王 欣 劉 江

1.河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院曹妃甸區(qū)醫(yī)院放射科，河北唐山063200；2.河北聯(lián)合大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河北唐山063000

環(huán)氧合酶-2及細(xì)胞周期蛋白D1在腮腺腫瘤組織中的表達(dá)及相關(guān)性分析

王 欣1劉 江2▲

1.河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院曹妃甸區(qū)醫(yī)院放射科，河北唐山063200；2.河北聯(lián)合大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河北唐山063000

目的探討環(huán)氧合酶-2（COX-2）、細(xì)胞周期蛋白D1（cyclinD1）在腮腺腫瘤組織中的表達(dá)及相關(guān)性。方法對(duì)河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院曹妃甸區(qū)醫(yī)院2009年3月～2014年9月收治的25例腮腺多形性腺瘤、42例癌在多形性腺瘤中及20例腺瘤旁組織（對(duì)照）病理標(biāo)本進(jìn)行免疫組織化學(xué)SP法染色，觀察COX-2、cyclinD1的陽性表達(dá)情況及兩者的相關(guān)性。結(jié)果癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織中COX-2的陽性率分別為83.3%、52.0%、5.0%，腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織的COX-2陽性率與癌在多形性腺瘤中比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），腮腺多形性腺瘤與腺瘤旁組織比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織中cyclinD1的陽性率分別為81.0%、44.0%、10.0%，腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織的cyclinD1陽性率與癌在多形性腺瘤中比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），腮腺多形性腺瘤與腺瘤旁組織比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。在癌在多形性腺瘤中，COX-2及cyclinD1的表達(dá)與年齡、性別、腫瘤直徑無關(guān)（P＞0.05）；cyclinD1的表達(dá)與TNM分期及淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05），COX-2的表達(dá)僅與TNM分期有關(guān)（P＜0.05）。在腮腺腫瘤中COX-2與cyclinD1的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.812，P＜0.01）。結(jié)論COX-2、cyclinD1隨著腫瘤的發(fā)生及惡化，其表達(dá)均逐漸增高，且兩者的表達(dá)呈正相關(guān)性，提示COX-2、cyclinD1與腮腺腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。COX-2、cyclinD1的聯(lián)合檢測有助于對(duì)腫瘤良惡性的鑒別，可對(duì)治療方案選擇提供參考。

腮腺多形性腺瘤；癌在多形性腺瘤中；環(huán)氧合酶-2；細(xì)胞周期蛋白D1

腮腺多形性腺瘤來源于腮腺上皮組織，是腮腺最常見的良性腫瘤，治療主要以手術(shù)為主，未完整切除的多形性腺瘤?？蓮?fù)發(fā)[1]，復(fù)發(fā)者常沿神經(jīng)分支分布，手術(shù)切除更為困難，且有癌變的可能[2]。因此，了解腮腺腫瘤的發(fā)病機(jī)制，對(duì)腫瘤早期診斷和治療均有重要的意義。近年來研究表明，環(huán)氧合酶-2（COX-2）、細(xì)胞周期蛋白D1（cyclinD1）與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[1-2]，而COX-2、cyclinD1在腮腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤組織中表達(dá)的相關(guān)報(bào)道較少。本研究分析河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院曹妃甸區(qū)醫(yī)院（以下簡稱“我院”）2009年3月～2014年9月收治的腮腺腫瘤患者病理標(biāo)本中COX-2、cyclinD1在腮腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤組織中表達(dá)及其相關(guān)性，為臨床的診斷、治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院收治的腮腺腫瘤患者67例，其中，腮腺多形性腺瘤25例，癌在多形性腺瘤中42例，診斷均經(jīng)手術(shù)病理結(jié)果證實(shí)，并選取腺瘤旁組織20例作為對(duì)照。67例患者中男30例，女37例，年齡22～75歲。所有患者術(shù)前均未進(jìn)行任何抗腫瘤治療。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)通過，患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 主要試劑和儀器

即用型鼠抗人COX-2單克隆抗體，購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司；即用型鼠抗人cyclinD1單克隆抗體和SP試劑盒，購自北京中山生物技術(shù)有限公司；高清晰度彩色圖文分析系統(tǒng)，購自武漢千屏影像技術(shù)有限公司。

1.3 免疫組化

病理樣本以10%福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，4 μm連續(xù)切片。對(duì)病理標(biāo)本行免疫組織化學(xué)SP法染色。按SP試劑盒說明書進(jìn)行操作。以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照，以肺癌組織切片作為陽性對(duì)照。

1.4 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

免疫組化陽性信號(hào)為棕色細(xì)小顆粒狀，COX-2、cyclinD1染色結(jié)果以細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕色顆粒為陽性反應(yīng)，在200倍顯微鏡下取5個(gè)視野計(jì)算陽性細(xì)胞與總細(xì)胞數(shù)的比值。結(jié)果判斷：陰性（-）：陽性細(xì)胞與總細(xì)胞數(shù)的比值＜10%；弱陽性（+）：10%≤陽性細(xì)胞與總細(xì)胞數(shù)的比值＜30%；陽性（++）：30%≤陽性細(xì)胞與總細(xì)胞數(shù)的比值＜50%；強(qiáng)陽性（+++）：陽性細(xì)胞與總細(xì)胞數(shù)的比值≥50%。以+～+++為陽性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)或精確概率法，等級(jí)資料的比較采用秩和檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman分析；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同腮腺組織COX-2、cyclinD1的陽性表達(dá)情況

COX-2陽性反應(yīng)定位于細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核，均可見棕色顆粒。癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織中COX-2的陽性率分別為83.3%、52.0%、5.0%；腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織的COX-2陽性率與癌在多形性腺瘤中比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；腮腺多形性腺瘤與腺瘤旁組織比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。cyclinD1陽性反應(yīng)定位于細(xì)胞核，可見棕色顆粒。癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織中cyclinD1的陽性率分別為81.0%、44.0%、10.0%；腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織的cyclinD1陽性率與癌在多形性腺瘤中比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），腮腺多形性腺瘤與腺瘤旁組織比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 不同臨床特征的癌在多形性腺瘤中組織COX-2、cyclinD1表達(dá)情況

在癌在多形性腺瘤中COX-2的表達(dá)與年齡、性別、腫瘤直徑、淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移無關(guān)（P＞0.05），與TNM分期有關(guān)（P＜0.05）；cyclinD1的表達(dá)與年齡、性別、腫瘤直徑無關(guān)（P＞0.05），與TNM分期及淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05）。見表2。

2.3 腮腺腫瘤中COX-2與cyclinD1表達(dá)的相關(guān)性

腮腺腫瘤組織中COX-2與cyclinD1的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.812，P＜0.01）。

3 討論

環(huán)氧化酶（COX）是花生四烯酸合成前列腺素過程中的重要限速酶，COX-2是其亞型。近年研究表明，COX-2表達(dá)與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[3]。研究表明，胰腺癌、胃癌、結(jié)腸癌組織中COX-2表達(dá)為89%以上[3]。COX-2可能通過以下機(jī)制參與了腫瘤的發(fā)生發(fā)展[4-7]：①增加促血管生成因子的表達(dá)并促進(jìn)生長因子誘導(dǎo)的血管形成及抑制內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡等途徑促進(jìn)腫瘤血管形成；②抑制機(jī)體免疫反應(yīng)；③通過其過氧化酶活性，發(fā)生共氧化反應(yīng)而生成致癌物。李波等[8]對(duì)肝癌切除術(shù)切取的肝癌組織標(biāo)本52例采用免疫組織化學(xué)方法檢測COX-2蛋白的表達(dá)，并與正常肝組織進(jìn)行對(duì)照分析，結(jié)果表明，正常肝組織中未見COX-2表達(dá)，COX-2在中、低分化肝癌組織的陽性率（94.1%）高于高分化肝癌組織（38.9%），兩者比較差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），表明COX-2參與了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程。COX-2在腮腺腫瘤組織中的表達(dá)研究較少，本研究對(duì)67例腮腺腫瘤患者的臨床資料進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織中COX-2的陽性率分別為83.3%、52.0%、5.0%，腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織的COX-2陽性率與癌在多形性腺瘤中比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），腮腺多形性腺瘤與腺瘤旁組織比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。因此認(rèn)為，檢測腮腺腫瘤組織中COX-2的表達(dá)有助于鑒別腫瘤的良惡性，可對(duì)治療方案選擇提供參考。

cyclinD1是調(diào)節(jié)細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期中增生期的主要因子，已被證實(shí)為原癌基因，其過度表達(dá)導(dǎo)致細(xì)胞增殖，從而發(fā)生腫瘤[9-11]。本研究結(jié)果顯示，癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織中cyclinD1的陽性率分別為81.0%、44.0%、10.0%，腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁組織的cyclinD1陽性率與癌在多形性腺瘤中比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），腮腺多形性腺瘤與腺瘤旁組織比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。本研究結(jié)果與已報(bào)道研究結(jié)果相符[2，12]。表明cyclinD1與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切。本研究相關(guān)性分析結(jié)果顯示，COX-2、cyclinD1兩者的表達(dá)呈正相關(guān)，提示COX-2、cyclinD1與腮腺腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。

綜上所述，COX-2、cyclinD1隨著腫瘤的發(fā)生及惡化，其表達(dá)均逐漸增高，且兩者的表達(dá)呈正相關(guān)性，提示COX-2、cyclinD1與腮腺腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，且兩者具有協(xié)同作用，COX-2、cyclinD1的聯(lián)合檢測有助于對(duì)腫瘤良惡性的鑒別，可對(duì)治療方案的選擇提供參考。

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Expression and correlation of COX-2 and cyclinD1 in parotid tumor tissues

WANG Xin1LIU Jiang2▲
1.Department of Radiology,the Affiliated Caofeidian Hospital of Hebei United University,Hebei Province,Tangshan 063200,China;2.School of Basic Medical,Hebei United University,Hebei Province,Tangshan063000,China

ObjectiveTo evaluate the expression and correlation of COX-2 and cyclinD1 in parotid tumor tissues.MethodsThe expression of COX-2,cyclinD1 were detected by SP immunohistochemical staining in specimens of 25 cases of parotid pleomorphic adenoma,42 cases of carcinoma in pleomorphic adenoma and 20 cases of tissues beside the adenoma(control).The positive expressions and correlation of COX-2,cyclinD1 were observed.ResultsThe positive expression rate of COX-2 in carcinoma in pleomorphic adenoma,pleomorphic adenoma of parotid gland,tissues beside the adenoma were 83.3%,52.0%,5.0%respectively.The positive expression rate of COX-2 in carcinoma in pleomorphic adenoma was significantly higher than that in pleomorphic adenoma of parotid gland,tissues beside the adenoma(P＜0.05);the positive expression rate of COX-2 in pleomorphic adenoma of parotid gland was significantly higher than that in tissues beside the adenoma(P＜0.05).The positive expression rate of cyclinD1 in carcinoma in pleomorphic adenoma,pleomorphic adenoma of parotid gland,tissues beside the adenoma were 81.0%,44.0%,10.0%, respectively.The positive expression rate of cyclinD1 in carcinoma in pleomorphic adenoma was significantly higher than those in pleomorphic adenoma of parotid gland,tissues beside the adenoma(P＜0.05);the positive expression rate of cyclinD1 in pleomorphic adenoma of parotid gland was significantly higher than that in tissues beside the adenoma(P＜0.05).In carcinoma in pleomorphic adenoma,the expression of COX-2 was only associated with TNM staging (P＜0.05),the expression of cyclinD1 was associated with the lymph node metastasis,TNM staging(P＜0.05);both of the expressions of COX-2 and cyclinD1were not associated with the patient's gender and age,the size of tumor(P＞0.05).There was a positive correlation between the expression of COX-2 and the expression of cyclinD1 in parotid tumor(r=0.812,P＜0.01).ConclusionThe expressions of COX-2,cyclinD1 are gradually increased with occurrence and progression of parotid gland tumor.There is a positive correlation between the expression of COX-2 and cyclinD1.The combined detection of COX-2 and cyclinD1 can help to differentiate benign and malignant tumors and help for antitumor therapy selection.

Parotid pleomorphic adenoma;Carcinoma in pleomorphic adenoma;COX-2;cyclinD1

R739.87

A

1673-7210（2015）04（b）-0015-04

2015-01-05本文編輯：程銘）

河北省科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（編號(hào)11276135）。

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