顧雪迎，王洪凱，郭慶元*

(1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，新疆烏魯木齊 830052;2.浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江杭州 310058)

蘋果和梨是世界范圍內(nèi)深受消費者喜愛的水果之一，中國是世界上蘋果和梨的最大生產(chǎn)國，目前，我國蘋果種植面積和總產(chǎn)量都位居世界第一［1］。梨的栽培面積、產(chǎn)量、出口量及品種數(shù)量等也均居世界前列，在我國，梨僅次于蘋果、柑橘，位居第三［2］。

輪紋病是蘋果、梨生產(chǎn)中的主要病害之一，不但在田間侵染枝干、果實和葉片，還可引起果實采后腐爛，造成貯藏期爛果，嚴(yán)重影響其產(chǎn)量和質(zhì)量，成為貯藏期的重要病害［3］，帶來巨大損失，嚴(yán)重時可給果園造成毀滅性破壞。該病在世界各蘋果、梨產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生，我國以南方地區(qū)最為嚴(yán)重［4-5］。本文對近年來關(guān)于蘋果和梨輪紋病的病原特性、發(fā)病規(guī)律、抗病機制及防治措施等方面的研究進展進行了綜述。

1 病原

輪紋病病原有性態(tài)是Botryosphaeria dothidea，屬子囊菌，無性態(tài)為樹殼梭孢菌 (Fusicoccum aesculi)［6-8］。輪紋病菌侵染梨或蘋果，引起果實輪紋爛果，多年生枝干粗皮，小枝條潰瘍等癥狀，并導(dǎo)致干枯死亡［9］。關(guān)于輪紋病菌的鑒定與命名，歷史上曾有爭議。1907年日本首先報道在梨和蘋果上發(fā)現(xiàn)輪紋?。?0］;1925年原攝祐命名為Macrophoma kawatsukai Hara［11］;1933 年野瀨直毅發(fā)現(xiàn)其有性世代，定名為Physalospora piricola Nose［12］。1980年，小金澤碩城和佐久間勉進行重新鑒定，認(rèn)為其致病菌為Botryosphaeria［13］，并于1984年提出，蘋果輪紋病菌與干腐病菌在形態(tài)上極為相似，應(yīng)屬同種，因其致病性存在一定差異，提議將其作為干腐病菌的一個?；麨锽otryosphaeria berengeriana de Not. f. sp. piricola (Nose)Koganezawa et Sakuma。中國科學(xué)院微生物研究所鄭儒永教授將其中文名擬名為貝倫格葡萄座腔菌梨生?；?(B．berengeriana f.sp.piricola)［14］。

近年來，經(jīng)生物學(xué)特性研究、酯酶同功酶比較及RAPD基因組多態(tài)性分析，指出輪紋病菌與干腐病菌親緣關(guān)系較近，但存在明顯的差異［15-16］。余仲東等［17］從ITS-rDNA-PCR-RFLP方面研究發(fā)現(xiàn)輪紋病菌具有有別于干腐病菌的210 bp的特征性譜帶，可以此作為2種致病菌的劃分依據(jù)。近年來結(jié)合形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)分析，確定了蘋果、梨輪紋病的致病菌屬于同一個種，都是B．dothidea［8-9］。

2 生物學(xué)特性

2.1 菌絲生長條件

輪紋病菌在多種天然及半合成培養(yǎng)基上均可生長，其菌絲的最適生長溫度為25～28℃，最適pH范圍為7～8。其菌絲生長的最適碳源為蔗糖，最適氮源為天門冬素和硝酸鈉，L-半胱氨酸對菌絲有明顯的抑制作用［18］。

2.2 分生孢子器的形成及成熟條件

輪紋病菌的分生孢子器在15～35℃均可產(chǎn)生，低于15℃或高于35℃時不易形成，其最適溫度為25℃。在pH 4～10時均可形成分生孢子，其適宜的pH范圍為5～8，而pH值5的弱酸性環(huán)境最利于分生孢子器的產(chǎn)生及成熟［18-19］。分生孢子器的形成必須依賴碳素營養(yǎng)，無碳素則不能形成，在以蔗糖為碳源的培養(yǎng)基上形成的子實體最多。另外，分生孢子器的形成必須在光照條件下完成，黑暗條件下不能形成成熟的分生孢子器，360～400 nm短光波黑光燈照射培養(yǎng)有利于分生孢子器的形成［18］。

2.3 分生孢子的萌發(fā)

分生孢子在自由水中，溫度達到15℃以上即可萌發(fā)，但其最適萌發(fā)溫度為28℃［15］。在寄主的果、葉組織液中孢子萌發(fā)率明顯增高［18］。

3 發(fā)病規(guī)律

輪紋病菌以菌絲體、分生孢子器及子囊殼在被害枝干上越冬，成為次年初侵染和連續(xù)侵染的主要菌源。病原菌主要通過植物皮孔侵入［20］，也可通過表面裂隙侵入，非皮孔部位的發(fā)病可能是由毛狀體脫落痕侵入引起［21］，侵染后往往表現(xiàn)出明顯的潛伏侵染特性［7］。輪紋病菌侵染果實時，分生孢子與果實接觸，溫、濕度適宜時萌發(fā)產(chǎn)生芽管，頂部膨大形成附著胞，侵入皮孔后菌絲擴展受抑制，潛伏在皮孔周圍組織中。早期侵入潛伏期達80～150 d，晚期侵入僅為18 d左右。當(dāng)果實進入成熟期，生理狀況發(fā)生改變，如釋放出可溶性養(yǎng)分或抑菌物質(zhì)濃度降低時，病菌結(jié)束潛伏，生出入侵錐，并在機械作用和真菌水解酶作用下入侵果實［20-21］，病菌入侵后，菌絲主要分布于寄主細(xì)胞壁、細(xì)胞內(nèi)、細(xì)胞間隙及細(xì)胞壁與細(xì)胞膜之間。菌絲侵入成熟果實，一般造成細(xì)胞質(zhì)變性和細(xì)胞器破壞，并伴隨著細(xì)胞壁的降解［22］。

與蘋果輪紋病的研究相比，梨輪紋病的研究相對較少。蘋果輪紋病在其潛伏侵染時，菌絲細(xì)胞中形成微體-脂肪粒復(fù)合體，儲備營養(yǎng)，并通過乙醛酸循環(huán)，提供能量和酶類，使病菌抵抗不良環(huán)境并度過潛伏侵染階段，在條件適宜時結(jié)束潛伏狀態(tài)，完成侵染，引起發(fā)?。?3］。蘋果輪紋病菌能在培養(yǎng)基及活體內(nèi)產(chǎn)生一系列果膠酶，其中多聚半乳糖醛酸酶 (PG)、聚甲基半乳糖醛酸酶 (PMG)參與致病過程［4］。

4 抗病機制研究

4.1 組織結(jié)構(gòu)與抗病性關(guān)系

皮孔是病原菌侵染、傳播的主要部位及病原菌潛伏的重要部位。有研究報道，皮孔的密度及大小影響著輪紋病的發(fā)病情況，可用皮孔密度或皮孔密度×直徑作為鑒定輪紋病抗性的指標(biāo)［24］。在接種試驗中發(fā)現(xiàn)，枝干輪紋病病斑在皮孔部位發(fā)病率達92%，從而證實了關(guān)于皮孔是主要侵入途徑的推測［25］。孫月麗等［26］通過對幾種蘋果砧木雜交后代及其父母本的皮孔性狀調(diào)查和抗病菌侵染力測定，證明皮孔密度與面積之積與侵染率之間存在極顯著正相關(guān)。

病原菌感染后的細(xì)胞壁發(fā)生木質(zhì)化是寄主在侵染過程中的抗性反應(yīng)，木質(zhì)素的沉積可加強細(xì)胞壁的木質(zhì)化，阻止病原菌的擴散，切斷病原菌營養(yǎng)來源，鈍化真菌生長點，抑制其生長繁殖;也可減少真菌的細(xì)胞壁降解酶與多糖接觸，從而減少細(xì)胞壁降解，增強抗病性［27］。許多研究結(jié)果都證實了木質(zhì)化反應(yīng)是植物抵抗病菌侵染的最有效的手段之一［28］。

4.2 抗病生化因子

4.2.1 糖酸類

糖類與酸類是果實中主要的代謝物質(zhì)，也影響著病原菌的生長發(fā)育。果實中總含糖量與果實發(fā)病呈正相關(guān)，而果實總酸度則與果實發(fā)病呈負(fù)相關(guān)［29］。推測原因是因為糖類物質(zhì)可為病菌的生長提供碳源和氮源［30］，有利于病菌的生長;而酸類物質(zhì)則有利于組織細(xì)胞的木質(zhì)化而對病菌有抑制作用。果實采后糖含量升高，而各種有機酸和總酸含量呈下降趨勢，致使病原菌從潛伏態(tài)發(fā)展為發(fā)病態(tài)［31］。但在對鴨梨中有機酸抗病性研究中發(fā)現(xiàn)，奎寧酸可以抑制病原菌的生長，但濃度較低時反而促進病原菌的生長［32］。

4.2.2 酚類物質(zhì)

酚類化合物是植物體內(nèi)重要的次生代謝產(chǎn)物，酚類物質(zhì)的快速積累可減緩 (甚至停止)病原菌的生長，對植物的抗病性起重要作用［33］。在離體條件下，部分酚類化合物達到一定濃度時對病菌菌絲的生長、分生孢子的產(chǎn)生、萌發(fā)及附著孢的形成有抑制作用［34］。研究表明，蘋果果實的總酚含量在幼果期、膨大期、成熟期都與蘋果輪紋病的發(fā)生程度呈顯著負(fù)相關(guān)，劉海英等［35］認(rèn)為果實中酚類物質(zhì)對輪紋病病菌侵入有顯著的抑制作用，可抑制病原菌的生長。果實中酚類物質(zhì)的成分及含量由遺傳因素及生長環(huán)境所決定，同時也受采后貯藏和加工過程的影響［36］。如蘋果品種紅玉中酚類物質(zhì)含量較高，其抗性就較強;而酚類物質(zhì)含量較少的金冠則抗病性較弱。

4.2.3 相關(guān)酶類

在植物抵抗病原微生物侵染的過程中，抗性相關(guān)酶起著重要的作用，主要包括超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶 (POD)和苯丙氨酸解胺酶(PAL)［37］。其抗性表現(xiàn)為:POD通過催化木質(zhì)素的合成促進細(xì)胞壁的木質(zhì)化，抵制病原菌的侵染;POD主要通過催化木質(zhì)素及將酚類物質(zhì)氧化為對病原菌有更大毒性的醌類物質(zhì)，來抑制病原菌的生長繁殖，也可通過形成醌類物質(zhì)直接發(fā)揮抗病作用。PAL是苯丙烷類代謝 (病原菌入侵時植物細(xì)胞的特征反應(yīng))的關(guān)鍵酶和限速酶，在木質(zhì)素的積累、植保素和酚類物質(zhì)的合成中起重要作用。鴨梨果實貯藏期對病原菌抗性下降與SOD，POD，PAL等酶活力的下降密切相關(guān)［38］。?

4.3 防御相關(guān)基因

對蘋果基因組進行生物信息學(xué)分析，并結(jié)合半定量PT-PCR和熒光定量技術(shù)對防御相關(guān)基因進行研究，發(fā)現(xiàn)了6個響應(yīng)輪紋病病原菌侵染的基因。對這些基因進行基因功能分析時發(fā)現(xiàn):MdPR-4-1通過編碼抗菌蛋白，直接抑制病原菌的生長，且該基因的抑菌作用具有廣譜性;MdMBP2則可能編碼識別蛋白，通過參與對病原菌的識別作用參與對蘋果輪紋病的防御反應(yīng)，熒光定量PCR結(jié)果顯示，該基因在皮和葉中的表達量較高。另外，MdACBP2基因的表達還能被輪紋病病原菌侵染所抑制，且不同脅迫處理的結(jié)果表明，該基因能被B．dothidea侵染和10%PEG滲透脅迫所抑制，但低溫可以誘導(dǎo)該基因的表達，推測該基因可能參與了蘋果對生物或非生物脅迫的抗性反應(yīng)［39］。

5 防治措施

輪紋病菌為弱寄生菌，因此，輪紋病的發(fā)生與樹勢強弱關(guān)系密切。對于輪紋病的防治，應(yīng)在加強栽培管理、增強樹勢、提高樹體抗病能力的基礎(chǔ)上，進行藥劑防治。藥劑一般采用波爾多液、代森錳鋅、多菌靈等。袁自更［40］從田間管理、藥劑防治及果實儲藏等方面詳細(xì)論述了蘋果輪紋病的防控措施。遲福梅等［41］通過室內(nèi)殺菌劑毒力試驗表明，10%苯醚甲環(huán)唑微乳劑對蘋果輪紋病病原菌的抑菌效果最佳，其次為43%戊唑醇懸浮劑。

隨著人們對食品安全問題的關(guān)注及環(huán)保意識的不斷增強，以及對農(nóng)藥殘留、病原菌抗藥性等問題認(rèn)識的加深，越來越多的研究者開始致力于尋找和開發(fā)安全高效的生物農(nóng)藥。枯草芽孢桿菌B-903是趙白鴿等［42］從蘋果樹皮上分離獲得的一種光譜拮抗菌株，其對離體的蘋果輪紋病菌株有明顯的抑菌效果，經(jīng)田間噴淋保護和水果貯前浸果處理結(jié)果表明，該菌株對輪紋病菌有明顯的抑制作用。紀(jì)兆林等［43］從土壤中分離獲得的地衣芽孢桿菌W10，對蘋果輪紋病菌的抑制及防效試驗結(jié)果表明，W10菌液、培養(yǎng)濾液、抗菌蛋白對病菌的形態(tài)、菌絲生長、產(chǎn)孢和分生孢子的萌發(fā)都具有明顯的破壞或抑制作用。分離篩選獲得的拮抗細(xì)菌No.1［44］和生防放線菌［45］等也均對輪紋病菌有很好的拮抗作用，而且生防菌與NaHCO3協(xié)同作用可提高生防菌對輪紋病采后防治的效果［46］。同時，苦參堿提取物［47］及植物內(nèi)生代謝物鮑曼菌素［48］等植物源農(nóng)藥也對輪紋病有較好防效。

6 問題與展望

輪紋病是蘋果和梨生產(chǎn)上的重要病害，可引起嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。雖然在病原分化、寄主抗性機理、藥劑篩選方面取得了一定進展，但是基礎(chǔ)研究相對并不深入，對輪紋病的防治效果并不理想，需要進一步加大研究投入，為病害的有效防治打下堅實的基礎(chǔ)。

隨著生物技術(shù)的迅速發(fā)展，利用分子遺傳學(xué)手段研究植物病害取得了很大發(fā)展。但輪紋病的致病機理研究還處于初級階段，基因水平研究輪紋病的致病機理還未見報道。研究輪紋病菌致病的分子機制有利于深入了解輪紋病發(fā)生發(fā)展的詳細(xì)情況，為制定相應(yīng)的防治策略提供科學(xué)依據(jù);可以開發(fā)分子靶標(biāo)，為新型農(nóng)藥的開發(fā)提供藥物靶點，促進新農(nóng)藥的研發(fā)。特別是輪紋病菌基因組序列的發(fā)表公布，為輪紋病菌功能基因組學(xué)的研究開辟了道路。當(dāng)前需要建立穩(wěn)定高效的輪紋病菌的基因轉(zhuǎn)化體系，充分借鑒當(dāng)前生物學(xué)發(fā)展的新技術(shù)和新成果［49-52］，深入開展輪紋病的基礎(chǔ)研究。

雖然有效的田間管理可以降低輪紋病的發(fā)生，但是輪紋病依然是蘋果和梨貯藏期的重要病害，可造成嚴(yán)重的爛果損失。因此，在深入研究輪紋病菌致病機理的基礎(chǔ)上，開發(fā)環(huán)境友好型的高效農(nóng)藥，是病害防治的關(guān)鍵。生物防治是很好的研究方向，也取得了一些進展，但如何確保生物農(nóng)藥在田間使用的高效性，及植物源農(nóng)藥的儲存及生產(chǎn)，都是目前迫切需要解決的問題。因此，在不斷篩選新的高效的生防菌種的同時，合適的配套施用技術(shù)的研究也是安全持續(xù)有效防治輪紋病貯藏期為害的關(guān)鍵。

［1］ 中國農(nóng)業(yè)年鑒編輯委員會.中國農(nóng)業(yè)年鑒［M］.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，2006.

［2］ 張亮，趙邦宏.改革開放30a來我國梨果產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟發(fā)展研究［J］.西北林學(xué)院學(xué)報，2009，24(4):234-236.

［3］ 王英，師校欣，杜國強.蘋果輪紋病病菌分生孢子離體人工誘導(dǎo)技術(shù)研究 ［J］.中國農(nóng)學(xué)通報，2009，25(1):194-197.

［4］ 李廣旭，沈永冰，高艷敏，等.蘋果輪紋病菌侵染機制的研究 ［J］.果樹學(xué)報，2007，24(1):16-20.

［5］ 李明桃.梨輪紋病的發(fā)生規(guī)律及防治技術(shù) ［J］.農(nóng)業(yè)災(zāi)害研究，2013，3(4):25-28.

［6］ 趙嘉平，梁軍，呂全，等.葡萄座腔菌屬 (Botryosphaeria)系統(tǒng)分類評述 ［J］.林業(yè)科學(xué)研究，2007，20(3):415-422.

［7］ Slippers B，Wingfield M J.Combined multiple gene genealogies and phenotypic characters differentiate several species previously identified as Botryosphaeria dothidea［J］.Mycologia，2004，96(1):83-101.

［8］ Xu C，Wang C，Sun X，et al.Multiple group I introns in the small-subunit rDNA of Botryosphaeria dothidea:implication for intraspecific genetic diversity ［J］. Plos One， 2013， 8(7):e67808.

［9］ Tang W，Ding Z，Zhou ZQ，et al.Phylogenetic and pathogenic analyses show that the causal agent of apple ring rot in China is Botryosphaeria dothidea ［J］.Plant Disease，2012，96:486-496.

［10］ 曹若彬.果樹病理學(xué) ［M］.1版.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，1997.

［11］ Nose T.On the ring disease of Pears and the causal organism，especially on its perfect generation Physalospora pincola n.sp［J］.N.Agric Exp Stn Chosen，1933(7):156-163.

［12］ 北島博.果樹病害各論 ［M］.東京:養(yǎng)賢堂，1989:256-261.

［13］ 小金澤碩城，佐久間勉.リソゴ粗皮病及ぴいば皮病病斑より分離てれゐ系狀菌.(日本)果樹試驗場報告［C］.1980，7:83-99.

［14］ Kohn F C，Hendrix F F.Temperature，free moisture，and inoculum concentration effects on the incidence and development of white rot of apples［J］.Phytopathology，1982，72(3):313-316.

［15］ 徐梅，尚忠海，王平，等.蘋果輪紋病菌與干腐病菌的研究［J］.河南林業(yè)科技，1999，19(2):7-9.

［16］ 黃春燕，劉開啟.蘋果輪紋病及相關(guān)病害病原菌的RAPD分析 ［J］.植物病理學(xué)報，2001，31(2):164-169.

［17］ 余仲東，曹支敏，張星耀.楊樹潰瘍病、蘋果輪紋病等病原菌的ITS-rDNA-RFLP解析 ［J］.中國森林病蟲，2004，23(2):15-18.

［18］ 吳貴本，劉傳德，王繼秋，等.蘋果輪紋病和炭疽病病原菌生物學(xué)研究［J］.中國果樹，2001(1):7-11.

［19］ 張定法，劉起麗，張建新，等.蘋果輪紋病菌分生孢子器產(chǎn)生條件研究［J］.西北農(nóng)業(yè)學(xué)報，2008，17(6):214-216.

［20］ 董娟華，李保華.蘋果輪紋病的研究進展［J］.北方果樹，2009(1):1-2.

［21］ 康玲，郝紅梅，楊振英，等.蘋果輪紋病研究進展 ［J］.中國農(nóng)學(xué)通報，2009，25(9):188-191.

［22］ Kim K W，Park E W，Kim Y H，et al.Latency-and defenserelated ultrastructural characteristics of apple fruit tissues infected with Botryosphaeria dothidea ［J］.Phytopathology，2001，91(2):165-172.

［23］ Kim K W.Glyoxysomal nature of microbodies complexed with lipid globules in Botryosphaeria dothidea ［J］.Phytopathology，2004，94(9):970-977.

［24］ 閻振立，張全軍，張順妮，等.蘋果品種對輪紋病抗性的鑒定 ［J］.果樹學(xué)報，2005，22(6):654-657.

［25］ 李廣旭，高艷敏，楊華，等.輪紋病菌在蘋果枝干上侵入途徑的掃描電鏡觀察 ［J］.果樹學(xué)報，2005，22(2):169-171.

［26］ 孫月麗，于秋香，徐繼忠.皮孔的組織結(jié)構(gòu)與蘋果枝干輪紋病抗性的關(guān)系 ［J］.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2011，34(6):55-59.

［27］ 李淼，檀根甲，承河元，等.植物抗病性研究現(xiàn)狀與前景展望［J］.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版，2002，24(5):731-736.

［28］ 李洪連，王守正，王金生，等.黃瓜對炭疽病誘導(dǎo)抗性的初步研究Ⅱ.誘導(dǎo)抗病機制的研究 ［J］.植物病理學(xué)報，1993，23(4):327-333.

［29］ 劉海英，李川，范永山，等.影響蘋果果實輪紋病抗性的寄主因素及相關(guān)性分析［J］.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2003，26(1):56-60.

［30］ Charles R D.Effect of pH and carbon on growth of the apple rot fungus， Botryosphaeria ribis ［J］. Phytopathology，1966，56:876.

［31］ 趙曉芳.鴨梨果實抗性物質(zhì)與輪紋病菌互作關(guān)系研究［D］.鄭州:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2008.

［32］ 王艷娜.鴨梨果實輪紋病寄生-病原菌互作機理［D］.北京:中國林業(yè)科學(xué)研究院林業(yè)研究所，2007:47-54.

［33］ Proceedings of 5th International Congress of Plant Pathology［C］.Kyoto，1988，55:111-116.

［34］ 劉國坤，陳啟建，吳祖建，等.幾種植物提取物對4種植物病原真菌的抑制作用［J］.福建農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版，2004，33(3):295-299.

［35］ 劉海英，李川，范永山，等.影響蘋果果實輪紋病抗性的寄主因素及相關(guān)性分析［J］.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2003，26(1):56-60.

［36］ 楊麗麗，莊艷，王憶，等.不同抗性蘋果果實受輪紋病菌侵染后亞顯微結(jié)構(gòu)的變化［J］.園藝學(xué)報，2012，39(5):963-969.

［37］ 李廣旭，楊華，高艷敏，等.輪紋病菌對不同抗性蘋果品種防御酶的影響［J］.果樹學(xué)報，2005，22(4):416-418.

［38］ 祝美云，趙曉芳，王貴禧，等.鴨梨果實接種輪紋病菌及生長期、貯藏期防御酶系活性變化的研究 ［J］.農(nóng)業(yè)工程學(xué)報，2008，24(3):251-255.

［39］ 柏素花.蘋果輪紋病防御相關(guān)基因的鑒定及功能分析［D］.長沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2012.

［40］ 袁自更.蘋果輪紋病防治方法［J］.果農(nóng)之友，2014(1):28-29.

［41］ 遲福梅，周宗山，吳玉星，等.5種殺菌劑對蘋果輪紋病菌的室內(nèi)毒力測定［J］.中國果樹，2008(5):41-43.

［42］ 趙白鴿，孔建，王文夕，等.枯草芽孢桿菌B-903對蘋果輪紋菌的抑菌作用及其對病害的控制效果［J］.植物病理學(xué)報，1997(3):213-214.

［43］ 紀(jì)兆林，凌箏，張清霞，等.地衣芽孢桿菌對蘋果輪紋病菌和炭疽病菌的抑制及其對貯藏期蘋果輪紋病的防治作用［J］.果樹學(xué)報，2008，25(2):209-214.

［44］ 楊華，紀(jì)明山，李廣旭，等.不同發(fā)酵條件對蘋果輪紋病拮抗細(xì)菌生長的影響 ［J］.果樹學(xué)報，2007，24(6):799-802.

［45］ 展麗然，張克誠，冉隆賢，等.蘋果輪紋病菌拮抗放線菌的篩選與鑒定 ［J］.中國農(nóng)學(xué)通報，2008，24(4):341-344.

［46］ 劉郵洲，陳志誼，王克榮，等.碳酸氫鈉 (NaHCO3)對生防菌防治采后梨輪紋病的影響［J］.果樹學(xué)報，2010(5):757-763.

［47］ 康斌斌，李林，張存瑞.植物源農(nóng)藥防治蘋果樹輪紋病的研究與應(yīng)用［J］.杭州化工，2012，43(2):24-26.

［48］ 藺經(jīng)，楊青松，李曉剛，等.鮑曼菌素對梨輪紋病病菌的毒力及其藥效評價［J］.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版，2011，37(1):52-54.

［49］ 陳其軍，肖玉梅，王學(xué)臣，等.植物功能基因組研究中的基因敲除技術(shù)［J］.植物生理學(xué)通訊，2004，40(1):121-126.

［50］ 李彩紅，李志芳，馮自力，等.農(nóng)桿菌介導(dǎo)的基因敲除技術(shù)在絲狀真菌基因功能研究中的應(yīng)用［J］.棉花學(xué)報，2013，25(3):262-268.

［51］ Wang D Y，He D，Li G Q，et al.An efficient tool for random insertional mutagenesis:Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of the filamentous fungus Aspergillus terreus［J］.Journal of Microbiological Methods，2014(98):114-118.

［52］ 陳亮，孫庚午，王洪凱，等.葡萄座腔菌原生質(zhì)體的制備及gfp的轉(zhuǎn)化 ［J］.林業(yè)科學(xué)，2014，50(6):131-137.