2-3]。前人已對假蜜環(huán)菌形態(tài)、生理、生態(tài)、藥用成分等進行了初步研究和記述[4-10]。假蜜環(huán)菌為重要經(jīng)濟真菌，對其進行商業(yè)化栽培、開發(fā)與利用，需要系統(tǒng)研究其形態(tài)、生態(tài)等生物學特征，但此方面研究較少，資料尚不系統(tǒng)。信陽位于河南省南部，地處亞熱帶至暖溫帶過渡區(qū)域，年平均氣溫15.3 ℃，無霜期200～230 d，年降水量約1 100 mm，此區(qū)溫暖適中，野生動植物資源豐富。有關該區(qū)野生假蜜環(huán)菌的系統(tǒng)研究未見報道，筆者于2013年6月份至2014年8月份在野外調查的基礎上，對其形態(tài)、生態(tài)等生物學特征進行了研究，旨在為人工栽培及開發(fā)利用提供基礎資料。

1 材料與方法

試驗材料：子實體從豫南地區(qū)野外采集。PSA培養(yǎng)基(土豆200.0 g，蔗糖20.0 g，瓊脂20.0 g，水1.0 L)；PSA綜合培養(yǎng)基(土豆200.0 g，麥皮100.0 g，蔗糖20.0 g，磷酸二氫鉀3.0 g，硫酸鎂1.5 g，瓊脂20.0 g，水1.0 L)，2種培養(yǎng)基均按常規(guī)方法制作成平板待用。

野外調查：在假蜜環(huán)菌發(fā)生季節(jié)，深入豫南各地，對其生長狀況及生長環(huán)境，如植被、土壤類型及酸堿度、光照、溫度、濕度等環(huán)境因子進行測量和記載。同時采集子實體新鮮標本，供室內解剖觀察及菌種分離。

形態(tài)學觀測：對子實體株高、株質量、叢質量、柄長、柄粗、菌蓋直徑、菌褶著生方式等進行觀察記載；取典型子實體縱切，對菌蓋、菌柄內部結構特征進行觀察，并用徙手切片法及臨時制片技術，用OLYMPUS顯微鏡對菌蓋、菌柄菌肉，菌蓋表面鱗片、菌褶等顯微結構特征進行觀測，有關數(shù)據(jù)使用創(chuàng)維MIE顯微圖像處理軟件進行處理。取子實體保留菌柄上端0.5 cm，其余切除。將菌褶朝下放于保濕培養(yǎng)皿內，皿內貼放黑白兩色紙，將處理子實體及培養(yǎng)皿放于恒溫箱中，27 ℃培養(yǎng)，24 h后觀察孢子印特征并拍照記錄。

菌種分離與培養(yǎng)觀察：無菌條件下，以假蜜環(huán)菌菌蓋菌肉組織為材料，用組織分離法，接種于PSA綜合培養(yǎng)基上進行分離純化得到菌種。然后將菌種分別接種于PSA平板培養(yǎng)基及PSA綜合平板培養(yǎng)基，恒溫培養(yǎng)箱內27 ℃培養(yǎng)，定時觀察菌種萌發(fā)及菌落狀態(tài)，并取氣生菌絲與基內菌絲等制臨時裝片，進行顯微觀測。

2 結果與分析

2.1 假蜜環(huán)菌的生態(tài)特征

在豫南地區(qū)，假蜜環(huán)菌分布普遍，主要生于闊葉林及茶樹板栗間作林山坡背陰處，每年6月份至7月份發(fā)生較多。生長基質為板栗、麻櫟(Quercusacutissima)等闊葉樹近地表枯樁或樹根。林內溫度20.7～30.6 ℃，相對濕度77.5%～87.2%，土壤類型為黃棕壤，呈酸性，pH=4.86～5.28。植被類型為落葉闊葉林或茶樹與板栗間作林。闊葉林優(yōu)勢樹種為麻櫟、白櫟(Q.fabri)、槲櫟(Q.aliena)、化香(Platycaryastrobilacea)等，灌木主要為牡荊(Vitexnegundovar.cannabifolia)、衛(wèi)矛(Euonymusalatus)、多花薔薇(Rosamultiflora)等，草本層優(yōu)勢種為梓木草(Buglossoideszollingeri)、貫眾(Rhizomacyrtomii)等。間作林下有菝葜(Smilaxchina)、玉竹(Polygonatumodoratum)、白蘞(Ampelopsisjaponica)、馬唐(Digitariasanguinalis)、鴨跖草(Commelinacommunis)等草本植物。

2.2 假蜜環(huán)菌的子實體形態(tài)

假蜜環(huán)菌子實體棕褐色，叢生或單生于林內地表枯樁或根上。叢生者，每叢具子實體19～42個，叢質量18.39～42.15 g。子實體株高5.3～13.2 cm，平均8.9 cm。株質量1.83～10.03 g，平均4.11 g。子實體由菌柄和菌蓋構成，菌蓋下為菌褶，無菌環(huán)和菌托，菌蓋中部表面具褐色鱗片(圖1A)。菌蓋肉質，菌肉白色，菌褶污白色，或淺褐色，長短不等，寬0.3～0.7 cm，略延生于菌柄上。菌蓋直徑2.4～7.3 cm，平均4.6 cm。菌柄纖維質，柱狀，向下漸粗，中部松軟或中空。柄長6.3～1.5 cm，粗0.4～0.9 cm(圖1B～C)。孢子印白色(圖1D)。

2.3 假蜜環(huán)菌的顯微形態(tài)特征

顯微觀察，菌蓋鱗片由黃褐色菌絲蜜集交織形成，菌絲具隔、具分枝，其細胞壁有明顯環(huán)狀內凸增厚現(xiàn)象。菌絲粗5.24～10.35 μm，平均8.28 μm(圖1E)。菌蓋菌肉菌絲無色透明，具隔、具分枝，無鎖狀聯(lián)合現(xiàn)象。菌絲粗絲不勻，相互交織呈網(wǎng)狀，菌絲直徑4.74～11.51 μm，平均8.14 μm(圖1F)。菌柄菌絲縱向緊密平行排列，菌絲亦無色透明，具隔、具分枝，無鎖狀聯(lián)合。菌絲粗6.87～11.76 μm，平均9.37 μm(圖1G)。

顯微鏡觀測，菌褶厚383.07～499.54 μm，平均449.33 μm。菌褶中間為菌髓，兩側為子實層。菌髓菌絲近平行排列，無色透明，具隔、具分枝，無鎖狀聯(lián)合。菌髓菌絲8.49～16.84 μm，平均11.91 μm。子實層由擔子、幼擔子和擔孢子組成。子實層厚45.93～51.51 μm，平均48.49 μm(圖1H～I)。擔子及幼擔子呈棒狀，無色透明，頂端圓鈍，向下漸狹，端部具小梗4個，小梗長4.33～7.19 μm，平均5.73 μm。成熟擔子每小梗頂端具一枚擔孢子。擔子大小為(40.96～41.36)μm×(7.46～8.51)μm(圖1J)。擔孢子寬卵形，無色透明，光滑，內有油球或顆粒狀物，大小為(4.91～6.13)μm×(6.77～9.31)μm(圖1K)。

2.4 假蜜環(huán)菌的培養(yǎng)特征

在供試的2種培養(yǎng)基上，假蜜環(huán)菌菌落的形態(tài)有明顯差異。在PSA培養(yǎng)基上，菌落為白色稀疏絨毛狀，氣生菌絲明顯，有些菌絲形成菌絲束(圖2A、E)，菌絲生長速度平均為0.58 mm·d-1，菌落在黑暗處發(fā)較弱熒光，菌落背面棕褐色，說明菌絲能產生棕褐色色素。PSA綜合培養(yǎng)基上，菌落為致密白色細絨毛狀，氣生菌絲不明顯，后期在菌落中部形成棕灰色菌皮(圖2B)，菌絲生長速度平均為0.63 mm·d-1，菌落在暗處發(fā)較強的熒光，菌落背面亦為棕褐色，菌絲可產生棕褐色色素(圖2C)；顯微觀察，菌絲在2種培養(yǎng)基上也有一定差異。在PSA培養(yǎng)基條件下，氣生菌絲無色或棕色，多彎曲，具隔且多分枝，菌絲直徑2.73～4.30 μm，平均3.68 μm(圖2D)?；鶅染z呈無色透明節(jié)節(jié)狀，有隔、具分枝，菌絲直徑3.08～3.90 μm，平均3.48 μm(圖2F)。在PSA綜合培養(yǎng)基條件下，氣生菌絲無色透明，具隔、具分枝，菌絲直徑2.31～3.72 μm，平均2.92 μm(圖2G)?；鶅染z無色透明，隔膜明顯，分枝密集，細胞內多液泡，菌絲直徑3.19～4.85 μm，平均3.68 μm(圖2H)。菌皮由菌絲及泡囊組成，菌絲淡棕色，具隔、具分枝，表面粗糙有大量疣狀突出物。菌皮菌絲直徑3.20～3.74 μm，平均3.56 μm，泡囊狀細胞大小為(6.31～8.88)μm×(5.01～8.13)μm(圖2I～J)。

A～C.子實體；D.孢子印；E.菌蓋鱗片菌絲(400×)；F.菌蓋菌肉菌絲(400×)；G.菌柄菌絲(400×)；H.菌褶菌髓菌絲(400×)；I.子實層(400×)；J.擔子(400×)；K.擔孢子(400×)。

圖1 假蜜環(huán)菌子實體形態(tài)

3 討論

通過系統(tǒng)調查，假蜜環(huán)菌在豫南地區(qū)分布普遍，每年6月份至7月份菌體多叢生于山坡背陰面茶園間作林或闊葉樹林內近地表樹樁根部。子實體呈棕褐色，主要由菌柄和菌蓋組成，無菌托和菌環(huán)。一般多個子實體著生在一起，形態(tài)美觀，香味濃，且發(fā)生量大，易采集，作為食用菌和藥用菌具有優(yōu)良的商品性狀，有重要的經(jīng)濟價值，需要深入研究與開發(fā)。

本研究觀察的假蜜環(huán)菌子實體顏色、株高、質地、菌褶著生方式、孢子印及孢子形態(tài)等特征與前人報道[1]187無明顯差異。據(jù)賀新生等[4]報道，假蜜環(huán)菌適合的碳源、氮源的選擇都比較狹窄，如可溶性淀粉、葡萄糖、麥芽糖；適合的氮源是酵母浸膏、蛋白胨。該菌在蔗糖、乳糖、纖維素、尿素、硫酸銨、氯化銨、硝酸銨、碳酸銨中無菌絲索出現(xiàn)。本研究中，供試菌株在以蔗糖為碳源的2種培養(yǎng)基上培養(yǎng)均未見菌索產生，此結果與上述研究相同。但前人未對假蜜環(huán)菌子實體鱗片及菌落菌皮顯微結構進行研究。本研究發(fā)現(xiàn)，菌蓋鱗片由黃褐色菌絲密集交織形成，其細胞壁有明顯環(huán)狀內凸增厚現(xiàn)象。菌落菌皮由菌絲及泡囊組成，菌絲淡棕色，表面粗糙有大量疣狀突出物。這些特征為首次記載。細胞壁環(huán)狀增厚可增加菌蓋表皮鱗片的機械強度，菌絲表面粗糙可使菌皮菌絲與泡囊結合更致密。同一菌株假蜜環(huán)菌在不同培養(yǎng)基上培養(yǎng)，其菌落形態(tài)、菌絲生長速度以及菌絲顯微特征均有差異。因此，有必要進一步篩選假蜜環(huán)菌菌株最佳培養(yǎng)基質條件，為人工栽培提供依據(jù)。據(jù)報道，假蜜環(huán)菌菌絲發(fā)酵培養(yǎng)可產生多糖、多肽、亮菌素、亮菌乙素等有效成分[5-7，10]。本試驗菌株是否產生上述物質，在何種條件下大量產生這些有效成分，仍需要進一步深入研究。

A.PSA培養(yǎng)基菌落；B.PSA綜合培養(yǎng)基菌落；C.菌落背面特征；D.PSA培養(yǎng)基氣生菌絲(400×)；E.菌絲束(400×)；F.PSA培養(yǎng)基基內菌絲(400×)；G.PSA綜合培養(yǎng)基氣生菌絲(400×)；H.PSA綜合培養(yǎng)基基內菌絲(400×)；I.菌皮(400×)；J.菌皮菌絲(400×)。

圖2 假蜜環(huán)菌培養(yǎng)特征

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Biological Characteristic ofArmillariatabescensin the South Area of Henan Province

Lu Dongsheng, Zhang Wei, Huang Xinhua, Xie Zhengping(Xinyang Normal University, Xinyang 464000, P. R. China)/Journal of Northeast Forestry University，2015,43(3)：117-120.

South Henan Province;Armillariatabescens; Morphology; Ecology

1)信陽師范學院種群生態(tài)模擬與控制重點實驗室開放課題(201005)；信陽師范學院博士科研基金項目(200501)。

盧東升，男，1963年10月生，信陽師范學院生命科學學院，教授。E-mail:luds0365@sina.com。

2014年8月5日。

S646.9

責任編輯：程 紅。