諶劍波，張麗君，吳　華，黎曉敏，吳建云（.西南大學動物科技學院，重慶北碚40075；.重慶市榮昌縣畜牧獸醫(yī)局，重慶榮昌40460；.重慶市北碚區(qū)農(nóng)委，重慶北碚400700）

渝西地區(qū)母豬子宮內(nèi)膜炎病原菌分離鑒定及耐藥性分析

諶劍波1，張麗君2，吳華3，黎曉敏1，吳建云1
（1.西南大學動物科技學院，重慶北碚400715；2.重慶市榮昌縣畜牧獸醫(yī)局，重慶榮昌402460；3.重慶市北碚區(qū)農(nóng)委，重慶北碚400700）

母豬子宮內(nèi)膜炎是一種母豬產(chǎn)后的常見病，可引起母豬發(fā)情不正常，或發(fā)情正常但屢配不孕。它是規(guī)?；B(yǎng)豬場母豬高淘汰率的重要疾病之一，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失。調(diào)查[1]顯示，在養(yǎng)豬業(yè)中，約20%分娩母豬患有子宮內(nèi)膜炎。渝西地區(qū)是我國重要的生豬生產(chǎn)區(qū)，子宮內(nèi)膜炎在當?shù)刎i場也常有發(fā)生。我們收集了渝西地區(qū)部分規(guī)模化種豬場母豬子宮內(nèi)膜炎病例進行細菌分離試驗，并進一步做了常用抗生素對分離細菌的敏感試驗，試驗結(jié)果可為渝西地區(qū)該病的臨床治療和預防提供理論與技術(shù)支持。

1　材料與方法

1.1試驗動物從渝西地區(qū)部分規(guī)?；N豬場選取具有相關(guān)臨床癥狀的疑似患病母豬，通過直腸檢查、子宮頸口黏液實驗室檢驗[2]等方法綜合確診為患子宮內(nèi)膜炎的母豬。

1.2培養(yǎng)基與試劑營養(yǎng)肉湯、血清瓊脂、營養(yǎng)瓊脂、甘露醇培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂等均按常規(guī)方法配制。

1.3藥敏試片青霉素、鏈霉素、慶大霉素、強力霉素、丁胺卡那霉素、氨芐青霉素、阿奇霉素、環(huán)丙沙星、諾氟沙星和氧氟沙星，均購自上海金穗生物科技有限公司。

1.4病料采集對26頭經(jīng)臨床診斷為子宮內(nèi)膜炎的母豬先使用溫水清潔陰部，再用0.1%新潔爾滅消毒。然后將滅菌輸精管伸入子宮頸，采集1～1.5 mL子宮分泌物，立即注入滅菌的小試管中，冷藏、密封待用。整個過程盡量保持無菌操作，并做好標記。

1.5細菌分離鑒定將采集的子宮分泌物接種肉湯培養(yǎng)液，37℃培養(yǎng)24 h，然后劃線接種于瓊脂平板，37℃培養(yǎng)24 h，挑選典型菌落涂片、染色、鏡檢。根據(jù)菌落形態(tài)、菌體大小和染色特征再進一步培養(yǎng)。最后將分離菌株低溫保存。

1.6藥敏試驗采用紙片瓊脂擴散法[3]測定常用抗菌藥物的敏感性。本試驗共測定了分離菌株對渝西地區(qū)常用的青霉素、鏈霉素、慶大霉素等10種抗菌藥物的敏感性。試驗時測量抑菌圈直徑，參照CSLI的抗菌藥物敏感性試驗解釋標準[4]進行結(jié)果判定。未列入評價標準的參考同類藥物標準進行判定。

2　結(jié)果與分析

2.1細菌的分離鑒定對26個子宮分泌物樣本進行細菌分離培養(yǎng)和鑒定，結(jié)果（見表1），共檢出7種共51個菌株。其中葡萄球菌23株，占45.1%；鏈球菌10株，占19.6%；大腸桿菌14株，占27.5%。從檢測結(jié)果來看，單一病原菌引起子宮內(nèi)膜炎發(fā)病情況較少，而多種細菌混合感染的情況較為嚴重，共22例，占總感染數(shù)的84.6%。

表1　母豬子宮內(nèi)膜炎病原菌分離鑒定結(jié)果

2.2藥敏試驗對渝西地區(qū)母豬子宮內(nèi)膜炎的主要致病菌（葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌）進行藥敏試驗，結(jié)果（表2）表明，葡萄球菌對青霉素、氨芐青霉素、強力霉素耐藥；對丁胺卡那霉素、阿奇霉素、環(huán)丙沙星、諾氟沙星較為敏感；鏈球菌對青霉素、鏈霉素、氨芐青霉素耐藥；對慶大霉素、阿奇霉素、環(huán)丙沙星和氧氟沙星較為敏感；大腸桿菌對青霉素、氨芐青霉素耐藥；對慶大霉素、環(huán)丙沙星、諾氟沙星和氧氟沙星較為敏感。幾種主要致病菌對丁胺卡那霉素、環(huán)丙沙星、諾氟沙星等藥物敏感性較高，可作為渝西地區(qū)治療母豬子宮內(nèi)膜炎的主要藥物。

表2　常用抗菌藥對主要致病菌藥敏試驗結(jié)果/%

3　討論

3.1在分離出的菌株中，檢出率前3名的分別是金黃色葡萄球菌23株（45.1%），大腸桿菌14株（27.5），鏈球菌10株（19.6%）。這說明引起渝西地區(qū)母豬子宮內(nèi)膜炎的主要病原菌是葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌，與以往其他地區(qū)報道[5-6]結(jié)果相近。但近年來，由于環(huán)境污染、抗生素濫用等原因，單一病原菌引起母豬子宮內(nèi)膜炎已較少發(fā)生，而多種細菌混合感染的情況已較為普遍。

3.2由于臨床長期不合理使用抗菌藥物，導致病原菌對常用抗菌藥物已產(chǎn)生耐藥性，尤其對于以前常用的青霉素等藥物更為明顯。環(huán)丙沙星、諾氟沙星、氧氟沙星等喹諾酮類藥物因以前臨床使用較少，對于主要致病菌仍有較強的敏感性，可在今后的臨床工作中作為主要的治療藥物使用。同時，在臨床用藥時要注意藥物的合理使用或交替使用，不要隨意加大劑量，暫停已產(chǎn)生明顯耐藥性的藥物。

3.3對于母豬子宮內(nèi)膜炎的防治，除了治療時選用較為敏感的抗菌藥物外，還可以考慮中西醫(yī)結(jié)合治療。據(jù)報道[7]，采用中西醫(yī)結(jié)合治療可在保證療效的同時，減少藥物在動物體內(nèi)的殘留。

參考文獻：

[1]張盼峰，劉宇.豬子宮內(nèi)膜炎的防治[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2008，9：110.

[2]范國英，鐘華，趙寶玉，等.母豬子宮內(nèi)膜炎的防治研究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學，2010，49（3）：648-650.

[3]徐淑云，卞如廉，陳修.藥理實驗方法學[M].3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2001：1651-1653.

[4] CLSI M100-S22.Performance standards for antimicrobial suscep?tibilitytesting; twenty-second informational supplement[S] . Clini?cal and Laboratory Standards Institute，2012．

[5]劉忠華，黃引賢.母豬子宮疾病的病原細菌及病理變化[J].中國獸醫(yī)學報，1998，13（1）：84-87.

[6]鄭立棟，孫紅祥，季君策，等.母豬子宮內(nèi)膜炎病原檢測與藥敏試驗[J].養(yǎng)豬，2001（2）：40-41.

[7]宋曉平，王建辰.家畜子宮內(nèi)膜炎的中草藥防治綜述[J].中獸醫(yī)學雜志，2001，1：33-36.

通訊作者：吳建云，E-mail：jianyun1973@163.com

作者簡介：諶劍波（1981-），男，實驗師，碩士，主要從事獸醫(yī)學相關(guān)實驗教學工作，E-mail：34670344@qq.com

基金項目：中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費專項資金項目（XDJK2-013L095）

收稿日期：2014-04-03

中圖分類號：S852.65+1

文獻標志碼：B

文章編號：0529- 6005（2015）10- 0046- 02