麻春瑩, 遲艷俠

(佳木斯大學(xué)附屬口腔醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154002)

C-MET在涎腺腺樣囊性癌中的表達(dá)和意義①

麻春瑩, 遲艷俠

(佳木斯大學(xué)附屬口腔醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154002)

目的：通過(guò)檢測(cè)C-MET在涎腺腺樣囊性癌組織中的表達(dá),探討C-MET與腺樣囊性癌的關(guān)系及相關(guān)性，為臨床的轉(zhuǎn)移趨勢(shì)、預(yù)后判斷和術(shù)后的隨診監(jiān)測(cè)提供一定的理論依據(jù)。方法：應(yīng)用SP免疫組織化學(xué)法檢測(cè)36例涎腺腺樣囊性癌和10例正常涎腺組織中C-MET的表達(dá)。結(jié)果：C-MET主要表達(dá)于細(xì)胞漿，在36例涎腺腺樣囊性癌中的C-MET陽(yáng)性表達(dá)率為66.7%(23/31)，明顯高于正常涎腺組織(0.00%)，組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。C-MET蛋白與性別、年齡腫瘤大小無(wú)關(guān)(P>0.05)，與組織學(xué)分型，轉(zhuǎn)移、侵潤(rùn)和復(fù)發(fā)有關(guān)(P<0.05)。結(jié)論：C-MET在腺樣囊性癌組織中的表達(dá)明顯高于正常涎腺組織，與涎腺腺樣囊性癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

C-MET；免疫組化；涎腺腺樣囊性癌

涎腺腺樣囊性癌是口腔頜面部中遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率最高的唾液腺惡性腫瘤之一，其遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率高達(dá)40%，發(fā)病率占涎腺腫瘤10%～15%。常見(jiàn)于腭部、腮腺及頜下腺，具強(qiáng)侵襲性生長(zhǎng)特性，常早期沿神經(jīng)擴(kuò)散，有較高的術(shù)后局部復(fù)發(fā)率[1]，且易侵入血管，常常造成血行轉(zhuǎn)移至肺部，嚴(yán)重影響著患者的預(yù)后和生存品質(zhì)。腫瘤的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)復(fù)雜的多步驟，多基因參與的過(guò)程[2]，近年來(lái)的不斷研究證明，具有酪氨酸激酶活性的膜受體蛋白的原癌基因C-MET的異常表達(dá)與許多的實(shí)體腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切,尤其是在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中起著尤為重要的作用[3]。本研究采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腺樣囊性癌中C-MET的表達(dá)情況，通過(guò)探討C-MET與涎腺腺樣囊性癌之間的關(guān)系，深入分析涎腺腺樣囊性癌發(fā)展規(guī)律，為尋找臨床治療與預(yù)防涎腺腺樣囊性癌術(shù)后復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的有效標(biāo)記物，探索更有效的臨床治療手段提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

佳木斯大學(xué)附屬口腔醫(yī)院頜面外科36例腺樣囊性癌組織標(biāo)本和10例正常腮腺的組織標(biāo)本。其中男17例，女19例，年齡34～80歲，50歲以上12例，50歲以下24例。部位：腮腺9例，頜下腺6例，舌下腺4例，腭部9例，其他8例。根據(jù)2005年WHO的涎腺腫瘤組織學(xué)分類(lèi)，病理閱片結(jié)果判斷：管型13例，腺型17例，實(shí)性型6例；神經(jīng)浸潤(rùn)17例，無(wú)神經(jīng)浸潤(rùn)19例；血行轉(zhuǎn)移9例，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移3例。

1.2 主要試劑

兔抗人C-MET多克隆抗體，SP試劑盒，DAB顯色劑，均購(gòu)自上?？ㄟ~舒生物有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 切片常規(guī)脫蠟至水，免疫組化染色檢測(cè)過(guò)程嚴(yán)格參照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3.2 染色結(jié)果判定：C-MET陽(yáng)性主要定位于細(xì)胞漿上，所有切片均由2位病理醫(yī)師在不知臨床資料及實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡那疤嵯陋?dú)立進(jìn)行讀片計(jì)數(shù)。400倍視野下隨機(jī)取不同視野5處，計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞所占細(xì)胞總數(shù)的百分比：陰性(-):陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<5%或無(wú)顯色；陽(yáng)性(+)：陽(yáng)性細(xì)胞5%～50%或顯色淺；強(qiáng)陽(yáng)性()：陽(yáng)性細(xì)胞>50%或顯色深。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行分析處理：計(jì)數(shù)資料組間比較采用采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05有顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 C-MET在腺樣囊性癌中及正常涎腺組織中的表達(dá)

C-MET的陽(yáng)性反應(yīng)為棕黃色顆粒，主要染色在細(xì)胞漿。36例腺樣囊性癌組織中有24例為陽(yáng)性表達(dá)，表達(dá)率為66.7%。而在10例正常腮腺組織中細(xì)胞漿未見(jiàn)棕黃色染色。陽(yáng)性表達(dá)率為0.00%，C-MET在SACC和腮腺中的表達(dá)具有顯著差異性(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表 1 C-MET在腺樣囊性癌和腮腺組織中的表達(dá)

2.2 C-MET表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

C-MET在性別組(陽(yáng)性率：男性為64.7%，女性為68.4%)、年齡組(陽(yáng)性率：50歲以上為66.7%，以下為62.5%)、不同部位組(陽(yáng)性率：腮腺為77.8%，頜下腺為66.7%，舌下腺為75.0%，腭腺為55.6%，其它為62.5%)、腫瘤直徑組(陽(yáng)性率：直徑大于3cm者為60.0%，直徑小于3cm者為68.8%)表達(dá)無(wú)顯著性差異(P>0.05)。組織學(xué)分型組(陽(yáng)性率：腺型為47.1%，管型為76.9%，實(shí)性型為100.0%)表達(dá)有顯著性差異(P>0.05)。C-MET在有神經(jīng)浸潤(rùn)的SACC中的陽(yáng)性表達(dá)率為82.4%，在無(wú)神經(jīng)浸潤(rùn)的SACC中的陽(yáng)性表達(dá)率為52.6%，二者之間的表達(dá)具有顯著差異(P<0.05)，在有血行和淋巴轉(zhuǎn)移的SACC中陽(yáng)性表達(dá)率為92.3%，無(wú)血行和淋巴轉(zhuǎn)移的SACC中陽(yáng)性表達(dá)率為54.2%，二者之間的表達(dá)具有顯著差異(P<0.05)，在有復(fù)發(fā)的SACC中陽(yáng)性表達(dá)率為86.7%，無(wú)復(fù)發(fā)的SACC中陽(yáng)性表達(dá)率為47.8%，二者之間的表達(dá)具有顯著差異(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 腺樣囊性癌中C-MET蛋白表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

3 討論

涎腺腺樣囊性癌是一種高度惡性的口腔頜面部常見(jiàn)惡性腫瘤，近年來(lái)有逐年上升趨勢(shì)，目前，唾液腺腺樣囊性癌的治療方案仍以手術(shù)切除為主，但對(duì)于如何預(yù)防并控制其術(shù)后局部復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，為腺樣囊性癌的術(shù)后跟蹤治療提供有效手段才是問(wèn)題的關(guān)鍵。隨著分子生物日益發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)腫瘤發(fā)生與多種原癌基因的激活有關(guān)，當(dāng)它們表達(dá)異常時(shí)，可引起細(xì)胞無(wú)限制的增殖而導(dǎo)致腫瘤最終發(fā)生[4]。所以尋找到理想的的腫瘤標(biāo)志物，對(duì)腺樣囊性癌的早期診斷和術(shù)后復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)具有重要的作用。原癌基因C-MET的信號(hào)傳導(dǎo)通路在細(xì)胞生長(zhǎng)、血管的形成，上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化起著不可或缺的作用。異常激活的C-MET信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與多種惡性腫瘤密切相關(guān)。腫瘤組織中的C-MET高表達(dá)、擴(kuò)增及基因的突變等均可引起C-MET信號(hào)通路被異常激活,C-MET酪氨酸激酶磷酸化通過(guò)與銜接蛋白連接而激活下游的信號(hào)通路，進(jìn)而影響腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和有絲分裂、抑制細(xì)胞凋亡、侵襲及轉(zhuǎn)移的能力[5]。許多研究發(fā)現(xiàn)在腫瘤中普遍存在C-MET不同程度的過(guò)表達(dá)或是基因擴(kuò)增，如肺癌、肝癌、頭頸部癌、結(jié)直腸癌、甲狀腺癌、胃癌等[6，7]，C-MET的不良表達(dá)與腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、發(fā)展、侵潤(rùn)以及預(yù)后不良密切相關(guān)。C-MET己被認(rèn)為是促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展, 尤其是惡性腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵分子。

本研究顯示檢測(cè)的36例腺樣囊性癌組織中C-MET陽(yáng)性24例，陽(yáng)性率為66.7%，而正常涎腺組織中全部為陰性，其差距具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。組織中C-MET的表達(dá)與患者的性別、年齡和部位無(wú)關(guān)，而與腺樣囊性癌的神經(jīng)浸潤(rùn)、組織學(xué)類(lèi)型、血行轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。實(shí)性型中C-MET的陽(yáng)性表達(dá)率明顯要高于腺型和管型，轉(zhuǎn)移組(血行和淋巴)C-MET的陽(yáng)性表達(dá)率與表達(dá)強(qiáng)度明顯高于無(wú)轉(zhuǎn)移組。神經(jīng)浸潤(rùn)組C-MET的陽(yáng)性表達(dá)率與表達(dá)強(qiáng)度要高于無(wú)神經(jīng)浸潤(rùn)組。提示：C-MET的表達(dá)可能與腺樣囊性癌愈后差相關(guān)，且C-MET高表達(dá)時(shí)的腺樣囊性癌可能更易于浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。說(shuō)明C-MET的表達(dá)與腫瘤的惡性程度有關(guān)。C-MET不僅能夠?yàn)橄严傧贅幽倚园┑脑缙谠\斷，惡性程度判定提供臨床參考，其更可能成為評(píng)估預(yù)后及術(shù)后隨診檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)靶標(biāo)。

[1]于世鳳. 口腔組織病理學(xué)(第 7 版)[J]. 北京：人民衛(wèi)生出版社, 2010, 125

[2]包合新，李建國(guó)，邢桂濱.EZH2和Bmi-1基因在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及其意義[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2014,37(1)：10-11

[3]任淑敏，史惠蓉，張瑞濤，等.結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因 1、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子和C-met在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及其意義 [J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2013,4(4):274-78

[4]馬曉穎，袁禧先，王鳳榮.骨橋蛋白在大腸腺瘤、大腸癌組織中的表達(dá)及意義[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2009,32(2)：25-26

[5] 張瑞濤，史惠蓉，黃好亮，等.MACC1、HGF和C-met蛋白在卵巢上皮性癌中的表達(dá)及其意義[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011,2(3):1551-1555

[6] 尹華偉.HGF、C-Met和VEGF在子宮癌中的表達(dá)及其臨床意義 [J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2013,5(14):1-3

[7]RosarioM,BirchmeierW.Howtomaketube:signalingbytheMetreceptortyrosinekinase[J].TrendsCellBiol，2003,13(6):328-335

黑龍江省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目，編號(hào)：12541796；佳木斯大學(xué)研究生創(chuàng)新項(xiàng)目，編號(hào)：LM2014-001。

麻春瑩(1977～)女，黑龍江佳木斯人，在讀碩士研究生，主管技師。

遲艷俠 (1978～)女,黑龍江佳木斯人,碩士,主治醫(yī)師。 E-mail：364088560@qq.com。

R739.87

B

1008-0104(2015)04-0061-02

2015-03-20)