賴錦茂，楊澤填，楊鴻權(quán)，張 斌

(廣州中醫(yī)藥大學(xué) 第一臨床醫(yī)學(xué)院，廣東 廣州510405)

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小青龍湯動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

賴錦茂，楊澤填，楊鴻權(quán)，張 斌

(廣州中醫(yī)藥大學(xué) 第一臨床醫(yī)學(xué)院，廣東 廣州510405)

小青龍湯作為中醫(yī)十大名方之一，其功效卓著，備受后人推崇，近年來對(duì)其研究越來越熱門，其中以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究最多。搜索數(shù)據(jù)庫中2010-2014年關(guān)于小青龍湯動(dòng)物研究的相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)小青龍湯近五年的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)行綜述，發(fā)現(xiàn)小青龍湯動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究主要集中在對(duì)哮喘、變應(yīng)性鼻炎、肺炎型心臟病等疾病機(jī)理和機(jī)制方面。

小青龍湯；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)；綜述

小青龍湯出自醫(yī)圣張仲景的《傷寒論》，被譽(yù)為治喘神方，備受后人推崇。小青龍湯由麻黃、芍藥、細(xì)辛、炙甘草、干姜、桂枝、五味子、半夏八味藥組成，配伍嚴(yán)謹(jǐn)，體現(xiàn)溫陽、益氣、化飲的作用。臨床上廣泛用于治療咳嗽、哮喘、肺源性心臟病等外寒里飲疾病。近年來，隨著小青龍湯在臨床上使用范圍的不斷拓展和延伸，其治療相關(guān)疾病作用機(jī)理的研究越來越受關(guān)注，針對(duì)小青龍湯的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究主要圍繞哮喘、過敏性鼻炎、肺源性心臟病等疾病展開。筆者通過查閱2010-2014年與小青龍湯動(dòng)物實(shí)驗(yàn)有關(guān)的相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)小青龍湯近五年來的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展做相關(guān)綜述。

1 小青龍湯治療哮喘機(jī)理研究

用大鼠、小鼠或者豚鼠進(jìn)行造模，造模方法為以卵清白蛋白(OVA)致敏與激發(fā)建立哮喘大鼠氣道重塑模型。

1.1 INF-γ、IL-4途徑

謝培洪[1]通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)哮喘小鼠模型組血清中INF-γ、IL-4均升高，IL-4升高程度遠(yuǎn)高于INF-γ，提示Th2細(xì)胞因子的優(yōu)勢(shì)地位可能是小鼠哮喘發(fā)作的免疫學(xué)機(jī)制。小青龍湯組中INF-γ明顯比哮喘模型組高，而IL-4升高程度低于哮喘模型組，提示小青龍湯治療哮喘的作用機(jī)制之一為升高哮喘發(fā)作小鼠血清INF-γ，拮抗IL-4分泌水平，從而達(dá)到調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡。董翠香等[2]研究小青龍湯對(duì)哮喘小鼠肺泡灌洗液(BALF)中INF-γ、IL-4水平及氣道炎癥的影響，也得出小青龍湯能夠升高肺泡灌洗液中INF-γ水平，降低IL-4水平，調(diào)節(jié)Th1/Th2失衡，從而有效改善氣道炎癥，其與人參五味子湯二步序貫治療效果及吸入布地奈德相似。陳紅霞等[3]研究小青龍湯、射干麻黃湯及其合方對(duì)大鼠哮喘模型肺泡灌洗液INF-γ/IL-4的影響，發(fā)現(xiàn)小青龍湯能有效緩解哮喘模型大鼠臨床表現(xiàn)及氣道炎癥，其作用機(jī)制可能是糾正Th1/Th2失衡，小青龍湯與射干麻黃湯合方比單方治療效果更顯著。郅琳等[4]發(fā)現(xiàn)小青龍湯能夠明顯降低BALF中炎癥細(xì)胞數(shù)量，并能夠明顯升高INF-γ水平，降低IL-4水平，改善哮喘氣道炎癥。

1.2 TGF-β1、Smad3途徑

楊帆[5-6]在探究小青龍湯對(duì)哮喘大鼠肺組織中TGF-β1、Smad3蛋白表達(dá)的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，造模后實(shí)驗(yàn)組大鼠支氣管管壁厚度比正常對(duì)照組平滑肌厚度顯著增厚，小青龍湯組與哮喘模型組相比，增厚程度低，免疫顯示哮喘模型組和小青龍湯組TGF-β1、Smad3蛋白表達(dá)明顯高于正常組，但小青龍湯組蛋白表達(dá)明顯低于哮喘模型組，從而提出小青龍湯可能通過影響哮喘大鼠肺組織中TGF-β1、Smad3蛋白表達(dá)來拮抗氣道重塑。

1.3 TLR4、P-Akt途徑

莫碧文等[7]研究TLR4、P-Akt在哮喘大鼠氣道平滑肌遷移中的作用及小青龍湯對(duì)其影響。造模后測(cè)定氣道阻力，觀察氣道壁嗜酸性粒細(xì)胞浸潤情況，通過圖像分析軟件測(cè)定支氣管管壁面積，平滑肌面積和平滑肌至上皮下基底膜距離；免疫組化檢測(cè)TLR4、P-Akt蛋白表達(dá)。發(fā)現(xiàn)TLR4和P-Akt參與氣道平滑肌的遷移，小青龍湯組的蛋白表達(dá)明顯低于模型組，從而得出小青龍湯可能通過抑制TLR4和P-Akt的表達(dá)抑制哮喘氣道平滑肌的遷移，從而在哮喘氣道重塑方面發(fā)揮一定的作用。

1.4 IL-5、IL-13途徑

殷彬等[8]通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)哮喘模型大鼠血清中IL-5及IL-13含量異常增高，而小青龍湯組則可以降低IL-5及IL-13含量。國外有研究證實(shí)IL-5可以增強(qiáng)EOS對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的黏附能力，延長其存活時(shí)間，強(qiáng)化EOS毒性蛋白的釋放，進(jìn)而增強(qiáng)EOS參與哮喘氣道炎癥的效應(yīng)[9]。IL-4/IL-5/IL-13都屬于Th2類分泌細(xì)胞因子，Kumar等[10]研究證實(shí)IL-13通過誘導(dǎo)趨化因子產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，調(diào)控轉(zhuǎn)化生長因子使肺組織纖維化等作用，在支氣管哮喘的發(fā)生發(fā)展中起非常重要的作用。

1.5 Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞途徑

吳奎等[11]研究小青龍湯對(duì)哮喘小鼠氣道變應(yīng)性炎癥的作用，觀察哮喘模型小鼠外周血和BALF中Foxp、CD T細(xì)胞的比例，發(fā)現(xiàn)小青龍湯可有效抑制哮喘模型小鼠氣道變應(yīng)性炎癥，作用途徑可能為誘導(dǎo)Foxp調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的產(chǎn)生、增加IL-10的分泌，進(jìn)而抑制Th2型免疫反應(yīng)。

1.6 MMP-9、T1MP-1途徑

韓征利等[12]研究小青龍湯和人參五味子湯二步序貫治療對(duì)于哮喘小鼠呼吸道炎癥與重塑的影響，研究指標(biāo)為基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、基質(zhì)金屬蛋白組織酶抑制劑-1(T1MP-1)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)小青龍湯組和人參五味子湯序貫治療組MMP-9、T1MP-1表達(dá)水平和MMP-9/T1MP-1明顯低于哮喘組，得出二步序貫治療能有效抑制呼吸道炎癥和重塑作用，一定程度上可以替代布地奈德吸入治療。

2 小青龍湯治療變應(yīng)性鼻炎機(jī)理研究

王樹鵬等[13]研究加味小青龍湯及其拆方對(duì)變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜病理形態(tài)和IL-4含量的影響，發(fā)現(xiàn)加味小青龍湯及其拆方作用下的變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜水腫、充血、炎癥細(xì)胞浸潤嗜酸性粒細(xì)胞浸潤上皮細(xì)胞壞死不完整現(xiàn)象均較模型組輕，且IL-4含量也明顯降低，提示了小青龍湯治療變應(yīng)性鼻炎的作用。王維賦等[14]研究麻黃附子細(xì)辛湯和小青龍湯對(duì)過敏性鼻炎豚鼠的作用，觀察指標(biāo)為治療前后的行為學(xué)體征積分、血液組胺含量和鼻黏膜切片病理變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為用藥組治療后體征積分和血液組胺含量均有降低，鼻黏膜修復(fù)較造模組明顯，表明麻黃附子細(xì)辛湯和小青龍湯均能改善過敏性鼻炎豚鼠癥狀，對(duì)血液組胺有降低和修復(fù)鼻黏膜作用，前者效果優(yōu)于后者。李丹等[15]觀察小青龍湯對(duì)過敏性鼻炎大鼠癥狀積分及血清IgE 、IL-12、LTC4水平的影響，提出小青龍湯治療過敏性鼻炎可能是通過提高TH1類細(xì)胞因子IL-12水平，使Th1/Th2比例恢復(fù)平衡，降低血清中IgE水平，抑制過敏反應(yīng)物質(zhì)LTC4釋放，實(shí)現(xiàn)降低炎性介質(zhì)分泌從而改善黏膜水腫，緩解鼻炎癥狀。

3 小青龍湯治療肺炎型心臟病機(jī)理研究

王浩等[16]研究小青龍湯對(duì)肺源性心臟病大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)、NO及內(nèi)皮素-1(ET-1)的影響，造模后大鼠出現(xiàn)咳嗽，氣促，嘴唇紫紺，給藥后癥狀改善，與模型組相比給藥組ANG-Ⅱ、ET-1和NO含量具有顯著差異。從而提出小青龍湯通過調(diào)節(jié)ANG-Ⅱ、ET-1和NO含量的動(dòng)態(tài)平衡有效改善大鼠肺動(dòng)脈高壓。有研究者通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)小青龍湯能有效改善肺源性心臟病大鼠的肺功能、肺動(dòng)脈高壓及右心肥厚程度[17]。

4 小青龍湯在其他方面的機(jī)理研究

張銀萍等[18]觀察小青龍湯對(duì)體外培養(yǎng)RBL-2H3細(xì)胞增殖及凋亡的影響，發(fā)現(xiàn)小青龍湯對(duì)體外培養(yǎng)RBL-2H3細(xì)胞有抑制增殖和促凋亡的作用，效果呈一定的濃度依賴性，提示小青龍湯治療過敏性鼻炎可能與此有關(guān)。李科宇等[19]在探討大鼠體內(nèi)小青龍湯對(duì)茶堿藥動(dòng)力學(xué)的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)小青龍湯組與對(duì)照組相比，茶堿清除率顯著變小，清除半衰期和體內(nèi)滯留時(shí)間顯著延長，得出小青龍湯可能抑制大鼠體內(nèi)茶堿代謝過程的結(jié)論。此外王筠默[20]將小青龍湯及其拆方制成醇提水劑，用離體兔耳灌流法，發(fā)現(xiàn)給藥后小青龍湯及其拆方對(duì)離體兔耳血管灌流液的流出量較給藥前明顯增加，現(xiàn)象持續(xù)5～10min；將藥液注射到大鼠腹腔，與對(duì)照組相比，發(fā)現(xiàn)大鼠足底溫度先升溫后降溫的作用，機(jī)理尚不清楚。

5 結(jié)語

小青龍湯是治療外感風(fēng)寒、寒飲內(nèi)停喘咳的常用方。其自古以來就備受各個(gè)醫(yī)家的喜愛，臨床運(yùn)用甚為廣泛。本方主治外感風(fēng)寒、寒飲內(nèi)停之證。風(fēng)寒束表，皮毛閉塞，衛(wèi)陽被遏，營陰郁滯，故見惡寒發(fā)熱、無汗、身體疼痛。素有水飲之人，一旦感受外邪，每致表寒引動(dòng)內(nèi)飲。《難經(jīng)·四十九難》說：“形寒飲冷則傷肺。”水寒相搏，內(nèi)外相引，飲動(dòng)不居，水寒射肺，肺失宣降，故咳喘痰多而?。凰Ｐ南?，阻滯氣機(jī)，故胸痞；飲動(dòng)則胃氣上逆，故干嘔；水飲溢于肌膚，故浮腫身重；舌苦白滑，脈浮為外寒里飲之佐證。對(duì)此外寒內(nèi)飲之證，若不疏表而徒治其飲，則表邪難解；不化飲而專散表邪，則水飲不除。故治宜解表與化飲配合，一舉而表里雙解。小青龍湯方中麻黃、桂枝相須為君，發(fā)汗散寒以解表邪，且麻黃又能宣發(fā)肺氣而平喘咳，桂枝化氣行水以利里飲之化；干姜、細(xì)辛為臣，溫肺化飲，兼助麻、桂解表祛邪；然而素有痰飲，脾肺本虛，若純用辛溫發(fā)散，恐耗傷肺氣，故佐以五味子斂肺止咳、芍藥和養(yǎng)營血，二藥與辛散之品相配，一散一收，既可增強(qiáng)止咳平喘之功，又可制約諸藥辛散溫燥太過之弊；半夏燥濕化痰，和胃降逆，亦為佐藥；炙甘草兼為佐使之藥，既可益氣和中，又能調(diào)和辛散酸收之品。藥雖八味，配伍嚴(yán)謹(jǐn)，散中有收，開中有合，使風(fēng)寒解、水飲去、宣降復(fù)，則諸癥自平。近年來，隨著小青龍湯在治療哮喘、過敏性鼻炎、肺源性心臟病等疾病時(shí)取得了顯著的療效，對(duì)其的作用機(jī)理研究越來越受關(guān)注，并已經(jīng)取得了一定的成果。從以上論述可知小青龍湯對(duì)機(jī)體許多靶點(diǎn)都有調(diào)節(jié)作用。目前對(duì)小青龍湯功效的研究主要集中于其對(duì)某種、某類疾病治療效果的直觀觀察，針對(duì)其作用機(jī)制的研究雖有一些，但研究的廣度和深度遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，因此尚需要進(jìn)一步大量的研究來明確其作用機(jī)制。

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(責(zé)任編輯：魏 曉)

2015-01-27

賴錦茂(1992-)，男，廣州中醫(yī)藥大學(xué)在讀生，研究方向?yàn)橹形麽t(yī)臨床。

R285.5

A

1673-2197(2015)13-0045-02

10.11954/ytctyy.201513017