王 方，吳 俊，陳慧瓊，翁磊羚，謝宇凱

（1.臨安市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，浙江杭州 311300；2.臨安市疾病預(yù)防控制中心，浙江杭州 311300；3.浙江農(nóng)林大學(xué)農(nóng)業(yè)與食品科學(xué)學(xué)院，浙江杭州 311300）

蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留檢測前處理優(yōu)化方法探索

王 方1，吳 俊2，陳慧瓊1，翁磊羚1，謝宇凱3

（1.臨安市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，浙江杭州 311300；2.臨安市疾病預(yù)防控制中心，浙江杭州 311300；3.浙江農(nóng)林大學(xué)農(nóng)業(yè)與食品科學(xué)學(xué)院，浙江杭州 311300）

為探索蔬菜中11種有機磷農(nóng)藥高效、簡潔、環(huán)保的有機磷檢測前處理方法，將樣品用乙腈提取，氯化鈉分層，有機相濃縮液經(jīng)氣相色譜火焰光度檢測器進行檢測。結(jié)果表明，使用探索的有機磷農(nóng)藥測定前處理方法比NY／T 761—2008行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中有機磷檢測前處理方法更簡潔、高效，檢測的11種有機磷農(nóng)藥的回收率為76.2%～102.0%，最低檢出限為0.01～0.03 mg·kg－1，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.1%～7.2%。該方法檢測蔬菜中有機磷的前處理操作簡單、重復(fù)性好、精密度高，測定結(jié)果可靠，是批量樣品多組分有機磷定量的簡便方法。

有機磷農(nóng)藥；蔬菜；前處理；氣相色譜

隨著我國人民物質(zhì)生活水平的不斷提高，農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量和安全問題越來越受到關(guān)注，尤其是農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留問題，關(guān)系到消費者的身體健康。有機磷農(nóng)藥是20世紀(jì)40年代發(fā)展起來的一類廣譜性農(nóng)用殺蟲劑，其特點是毒性高，殺蟲范圍廣［1］。在我國，因有機磷使用不當(dāng)而引起的食品污染和食品中毒事件時有發(fā)生，蔬菜的有機磷農(nóng)藥殘留問題已經(jīng)不容忽視［2］。蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定（NY／T 761—2008）標(biāo)準(zhǔn)在蔬菜檢測有機磷農(nóng)藥殘留中廣為使用，但是檢測前處理存在著復(fù)雜煩瑣、時間長、氮氣消耗大、回收率較低等問題，因此探索操作簡潔、高效且環(huán)保的有機磷前處理方法非常必要。本研究在NY／T 761—2008行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，將前處理的操作步驟進行優(yōu)化，選取11種常規(guī)性有機磷代表性農(nóng)藥（敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂果、樂果、毒死蜱、甲基對硫磷、馬拉硫磷、殺螟硫磷、水胺硫磷、殺撲磷）作為測試農(nóng)藥，分別進行不同的前處理分析，并將這11種代表性常規(guī)有機磷農(nóng)藥的回收率、精密度進行對比。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

試劑由乙腈、丙酮（美國TEDIA、色譜純）；氯化鈉、無水硫酸鎂（阿拉丁，化學(xué)純）。標(biāo)準(zhǔn)溶液有敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂果、樂果、毒死蜱、甲基對硫磷、馬拉硫磷、殺螟硫磷、水胺硫磷、殺撲磷，各標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度為100μg· mL－1（上海農(nóng)藥研究所）。儀器有A7890A型氣相色譜儀，配氣相色譜火焰光度檢測器（FPD），7693自動進樣器（美國Agilent）；Multiquick3食品加工器（德國博朗）；T18均漿機（德國IKA）；MTN?2800d氮吹儀（天津奧特賽恩斯）；DT100A天平（常熟意歐）；CT14RD離心機（北京京立）；RE?5298旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化）。

1.2 色譜條件

色譜柱Agilent DB?1701（30 m×0.25 mm× 0.25 m），載氣為氮氣（純度＞99.999%），恒流模式，流速1.5 mL·min－1。升溫程序為初始溫度100℃，保持1 min；10℃·min－1升至200℃，3℃·min－1升至250℃，保持5 min。檢測器溫度230℃；氫氣流速75 mL·min－1；空氣流速100 mL· min－1；尾吹氣流速60 mL·min－1。進樣口溫度220℃；進樣方式為不分流進樣，進樣量1.0μL。

1.3 分析步驟

1.3.1 樣品制備

取一定量（新鮮大白菜樣品500 kg左右）試樣的可食部分，經(jīng)縮分后，將其切碎，充分混勻放入食品加工器粉碎，制成待測樣。所取的樣品平均分為2份，1份供測定，另1份放置于－20℃冰箱中保存，備用。

1.3.2 提取

稱取25 g試樣置于100mL離心管中，加入5 g氯化鈉，40 mL乙腈，高速均漿1 min；再加入5 g無水硫酸鎂，混勻加蓋，以6 000 r·min－1離心5 min。

1.3.3 凈化

從離心管中吸取8 mL上層有機相置于50 mL濃縮瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸發(fā)至近干，氮氣吹干。用3 mL丙酮分3次沖洗，并轉(zhuǎn)移至10 mL比色管，最后定容至5.0 mL，在旋渦混合器上混勻，移入2 mL進樣瓶，上機測定。

1.4 工作曲線的制備

分別準(zhǔn)確吸取1.0 mL各農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)于25 mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，得到濃度為4μg· mL－1的農(nóng)藥混標(biāo)儲備液。臨用前用空白樣品基質(zhì)液稀釋成濃度分別為0.1，0.25，0.5，1.0，2.5，5.0和10.0μg·mL－1的基質(zhì)加標(biāo)工作曲線。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法的相關(guān)系數(shù)與檢出限

11種農(nóng)藥的線性范圍為0.01～10.0μg· mL－1，r在0.995 6～0.999 9；以3倍信噪比（S／N）所對應(yīng)的農(nóng)藥濃度為檢出限，以10倍信噪比（S／N）所對應(yīng)的農(nóng)藥濃度為定量限［3］；從表1看出，11種農(nóng)藥檢出限在0.01～0.03 mg·kg－1，定量限在0.003～0.009 mg·kg－1。

表1 11種有機磷檢測方法的相關(guān)系數(shù)與檢出限

2.2 回收率測定與對比

選擇2份本底不含11種有機磷農(nóng)藥的大白菜同一樣本各25 g，均加入含量為0.3μg·m L－1含11種有機磷溶液的混標(biāo)溶液2.5 mL，分別用NY／T 761—2008［4］標(biāo)準(zhǔn)與探索的新方法進行前處理，在相同的儀器條件下分別檢測6次（圖1和表2）。通過對比得出，新方法的實際平均測得值均比NY／T 761—2008更接近于實際加入值，且運用新方法的加標(biāo)回收率在76.2%～102.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差＜7.2%；而運用NY／T761—2008標(biāo)準(zhǔn)的加標(biāo)回收率在70.3%～108.2%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差值均＜8.9%。說明新方法更能滿足農(nóng)殘分析需要［5］。

表2 不同有機磷加標(biāo)回收情況（n＝6）

2.3 NY／T 761—2008方法

準(zhǔn)確稱取25.0 g試樣放入勻漿機中，加入50.0 mL乙腈，高速勻漿2 min后用濾紙過濾，濾液收集到裝有5～7 g氯化鈉的100 mL具塞量筒中，收集濾液40～50 mL，蓋上塞子，劇烈震蕩1 min，在室溫下靜置30 min，使乙腈相與水分層。從具塞量筒中吸取10.0 mL乙腈溶液，放入150mL燒杯中80℃水浴鍋上加熱，杯內(nèi)緩緩?fù)ㄈ氲獨?，蒸發(fā)近干，加入2.0 mL丙酮，蓋上鋁箔，備用。將備用液完全移至15 mL刻度離心管中，再用3 mL丙酮分3次沖洗燒杯，并轉(zhuǎn)移至離心管，定容至5.0 m L，在旋渦混合器上混勻，移入進樣瓶［5］。

3 小結(jié)

采用6 000 r·min－1離心5 min代替了NY／T 761—2008標(biāo)準(zhǔn)中過濾與靜置30 min 2個步驟；使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸發(fā)至0.5～1 mL后，用80℃水浴氮氣或水浴吹至近干花時10 min左右，而NY／T 761—2008標(biāo)準(zhǔn)中直接將燒杯在80℃水浴鍋上加熱，杯內(nèi)緩緩?fù)ㄈ氲獨?，蒸發(fā)近干要15 min左右。可見，該方法比NY／T 761—2008標(biāo)準(zhǔn)方法更省時、省氮氣。且樣品前處理的測定值更接近加標(biāo)值，回收率高，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小，重復(fù)性好，精密度高，測定結(jié)果可靠。

［1］ 蔣合舉.氣相色譜法測定蔬菜中7種有機磷農(nóng)藥殘留［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2007，17（8）：1419－1420.

［2］ 朱之鑫.中國統(tǒng)計年鑒［M］.北京：中國統(tǒng)計出版社，2002.

［3］ USEPA Method 1657－1993 The Determination of organoPhosphorus Pesticides in Municipal and Industrial Wastewater［S］.

［4］ NY／T 761—2008.蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸脂類農(nóng)藥多殘留的測定［S］.

［5］ 李博，張莉，汪東風(fēng)，等.固相萃取?氣相色譜法檢測8種有機磷農(nóng)藥的方法及條件優(yōu)化［J］.中國農(nóng)學(xué)通報，2010，26（19）：88－93.

（責(zé)任編輯：張瑞麟）

S 481

A

0528?9017（2015）11?1721?03

文獻(xiàn)著錄格式：王方，吳俊，陳慧瓊，等.蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留檢測前處理優(yōu)化方法探索［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，56（11）：1721－1723.

DOI 10.16178／j.issn.0528?9017.20151107

2015?08?31

王 方（1988－），女，浙江臨安人，助理工程師，本科，從事農(nóng)產(chǎn)品檢測工作。E?mail：418905336＠qq.com。