趙德春，徐能潮，王 軍

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·論著·

配方營養(yǎng)素對母乳喂養(yǎng)嬰兒骨密度和免疫球蛋白水平的影響研究

趙德春，徐能潮，王 軍

目的 探討配方營養(yǎng)素對母乳喂養(yǎng)嬰兒骨密度(BMD)和免疫球蛋白水平的影響。方法 選取2012年1—5月在武義縣婦幼保健院接生的嬰兒74例，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為A(n=25)、B(n=28)、C(n=21)3組，A組采取組方喂養(yǎng)方案(即母乳喂養(yǎng)聯(lián)合配方營養(yǎng)素)，B組進(jìn)行單純性的母乳喂養(yǎng)，C組在母乳喂養(yǎng)的基礎(chǔ)上補(bǔ)充外源性維生素D(VD)；分別于出生時及6、12月齡時，檢測血清1，25-二羥維生素D3〔1,25(OH)2D3〕、免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)水平及測定T細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+)比例、BMD水平，并進(jìn)行比較分析。結(jié)果 A組嬰兒6、12月齡時血清1,25(OH)2D3、IgA、IgG、IgM水平和CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞比例及BMD水平均高于B、C組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。C組嬰兒6月齡時血清1,25(OH)2D3、IgA、IgG、IgM水平及CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞比例均高于B組，12月齡時僅血清1,25(OH)2D3水平高于B組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；而6、12月齡時BMD水平與B組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 單純性的母乳喂養(yǎng)嬰兒表現(xiàn)出較低的維生素水平和BMD；補(bǔ)充單一的VD雖然能夠提高嬰兒的血清1,25(OH)2D3水平，但對免疫球蛋白和BMD的作用相對受限；而配方營養(yǎng)素可同時提高嬰兒的免疫球蛋白和BMD水平，具有良好的應(yīng)用前景。

母乳喂養(yǎng)；嬰兒；配方營養(yǎng)素；骨密度；免疫球蛋白亞類

趙德春，徐能潮，王軍.配方營養(yǎng)素對母乳喂養(yǎng)嬰兒骨密度和免疫球蛋白水平的影響研究[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2015，18(22)：2684-2687,2691.[www.chinagp.net]

Zhao DC,Xu NC,Wang J.Effect of formulated nutrients on bone mineral density and immunoglobulin level of breast-fed infants[J].Chinese General Practice，2015，18(22)：2684-2687,2691.

維生素D(vitamin D,VD)是與機(jī)體鈣磷平衡及骨骼健康密切相關(guān)的脂溶性維生素之一。兒童VD缺乏可能導(dǎo)致骨量不足，引發(fā)佝僂癥；成年VD缺乏則多表現(xiàn)為骨密度(bone mineral density,BMD)降低，易發(fā)脆性骨折[1-3]。基于骨骼系統(tǒng)生長迅速，VD缺乏在嬰兒成長過程中極為常見[4]，隨著VD營養(yǎng)補(bǔ)充劑的應(yīng)用，VD缺乏癥的發(fā)生率在過去幾十年得到了顯著改善；然而，佝僂癥患兒常常并發(fā)營養(yǎng)不良和免疫力低下的狀態(tài)，且臨床對于營養(yǎng)狀態(tài)與患兒骨骼健康的相關(guān)報道較少。復(fù)合維生素和膳食補(bǔ)充劑均為嬰幼兒配方營養(yǎng)素，復(fù)合維生素除了多種維生素外，還含有二十二碳六烯酸(DHA)，有助于嬰兒智力、視力發(fā)育及提高免疫力；膳食補(bǔ)充劑艾兒鐵氨基酸鐵濃縮糖漿滴劑的主要成分為甘氨酸鐵，不僅能夠補(bǔ)充一定量的微量元素，還能夠提高維生素A(VA)、維生素E(VE)、維生素C(VC)等多種維生素的存留量。母乳喂養(yǎng)對維持嬰兒免疫力具有積極意義，是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)提倡的哺育方式，本研究分別采用配方營養(yǎng)素和VD補(bǔ)充劑輔助母乳喂養(yǎng)，并與單純母乳喂養(yǎng)作對照分析，以探討配方營養(yǎng)素對母乳喂養(yǎng)嬰兒骨骼生長和免疫功能的重要性，現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2012年1—5月在武義縣婦幼保健院接生的嬰兒74例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)母體健康，年齡為23～35歲；(2)均為足月順產(chǎn)兒；(3)出生后母乳喂養(yǎng)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)先天性新生兒疾??；(2)雙胎或多胎；(3)妊娠期疾??；(4)感染及免疫系統(tǒng)疾??；(5)未完成研究全程或失訪者。本研究經(jīng)該院倫理委員會批準(zhǔn)，嬰兒家屬均知情同意并簽署同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 喂養(yǎng)方法 采用隨機(jī)數(shù)字表法將嬰兒分為A(n=25)、B(n=28)、C(n=21) 3組。B組進(jìn)行單純性的母乳喂養(yǎng)，A、C組嬰兒均在2月齡時給予外源性補(bǔ)充劑。A組在母乳喂養(yǎng)的基礎(chǔ)上給予配方營養(yǎng)素，即復(fù)合維生素和膳食補(bǔ)充劑。其中復(fù)合維生素〔美國 Twinlab，DHA嬰兒綜合維生素滴劑，含VA、VC、維生素B1(VB1)、維生素B2(VB2)、DHA等〕，按月齡給予不同用量，2～6月齡時0.5 ml/d，7～12月齡時1.0 ml/d；膳食補(bǔ)充劑(艾兒鐵氨基酸鐵濃縮糖漿滴劑，鐵元素含量為1.67 g/L)，按月齡給予不同用量，2～6月齡時1.0 ml/d，7～12月齡時2.0 ml/d。C組在母乳喂養(yǎng)的基礎(chǔ)上補(bǔ)充外源性VD(美國ChildLife，維生素D3補(bǔ)充液)，2～12月齡，5滴/d。

1.2.2 觀察指標(biāo)及檢測方法 分別于嬰兒出生時及6、12月齡3個時間點抽取空腹靜脈血，采用全自動放射免疫分析儀(M240172，北京中西遠(yuǎn)大科技有限公司)，以放射免疫法檢測血清1，25-二羥維生素D3〔1,25(OH)2D3〕水平；以免疫比濁法檢測分泌型免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)水平，試劑盒均由上海撫生實業(yè)有限公司提供；以流式細(xì)胞儀測定T細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+)比例，熒光標(biāo)記抗體Anti-CD3+/PE-Cy5(克隆號：4AT3，亞型Mouse IgG2a)、Anti-CD4+/FITC(克隆號：4AT4，亞型Mouse IgG2b)、Anti-CD8+/PE(克隆號：COV8，亞型Mouse IgG1)均由北京四正柏生物科技有限公司提供。同時，分別于患兒出生時及6、12月齡時，采用Lunar Expert-XL DEX分析儀(美國Lunar Corp)，以雙能X線吸收法測定BMD水平。

2 結(jié)果

2.1 3組嬰兒一般資料比較 3組嬰兒的母親年齡、有穩(wěn)定工作比例、本科及以上學(xué)歷比例及男性比例、孕期、出生時體質(zhì)量、出生時身長、出生時頭圍、城市戶口比例、6～11月出生比例間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，見表1)，具有可比性。

2.2 3組嬰兒不同時間點血清25(OH)2D3水平比較 3組嬰兒出生時血清1,25(OH)2D3水平間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；而6、12月齡時血清1,25(OH)2D3水平間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，且兩兩比較差異亦均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表2)。2.3 3組嬰兒不同時間點BMD水平比較 3組嬰兒出生時BMD水平間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；而6、12月齡時BMD水平間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，且B、C組BMD水平與A組比較，差異亦均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表3)。

Table 2 Comparison of serum 1,25(OH)2D3level among three groups at different time points

組別例數(shù)出生時6月齡12月齡A組25184±26244±62533±58B組28191±23485±41a283±31aC組21187±27376±48ab435±43abF值08841365715258P值0164<0001<0001

注：1,25(OH)2D3=1，25-二羥維生素D3；與A組比較，aP<0.05；與B組比較，bP<0.05

表1 3組嬰兒一般資料比較

注：a為χ2值

2.4 3組嬰兒不同時間點血清免疫球蛋白水平比較 3組嬰兒出生時血清IgA、IgG、IgM水平間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；而6月齡時血清IgA、IgG、IgM水平間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，且兩兩比較差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；12月齡時血清IgA、IgG、IgM水平間差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，且B、C組血清IgA、IgG、IgM水平與A組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表4)。

2.5 3組嬰兒不同時間點T淋巴細(xì)胞亞群比例比較 3組嬰兒出生時CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞比例間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；而6月齡時CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞比例間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，且兩兩比較差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；12月齡時CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞比例間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，且B、C組CD3+、CD4+T淋巴細(xì)胞比例與A組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。另外，3組嬰兒出生時及6、12月齡時CD8+T淋巴細(xì)胞比例間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，見表5)。

Table 3 Comparison of BMD level among three groups at different time points

組別例數(shù)出生時6月齡12月齡A組25021±006031±010033±011B組28020±009022±008a027±008aC組21019±008023±006a028±007aF值053528513005P值040600310026

注：BMD=骨密度；與A組比較,aP<0.05

表4 3組嬰兒不同時間點血清免疫球蛋白水平比較±s，g/L)

注：與A組比較，aP<0.05；與B組比較，bP<0.05

表5 3組嬰兒不同時間點T淋巴細(xì)胞亞群比例比較±s，%)

注：與A組比較，aP<0.05；與B組比較，bP<0.05

3 討論

血清1,25(OH)2D3水平主要由兩方面因素決定：一是飲食攝取量；二是暴露于陽光時自身皮膚合成量[5]。本研究選取嬰兒時，除對母體的基本統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)，如年齡、工作、學(xué)歷等做出隨機(jī)分配外，對嬰兒的性別、出生時體質(zhì)量、出生時頭圍、出生時身長及出生季節(jié)等可能影響陽光下皮膚合成作用的因素亦考慮在內(nèi)，以最大限度確保各組間的1,25(OH)2D3皮膚合成量不會對試驗結(jié)果造成干擾。本研究結(jié)果顯示，A組嬰兒6、12月齡時血清1,25(OH)2D3、IgA、IgG、IgM 水平及BMD水平均高于B、C組；C組嬰兒6、12月齡時血清1,25(OH)2D3水平均高于B組；同時，C組嬰兒6月齡時血清IgA、IgG、IgM水平均高于B組，而12月齡時兩組無差異；另外，C組嬰兒6、12月齡時BMD水平與B組比較均無差異。

從血清1,25(OH)2D3水平來看，其基本趨勢為A組>C組>B組。健康足月新生兒出生時，主要依靠從母體獲得的1,25(OH)2D3維持骨骼生長；1,25(OH)2D3的t1/2約為12～20 d，因此該部分1,25(OH)2D3可在出生2個月左右耗竭[6-7]。嬰兒快速生長期的VD消耗量約為200 U/d，而正常女性的母乳中1,25(OH)2D3水平較少(12～60 U/L)，不足以維持其骨骼系統(tǒng)的穩(wěn)定性；因此，完全母乳喂養(yǎng)的嬰兒存在較高風(fēng)險的VD不足[8-9]。本研究對C組嬰兒補(bǔ)充外源性VD 200 U/d(約等同于其日消耗量)，A組患兒則在滿足基本VD劑量的基礎(chǔ)上補(bǔ)充DHA、VA、VC、氨基酸及微量元素等。結(jié)果顯示，單純母乳喂養(yǎng)的嬰兒血清1,25(OH)2D3水平較低，VD補(bǔ)充劑可提高血清1,25(OH)2D3水平，而使用復(fù)合維生素和膳食補(bǔ)充劑時，效果更佳。

從BMD水平來看，其基本趨勢為A組>B組=C組。血清1,25(OH)2D3水平對于成年人的BMD具有決定性意義；然而，對于嬰兒而言，已經(jīng)研究證實，BMD水平與血清1,25(OH)2D3水平無直接相關(guān)性[10]。本研究結(jié)果亦顯示，單純VD補(bǔ)充可有效提高嬰兒血清1,25(OH)2D3水平，但不足以改變其BMD水平。除VD狀態(tài)，嬰兒BMD水平尚與骨礦物質(zhì)含量(bone mineral content,BMC)密切相關(guān)，如鈣、鋅、磷、鎂等。本研究結(jié)果從某種意義上說明，除1,25(OH)2D3以外，單純母乳喂養(yǎng)提供給嬰兒的礦物質(zhì)及微量元素相對匱乏，從這一點分析，配方營養(yǎng)素對于維持嬰兒BMD至關(guān)重要。

從免疫球蛋白和T細(xì)胞亞群來看，其基本趨勢與患兒月齡有關(guān)，6月齡時A組>C組>B組，12月齡時A組>B組=C組。提示較小嬰兒補(bǔ)充VD，尚可有效提高血清免疫球蛋白水平；對于較大嬰兒而言，單純的VD補(bǔ)充效果差強(qiáng)人意。嬰兒出生之初，VD缺乏可能影響骨骼生長趨勢，即成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的比例，兩者均與免疫細(xì)胞同源，此為VD可能影響機(jī)體免疫功能的理論基礎(chǔ)[11]。隨著嬰兒的迅速成長，除VD以外，對礦物質(zhì)、氨基酸、微量元素等其他營養(yǎng)素的需求亦更加明顯，可能是單純VD補(bǔ)充不足以提高免疫球蛋白水平的重要原因之一。因此，該結(jié)果從免疫角度進(jìn)一步闡明了配方營養(yǎng)素對母乳喂養(yǎng)嬰兒的重要性。

綜上所述，單純性的母乳喂養(yǎng)嬰兒表現(xiàn)出較低的維生素水平和BMD；補(bǔ)充單一的VD雖然能夠提高嬰兒血清1,25(OH)2D3水平，但對免疫功能和BMD的作用相對受限；而配方營養(yǎng)素可同時提高嬰兒的免疫功能和BMD水平，具有良好的應(yīng)用前景。

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(本文編輯：崔沙沙)

Effect of Formulated Nutrients on Bone Mineral Density and Immunoglobulin Level of Breast-fed Infants.

ZHAODe-chun,XUNeng-chao,WANGJun.

DepartmentofPediatrics,MaternalandChildCareServiceCentreofWuyiCounty,Jinhua321200,China

Objective To explore the effect of formulated nutrients on bone mineral density and immunoglobulin level of breast-fed infants.Methods We enrolled 74 newborns in Maternal and Child Care Service Centre of Wuyi County.Using random number table method,the infants were divided into three groups:group A(n=25),group B(n=28) and group C(n=21).The group A was fed with breast milk combined with formulated nutrients,the group B was purely fed with breast milk,and group C was fed with breast milk complemented with vitamin D.At birth,6 months after and 12 months after,serum concentrations of 1,25(OH)2D3and immunoglobulin(IgA,IgG,IgM) levels,T cell subsets(CD3+、CD4+、CD8+) proportions and BMD level were detected and compared among the three groups.Results Group A was higher(P<0.05) than group B and group C in 1,25(OH)2D3serum concentration,levels of IgA,IgG and IgM，proportions of CD3+and CD4+T lymphocytes and BMD level 6 months and 12 months after birth.Group C was higher(P<0.05) than group B in 1,25(OH)2D3serum concentration,levels of IgA,IgG and IgM and proportions of CD3+and CD4+T lymphocytes 6 months after birth,and group C was higher(P<0.05) than group B only in 1,25(OH)2D3serum concentration 12 months after birth;6 and 12 months after birth,no significant difference was noted between group B and group C in BMD level(P>0.05).Conclusion Infants fed with pure breast milk show lower BMD and vitamin level.Although the only supplement of Vitamin D can improve 1,25(OH)2D3serum concentration in infants,its effect on bone mineral density and immunoglobulin level is relatively limited.Formulated nutrients could increase the immunoglobulin and BMD level and have a favorable application prospect.

Breast feeding;Infant;Formulated nutrients;Bone mineral density;Immunoglobulin subunits

321200浙江省金華市，武義縣婦幼保健院兒科

趙德春，321200浙江省金華市，武義縣婦幼保健院兒科；E-mail:drzhaodechun@126.com

R 151.43

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2015.22.015

2015-04-13；

2015-06-23)