韋桂寧，楚世峰，蘇 華，何 飛，蘇啟表，盧文杰，陸國(guó)壽，黃周鋒，譚 曉，林 霄，曾憲彪，韋寶偉，陳乃宏

（1．廣西中醫(yī)藥研究院藥理所，廣西南寧 530022；2．湖南中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙 410208；3．廣東藥學(xué)院健康學(xué)院，廣東廣州 510006，4．湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙 410208）

擬黑多刺蟻醇提物抗抑郁作用研究

韋桂寧1，楚世峰2，蘇 華1，何 飛1，蘇啟表3，盧文杰1，陸國(guó)壽1，黃周鋒1，譚 曉1，林 霄1，曾憲彪1，韋寶偉1，陳乃宏4

（1．廣西中醫(yī)藥研究院藥理所，廣西南寧 530022；2．湖南中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙 410208；3．廣東藥學(xué)院健康學(xué)院，廣東廣州 510006，4．湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙 410208）

中國(guó)圖書分類號(hào)：R-332；R284．1；R384．9；R971．43

摘要：目的 觀察擬黑多刺蟻醇提物抗抑郁作用，并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行初步分析。方法 擬黑多刺蟻醇提物通過乙醇提取得到。采用懸尾試驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)等行為絕望模型和利血平誘導(dǎo)的抑郁模型觀察擬黑多刺蟻醇提物抗抑郁作用。結(jié)果 擬黑多刺蟻醇提物8、4 g·kg－1劑量組均能明顯縮短小鼠在TST和FST的懸尾不動(dòng)時(shí)間和游泳不動(dòng)時(shí)間（P＜0.05）；擬黑多刺蟻醇提物8 g·kg－1劑量組可提高抑郁癥大鼠體溫和糖水?dāng)z取量（P＜0.05）；擬黑多刺蟻醇提物8、2 g ·kg－1劑量組可拮抗利血平大鼠眼瞼下垂，減少運(yùn)動(dòng)不能時(shí)間（P＜0.05，P＜0.01）；擬黑多刺蟻醇提物8 g·kg－1可明顯提高抑郁癥大鼠血清、海馬組織、大腦皮層的5－羥色胺、去甲腎上腺素水平及超氧化物歧化酶的活性（P＜0.05）；擬黑多刺蟻醇提物對(duì)所述正常組各指標(biāo)無影響。結(jié)論 擬黑多刺蟻醇提物具有明顯的抗抑郁作用，可能通過對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)代謝及對(duì)神經(jīng)細(xì)胞抗氧化作用的調(diào)節(jié)來實(shí)現(xiàn)。

關(guān)鍵詞：擬黑多刺蟻；抑郁；作用機(jī)制；5-羥色胺；去甲腎上腺素；超氧化物歧化酶

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2015－8－10 14：37 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／34．1086．R．20150810．1437．020．html

抑郁癥是一種以明顯而持久的心境低落為主要特征的情感性精神障礙綜合征，主要臨床表現(xiàn)為情緒低落，運(yùn)動(dòng)遲緩，內(nèi)疚、自責(zé)自罪，很嚴(yán)重狀態(tài)下會(huì)有輕生、自殺傾向等癥。近年來，抑郁癥的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅患者的健康，影響到家庭和社會(huì)的和諧［1－2］。抑郁癥的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，發(fā)生機(jī)制至今不明。生物胺假說是最具代表性的假說之一，即抑郁的發(fā)生與腦內(nèi)去甲腎上腺素和五羥色胺等單胺水平低下密切相關(guān)，阻斷特定單胺的重?cái)z取進(jìn)入神經(jīng)末鞘、抑制MAO增加單胺存儲(chǔ)與釋放、阻斷突觸前膜α2自身受體增加單胺遞質(zhì)釋放，可明顯改善抑郁癥狀。

擬黑多刺蟻（Polyrhachis vicina Roger），也稱擬黑多翅蟻。味咸、酸，性平；歸肝、腎經(jīng)；具補(bǔ)腎益精，通經(jīng)活絡(luò)，解毒消腫之功效；主治腎虛頭暈耳鳴，失眠多夢(mèng)，陽痿遺精，風(fēng)濕痹痛，中風(fēng)偏癱，手足麻木，紅斑狼瘡，毒蛇咬傷等癥。擬黑多刺蟻全身含有多種氨基酸、維生素及微量元素等多種營(yíng)養(yǎng)成分，號(hào)稱“動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)寶庫”。擬黑多刺蟻?zhàn)鳛樗幨硟捎玫睦ハx類藥材，長(zhǎng)期以來，多用米酒制成酒劑，廣泛用于保健或治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病。在我們的相關(guān)實(shí)驗(yàn)中，擬黑多刺蟻的醇提取物具有抗痛風(fēng)作用，療效與乙醇的濃度有關(guān)，醇提物主要以脂肪酸為主，特別是不飽和脂肪酸［3－4］。根據(jù)民間的臨床使用經(jīng)驗(yàn)，我們對(duì)擬黑多刺蟻的提取物進(jìn)行抗抑郁研究，初步的結(jié)果表明，擬黑多刺蟻的醇提物具有抗抑郁作用，且也與乙醇的濃度有關(guān)，95%乙醇的提取物效果最佳。

鑒于抑郁癥的高發(fā)病率、高危害性，目前缺乏安全有效抗抑郁藥物的現(xiàn)狀，結(jié)合擬黑多刺蟻藥性及其現(xiàn)代研究進(jìn)展，本研究考察了黑螞蟻95%乙醇的醇提物的抗抑郁作用，以期為其作為抗抑郁藥物的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1　材料

1．1藥物與藥品 擬黑多刺蟻醇提物（Ethyl alco-hol extract of Polyrhachis vicina Roger，EAPR），由廣西中醫(yī)藥研究院藥理所提供。利血平注射液，天津金耀氨基酸有限公司，批號(hào)：1203241；鹽酸氟西汀膠囊，禮來蘇州制藥有限公司，批號(hào)：1037A；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）試劑盒，南京建成生物工程研究所，批號(hào)：20140118；丙二醛（malon-dialdehyde，MDA）試劑盒，南京建成生物工程研究

所，批號(hào)：20140117；5-羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）試劑盒，Cusabio Biotech CO．，LTD，批號(hào)：C0601800187；去甲腎上腺素（noradrenaline，NA）試劑盒，Cusabio Biotech CO．，LTD，批號(hào)：B18011310。

1．2動(dòng)物 昆明種小鼠，8周齡，體質(zhì)量18～22 g，SPS級(jí)；Wistar大鼠，9周齡，體質(zhì)量180～220 g，SPS級(jí)，均由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物質(zhì)量合格證證號(hào)：SCXK桂2009-0002。動(dòng)物觀察室：溫度25℃±1℃，相對(duì)濕度60%±10%。

1．3主要儀器 13960型iMark酶標(biāo)儀（Japan Bio-rad公司）；TDL-5000B型低速冷凍離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；FA1004電子天平（上海精科天平儀器廠）。

2　方法

2．1EAPR溶液制備 取擬黑多刺蟻粉1 000 g，用95%乙醇浸泡，水浴回流提取3次，合并回流液，水浴濃縮至無醇味，得178 g棕褐色稠膏（得膏率為17．8%）。用吐溫-80乳化，配成所需的濃度，其中吐溫-80含量為0.3%。

2．2懸尾實(shí)驗(yàn) （tail suspension test，TST）采用昆明種♂小鼠，體質(zhì)量18～22 g，每組10只。分別為對(duì)照組、陽性對(duì)照藥氟西汀組（3.6 mg·kg－1）、EA-PR高、中、低劑量組（分別相當(dāng)于藥材8、4、2 g·

kg－1，下同）。對(duì)照給予同等體積的含0．3%吐溫-80的蒸餾水，各組均連續(xù)灌胃（ig）給藥10 d，末次給藥1 h后測(cè)試。測(cè)試方法如下。

參照文獻(xiàn)［5－6］的方法，將單個(gè)小鼠尾端（在距尾尖部約2cm處）用醫(yī)用膠布粘于懸尾箱（30 cm×30 cm×25 cm）上部支架上，使成倒掛狀態(tài)，頭部離箱底約5 cm。懸掛時(shí)間為6 min，統(tǒng)計(jì)后4 min內(nèi)累計(jì)不動(dòng)時(shí)間（不動(dòng)狀態(tài)即小鼠停止掙扎不動(dòng)或無任何活動(dòng)）。

2．3強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn) （forced swimming，F(xiàn)ST）采用♂昆明小鼠，體質(zhì)量18～22 g，分組、給藥同“2.2”。測(cè)試方法如下。

參考文獻(xiàn)［5－6］報(bào)道的方法，將小鼠單獨(dú)放人高20 cm、直徑14 cm的圓柱形玻璃缸中，缸內(nèi)水深10 cm，水溫25℃±2℃，從小鼠入水后計(jì)時(shí)6 min，記錄后4 min內(nèi)游泳累計(jì)不動(dòng)時(shí)間（指小鼠在水中停止掙扎，或顯示漂浮狀態(tài)，僅有微小的肢體運(yùn)動(dòng)以保持頭部浮在水面）。

2．4EAPR對(duì)利血平引起的抑郁癥大鼠的影響［5－6］

2．4．1動(dòng)物分組與處理 ♂Wistar大鼠70只，體質(zhì)量180～220 g，喂養(yǎng)適應(yīng)1周后，按空腹體重隨機(jī)分為7組，即對(duì)照組、模型組（利血平組）、陽性藥氟西汀＋利血平組、EAPR高劑量組＋利血平組、EA-PR低劑量＋利血平組，EAPR高劑量組、EAPR低劑量組，每組10只，組間體重水平無明顯差異，每周記錄體重1次，根據(jù)體重給藥。空白對(duì)照組大鼠每天腹腔注射生理鹽水0.5 ml·kg－1，其余各組大鼠每天腹腔注射利血平0.5 mg·kg－1造模，通過運(yùn)動(dòng)抑制觀察確定模型成功后，改生理鹽水及利血平隔天腹腔注射0.25 mg·kg－1維持模型，連續(xù)10 d。各組開始造模起，陽性藥氟西汀組給予氟西汀1.8 mg· kg－1，EAPR高劑量＋利血平組給予EAPR 8.0 g· kg－1，EAPR低劑量＋利血平組給予EAPR 2.0 g· kg－1，EAPR高劑量給予EAPR 8.0 g·kg－1，EAPR低劑量組給予EAPR 2.0 g·kg－1，每天1次。

2．4．2對(duì)體溫、上瞼下垂、運(yùn)動(dòng)抑制的影響 于實(shí)驗(yàn)d 10時(shí)記錄肛門體溫值，記錄各組大鼠上瞼下垂、運(yùn)動(dòng)抑制等情況。上瞼下垂觀察時(shí)，將大鼠放在支架上，觀察大鼠眼瞼不能睜開1／2的動(dòng)物只數(shù)，計(jì)算對(duì)抗率，對(duì)抗率／%＝（1－上瞼下垂大鼠／組內(nèi)動(dòng)物總數(shù)）×100%；運(yùn)動(dòng)抑制觀察時(shí)，將動(dòng)物放于直徑40 cm的圓形白板的中心位置觀察30 s，觀察不同組中大鼠呆在圈內(nèi)的時(shí)間。

2．4．3對(duì)糖水?dāng)z入量的影響 于實(shí)驗(yàn)的d 8，首先給予大鼠質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的蔗糖溶液，預(yù)適應(yīng)24 h后，大鼠禁食禁水12 h，之后每只大鼠單籠飼養(yǎng)給予兩只相同的水平，分別裝有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的蔗糖水和正常飲用水，統(tǒng)計(jì)1 h內(nèi)大鼠攝入的蔗糖溶液和飲用水量，計(jì)算出蔗糖消耗百分比［蔗糖消耗百分比＝蔗糖溶液攝入量／（蔗糖溶液攝入量＋飲用水?dāng)z入量）］。

2．4．4對(duì)血清、大腦皮層、海馬中5-HT、NA、SOD、MDA的影響 腹主動(dòng)脈取血，離心取血清。處死后取腦組織，即刻分離皮層組織與海馬組織，－70℃凍存，檢測(cè)前加生理鹽水制備組織勻漿液。檢測(cè)血清、海馬組織和大腦皮層中5-HT、NA、SOD、MDA水平。

2．5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以±s表示，各組間采用One-way ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

3　結(jié)果

3．1EAPR對(duì)小鼠TST不動(dòng)時(shí)間的影響 與對(duì)照組比較，EAPR（8、4 g·kg－1）連續(xù)ig給予小鼠10 d，均可明顯縮短懸尾不動(dòng)時(shí)間，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05，Tab 1）。

3．2EAPR對(duì)小鼠FST不動(dòng)時(shí)間的影響 與對(duì)照組比較，EAPR（8、4 g·kg－1）連續(xù)ig給予小鼠10 d，

均可明顯縮短游泳不動(dòng)時(shí)間，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0．05）。結(jié)果如Tab 2。

Tab 1 Effect of EAPR on murine immobility in TST of mice（±s，n＝10）

Tab 1 Effect of EAPR on murine immobility in TST of mice（±s，n＝10）

*P＜0．05，**P＜0．01 vs control animals

Group　Immobility time／s Control　102．90±19．67 Fluoxetine（3．6mg·kg－1）　17．90±15．44**EAPR（8 g·kg－1）　67．90±41．08*EAPR（4 g·kg－1）　70．50±40．77*EAPR（2 g·kg－1）78．60±51．57

Tab 2 Effect of EAPR on murine immobility in FST of mice（±s，n＝10）

Tab 2 Effect of EAPR on murine immobility in FST of mice（±s，n＝10）

*P＜0．05，**P＜0．01 vs control animals

Group　Immobility time／s Control　65．33±38．38 Fluoxetine（3．6mg·kg－1）　22．89±20．94**EAPR（8 g·kg－1）　29．11±28．89*EAPR（4 g·kg－1）　31．89±25．58*EAPR（2g·kg－1）65．56±40．72

3．3EAPR對(duì)利血平誘導(dǎo)的抑郁癥大鼠的影響

3．3．1EAPR對(duì)利血平誘導(dǎo)的抑郁癥大鼠體重、體溫和糖水消耗的影響 在造模前各組大鼠的體重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；從給藥開始至實(shí)驗(yàn)結(jié)束前，利血平誘導(dǎo)的抑郁癥大鼠各組大鼠體重與對(duì)照組相比，體重均下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。開始給予利血平腹腔注射各組大鼠肛溫有所下降，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；至實(shí)驗(yàn)結(jié)束前，EAPR 8.0 g·kg－1＋利血平組抑郁大鼠肛溫有所回升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；EAPR 8.0 g·kg－1＋利血平組抑郁大鼠糖攝取量明顯提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），EAPR對(duì)正常大鼠體重、體溫和糖水消耗無明顯影響（Tab 3）。

3．3．2EAPR對(duì)抑郁癥大鼠行為學(xué)的影響 末次利血平腹腔注射及給藥后12 h，空白對(duì)照組大鼠沒有眼瞼下垂現(xiàn)象；模型組有8只出現(xiàn)眼瞼下垂，與空白對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；氟西汀組有3只出現(xiàn)眼瞼下垂，與模型組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；EAPR 8．0 g·kg－1＋利血平組、EAPR 2．0 g·kg－1＋利血平組分別有4只、2只出現(xiàn)眼瞼下垂，與模型組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.01）。末次利血平腹腔注射及給藥后1 h后，和對(duì)照組比較，圈內(nèi)保留時(shí)間明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；和模型組比較，EAPR 8．0 g·kg－1＋利血平組、EAPR 2．0 g·kg－1＋利血平組圈內(nèi)保留時(shí)間明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；EAPR對(duì)正常大鼠圈內(nèi)保留時(shí)間和對(duì)抗率均無明顯影響（Tab 4）。

3．3．3EAPR對(duì)抑郁癥大鼠血清、海馬組織和大腦皮層中5-HT水平的影響 與對(duì)照組比較，模型組大鼠血清、海馬組織和大腦皮層中5-HT水平明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與模型組相比，EAPR 8．0 g·kg－1＋利血平組抑郁大鼠血清、海馬組織和大腦皮層5-HT水平明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.05）；EAPR對(duì)正常大鼠海馬組織和大腦皮層5-HT水平無明顯影響（Tab 5）。

3．3．4EAPR對(duì)抑郁癥大鼠血清、海馬組織和大腦皮層中NA水平的影響 與對(duì)照組比較，模型組大鼠血清、海馬組織和大腦皮層中NA水平明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與模型組相比，EA-PR 8．0 g·kg－1＋利血平組抑郁大鼠血清、海馬組織和大腦皮層NA水平明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.05）；EAPR對(duì)正常大鼠海馬組織和大腦皮層NA水平無明顯影響（Tab 6）。

Tab 3 Effect of EAPR on body weight，rectal temperature and sugar water intake of depression rats（±s，n＝10）

Tab 3 Effect of EAPR on body weight，rectal temperature and sugar water intake of depression rats（±s，n＝10）

*P＜0．05，**P＜0．01 vs model animals

Group Body weight／g 0 d　10 d Rectal tempreture／℃Sucrose preference／% Control　216．10±8．24　277．60±19．24　37．10±0．57　64．85±10．96**Model　208．10±12．02　217．60±14．62　36．38±0．55　47．44±13．45 Fluoxetine（1.8 mg·kg－1）＋Reserpine　213．30±8．98　228．86±10．07　36．53±0．78　62．71±11．62*EAPR（8 g·kg－1）＋Reserpine　211．30±7．97　227．60±13．40　36．98±0．56　59．18±9．97*EAPR（2 g·kg－1）＋Reserpine　210．80±8．77　222．00±14．22　36．77±0．39　56．88±18．09 EAPR（8 g·kg－1）　209．70±5．96　280．10±18．59　37．38±0．27　65．74±11．68**EAPR（2 g·kg－1）　209．10±7．75　279．10±13．33　36．99±0．53　61．87±11．53*

3．3．5EAPR對(duì)抑郁癥大鼠血清、大腦皮層、海馬組織等的SOD的活性的影響 與對(duì)照組比較，在連續(xù)給大鼠腹腔注射0.5 mg·kg－1利血平注射液以后，血清、大腦皮層、海馬組織等的SOD的活性明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。和模型組比較，EAPR 8．0 g·kg－1＋利血平組的血清、大腦皮層、海馬組織SOD的活性明顯提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

意義（P＜0.05）；EAPR對(duì)正常大鼠血清、大腦皮層、海馬組織SOD的活性無明顯影響（Tab 7）。

Tab 4 Effect of EAPR on akinesia of depression rats（±s，n＝10）

Tab 4 Effect of EAPR on akinesia of depression rats（±s，n＝10）

*P＜0．05，**P＜0．01 vs model animals

Group　Rest time／s Control　5．44±1．59**Model　28．30±2．91 Fluoxetine（1．8mg·kg－1）＋Reserpine　23．90±5．76*EAPR（8 g·kg－1）＋Reserpine　22．60±7．89*EAPR（2 g·kg－1）＋Reserpine　23．50±8．44 EAPR（8 g·kg－1）　5．80±2．78**EAPR（2 g·kg－1）　4．11±2．62**

3．3．6EAPR對(duì)抑郁癥大鼠血清血清、大腦皮層、海馬組織等的MDA的活性的影響 與對(duì)照組比較，在連續(xù)給大鼠腹腔注射0.5 mg·kg－1利血平注射液以后，血清、大腦皮層、海馬組織等的MDA水平無明顯影響，差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。和模型組比較，EAPR各劑量組對(duì)血清、大腦皮層、海馬組織MDA的水平無明顯影響，差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，Tab 8）。

4　討論

TST、FST是兩種種經(jīng)典而又能快速評(píng)價(jià)抗抑郁藥物藥效的方法。TST利用小鼠懸尾后企圖逃脫但又無法逃脫，從而放棄掙扎，進(jìn)入特有的抑郁不動(dòng)狀態(tài)；FST通過將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物置于一個(gè)局限的環(huán)境中（如水中），動(dòng)物在該環(huán)境中拼命掙扎試圖逃跑又無法逃脫，從而提供了一個(gè)無可回避的壓迫環(huán)境，一段時(shí)間的實(shí)驗(yàn)后，動(dòng)物即表現(xiàn)出典型的“不動(dòng)狀態(tài)”，反映“行為絕望狀態(tài)”。擬黑多刺蟻醇提物可縮短TST和FST小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間和游泳不動(dòng)時(shí)間，顯示出良好的抗抑郁作用。TST、FST涉及神經(jīng)中樞5-HT、NA系統(tǒng)的敏感性［7－8］，因此擬黑多刺蟻醇提物抗抑郁作用，可能與神經(jīng)中樞的5-HT、NA調(diào)節(jié)系統(tǒng)有關(guān)。

Tab 5 Effect of EAPR on the concentration of 5-HT in serum，hippocampus and prefrontal cortex of depression rats（±s，n＝10）

Tab 5 Effect of EAPR on the concentration of 5-HT in serum，hippocampus and prefrontal cortex of depression rats（±s，n＝10）

*P＜0．05，**P＜0．01 vs model animals

Group 5-HT Serum／μg·L－1　Hippocampus／ng·g－1wwt　Prefrontal cortex／ng·g－1wwt Control　15．06±6．96　66．40±14．63　74．27±9．63**Model　6．52±3．21　46．30±10．48　45．08±9．59 Fluoxetine（1．8mg·kg－1）＋Reserpine　10．37±3．73　62．04±10．24　59．03±11．97*EAPR（8 g·kg－1）＋Reserpine　13．22±6．94　60．69±7．33　56．29±12．02*EAPR（2 g·kg－1）＋Reserpine　13．44±12．70　59．15±9．42　52．70±10．84 EAPR（8 g·kg－1）　21．28±11．20　69．23±10．94　78．58±5．57**EAPR（2 g·kg－1）　13．01±10．02　65．69±8．34　76．80±4．96**

Tab 6 Effect of EAPR on the concentration of NA in serum，hippocampus and prefrontal cortex of depression rats（±s，n＝10）

Tab 6 Effect of EAPR on the concentration of NA in serum，hippocampus and prefrontal cortex of depression rats（±s，n＝10）

*P＜0．05，**P＜0．01 vs model animals

Group NA Serum／ng·L－1　Hippocampus／ng·g－1wwt　Prefrontal cortex／ng·g－1wwt Control　1．76±0．91　186．60±23．22　264．48±35．54*Model　0．49±0．31　159．90±12．64　205．98±21．74 Fluoxetine（1．8mg·kg－1）＋Reserpine　1．72±1．34　180．19±18．73　261．33±29．19*EAPR（8 g·kg－1）＋Reserpine　1．25±0．82　177．54±19．69　253．60±27．62*EAPR（2 g·kg－1）＋Reserpine　0．32±0．16　172．07±20．09　232．79±34．81 EAPR（8 g·kg－1）　2．17±1．51　190．70±12．70　265．50±33．87*EAPR（2 g·kg－1）　0．93±0．77　189．78±16．40　262．57±39．55*

Tab 7 Effect of EAPR on the activity of SOD in serum，hippocampus and cerebral cortex of depression rat（±s，n＝10）

Tab 7 Effect of EAPR on the activity of SOD in serum，hippocampus and cerebral cortex of depression rat（±s，n＝10）

*P＜0．05，**P＜0．01 vs model animals

Group SOD Serum／kU·L－1　Hippocampus／kU·g－1Pro　Prefrontal cortex／kU·g－1Pro Control　249．67±18．75　98．18±8．34　63．82±8．17**Model　177．43±40．65　86．75±6．10　49．60±3．49 Fluoxetine（1．8mg·kg－1）＋Reserpine　225．14±34．29　92．55±15．43　56．43±4．36**EAPR（8 g·kg－1）＋Reserpine　219．07±33．51　98．64±16．22　57．88±10．58*EAPR（2 g·kg－1）＋Reserpine　212．48±42．36　94．95±12．91　56．29±11．04 EAPR（8 g·kg－1）　232．71±34．43　99．21±28．82　62．28±5．13**EAPR（2 g·kg－1）　234．01±43．54　97．52±14．13　64．88±9．90**

囊泡單胺轉(zhuǎn)運(yùn)體是重要的神經(jīng)遞質(zhì)載體，將遞質(zhì)儲(chǔ)存在囊泡中并運(yùn)送到細(xì)胞膜表面，隨后釋放到

突觸間隙。如果囊泡單胺轉(zhuǎn)運(yùn)體的形成、功能受到抑制或損害，突觸前神經(jīng)末梢產(chǎn)生的去甲腎上腺素、5-羥色胺、多巴胺等物質(zhì)，在未受保護(hù)的情況下被細(xì)胞質(zhì)中的MAO以及兒茶酚鄰位甲基轉(zhuǎn)移酶（COMT）代謝，因而永遠(yuǎn)無法到達(dá)突觸后膜，使腦內(nèi)NA、5-HT等神經(jīng)遞質(zhì)耗竭可誘發(fā)抑郁癥。利血平不可逆抑制囊泡單胺轉(zhuǎn)運(yùn)體，使腦內(nèi)NA、5-HT等神經(jīng)遞質(zhì)耗竭。在長(zhǎng)期連續(xù)給大鼠腹腔注射利血平注射液后，大鼠出現(xiàn)體溫下降、體重減輕、眼瞼下垂、糖水?dāng)z取量下降、運(yùn)動(dòng)不能等抑郁表征，同時(shí)血清、海馬組織、大腦皮層的NA、5-HT水平下降。擬黑多刺蟻醇提物可提高抑郁大鼠體溫，提高糖水?dāng)z取量，逆轉(zhuǎn)抑郁大鼠快感消失的癥狀，可拮抗利血平大鼠眼瞼下垂、減少運(yùn)動(dòng)不能時(shí)間，恢復(fù)抑郁大鼠運(yùn)動(dòng)能力，明顯提高血液、海馬組織、大腦皮層的NA、5-HT水平，而對(duì)正常大鼠體溫、體重、糖水?dāng)z取量、眼簾下垂、運(yùn)動(dòng)不能時(shí)間，血液、海馬組織、大腦皮層的NA、5-HT水平無影響。提示擬黑多刺蟻醇提物可能通過調(diào)節(jié)體內(nèi)NA、5-HT水平達(dá)到抗抑郁的作用。

Tab 8 Effect of EAPR on the activity of MDA in serum，hippocampus and cerebral cortex of depression rats（±s，n＝10）

Tab 8 Effect of EAPR on the activity of MDA in serum，hippocampus and cerebral cortex of depression rats（±s，n＝10）

Group MDA Serum／μmol·L－1　Hippocampus／μmol·g－1Pro　Prefrontal cortex／μmol·g－1Pro Control 3．13±0．36　3．57±0．68　2．51±0．82 Model　3．03±0．60　3．80±0．67　2．55±0．54 Fluoxetine（1．8mg·kg－1）＋Reserpine　2．96±0．51　3．74±0．62　2．52±0．39 EAPR（8 g·kg－1）＋Reserpine　3．23±0．79　3．77±0．95　2．52．±0．68 EAPR（2 g·kg－1）＋Reserpine　3．18±0．97　3．70±0．36　2．47±0．81 EAPR（8 g·kg－1）　3．02±1．50　3．29±0．45　2．58±0．45 EAPR（2 g·kg－1）2．35±0．92　3．91±0．31　1．98±0．34

海馬、大腦皮層是與情緒行為和學(xué)習(xí)記憶功能密切相關(guān)的重要腦區(qū)，受到諸多病理因素的影響時(shí)，會(huì)受氧化應(yīng)激影響。當(dāng)發(fā)生重度抑郁時(shí)，下丘腦－垂體－腎上腺軸受到影響，使海馬的毒素－皮質(zhì)醇增多而阻止其神經(jīng)元的再生［9－11］。研究表明，抑郁者的海馬產(chǎn)生明顯的病理學(xué)改變，包括體積減小，神經(jīng)元變性、壞死，大腦或血清中的MDA的含量較正常組增高，SOD的活性下降［12－13］。擬黑多刺蟻醇提物可提高海馬、皮層組織、血清的SOD的活性，說明黑多刺蟻醇提物能提高機(jī)體抗氧化能力，提高抑郁癥大鼠機(jī)體清除自由基能力，減小細(xì)胞受損程度，保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞，最終緩解抑郁癥狀。這和我們先前的研究結(jié)果，黑多刺蟻醇提物可提高亞急性衰老小鼠海馬和腦皮層組織SOD活性［14］，有相似之處，顯示出良好的抗氧化活性。

擬黑多刺蟻富含不飽和脂肪酸，以十八碳烯酸、十六碳烯酸為主?；厝鹑A等［15］研究表明，黑螞蟻抗氧化的的IC%為0.43 g·L－1，當(dāng)濃度為2.0 g·L－1時(shí)，抗氧化性為89.39%，具有較強(qiáng)的抗氧化性能。在我們的前期研究中發(fā)現(xiàn)，擬黑多刺蟻可提高亞急性衰老小鼠血清GSH含量，提高亞急性衰老小鼠海馬和腦皮層組織SOD活力、提高腦皮層組織GSH含量水平［14］。最近報(bào)道ω-不飽和脂肪酸具有明顯的抗抑郁作用［16－18］。雖然，我們還不能確定擬黑多刺蟻抗抑郁作用的物質(zhì)基礎(chǔ)是不飽和脂肪酸，但是基于抑郁癥和氧化應(yīng)激的關(guān)系，擬黑多刺蟻不飽和脂肪酸的藥理活性值得我們關(guān)注。

抑郁癥的發(fā)生機(jī)制至今不明，相關(guān)的神經(jīng)遞質(zhì)包括5-HT、NA、DA為代表的單胺遞質(zhì)和以谷氨酸、γ-氨基丁酸、促糖皮質(zhì)激素釋放因子、細(xì)胞因子為代表的非單胺類遞質(zhì)，相關(guān)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路包括cAMP-CREP通路、有絲分裂原激活的蛋白激酶通路、PKC信號(hào)通路、糖原合成酶激酶-3β、細(xì)胞存活通路等［19－24］。擬黑多刺蟻醇提物可使5-HT、NA水平升高趨于正常，同時(shí)增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力，對(duì)抑郁癥起著明顯的防治作用，提示黑多刺蟻醇提物對(duì)抑郁癥的作用可能具有多靶點(diǎn)和多環(huán)節(jié)特征。黑多刺蟻醇提物復(fù)雜的作用機(jī)制和作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，需要進(jìn)一步研究。

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Antidepressive-like effect of alcoholic extract of Polyrhachis vicina Roger

WEI Gui-ning1，CHU Shi-feng2，SU Hua1，HE Fei1，SU Qi-biao3，LU Wen-jie1，LU Guo-shou1，HUANG Zhou-feng1，TAN Xiao1，LIN xiao1，ZENG Xian-biao1，WEI Bao-wei1，CHEN Nai-hong4
（1．Dept of Pharmaocology，Guangxi Institute of Chinese Medicine and Pharmaceutical Science，Nanning 530022，China；2．TCM School，Hunan University of Chinese Medicine，Changsha 410208，China；3．College of Health Science，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China；4．Pharmacy College，Hunan University of Chinese Medicine，Changsha 410208，China）

Abstract：Aim To investigate the antidepressive-like effect of ethyl alcohol extract of Polyrhachis vicina Rog-er（EAPR），and its mechanism．Methods EAPR was prepared by ethanol extraction．Its anti-depressive effect was investigated by tail suspension test（TST）and forced swimming test（FST）．Furthermore，repeated

doses of reserpine was used for preparing the depres-sive rats．Results EAPR has definitely anti-depres-sive effect，as evidenced by the decreased immobility time in FST and TST at the doses of 8 and 4 g·kg－1（P＜0.05）．In the repeated reserpine evoked depres-sive rats，EAPR antagonized the symptoms induced by monoamines depletion and attenuated the anhedonia，as manifested by reversed hypothermia，akinesia and sucrose consumption at the doses of 8 and 2 g·kg－1（P＜0.05，P＜0.01）．Neuro-chemical studies showed that AFPR significantly increased the concentration of monoamines，including 5-hydroxytryptamine（5-HT） and noradrenaline（NA）at the dose of 8 g·kg－1（P＜0.05），and had no effect on normal rats．Furthermore，EAPR increased the activity of superoxide dismutase （SOD）in serum，hippocampus and cerebral cortex at the dose of 8 g·kg－1（P＜0.05）．Conclusion EA-PR possesses the definite antidep ressive properties，connected with the regulation of neurotransmitter me-tabolism and the nerve cells antioxidant effect．

Key words：Polyrhachis vicina Roger；depression；mechanism；5-hydroxytryptamine；noradrenaline；su-peroxide dismutase

作者簡(jiǎn)介：韋桂寧（1973－），男，碩士，副主任藥師，研究方向：中藥藥理學(xué)，Tel：0771-5869102，E-mail：weiguining2004＠163．com；陳乃宏（1961－），男，博士，研究員，博士生導(dǎo)師，研究方向：神經(jīng)系統(tǒng)疾患創(chuàng)新藥物開發(fā)及作用機(jī)制，通訊作者，E-mail：chennh＠imm．a(chǎn)c．cn

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No 81360653，81560663）；廣西自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No 2011GXNSFA018258）；廣西中醫(yī)藥民族醫(yī)藥繼承創(chuàng)新工程課題（No GZPT13-29）

收稿日期：2015－05－20，修回日期：2015－06－23

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1001－1978（2015）09－1280－07

doi：10．3969／j．issn．1001－1978．2015．09．020