潘麗梅+馬小軍+韋榮昌+唐其+韋樹根+莫長明+付金娥
摘要:以鉤藤無菌莖尖組培苗為試驗(yàn)材料,研究不同基本培養(yǎng)基、不同激素配比對鉤藤生根壯苗的影響;同時以優(yōu)良的組培苗為試驗(yàn)材料,搭配不同比例的基質(zhì),研究其對鉤藤組培苗移栽成活率和生長狀況的影響。結(jié)果顯示,1/2MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA激素組合的培養(yǎng)基生根壯苗效果最好,所發(fā)的新根粗壯,根長適中,根數(shù)較多,最適于煉苗移栽;移栽基質(zhì)以體積比2∶1∶1的塘泥∶育苗土∶蛭石較佳,移栽成活率可達(dá)90%以上,且生長狀況最佳。
關(guān)鍵詞:鉤藤;生根壯苗;移栽;基質(zhì)篩選
中圖分類號:S567.1+90.4文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:1002-1302(2014)11-0083-02
鉤藤[Uncariarhynchopylla(Miq.)Jacks]為茜草科鉤藤屬木本植物,別稱耿馬鉤藤、雙鉤藤、雙鉤、無柄果鉤藤[1],產(chǎn)于廣東、廣西、云南、貴州、福建、湖南等地,常生于山谷溪邊的疏林或灌叢中,為我國的著名中藥。鉤藤的功能為清血平肝、息風(fēng)定驚等,可用于風(fēng)熱頭痛、感冒夾驚、驚痛抽搐等癥,所含鉤藤堿有降血壓作用,是一種較好的藥材,其根也可入藥[2-3]。由于鉤藤用途廣泛,療效明確,近年來國內(nèi)外市場對該藥材的需求量激增,致使其野生資源遭到嚴(yán)重的采挖,資源漸顯枯竭,在進(jìn)行鉤藤種苗的生產(chǎn)過程中,最快速有效的一條繁殖途徑為組織培養(yǎng),而組織培養(yǎng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)就是對組培苗進(jìn)行生根壯苗培養(yǎng)及移栽馴化,其中移栽基質(zhì)是提高組培苗移栽成活率、促進(jìn)種苗健壯生長的重要因素之一[4],基質(zhì)選擇的原則是疏松透氣,具有一定的保水保肥能力,容易滅菌處理,不利于雜菌孳生等[5]。因此,本試驗(yàn)在組織培養(yǎng)基礎(chǔ)上優(yōu)化生根壯苗培養(yǎng)基,并對影響鉤藤組培苗移栽成活率和成苗生長的基質(zhì)類型及配比進(jìn)行優(yōu)化篩選研究,以期為鉤藤組培苗的規(guī)?;a(chǎn)提供參考和理論依據(jù)。
1材料與方法
鉤藤組培苗為廣西藥用植物園組織培養(yǎng)室經(jīng)多次繼代繁殖的鉤藤莖尖組培苗。
1.1鉤藤生根壯苗培養(yǎng)基的優(yōu)化試驗(yàn)
供試材料為3cm左右、葉片張開、綠色的鉤藤無菌試管幼苗,在超凈臺上將其取出后分別接種到高壓滅菌的生根壯苗培養(yǎng)基中,每瓶接種5株。生根壯苗培養(yǎng)基設(shè)6個處理:A1,1/2MS+0.2mg/LNAA;A2,1/2MS+0.2mg/LIBA;A3,1/2MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA;B1,MS+0.2mg/LNAA;B2,MS+0.2mg/LIBA;B3,MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA。每個處理培養(yǎng)基中均加入蔗糖25g/L,瓊脂4.5g/L,活性炭1g/L,每個處理培養(yǎng)基均接種20瓶。接種后置于培養(yǎng)溫度為(25±2)℃、光照強(qiáng)度1500~2000lx下光照培養(yǎng)時間12h/d。培養(yǎng)30d后統(tǒng)計(jì)幼苗生根率、生根數(shù)、根長和株高,分析不同培養(yǎng)基對鉤藤組培苗生長情況的影響。
1.2鉤藤組培苗移栽基質(zhì)的篩選試驗(yàn)
1.2.1煉苗及預(yù)處理選擇在生根壯苗培養(yǎng)基中培養(yǎng)時間為25d、高約4cm、葉片4~5張、長勢一致的已生根鉤藤莖尖苗。在移栽環(huán)境下先閉瓶強(qiáng)光煉苗3~5d,再打開瓶蓋繼續(xù)煉苗3~4d,每天保持噴霧澆水以避免葉片水分過快流失而萎蔫。移栽時選取生長狀況良好、株高3~5cm、根長2~3cm、每株具4~5條根系的組培苗作為移栽材料,用鑷子將小苗輕輕取出后用自來水沖洗干凈,在0.1%高錳酸鉀溶液中浸泡30s備用。
1.2.2移栽基質(zhì)的消毒及配制移栽基質(zhì)在使用前,于160℃高溫下烘8h消毒,以塘泥為基本基質(zhì),按不同比例(體積比)混合配制成8種移栽基質(zhì)(表1),每種基質(zhì)裝2個育苗框,每個育苗框30株苗,3次重復(fù)。
1.2.3組培苗的移栽將預(yù)處理的組培苗移栽到8種不同的試驗(yàn)基質(zhì)中,隨機(jī)移苗,注意及時噴水保持濕度。定期記錄移栽組培苗的成活率、株高、根數(shù)、根長、長勢等情況。
2結(jié)果與分析
2.1鉤藤生根壯苗培養(yǎng)基優(yōu)化試驗(yàn)
由表2可知,接種在1/2MS培養(yǎng)基中的試管苗在接種1周后就開始出現(xiàn)新根的分化,而接種在MS培養(yǎng)基中的試管苗則是在接種后3周才有較明顯的新根分化,說明1/2MS培養(yǎng)基更有利于新根的分化;從生根率來看,也說明了1/2MS培養(yǎng)基更有利于新根的分化。在只添加NAA的生根培養(yǎng)基A1中,雖然平均根長較長,但其根較細(xì)小,容易折斷而不利于移栽成活;只添加IBA的生根培養(yǎng)基A2,根雖比A1中的根粗,但生根數(shù)變少,顏色呈現(xiàn)淡褐色;1/2MS培養(yǎng)基中以NAA與IBA組合使用(A3)的生根率最好,平均生根條數(shù)達(dá)到7.25條,平均根長3.62cm,與MS培養(yǎng)基相同激素組合(B3)的生根率相比差異極顯著。從組培苗的生長狀態(tài)來看,接種在MS培養(yǎng)基中的試管苗更傾向于根上部的生長,即莖葉的生長,而根系則生長緩慢,根部生長一段時間后生長點(diǎn)出現(xiàn)愈傷化現(xiàn)象,根不再生長,因此不適于作為生根培養(yǎng)基。綜合上述因素分析可知,A3處理最適合鉤藤壯苗生根。
2.2鉤藤組培苗移栽基質(zhì)的篩選試驗(yàn)
2.2.1不同基質(zhì)對鉤藤組培苗移栽成活的影響從鉤藤組培苗移栽60d后的調(diào)查結(jié)果(圖1)可看出,T7處理的移栽成活率最高,為96.35%,且根系發(fā)達(dá)、粗壯;T6處理次之,為91.65%;T7、T6處理間差異不顯著,但均與其他處理間差異顯著,且與T1、T2處理差異極顯著;處理T1的成活率最低,且根系分支少而短,生長差,不適合作為鉤藤組培苗的移栽基質(zhì)。
2.2.2不同基質(zhì)對鉤藤組培苗葉片數(shù)的影響由圖2可以看出,經(jīng)過30~40d的生長,穩(wěn)定成活后的鉤藤組培苗在不同基質(zhì)處理下的平均葉片數(shù)均可達(dá)到4張以上,其中處理T7的平均葉片數(shù)最多,為6.11張,其次為T6處理,平均為5.93張,處理T5、T8的平均葉片數(shù)也達(dá)5張以上,這4個處理間差異均不顯著,但與其他4個處理差異顯著。
2.2.3不同基質(zhì)對鉤藤組培苗株高的影響鉤藤組培苗移栽時的株高基本在4.5cm左右,由圖3可知,在不同基質(zhì)中穩(wěn)定成活后,鉤藤組培苗株高均有增加,其中以處理T6的植株最高,達(dá)8.67cm,與T5、T7處理差異顯著,與T1、T2、T3、T4、T8處理差異極顯著;T5、T7間差異不顯著,T2、T3、T4處理間差異不顯著??梢?,處理T6的植株根系最發(fā)達(dá),最有利于吸收養(yǎng)分,植株生長快。
2.2.4不同基質(zhì)對鉤藤組培苗莖粗的影響從圖4可以看出,不同基質(zhì)處理間組培苗莖粗差異明顯,其中T7的莖最粗(0.19cm),T3最細(xì)(0.09cm),且T7與其他各處理間差異顯著或極顯著,與T2、T3、T4、T5處理間差異極顯著??梢?,T7處理的組培苗的莖最粗,效果最好。
3結(jié)論與討論
3.1生根與壯苗
從基本培養(yǎng)基看,1/2MS培養(yǎng)基生根快,且長出的新根較粗壯,而MS培養(yǎng)基生根緩慢,且新根細(xì)長,根數(shù)少,因此1/2MS培養(yǎng)基更適合鉤藤組培苗生根。激素NAA與IBA對鉤藤組培苗的生根、壯苗均有促進(jìn)作用,6個處理中以1/2MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA組合(A3培養(yǎng)基)的生根壯苗效果最好,所發(fā)的新根粗壯,根長適中,最適于移栽煉苗。
3.2移栽
在環(huán)境適宜的條件下,組培苗移栽生根過程中栽培基質(zhì)發(fā)揮著重要作用,基質(zhì)的物理性狀及化學(xué)成分不同,其保水性、保肥能力以及透氣性不同,對組培苗的移栽成活和后期生長有重要的影響[6]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,在8種不同的移栽基質(zhì)中,鉤藤組培苗的成活率和生長狀況差異明顯,根據(jù)各生長指標(biāo)測定數(shù)據(jù),最適合的基質(zhì)配方是塘泥∶育苗土∶蛭石體積比為2∶1∶1的基質(zhì)(T7),其次是塘泥∶育苗土∶珍珠巖體積比為2∶1∶1的基質(zhì)(T6),移栽成活率均達(dá)90%以上,且長勢良好。加有園土的基質(zhì),鉤藤組培苗成活率普遍偏低,且植株長勢弱,葉色淡,莖稈纖細(xì),根短小而弱,雖然園土的吸水性和保水性強(qiáng),但比較容易板結(jié),透氣性差,組培苗根系受到影響,從而引起種苗生長不旺盛。在塘泥中加入育苗土后,結(jié)合蛭石或珍珠巖,改善了塘泥的透氣性,提高了組培苗的成活率,進(jìn)一步促生了新根,也促進(jìn)了幼苗的生長,因而最適合組培苗移栽種植。
參考文獻(xiàn):
[1]徐祥浩,吳翰.中國鉤藤屬植物的整理[J].華南農(nóng)學(xué)院學(xué)報,1981(3):21-32.
[2]韋樹根,馬小軍,施力軍,等.鉤藤扦插繁殖試驗(yàn)[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,39(6):415-416.
[3]施力軍,蘇建春,蔣向軍,等.鉤藤組培技術(shù)體系研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,38(6):2937,2955.
[4]何應(yīng)對,馬蔚紅,韓麗娜,等.3種基質(zhì)配方對香蕉組培苗生長的影響[J].中國南方果樹,2010,39(6):38-39.
[5]吳麗芳,丁偉,陸偉東,等.不同基質(zhì)對密閉培養(yǎng)下梔子組培苗移栽成活率的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(1):172-173.
[6]肖旭峰,劉明月.不同基質(zhì)配比對馬鈴薯微型薯生長發(fā)育的影響[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2008,30(3):460-463.
2.2.3不同基質(zhì)對鉤藤組培苗株高的影響鉤藤組培苗移栽時的株高基本在4.5cm左右,由圖3可知,在不同基質(zhì)中穩(wěn)定成活后,鉤藤組培苗株高均有增加,其中以處理T6的植株最高,達(dá)8.67cm,與T5、T7處理差異顯著,與T1、T2、T3、T4、T8處理差異極顯著;T5、T7間差異不顯著,T2、T3、T4處理間差異不顯著??梢?,處理T6的植株根系最發(fā)達(dá),最有利于吸收養(yǎng)分,植株生長快。
2.2.4不同基質(zhì)對鉤藤組培苗莖粗的影響從圖4可以看出,不同基質(zhì)處理間組培苗莖粗差異明顯,其中T7的莖最粗(0.19cm),T3最細(xì)(0.09cm),且T7與其他各處理間差異顯著或極顯著,與T2、T3、T4、T5處理間差異極顯著??梢姡琓7處理的組培苗的莖最粗,效果最好。
3結(jié)論與討論
3.1生根與壯苗
從基本培養(yǎng)基看,1/2MS培養(yǎng)基生根快,且長出的新根較粗壯,而MS培養(yǎng)基生根緩慢,且新根細(xì)長,根數(shù)少,因此1/2MS培養(yǎng)基更適合鉤藤組培苗生根。激素NAA與IBA對鉤藤組培苗的生根、壯苗均有促進(jìn)作用,6個處理中以1/2MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA組合(A3培養(yǎng)基)的生根壯苗效果最好,所發(fā)的新根粗壯,根長適中,最適于移栽煉苗。
3.2移栽
在環(huán)境適宜的條件下,組培苗移栽生根過程中栽培基質(zhì)發(fā)揮著重要作用,基質(zhì)的物理性狀及化學(xué)成分不同,其保水性、保肥能力以及透氣性不同,對組培苗的移栽成活和后期生長有重要的影響[6]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,在8種不同的移栽基質(zhì)中,鉤藤組培苗的成活率和生長狀況差異明顯,根據(jù)各生長指標(biāo)測定數(shù)據(jù),最適合的基質(zhì)配方是塘泥∶育苗土∶蛭石體積比為2∶1∶1的基質(zhì)(T7),其次是塘泥∶育苗土∶珍珠巖體積比為2∶1∶1的基質(zhì)(T6),移栽成活率均達(dá)90%以上,且長勢良好。加有園土的基質(zhì),鉤藤組培苗成活率普遍偏低,且植株長勢弱,葉色淡,莖稈纖細(xì),根短小而弱,雖然園土的吸水性和保水性強(qiáng),但比較容易板結(jié),透氣性差,組培苗根系受到影響,從而引起種苗生長不旺盛。在塘泥中加入育苗土后,結(jié)合蛭石或珍珠巖,改善了塘泥的透氣性,提高了組培苗的成活率,進(jìn)一步促生了新根,也促進(jìn)了幼苗的生長,因而最適合組培苗移栽種植。
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[5]吳麗芳,丁偉,陸偉東,等.不同基質(zhì)對密閉培養(yǎng)下梔子組培苗移栽成活率的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(1):172-173.
[6]肖旭峰,劉明月.不同基質(zhì)配比對馬鈴薯微型薯生長發(fā)育的影響[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2008,30(3):460-463.
2.2.3不同基質(zhì)對鉤藤組培苗株高的影響鉤藤組培苗移栽時的株高基本在4.5cm左右,由圖3可知,在不同基質(zhì)中穩(wěn)定成活后,鉤藤組培苗株高均有增加,其中以處理T6的植株最高,達(dá)8.67cm,與T5、T7處理差異顯著,與T1、T2、T3、T4、T8處理差異極顯著;T5、T7間差異不顯著,T2、T3、T4處理間差異不顯著??梢?,處理T6的植株根系最發(fā)達(dá),最有利于吸收養(yǎng)分,植株生長快。
2.2.4不同基質(zhì)對鉤藤組培苗莖粗的影響從圖4可以看出,不同基質(zhì)處理間組培苗莖粗差異明顯,其中T7的莖最粗(0.19cm),T3最細(xì)(0.09cm),且T7與其他各處理間差異顯著或極顯著,與T2、T3、T4、T5處理間差異極顯著。可見,T7處理的組培苗的莖最粗,效果最好。
3結(jié)論與討論
3.1生根與壯苗
從基本培養(yǎng)基看,1/2MS培養(yǎng)基生根快,且長出的新根較粗壯,而MS培養(yǎng)基生根緩慢,且新根細(xì)長,根數(shù)少,因此1/2MS培養(yǎng)基更適合鉤藤組培苗生根。激素NAA與IBA對鉤藤組培苗的生根、壯苗均有促進(jìn)作用,6個處理中以1/2MS+0.2mg/LNAA+0.2mg/LIBA組合(A3培養(yǎng)基)的生根壯苗效果最好,所發(fā)的新根粗壯,根長適中,最適于移栽煉苗。
3.2移栽
在環(huán)境適宜的條件下,組培苗移栽生根過程中栽培基質(zhì)發(fā)揮著重要作用,基質(zhì)的物理性狀及化學(xué)成分不同,其保水性、保肥能力以及透氣性不同,對組培苗的移栽成活和后期生長有重要的影響[6]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,在8種不同的移栽基質(zhì)中,鉤藤組培苗的成活率和生長狀況差異明顯,根據(jù)各生長指標(biāo)測定數(shù)據(jù),最適合的基質(zhì)配方是塘泥∶育苗土∶蛭石體積比為2∶1∶1的基質(zhì)(T7),其次是塘泥∶育苗土∶珍珠巖體積比為2∶1∶1的基質(zhì)(T6),移栽成活率均達(dá)90%以上,且長勢良好。加有園土的基質(zhì),鉤藤組培苗成活率普遍偏低,且植株長勢弱,葉色淡,莖稈纖細(xì),根短小而弱,雖然園土的吸水性和保水性強(qiáng),但比較容易板結(jié),透氣性差,組培苗根系受到影響,從而引起種苗生長不旺盛。在塘泥中加入育苗土后,結(jié)合蛭石或珍珠巖,改善了塘泥的透氣性,提高了組培苗的成活率,進(jìn)一步促生了新根,也促進(jìn)了幼苗的生長,因而最適合組培苗移栽種植。
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[5]吳麗芳,丁偉,陸偉東,等.不同基質(zhì)對密閉培養(yǎng)下梔子組培苗移栽成活率的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(1):172-173.
[6]肖旭峰,劉明月.不同基質(zhì)配比對馬鈴薯微型薯生長發(fā)育的影響[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2008,30(3):460-463.