冉宇生 劉曉燕 呂 瑤 趙 明 張 芳 顏宗家

唐奇峰 周 強 張遠梅 楊 宏 張祖義 黎 兵 李啟琴 何孝川

（重慶市開縣動物疫病預防控制中心，重慶 405499）

開縣生豬重大動物疫病321免疫試驗報告

冉宇生 劉曉燕 呂 瑤 趙 明 張 芳 顏宗家

唐奇峰 周 強 張遠梅 楊 宏 張祖義 黎 兵 李啟琴 何孝川

（重慶市開縣動物疫病預防控制中心，重慶 405499）

本文簡述了開縣生豬重大動物疫病321免疫試驗的試驗目的、試驗要求、試驗內容及步驟等等，對于試驗結果進行了分析。

生豬 重大動物疫病 免疫試驗

開縣作為全國生豬養(yǎng)殖大縣，為確保生豬產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展，落實生豬重大疫病免疫工作，開縣動物防疫首席專家項目課題組在開縣南門鎮(zhèn)鑫牧養(yǎng)殖科技示范場等進行了生豬重大動物疫病321免疫技術試驗。試驗采用豬口蹄疫（FMD）滅活疫苗一針，豬瘟（CSF）脾淋活疫苗或細胞苗和高致病性豬藍耳?。℉PPRRS）活疫苗用1ml豬瘟或豬藍耳病稀釋液稀釋兩種疫苗混合一針注射，3種疫苗二針免疫注射同步一次完成新技術（簡稱321免疫），對被免疫豬只分別進行了小組試驗、免疫持續(xù)期觀察、擴大應用和臨床免疫等試驗研究，并用ELISA方法定期對各階段血清抗體進行檢測，旨在探索一種適合基層應用的FMD、CSF、HPPRRS 3種疫苗同步分點注射免疫技術，提高免疫密度和免疫效果，破解基層強制免疫工作難題，減少生豬應激，提高疫苗利用率，降低免疫成本，避免重復免疫、漏免等情況。

1 試驗目的

1.1掌握生豬321免疫技術對抗體效價的影響。

1.2掌握生豬321免疫技術和圓環(huán)病毒2型疫苗免疫對生長豬體重的影響（另外專題報告）。

2 試驗要求

2.1本次試驗豬瘟疫苗為山西海森生物制品有限公司生產(chǎn)的批號

為2014026的政府采購專用豬瘟活疫苗（脾淋源）。藍耳疫苗為

山西隆克爾生物制藥有限公司生產(chǎn)的批號為3214024的高致病性豬

繁殖與呼吸綜合征活疫苗（TJM-92株）。豬口蹄疫疫苗為金宇保

靈生物藥品有限公司生產(chǎn)的批號為436017的豬口蹄疫O型滅活疫

苗。

2.2本次試驗分成6個組，仔豬共98頭（試驗前均用武漢科前豬圓環(huán)病毒2型疫苗免疫），其中1月齡仔豬51頭，2月齡仔豬47頭。均為開縣鑫牧養(yǎng)殖科技示范養(yǎng)殖場三元生豬。

2.3注射部位為小豬耳根后2～3指處，大豬耳根后3～4指的頸部肌肉處，注射劑量為試驗組豬瘟和高致病性藍耳病各按1頭份/ml用豬瘟或藍耳病稀釋液稀釋混勻后1ml/頭，口蹄疫2ml/頭。對照組按豬瘟疫苗1頭份/頭、高致病性藍耳病疫苗1頭份/頭、口蹄疫疫苗2ml/頭注射，其仔豬均是從1～4組同胎仔豬中隨機抽選共10頭，減少其母源抗體干擾影響。

2.4監(jiān)測方法和判定標準。O型口蹄疫免疫抗體用VP1結構蛋白ELISA（OIE《陸生動物診斷試驗和疫苗手冊》2013年）檢測；豬瘟免疫抗體用間接ELISA（GB/T 16551-2008）檢測；高致病性豬藍耳病免疫抗體用間接ELISA（GB/T 18090-2008）檢測；豬圓環(huán)病毒2型抗體用豬圓環(huán)病毒2型抗體ELISA法酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測，上述檢測方法均按試劑盒說明書進行操作和結果判定。

3 試驗內容和步驟

本次試驗按仔豬圈共分6組，第1試驗組11頭仔豬，第2試驗組10頭仔豬，第3試驗組10頭仔豬，第4試驗組10頭仔豬，第5對照組為10頭仔豬，第6試驗組為47頭2月齡仔豬。對照組按傳統(tǒng)免疫技術3針分別注射疫苗，試驗組按“321”免疫技術注射疫苗。

3.1對1～5組51頭仔豬進行稱重，采血監(jiān)測母源抗體，對第1、2、3、4試驗組按試驗注射方案二針注射3種疫苗，對第5組進行3針分別注射。

3.2對第6試驗組2月齡豬進行試驗方案二針注射3種疫苗并同時采血監(jiān)測初始抗體。

3.3對第1、2、3、4、5、6組免疫注射1月后稱重并采血抗體監(jiān)測。并對第1、2、3、4、5組口蹄疫加強免疫注射一次。

3.4免疫注射29日對所有試驗組抽樣采血做抗體監(jiān)測并稱重。

3.5免疫注射42日對所有試驗組抽樣采血做抗體監(jiān)測并稱重。

3.6免疫注射67日后對所有試驗組抽樣采血做抗體監(jiān)測并稱重。

3.7免疫注射107日對所有試驗組抽樣采血做抗體監(jiān)測并稱重。

3.8免疫注射180日對所有試驗組抽樣采血做抗體監(jiān)測并稱重。

4 試驗結果

4.1在仔豬日齡相等，試驗組與對照組同時進行注射的情況下，3種疫苗的抗體有效性偏差在5%以內。證明“321”免疫技術對3種疫苗抗體合格率無明顯影響。

4.2在不進行口蹄疫加強注射的情況下，口蹄疫疫苗在2月期抽檢的抗體合格率與加強口蹄疫注射的試驗組相差較大。證明免疫后1個月加強注射口蹄疫免疫是十分必要，對提高免疫抗體合格率十分有效。

4.3“321”免疫技術對豬瘟和高致病性藍耳病抗體無明顯影響，口蹄疫疫苗免疫注射在1.5個月內抗體合格率最高。在免疫注射2個月后開始逐漸降低。在本次進行的“321”免疫技術試驗中未出現(xiàn)過敏反應以及其他副反應。

5 結論

5.1建立了口蹄疫、豬瘟和高致病性豬藍耳病3種疫苗2針同步免疫技術方法并證明了其臨床應用的可行性與科學性。

5.2口蹄疫、豬瘟和高致病性豬藍耳病3種疫苗兩針同步免疫證明了3種疫苗同步分點免疫相互間未出現(xiàn)免疫干擾現(xiàn)象。同時，對應用3種疫苗兩點同步免疫技術中各病種免疫效果的同步評估需在免疫后30～40 d期間進行監(jiān)測為佳。

5.3本研究證明了3種疫苗2點同步免疫新技術的可行性和科學性，近2年將3種疫苗同步兩點免疫新技術在全縣大面積推廣應用免疫了210多萬頭生豬，效果很好。大量節(jié)約了人力、物力、財力、時間，提高免疫效率。解決了長期困擾基層動物防疫工作的難點問題，為其臨床應用提供了科學依據(jù)和數(shù)據(jù)支持，在生產(chǎn)應用中具有重要意義。