吳曉紅，于祥遠(yuǎn)，王程強(qiáng)

（桂林醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院，廣西桂林541004）

X 射線損傷修復(fù)的交叉互補(bǔ)基因（X-ray repair cross-complementing group 1，XRCC1）定位于人染色體19q13.2，為堿基切除修復(fù)（base excision repair，BER）通路基因，編碼蛋白可參與DNA 單鏈斷裂損傷修復(fù)過(guò)程，存在于第399 位（Arg-Gln）的錯(cuò)義突變可能通過(guò)改變XRCC1 基因的DNA 損傷修復(fù)能力而增加易感人群罹患鼻咽癌的風(fēng)險(xiǎn)［1］。迄今，國(guó)內(nèi)外一系列病例-對(duì)照研究試圖探討XRCC1Arg399Gln多態(tài)性同鼻咽癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)系，但結(jié)果、結(jié)論并不完全一致［2-9］。為進(jìn)一步明確XRCC1 Arg399Gln多態(tài)性與鼻咽癌的易感性關(guān)系，克服單個(gè)研究樣本量小、地域性和種族差異等因素，本研究利用循證醫(yī)學(xué)的基本原理和方法，綜合評(píng)價(jià)XRCC1 基因Arg399Gln多態(tài)變異與鼻咽癌遺傳易感性之間的關(guān)聯(lián)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 文獻(xiàn)檢索策略 通過(guò)使用中文關(guān)鍵詞包括：“XRCC1”、“單核苷酸多態(tài)性”、“鼻咽癌”；以及英文關(guān)鍵詞“XRCC1”、“polymorphism”、“nasopharyngeal carcinoma”等聯(lián)合檢索中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)（CNKI）、萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)及PubMed數(shù)據(jù)庫(kù)，獲取已發(fā)表有關(guān)XRCC1Arg399Gln與鼻咽癌研究報(bào)道。末次檢索日期：2014年7月1日。文獻(xiàn)篩選由兩名專業(yè)研究人員同時(shí)進(jìn)行，對(duì)檢索結(jié)果進(jìn)行匯總，若意見(jiàn)分歧則參照原文協(xié)商解決。

1.2 研究文獻(xiàn)的納入、排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）文獻(xiàn)須為獨(dú)立研究資料的病例-對(duì)照研究；（2）病例組為經(jīng)臨床和病理確診的鼻咽癌患者有；（3）所研究位點(diǎn)基因型、等位基因頻率等分型資料；（4）納入文獻(xiàn)的語(yǔ)言設(shè)定為中文或英文。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）只有病例組數(shù)據(jù)資料；（2）文獻(xiàn)為病例報(bào)告、文摘、綜述、講座、述評(píng)等非病例-對(duì)照研究；（3）重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)。

1.3 資料提取 統(tǒng)一制訂數(shù)據(jù)收集表，由兩位研究者獨(dú)立提取納入文獻(xiàn)數(shù)據(jù)資料，主要包括：第一作者、發(fā)表時(shí)間、國(guó)家、種族、病例／對(duì)照例數(shù)、基因型和等位基因頻數(shù)（率）、對(duì)照組哈迪-溫伯格平衡情況等。若納入文獻(xiàn)涉及多個(gè)種族，則依照人群分別提取相應(yīng)數(shù)據(jù)。

表1 XRCC1Arg399Gln在鼻咽癌及健康人群中的分布

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 Meta分析應(yīng)用Review Manager5.0 和Stata12.0軟件進(jìn)行，XRCC1Arg399Gln多態(tài)性與鼻咽癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估以相對(duì)危險(xiǎn)度OR值及相應(yīng)95%CI進(jìn)行描述；采用χ2檢驗(yàn)評(píng)價(jià)對(duì)照組基因分型結(jié)果的哈迪-溫伯格平衡情況。各研究間異質(zhì)性采用Cochran Q 檢驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià)，P＜0.05提示發(fā)表文獻(xiàn)數(shù)據(jù)存在明顯異質(zhì)性；I2值定量評(píng)價(jià)異質(zhì)性大小，值越大提示異質(zhì)性愈明顯。設(shè)定異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果P＜0.05或I2＞50%，則提示各研究存在明顯抑制性，分析時(shí)采用隨機(jī)效應(yīng)模型；反之則采用固定效應(yīng)模型。應(yīng)用Stata12.0軟件，以Begger′s漏斗圖和Egger′s線性回歸分析納入文獻(xiàn)的發(fā)表偏倚情況［10-11］。采用Leave-one-out方法逐一剔除單個(gè)研究進(jìn)行敏感性分析，用以評(píng)價(jià)單一研究對(duì)總體OR值的影響。

2 結(jié) 果

2.1 納入文獻(xiàn)基本資料特征 截止2014年7月1日，通過(guò)聯(lián)合檢索CNKI、萬(wàn)方、PubMed 等數(shù)據(jù)庫(kù)，共檢索到XRCC1 Arg399Gln與鼻咽癌相關(guān)研究報(bào)道177 篇，嚴(yán)格按照納入、排除標(biāo)準(zhǔn)，并結(jié)合仔細(xì)閱讀相關(guān)綜述文獻(xiàn)，手工補(bǔ)充查找合格文獻(xiàn)，根據(jù)相應(yīng)檢索詞獲得文獻(xiàn)177篇，排除綜述、非病例對(duì)照研究相關(guān)文獻(xiàn)45篇，剩余相關(guān)文獻(xiàn)32篇，排除XRCC1 其他位點(diǎn)。最終納入8 篇病例-對(duì)照研究［4-11］。共包含研究對(duì)象4 323例，其中鼻咽癌患者2 115例，對(duì)照組2 208例。納入文獻(xiàn)的基本資料特征情況，見(jiàn)表1。

2.2 Meta分析結(jié)果 399Gln等位基因與鼻咽癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)應(yīng)用RevMan5.0對(duì)所納入文獻(xiàn)等位基因分布情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示與399Arg等位基因相比，399Gln顯著增加鼻咽癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，其相對(duì)發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的OR值及95%CI分別為1.14（1.04～1.26）。異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果顯示，各研究間等位基因分布數(shù)據(jù)不存在明顯異質(zhì)性（I2＝32%，P＝0.18），見(jiàn)圖1。

2.2.1 不同遺傳模型與鼻咽癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn) 本研究統(tǒng)計(jì)分析了顯性、隱性、共顯性及相加模型4種遺傳模型下，XRCC1 基因Arg399Gln多態(tài)性與鼻咽癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性。綜合評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，在隱性遺傳模型Gln／Glnvs.Arg／Gln＋Arg／Arg和共顯性模型Gln／Glnvs.Arg／Arg下，總體OR值及95%CI分別為1.30（1.04～1.63）、1.37（1.09～1.72），異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果兩種遺傳模型下不存在明顯異質(zhì)性。異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果顯示，在顯性模型下文獻(xiàn)發(fā)表結(jié)果存在明顯異質(zhì)性（I2＝51%，P＝0.05），其他模型均未發(fā)現(xiàn)明顯異質(zhì)性，結(jié)果見(jiàn)表2和圖2～3。

圖1 等位基因與鼻咽癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)

表2 XRCC1Arg399Gln多態(tài)性與鼻咽癌易感性分析

圖2 隱性遺傳模型與鼻咽癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)

圖3 共顯性模型與鼻咽癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)

2.2.2 文獻(xiàn)發(fā)表偏倚情況 應(yīng)用Stata12.0評(píng)估所納入文獻(xiàn)的發(fā)表偏倚情況，Begger′s漏斗圖和Egger′s線性回歸分析結(jié)果顯示，未發(fā)現(xiàn)本研究所納入文獻(xiàn)存在發(fā)表偏倚，Begger′s檢驗(yàn)（P＝0.902），Egger′s檢驗(yàn)（P＝0.989），見(jiàn)圖4～5。

圖4 Begg′s檢驗(yàn)評(píng)估納入文獻(xiàn)發(fā)表偏倚情況

圖5 Egger′s檢驗(yàn)評(píng)估納入文獻(xiàn)發(fā)表偏倚情況

2.2.3 敏感性分析 采用Leave-one-out方法，將合格文獻(xiàn)逐一剔除，觀察單一文獻(xiàn)對(duì)總體結(jié)果的影響，并未發(fā)現(xiàn)哪篇文獻(xiàn)明顯影響總體OR及95%CI。但在顯性模型下，當(dāng)剔除Li等［7］的報(bào)道后，異質(zhì)性便不再存在，I2值及相應(yīng)PHete由I2＝51%，P＝0.05變?yōu)镮2＝0，P＝0.50。

3 討 論

XRCC1基因是堿基切除修復(fù)通路的重要組成部分，主要參與受損部分堿基切除和斷裂DNA 連接，修復(fù)損傷的DNA，維持個(gè)體的遺傳穩(wěn)定性，當(dāng)其DNA 損傷修復(fù)能力喪失或減低則可能導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。有研究表明，XRCC1 基因399 位（Arg-Gln）多態(tài)突變可能影響其DNA 損傷修復(fù)能力，從而增加易感人群罹患癌癥的風(fēng)險(xiǎn)［12～14］。但目前針對(duì)XRCC1 Arg399Gln多態(tài)性與鼻咽癌的關(guān)聯(lián)研究的結(jié)論存在矛盾，為進(jìn)一步明確XRCC1Arg399Gln多態(tài)性與鼻咽癌的易感性關(guān)系，克服單個(gè)研究樣本量小、地域性和種族差異等因素，共8篇文獻(xiàn)包含研究對(duì)象4 323例，其中鼻咽癌2 115例，對(duì)照2 208例納入本研究。

Meta分析發(fā)現(xiàn)，風(fēng)險(xiǎn)等位基因399Gln可顯著增加鼻咽癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，其相對(duì)發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的OR值及95%CI分別為1.14（1.04～1.26），提示XRCC1 基因第399 位的錯(cuò)義突變Arg-Gln，可能在某種程度上使得機(jī)體對(duì)鼻咽癌的易感性改變，從而增加鼻咽癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。本研究探討了4種不同遺傳效應(yīng)模型下XRCC1Arg399Gln多態(tài)性與鼻咽癌的易感性關(guān)系，發(fā)現(xiàn)隱性遺傳模型Gln／Glnvs.Arg／Gln＋Arg／Arg和共顯性模型Gln／Glnvs.Arg／Arg下，總體OR值及95%CI分別為1.30（1.04～1.63）、1.37（1.09～1.72）。這與上述399Gln可顯著增加鼻咽癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的結(jié)果一致。而Huang等［15］的Meta分析（2011年，納入5篇文獻(xiàn)，病例組：1 644例，對(duì)照組：1 678例）僅在共顯性模型Gln／Gln vs.Arg／Arg下的結(jié)果與本研究類似，OR及95%CI分別為1.30（1.01～1.69）?？赡芤虮狙芯吭谄浠A(chǔ)上，納入最新研究報(bào)道、擴(kuò)大研究樣本量，提高統(tǒng)計(jì)學(xué)效能，因此更為客觀地反映了真實(shí)結(jié)果。但進(jìn)一步分析，本研究注意到反映隱性遺傳模型下XRCC1Arg399Gln多態(tài)性與鼻咽癌的易感性關(guān)系的森林圖（圖3）顯示，所有單個(gè)病例-對(duì)照研究的統(tǒng)計(jì)分析后的OR及95%CI卻均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這一現(xiàn)象可能因單個(gè)研究樣本量過(guò)小導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)效能不足，分析過(guò)程中未能檢測(cè)出該多態(tài)變異在所研究人群中帶來(lái)的易感性差異。

另外，本研究?jī)H納入已公開(kāi)發(fā)表的、結(jié)果數(shù)據(jù)完整的、探討XRCC1Arg399Gln多態(tài)性與鼻咽癌的易感性關(guān)系的病例-對(duì)照研究，對(duì)照的選取及方法、病例／對(duì)照的配對(duì)比例等不盡相同，理論上可能存在一定的發(fā)表偏倚，但應(yīng)用Stata12.0軟件Begger′s漏斗圖和Egger′s線性回歸分析，在所納入研究之間未發(fā)現(xiàn)明顯的發(fā)表偏倚。采用Leave-one-out方法，探索異質(zhì)性來(lái)源的敏感性分析，將納入文獻(xiàn)逐一剔除，觀察單一文獻(xiàn)對(duì)總體結(jié)果的影響，并未發(fā)現(xiàn)哪篇文獻(xiàn)明顯影響總體OR及95%CI。但在顯性模型下，當(dāng)剔除Li等［7］的報(bào)道后，異質(zhì)性便不再存在，I2值及相應(yīng)PHete由I2＝51%，PHete＝0.05變?yōu)镮2＝0，PHete＝0.50。提示，該篇報(bào)道結(jié)果可能是顯性遺傳模型下異質(zhì)性的主要來(lái)源。因所納入文獻(xiàn)中，僅有1篇為非洲的研究，本研究未按種族作進(jìn)一步分層分析，探討XRCC1Arg399Gln多態(tài)位點(diǎn)與鼻咽癌的遺傳易感情況，可能對(duì)本研究的總體結(jié)果產(chǎn)生些許影響。

綜上所述，XRCC1基因Arg399Gln多態(tài)性與鼻咽癌的遺傳易感性密切相關(guān)，結(jié)果表明，399Gln等位基因可顯著增加鼻咽癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，初步推測(cè)其可能是鼻咽癌發(fā)病的危險(xiǎn)遺傳因素。但仍需設(shè)計(jì)更加合理、更大樣本量的病例-對(duì)照研究來(lái)確認(rèn)本研究的結(jié)論。

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