■黎宗寶 陳海浪 王學(xué)梅

（海南大學(xué)農(nóng)學(xué)院，海南?？?570228）

隨著人們生活質(zhì)量和對食品安全的關(guān)注度的提高，綠色飼料添加劑的開發(fā)與應(yīng)用越來越受到重視。有機酸作為綠色飼料添加劑，因具有無殘留、無抗藥性、無毒副作用，添加量少等優(yōu)點[1]而越來越受歡迎。有研究表明：在雞日糧中添加復(fù)合有機酸，可降低消化道的pH值、改善腸道微生態(tài)環(huán)境、提高機體免疫力和日糧養(yǎng)分的利用率，提高營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化率[2-3]。金曉君等（2011）研究表明：有機酸有提高肉雞日糧蛋白、干物質(zhì)、鈣和磷的表觀代謝率的作用[4]。文昌雞作為海南優(yōu)良的地方雞品種，有關(guān)有機酸制劑應(yīng)用研究少見報道[5]。本試驗在文昌雞飼糧中添加復(fù)合有機酸研究其對營養(yǎng)物質(zhì)代謝和血液理化指標的影響，為復(fù)合有機酸在文昌雞生產(chǎn)上的利用提供試驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與試驗設(shè)計

1.1.1 試驗動物

試驗在海南大學(xué)校內(nèi)實習(xí)基地進行，選取健康、體況正常、個體均勻的7周齡的文昌雞共48只。公母比例為1∶1，平均體重約為(655.4±79.6)g。

1.1.2 添加劑

本試驗所用有機酸為意大利亞士可化工大藥廠生產(chǎn)，主要成分：每千克含150.00 mg延胡索酸、100.00 mg檸檬酸、125.00 mg乳酸、75.00 mg蘋果酸。

1.1.3 試驗設(shè)計及日糧組成

采用單因素試驗設(shè)計，試驗設(shè)3個處理。其中對照組飼喂全價商品飼糧（由海南恒興飼料公司提供），試驗組是在對照組的基礎(chǔ)上添加不同水平的有機酸，添加量分別為0.25%、0.5%，每組4個重復(fù)，每重復(fù)4只雞。飼料配方組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.2 飼養(yǎng)管理

試雞采用籠上飼養(yǎng)，飼喂粉料，自由采食、自由飲水，自然光照通風(fēng)，常規(guī)免疫。試驗為期10 d后（喂料量每重復(fù)200 g/d），其中預(yù)飼期6 d，正式代謝試驗2 d，代謝試驗結(jié)束后進行血液采集。

表1 飼料配方組成及營養(yǎng)水平

1.3 樣品采集

1.3.1 糞樣采集與處理

代謝試驗采用肛門全收糞法，預(yù)飼期結(jié)束后開始收集糞尿混合物，每天早上8：00和下午5：00各收集一次，共收集48 h，每次取所收糞樣的10%添加10%的鹽酸攪拌均勻后放入70℃的烘箱中烘干，粉碎，備用。

1.3.2 血液采集與處理

以重復(fù)為單位，代謝試驗結(jié)束后試雞在早上空腹從翅靜脈采血。每組試驗雞采血約5 ml置于干凈的試管內(nèi)，傾斜靜置，常溫下制備血清。待血清滲出后，迅速以3 000 r/min離心10 min，取上清液，置于-20℃冰箱保存待測。

1.4 試驗指標的測定方法

1.4.1 常規(guī)養(yǎng)分

飼料和糞樣中粗脂肪(GB/T 6433—1994)、粗纖維(GB/T 6434—2006)、鈣 (GB/T 6436—2002)、磷 (GB/T 6437—2002)、干物質(zhì)(GB/T 6435—2006)、粗灰分（GB/T 6438—2007）的測定采用常規(guī)方法，具體參照楊勝（1993）主編的《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》中的相應(yīng)方法[6]。

1.4.2 血液理化指標

血清白蛋白(ALB)、尿酸(UA)、總膽固醇（CHO）、甘油三酯(TG)、鈣(Ca)、磷(P)、pH值，采用試劑盒測定，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

血清pH值用pH計測定；血清中的鈣用甲基百里香酚藍比色法測定；磷采用磷鉬酸法測定；尿酸采用磷鎢酸法測定；白蛋白采用溴甲酚綠比色法測定；總膽固醇采用酶偶聯(lián)比色法測定；甘油三酯采用酶偶聯(lián)比色法測定。

1.5 計算公式

糞樣中有機物、干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、鈣和磷的表觀利用率分別依據(jù)下列公式計算：

某養(yǎng)分表觀代謝率（%）=（某養(yǎng)分攝入量-糞尿某養(yǎng)分排出量）/某養(yǎng)分攝入量×100。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)采用SAS軟件包（8.0版）進行方差分析，用Duncan's法進行多重比較。測定結(jié)果以“平均值±標準差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合有機酸對文昌雞常規(guī)養(yǎng)分表觀代謝率的影響（見表2）

表2 飼糧中添加復(fù)合有機酸對文昌雞營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率的影響(%)

從表2可見，飼糧中添加復(fù)合有機酸對文昌雞營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率無明顯影響（P＞0.05）。其中，與第Ⅰ組（對照組）比較，第Ⅱ組和第Ⅲ組的文昌雞對飼糧中粗灰分和磷的表觀利用率有所提高；第Ⅲ組的文昌雞對飼料中鈣的表觀利用率比第Ⅰ組有所提高，但差異不顯著（P＞0.05）；各組間其他指標差異均不顯著（P＞0.05）。本試驗結(jié)果表明：飼糧中添加復(fù)合有機酸對文昌雞營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率沒有明顯的影響。

2.2 有機酸對文昌雞血液理化指標的影響（見表3）

表3 飼糧中添加復(fù)合有機酸對文昌雞血液理化指標的影響

由表3可以看出，復(fù)合有機酸對文昌雞血液理化指標的影響不大，各組血液理化指標之間差異不顯著（P＞0.05)。其中隨著復(fù)合有機酸添加量的增多，血清甘油三酯水平有降低趨勢。

3 討論

3.1 飼糧中添加復(fù)合有機酸對文昌雞飼料常規(guī)養(yǎng)分表觀代謝率的影響

大多數(shù)研究表明，飼料中添加有機酸制劑可以提高營養(yǎng)物質(zhì)利用率。王盼盼等（2013）研究表明：添加0.5%有機酸有提高三黃雞飼糧粗蛋白和粗脂肪表觀代謝率的趨勢，且能顯著提高鈣的表觀代謝率[7]。李萬軍（2012）和程金榮等（2011）的研究結(jié)果也表明，在肉仔雞飼糧中添加酸化劑，可以顯著提高飼糧蛋白質(zhì)、能量、干物質(zhì)、鈣和磷的表觀利用率[8-9]。本試驗利用文昌雞的研究結(jié)果表明，飼糧中添加0.25%和0.5%的復(fù)合有機酸對有機物、干物質(zhì)、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、粗蛋白表觀代謝率沒有明顯的改善，對飼糧鈣、磷利用率有改善作用，但差異不顯著（P＞0.05）。朱碧泉等（2007）研究復(fù)合有機酸對肉雞的營養(yǎng)生理效應(yīng)時表明，飼糧添加有機酸可改善肉雞1～21日齡日糧的干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、有機物和能量的利用率。在21～42日齡期間添加有機酸對飼糧干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機物和能量利用率無明顯改善作用[10]。朱碧泉等(2007)在不同種類有機酸對肉雞生長性能、養(yǎng)分利用率和腸道菌群的影響研究也有相似的報道[11]。本試驗結(jié)果可能是由于試驗文昌雞日齡較大，消化系統(tǒng)發(fā)育逐步完善，胃內(nèi)酸度和胃蛋白酶活性的提高，使復(fù)合有機酸對文昌雞的消化作用效果減弱。羅四維（2010）對肉仔雞的研究也說明同樣的問題[12]。

3.2 飼糧中添加復(fù)合有機酸對文昌雞血液理化指標的影響

血液理化指標的變化反映了動物機體內(nèi)的代謝及生理機能表征，反映了機體的營養(yǎng)健康狀況。白蛋白（ALB）是總蛋白的組成之一，由肝臟合成，具有維持正常血漿滲透壓、傳遞小分子物質(zhì)、保護球蛋白的功能[13]。同時，ALB含量也反映肝臟的代謝狀況[14]。ALB的變化不僅反映動物機體的一些病理狀態(tài)，也反映了動物機體的代謝水平，動物在正常狀況下血清中的白蛋白的含量保持在相對穩(wěn)定的狀態(tài)，當肝臟或腎臟患病時，血清白蛋白的含量就會降低。本試驗結(jié)果表明：添加不同劑量的復(fù)合有機酸對文昌雞血清中的ALB含量無顯著影響（P＞0.05)。UA是禽類的主要排氨形式，它是由蛋白質(zhì)和核酸降解生成。當?shù)鞍踪|(zhì)分解代謝增高時，UA含量就會升高，因此UA含量高低可很大程度上反映機體內(nèi)蛋白質(zhì)利用狀況，UA含量越低表明機體氮的利用效果越高，體內(nèi)蛋白質(zhì)的沉積量越大。本試驗研究結(jié)果表明，復(fù)合有機酸對文昌雞血清中的UA含量無顯著影響，說明本試驗添加劑量下的復(fù)合有機酸沒有提高氮的利用率以及增加體內(nèi)蛋白質(zhì)沉積量。

血清總膽固醇、甘油三酯水平是反映動物體內(nèi)脂類代謝功能正常與否的兩個重要指標。尹靖東等（2000）研究報道，脂肪組織發(fā)育和脂肪沉淀均受血漿甘油三酯水平的影響[15]。高密度脂蛋白（HDL）主要是由肝臟和小腸合成，它們能清除存在于肌肉組織細胞中的膽固醇，從而確保體內(nèi)膽固醇的穩(wěn)定。本試驗復(fù)合有機酸在添加劑量下對文昌雞血清中總膽固醇、甘油三酯無顯著影響(P＞0.05)，但對血清中甘油三酯水平有降低趨勢。結(jié)果說明日糧中添加復(fù)合有機酸能夠加速機體脂肪的代謝，減少脂肪的沉淀。

血液pH值是動物體內(nèi)重要的酸堿平衡之一，動物血液pH值在一個小的范圍內(nèi)變動，當血液pH值發(fā)生巨大的變化時，機體內(nèi)的緩沖系統(tǒng)就不能保持血液pH值的穩(wěn)定，就會導(dǎo)致動物機體發(fā)生血液循環(huán)障礙，導(dǎo)致機體中毒。本試驗在日糧中添加有機酸并沒有大范圍改變文昌雞血液pH值，仍維持穩(wěn)定狀態(tài)。孫喜偉等（2009）研究結(jié)果表明：酸化劑能降低雪山草雞血清中的pH值，提高血清中的Ca，對磷無顯著影響[16]。本試驗中在文昌雞日糧中添加復(fù)合有機酸對血清pH值、鈣和磷都無顯著影響，說明經(jīng)過短時間飼喂復(fù)合有機酸對文昌雞鈣、磷礦物質(zhì)吸收無促進作用。有機酸在動物生產(chǎn)上應(yīng)用效果受有機酸種類、動物品種、生理狀態(tài)、年齡、日糧類型及飼養(yǎng)期長短等多種因素的影響；另外，關(guān)于有機酸在文昌雞生產(chǎn)上的應(yīng)用研究較少，因此，深入系統(tǒng)地研究有機酸制劑對文昌雞消化生理、健康及營養(yǎng)物質(zhì)利用等具有重要的指導(dǎo)意義。

4 結(jié)論

本試驗結(jié)果表明，飼糧中添加復(fù)合有機酸對7周齡文昌雞營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率和血液理化指標均無明顯影響。