孟騰騰，魏 虹，管東方，吳廣勝，張志威，齊新宇

?

·論著·

姜黃素對人早幼粒白血病細胞增殖和凋亡的影響及其機制研究

孟騰騰，魏 虹，管東方，吳廣勝，張志威，齊新宇

目的 研究姜黃素對人早幼粒白血病細胞HL-60細胞增殖和凋亡的影響及其可能的作用機制。方法 將HL-60細胞設立實驗組、陰性對照組、空白對照組，實驗組分姜黃素(0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 μmol/L)單獨亞組和姜黃素(0、5.0、10.0、20.0 μmol/L+30 μmol/L GANT61)聯(lián)合亞組，于作用24、48 h時觀察。采用CCK-8法檢測HL-60細胞增殖，計算細胞增殖抑制率；并評價體外聯(lián)合應用藥物對細胞毒性作用是否有協(xié)同作用；采用AnnexinⅤ-FITC/PI雙染檢測細胞凋亡率。結果 姜黃素單獨亞組和姜黃素聯(lián)合亞組在24、48 h對HL-60細胞的抑制率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；培養(yǎng)至24、48 h時，5.0、10.0、20.0 μmol/L姜黃素聯(lián)合亞組分別與5.0、10.0、20.0 μmol/L單獨亞組對HL-60增殖抑制率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；培養(yǎng)至24、48 h時，10.0、20.0 μmol/L姜黃素聯(lián)合亞組與0 μmol/L姜黃素聯(lián)合亞組對HL-60增殖抑制率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。培養(yǎng)至24 h時，5.0 μmol/L姜黃素與30 μmol/L GANT61對HL-60細胞的增殖抑制率呈拮抗作用，培養(yǎng)至48 h時，呈單純相加作用；24、48 h時，10.0、20.0 μmol/L姜黃素與30 μmol/L GANT61聯(lián)合用藥對HL-60細胞的增殖抑制率均呈增強作用。培養(yǎng)至24、48 h時，姜黃素、GANT61和姜黃素+GANT61對HL-60細胞凋亡率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；其中，培養(yǎng)至24 h時，10.0、20.0 μmol/L姜黃素聯(lián)合用藥分別與10.0、20.0 μmol/L姜黃素單獨用藥對HL-60細胞凋亡率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；培養(yǎng)至48 h時，5.0、10.0、20.0 μmol/L姜黃素聯(lián)合用藥分別與5.0、10.0、20.0 μmol/L姜黃素單獨用藥對HL-60細胞凋亡率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；5.0、10.0、20.0 μmol/L姜黃素聯(lián)合用藥與GANT61單獨用藥對HL-60細胞凋亡率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論 姜黃素和GANT61聯(lián)合用藥對HL-60細胞增殖具有協(xié)同抑制作用，顯著促進HL-60細胞凋亡，而且與濃度和時間有關，姜黃素可能通過抑制Hedgehog信號通路而起作用。

白血病，髓樣，急性；姜黃素；GANT61；Hedgehog-Gli信號通路

姜黃素(curcumin)是一種從姜黃根莖中提取的天然化合物，具有抗氧化[1]、抗感染[2]、抗動脈粥樣硬化[3]、抗纖維化[4]、神經(jīng)保護[5]、抗腫瘤[6-7]等作用。姜黃素對人早幼粒白血病細胞HL-60細胞生長有抑制作用，并誘導細胞凋亡[8]。Hedgehog(Hh)信號通路異常活化參與多種腫瘤形成，如皮膚基底細胞癌、小腦成神經(jīng)管細胞瘤、橫紋肌肉瘤、胰腺癌、結腸癌、胃癌、肺癌、前列腺癌[9]。GANT61是特異性抑制Gli轉錄的Hh-Gli信號通路抑制劑，其可以抑制薯蕷皂苷元(diosgenin)介導的HEL細胞中巨核細胞分化[10]，抑制卵巢癌細胞的侵襲和遷移[11]，抑制非小細胞型肺癌上皮間質(zhì)轉化[12]，抑制腫瘤細胞增殖、促進其凋亡[13-14]。姜黃素通過抑制Hh信號通路進而抑制膠質(zhì)瘤細胞增殖及細胞集落形成，并顯示出濃度和時間依賴性[7]。本實驗在體外研究姜黃素單獨及與GANT61聯(lián)合用藥對HL-60細胞增殖、凋亡的影響，為今后白血病臨床用藥提供部分實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥物和試劑 GANT61為Selleck公司產(chǎn)品；姜黃素(純度≥94%)購于Sigma公司；RPMI 1640培養(yǎng)基和胎牛血清為Gibco公司產(chǎn)品；Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)購自日本同仁化學研究所(Dojindo)；AnnexinⅤ-FITC細胞凋亡檢測試劑盒購自南京凱基生物科技發(fā)展有限公司。

1.2 細胞株及培養(yǎng)條件 HL-60細胞購自中國科學院細胞庫。細胞培養(yǎng)采用含10%胎牛血清，1×105U/L青霉素，含1×105U/L鏈霉素的RPMI 1640培養(yǎng)液，在37 ℃，5% CO2飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每48 h換液傳代1次。取生長良好，細胞活性>95%的細胞進行實驗。

1.3 方法

1.3.1 CCK-8實驗分組 將HL-60細胞設立實驗組、陰性對照組、空白對照組，每組設5個復孔，實驗組分姜黃素(0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 μmol/L)單獨亞組和姜黃素(5.0、10.0、20.0 μmol/L)、GANT61(30 μmol/L)聯(lián)合亞組，陰性對照組為完全培養(yǎng)基+DMSO+HL-60細胞，空白對照組為完全培養(yǎng)基+DMSO，分別作用24、48 h。

1.3.2 CCK-8法檢測細胞增殖 取對數(shù)生長期HL-60細胞，調(diào)整細胞密度，按4.5×104/孔接種細胞于96孔板中，24 h后加入上述不同濃度的藥物，放入培養(yǎng)箱中孵育到上述各相應時間，每孔加入10 μl CCK-8溶液作用2 h，用酶標儀測450 nm處各孔的吸光度(OD)值，最后按以下公式計算各實驗組抑制率，抑制率(%)=〔1-(實驗組OD值-空白對照組OD值)/(陰性對照組OD值-空白對照組OD值)〕×100%。

1.3.3 協(xié)同作用 評價體外聯(lián)合應用藥物對細胞毒性作用是否有協(xié)同作用，參照公式判斷：Q=Ea+b/(Ea+Eb-Ea×Eb)，其中Ea+b為聯(lián)合用藥抑制率，Ea和Eb分別為a藥和b藥的抑制率。式中分子代表“實測合并效應”，分母是“期望合并效應”。Q值0.86～1.15為單純相加(+)，Q值1.16～2.00為增強(++)，Q值0.55～0.85為拮抗(-)，Q值<0.55為明顯拮抗(--)。

1.3.4 AnnexinⅤ-FITC/PI雙染檢測細胞凋亡率 收集對數(shù)生長期HL-60細胞，調(diào)整細胞濃度為3×108/L，培養(yǎng)24 h后，分別單獨加入姜黃素(0、5.0、10.0、20.0 μmol/L)、GANT61(30 μmol/L)和姜黃素(5.0、10.0、20.0 μmol/L)、GANT61(30 μmol/L)聯(lián)合應用，每個濃度均設3個復孔，分別作用24、48 h后，收獲培養(yǎng)細胞，用冷PBS洗滌2次，離心去上清液。用Annexin結合液重懸細胞，調(diào)整細胞濃度為1×109/L，向細胞懸液加5 μl AnnexinⅤ-FITC混勻，4 ℃避光孵育15 min，加入10 μl PI，4 ℃避光孵育5 min，上流式細胞儀檢測。

2 結果

2.1 實驗組對HL-60細胞的增殖抑制效應 姜黃素單獨亞組和姜黃素聯(lián)合亞組在24、48h對HL-60細胞的抑制率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；其中其他各濃度與0μmol/L姜黃素單獨亞組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；培養(yǎng)至24、48h時，5.0、10.0、20.0μmol/L姜黃素聯(lián)合亞組分別與5.0、10.0、20.0μmol/LHL-60增殖抑制率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；培養(yǎng)至24、48h時，10.0、20.0μmol/L姜黃素聯(lián)合亞組與0μmol/L姜黃素聯(lián)合亞組對HL-60增殖抑制率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05，見表1)。

Table 1 Comparison of proliferation inhibition rate of HL-60 cells between curcumin single subgroups and curcumin combined subgroups

組別濃度(μmol/L)抑制率(%)24h 48h姜黃素單獨亞組0-1893±2184-2396±2366254127±2589a6495±0849a505000±1737a14340±2477a10012420±3291a32943±4172a20040997±1733a74890±6311a40057197±6202a806633±1489a姜黃素聯(lián)合亞組0+3023437±3187a28290±1960a50+3017333±2440ab37783±1558ab100+3040380±1289abc65543±2431abc200+3082693±2651abc98207±0548abcF值2606290214P值<0001<0001

注：與0 μmol/L姜黃素單獨亞組比較，aP<0.05；與同一濃度水平姜黃素單獨亞組比較，bP<0.05；與0 μmol/L姜黃素聯(lián)合亞組比較，cP<0.05

2.2 協(xié)同作用 培養(yǎng)至24 h時，5.0 μmol/L姜黃素與30 μmol/L GANT61對HL-60細胞的增殖抑制率呈拮抗作用，10.0、20.0 μmol/L姜黃素與30 μmol/L GANT61聯(lián)合用藥對HL-60細胞的增殖抑制率呈增強作用；培養(yǎng)至48 h時，5.0 μmol/L姜黃素與30 μmol/L GANT61對HL-60細胞的增殖抑制率呈單純相加作用，10.0、20.0 μmol/L姜黃素與30 μmol/L GANT61對HL-60細胞的增殖抑制率呈增強作用(見表2)。

表2 姜黃素聯(lián)合GANT61對HL-60細胞協(xié)同抗腫瘤作用

Table 2 Synergistic antitumor effect of the simultaneous administration of curcumin and GANT61 on HL-60 cells

姜黃素聯(lián)合GANT61(μmol/L)Q值24h 48h50+30065098100+30133126200+30151120

2.3 姜黃素和GANT61對HL-60細胞凋亡率的影響 培養(yǎng)至24、48 h時，姜黃素、GANT61和姜黃素+GANT61對HL-60細胞凋亡率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；其中，培養(yǎng)至24 h時，20.0 μmol/L姜黃素單獨用藥及5.0 μmol/L、10.0 μmol/L、20.0 μmol/L姜黃素聯(lián)合用藥對HL-60細胞凋亡率與0 μmol/L姜黃素單獨用藥比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；10.0、20.0 μmol/L姜黃素聯(lián)合用藥分別與10.0、20.0 μmol/L姜黃素單獨用藥對HL-60細胞凋亡率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；培養(yǎng)至48 h時，其他各濃度用藥與0 μmol/L姜黃素單獨用藥對HL-60細胞凋亡率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；5.0、10.0、20.0 μmol/L姜黃素聯(lián)合用藥分別與5.0、10.0、20.0 μmol/L姜黃素單獨用藥對HL-60細胞凋亡率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；5.0、10.0、20.0 μmol/L姜黃素聯(lián)合用藥與GANT61單獨用藥對HL-60細胞凋亡率比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05，見表3)。

3 討論

急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)是一類造血干細胞惡性克隆性疾病，雖然當前誘導治療完全緩解率近80%，但60%以上最終耐藥復發(fā)[15]，5年總生存率不到40%。因此，研發(fā)新的化療藥物及新的聯(lián)合用藥方案尤其是敏感有效、毒副作用小且經(jīng)濟適用的化療方案成為當今研究的熱點。

姜黃素是姜黃的主要組成部分，通常被用于香料和食品著色劑，來源廣泛、價格低廉且每天應用劑量高達10 g對人體無不良反應，可通過多種不同途徑發(fā)揮良好的抗腫瘤作用，目前，已有臨床試驗應用姜黃素治療胰腺癌，多發(fā)性骨髓瘤和結腸直腸癌[16-17]。

Table 3 Comparison of apoptosis rate of HL-60 cells between the single application of curcumin，GANT61 and the combined application of them

組別濃度(μmol/L)凋亡率(%)24h 48h姜黃素單獨用藥04153±15113413±1050505497±11309787±0653a1006340±124813853±1665a20019270±1784a34187±1978aGANT61單獨用藥307543±128916443±0537a姜黃素+GANT61聯(lián)合用藥50+308710±1192a27353±0491abc100+3017000±4403abc36177±1662abc200+3040696±2143abc39643±1446abcF值10672790979P值<0001<0001

注：與0 μmol/L姜黃素單獨用藥比較，aP<0.05；與同一濃度水平姜黃素單獨用藥比較，bP<0.05；與GANT61單獨用藥比較，cP<0.05

本研究單獨應用姜黃素作用于HL-60細胞，顯示其可抑制HL-60細胞增殖、促進凋亡，且這些作用受時間和劑量影響。培養(yǎng)至24 h時，5.0 μmol/L和20.0 μmol/L姜黃素對HL-60細胞增殖抑制率分別約為5%和40%，與吳裕丹等[18]和閔旻等[19]研究結果一致。Hh信號通路轉錄因子Gli1、Gli2至少有一個持續(xù)性活化，這對腫瘤的發(fā)展非常重要[20-23]。下游Gli轉錄因子是Hh通路轉導終末階段，不同的通路活化路徑最終通過Gli發(fā)揮作用，因此，Gli特異性抑制劑比上游特異性抑制劑具有更大的適用性[9]。HL-60細胞中Hh信號通路活化不依賴轉導因子SMO，rshh和特異性SMO抑制劑cyclopamine對HL-60細胞增殖、凋亡無作用，然而30 μmol/L GANT61可抑制其增殖，促進其凋亡[24]。因此選用30 μmol/L GANT61進行實驗。竇志金等[7]研究表明，姜黃素通過抑制Hh信號通路，進而抑制膠質(zhì)瘤細胞增殖及細胞集落形成，并顯示出濃度和時間依賴性。因此本實驗通過應用GANT61阻斷HL-60細胞Hh信號通路，進而驗證姜黃素是否通過Hh信號通路對HL-60細胞的增殖、凋亡起作用。本研究結果顯示，姜黃素和GANT61聯(lián)合用藥后對HL-60細胞增殖抑制作用高于單獨應用姜黃素，聯(lián)合用藥時姜黃素濃度越高，作用時間越長，增殖抑制作用越強。在姜黃素和GANT61聯(lián)合用藥對HL-60細胞凋亡影響研究發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合用藥凋亡率高于單獨用藥。研究發(fā)現(xiàn)，姜黃素通過抑制Sonic Hh信號通路，進而抑制成神經(jīng)管細胞瘤細胞增殖、促進凋亡[25]，因此，筆者推測姜黃素可能是通過Hh信號通路對HL-60細胞的增殖、凋亡發(fā)揮作用，但其具體作用機制仍有待進一步研究。

姜黃素抗癌機制復雜，至今未完全清楚，但其抗瘤的作用已得到大量研究證實。隨著研究的不斷深入，其可能在治療白血病領域形成一個新熱點。

[1]Aggarwal BB，Harikumar KB.Potential therapeutic effects of curcumin，the anti-inflammatory agent，against neurodegenerative，cardiovascular，pulmonary，metabolic，autoimmune and neoplastic diseases[J].Int J Biochem Cell Biol，2009，41(1)：40-59.

[2]Yang ZS，Peng ZH，Li XL，et al.Effect of curcumin on IL-17-induced nitric oxide production and expression of iNOS in human keratinocytes[J].Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology，2011，27(9)：959-961.

[3]Shin SK，Ha TY，McGregor RA，et al.Long-term curcumin administration protects against atherosclerosis via hepatic regulation of lipoprotein cholesterol metabolism[J].Mol Nutr Food Res，2011，55(12)：1829-1840.

[4]Zheng J，Wu C，Lin Z，et al.Curcumin up-regulates phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10 through microRNA-mediated control of DNA methylation——a novel mechanism suppressing liver fibrosis[J].FEBS J，2014，281(1)：88-103.

[5]Ma J，Liu J，Yu H，et al.Curcumin promotes nerve regeneration and functional recovery in rat model of nerve crush injury[J].Neurosci Lett，2013，547：26-31.

[6]Fan JX，Zeng YJ，Wu JW，et al.Synergistic killing effect of arsenic trioxide combined with curcumin on KG1a cells[J].Journal of Experimental Hematology，2014，22(5)：1267-1272.

[7]Dou ZJ，Du WZ，Liu X，et al.Curcumine inhibits the proliferation of glioma cells through Hedgehog signaling pathway[J].Chinese Journal of Minimally Invasive Neurosurgery，2014，19(5)：228-231.(in Chinese) 竇志金，杜文眾，劉幸，等.姜黃素通過Hedgehog信號通路抑制膠質(zhì)瘤細胞增殖[J].中國微侵襲神經(jīng)外科雜志，2014，19(5)：228-231.

[8]Hu LS，Xiong WY，Yu LH，et al.Curcumin induced acute promyeloblast leukemia HL-60 cells apoptosis through up-regulating NF-κB[J].Shandong Medical Journal，2011，51(12)：23-25.(in Chinese) 胡亮杉，熊文艷，余莉華，等.姜黃素上調(diào)NF-κB誘導急性早幼粒白血病HL-60細胞凋亡[J].山東醫(yī)藥，2011，51(12)：23-25.

[9]Lauth M，Bergstr?m A，Shimokawa T，et al.Inhibition of GLI-mediated transcription and tumor cell growth by small-molecule antagonists[J].Proc Natl Acad Sci U S A，2007，104(20)：8455-8460.

[10]Ghezali L，Liagre B，Limami Y，et al.Sonic Hedgehog activation is implicated in diosgenin-induced megakaryocytic differentiation of human erythroleukemia cells[J].PLoS One，2014，9(4)：e95016.

[11]Chen Q，Xu R，Zeng C，et al.Down-regulation of Gli transcription factor leads to the inhibition of migration and invasion of ovarian cancer cells via integrin β4-mediated FAK signaling[J].PLoS One，2014，9(2)：e88386.

[12]Li H，Da LJ，F(xiàn)an WD，et al.Transcription factor glioma-associated oncogene homolog 1 is required for transforming growth factor-β1-induced epithelial-mesenchymal transition of non-small cell lung cancer cells[J].Mol Med Rep，2015，11(5)：3259-3268.

[13]Graab U，Hahn H，F(xiàn)ulda S.Identification of a novel synthetic lethality of combined inhibition of hedgehog and PI3K signaling in rhabdomyosarcoma[J].Oncotarget，2015，6(11)：8722-8735.

[14]Wellbrock J，Latuske E，K?hler J，et al.Expression of Hedgehog pathway mediator GLI represents a negative prognostic marker in human acute myeloid leukemia and its inhibition exerts antileukemic effects[J].Clin Cancer Res，2015，21(10)：2388-2398.

[15]Colado E，Paíno T，Maiso P，et al.Zalypsis has in vitro activity in acute myeloid blasts and leukemic progenitor cells through the induction of a DNA damage response[J].Haematologica，2011，96(5)：687-695.

[16]Tuorkey MJ.Curcumin a potent cancer preventive agent：Mechanisms of cancer cell killing[J].Interv Med Appl Sci，2014，6(4)：139-146.

[17]Rahmani AH，Al Zohairy MA，Aly SM，et al.Curcumin：a potential candidate in prevention of cancer via modulation of molecular pathways[J].Biomed Res Int，2014(2014)：761608.doi：10.1155/2014/761608.

[18]吳裕丹，陳燕，陳文娟.姜黃素對急性髓性白血病細胞HL-60增殖和凋亡的影響[J].同濟醫(yī)科大學學報，1999，28(4)：299-301.

[19]Min M，Gao QP.Effects of curcumin on PI3K/AKT signaling pathway in HL60 cells[J].Hainan Medical Journal， 2012，23(6)：3-5.(in Chinese) 閔旻，高清平.姜黃素對HL60細胞PI3K/AKT信號傳導通路的影響[J].海南醫(yī)學，2012，23(6)：3-5.

[20]Nilsson M，Undèn AB，Krause D，et al.Induction of basal cell carcinomas and trichoepitheliomas in mice overexpressing GLI-1[J].Proc Natl Acad Sci U S A，2000，97(7)：3438-3443.

[21]Grachtchouk M，Mo R，Yu S，et al.Basal cell carcinomas in mice overexpressing Gli2 in skin[J].Nat Genet，2000，24(3)：216-217.

[22]Sheng H，Goich S，Wang A，et al.Dissecting the oncogenic potential of Gli2：deletion of an NH(2)-terminal fragment alters skin tumor phenotype[J].Cancer Res，2002，62(18)：5308-5316.

[23]Kimura H，Stephen D，Joyner A，et al.Gli1 is important for medulloblastoma formation in Ptc1+/- mice[J].Oncogene，2005，24(25)：4026-4036.

[24]Pan D，Li Y，Li Z，et al.Gli inhibitor GANT61 causes apoptosis in myeloid leukemia cells and acts in synergy with rapamycin[J].Leuk Res，2012，36(6)：742-748.

[25]Elamin MH，Shinwari Z，Hendrayani SF，et al.Curcumin inhibits the Sonic Hedgehog signaling pathway and triggers apoptosis in medulloblastoma cells[J].Mol Carcinog，2010，49(3)：302-314.

(本文編輯：賈萌萌)

Influence of Curcumin on the Proliferation and Apoptosis of HL-60 Cells and Its Mechanism

MENGTeng-teng，WEIHong，GUANDong-fang，etal.

DepartmentofHistologyandEmbryology，CollegeofMedicine，ShiheziUniversity，Shihezi832002，China

Objective To investigate the influence of curcumin on the proliferation and apoptosis of human promyelocytic leukemia HL-60 cells and its possible mechanism.Methods We divided the included HL-60 cells into trial group，negative control group and blank control group.The trial group was further divided into single subgroups(0，2.5，5.0，10.0，20.0，40.0 μmol/L curcumin)and combined subgroups(5.0，10.0，20.0 μmol/L curcumin+30 μmol/L GANT61).Observations were conducted 24 hours and 48 hours after the trial began.CCK-8 method was used to detect the proliferation of HL-60 cells，and the proliferation inhibition rate was calculated.In vitro combined application of medicines was investigated to observe whether synergistic effect exists.AnnexinⅤ-FITC/PI double-stained method was employed to detect the apoptosis rate of cells.Results The single subgroup and combined subgroup were significantly different(P<0.05)in 24 h and 48 h inhibition rates；the 5.0，10.0 and 20.0 μmol/L combined subgroups were significantly different from 5.0，10.0 and 20.0 μmol/L single subgroups in 24 h and 48 h proliferation inhibition rates；10.0 and 20.0 μmol/L combined subgroups and 0 μmol/L combined subgroup were significantly different(P<0.05)in 24 h and 48 h inhibition rates.Antagonistic effect occurred in the combined subgroup with 5.0 μmol/L curcumin+30 μmol/L GANT61 on 24 h proliferation inhabitation rate，and pure additive effect occurred in this group on 48 h proliferation inhabitation rate；potentiation occurred in the combined subgroups with 10.0 or 20.0 μmol/L+30 μmol/L GANT61 on 24 h and 48 h proliferation inhabitation rates.Curcumin，GANT61 and curcumin+GANT61 were significantly different(P<0.05)in the effect on 24 h and 48 h apoptosis rates；the 10.0 and 20.0 μmol/L combined subgroups were significantly different(P<0.05)from 10.0 and 20.0 μmol/L single subgroups in 24 h apoptosis rate；the 5.0，10.0 and 20.0 μmol/L combined subgroups were significantly different(P<0.05)from 5.0，10.0 and 20.0 μmol/L single subgroups in 48 h apoptosis rate；the combined application of 5.0，10.0 or 20.0 μmol/L curcumin+GANT61 was significantly different(P<0.05)from the single use of GANT61 in apoptosis rate.Conclusion The combined application of curcumin and GANT61 has synergistic inhibition effect on the proliferation of HL-60 cells and obviously speeds up the apoptosis of HL-60 cells.Its efficacy has correlation with concentration and time.Curcumin may take effects by inhibiting Hedgehog signaling pathway.

Leukemia,myeloid,acute；Curcumin；GANT61；Hedgehog-Gli signaling pathway

國家自然科學基金資助項目(81460024)；石河子大學優(yōu)秀青年項目(2013ZRKXYQ26)

832002新疆石河子市，石河子大學醫(yī)學院組織胚胎學教研室(孟騰騰，魏虹，管東方，張志威)；石河子大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院血液風濕科(吳廣勝)；石河子大學醫(yī)學院(齊新宇)

魏虹，832002新疆石河子市，石河子大學醫(yī)學院組織胚胎學教研室；E-mail：weihong-2@163.com

R 733.72

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2015.23.013

2015-04-28；

2015-06-06)

孟騰騰，魏虹，管東方，等.姜黃素對人早幼粒白血病細胞增殖和凋亡的影響及其機制研究[J].中國全科醫(yī)學，2015，18(23)：2800-2804.[www.chinagp.net]

Meng TT，Wei H，Guan DF，et al.Influence of curcumin on the proliferation and apoptosis of HL-60 cells and Its mechanism[J].Chinese General Practice，2015，18(23)：2800-2804.