朱澤航，陸元善

(上海交通大學附屬第一人民醫(yī)院輸血科，上海200080)

類孟買血型血清學鑒定及家系調(diào)查探討

朱澤航，陸元善

(上海交通大學附屬第一人民醫(yī)院輸血科，上海200080)

目的探討正確鑒定類孟買血型的方法，為罕見血型人群找尋更多相合供者。方法對4例正反定型不符者用ABO正反定型、Lewis血型鑒定、H抗原檢測、紅細胞吸收放散試驗、冷抗體檢測和檢測唾液血型物質(zhì)的中和抑制試驗進行綜合鑒定，并且進行家系調(diào)查。結(jié)果4例被檢者均證實為類孟買血型。先證者c的妹妹也被證實為同型類孟買型。結(jié)論對正反定型不一致的標本要高度警惕，應(yīng)加做其它必要的血清學試驗。冷抗體檢測還能為類孟買血型患者輔助選擇合適的血液輸注。家系調(diào)查不僅能查清類孟買血型的來源和遺傳，而且可以提供更多相同稀有血型供者。

類孟買血型;ABD正反定型;H抗原;冷抗體

作為ABO和Lewis等血型形成的前體糖鏈，H血型抗原存在于幾乎所有人的紅細胞表面。而類孟買血型是罕見的H缺陷的ABO分泌型［1］。我們對4例正反定型不符且疑似類孟買血型者做了以下進一步血清學鑒定，并對其中一個家庭進行了家系調(diào)查。

材料和方法

一、研究對象

4例(分別為被檢者a、b、c、d)標本在常規(guī)血型鑒定時正反定型不符，且排除抗-A、抗-B減弱。男2例，女2例，年齡23～45歲。調(diào)查家系成員包括先證者父母、姑姑和弟妹，共5人。

二、試劑

單克隆抗-A、抗-B、抗-H及標準ABO紅細胞均購自上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司。抗-Lea、抗-Leb購自荷蘭Sanquin公司。人源抗-A和抗-B、新鮮O型臍血細胞、新鮮成人ABO細胞均由本實驗室自制。

三、方法

1.ABO血型、紅細胞吸收放散試驗、抗體檢測和唾液中和抑制試驗均按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》(第3版)進行。

2.H抗原檢測、Lewis血型鑒定按試劑說明書操作。

結(jié)果

一、血型鑒定

4名被檢者a、b、c和d的紅細胞與抗-A、抗-B、抗-H、抗-Lea均不凝集，與抗-Leb均凝集。被檢者血清與標準ABO紅細胞的反應(yīng)均不符合正定型，但與自身紅細胞不發(fā)生凝集。見表1。

二、紅細胞吸收放散試驗

被檢者a、b、c檢出紅細胞上有弱B抗原，被檢者d紅細胞上有弱A和弱B抗原。正常成人O細胞上A、B抗原陰性。見表2。

表1 ABO、H、Lewis血型鑒定結(jié)果

表2 紅細胞吸收放散試驗結(jié)果

三、抗體鑒定

被檢者a和d血清中檢出抗-H，被檢者b和c血清中檢出抗-HI。

四、唾液中血型物質(zhì)檢測

在被檢者a、b和c的唾液中檢測到B物質(zhì)和H物質(zhì)，在被檢者d的唾液中檢測到A、B和H物質(zhì)。

根據(jù)以上結(jié)果判定被檢者a、b和c的血型為Bmh，被檢者d的血型為ABmh。

五、家系調(diào)查結(jié)果

對被檢者c家系成員進行血型血清學鑒定，除妹妹與先證者c同為Bmh外，其他成員血型均表現(xiàn)正常。家系圖見圖1。

圖1 先證者c家系圖

討論

ABO血型正反定型結(jié)果可以相互參照，正反定型結(jié)果相符才能確保ABO血型鑒定的正確性［2］。類孟買血型作為一種稀有血型，主要表現(xiàn)在紅細胞H抗原部分或全部缺失。由于H抗原是A和B抗原前身物質(zhì)，其缺失直接影響A和B抗原形成，導致實驗室易將類孟買血型誤定為O型。因此，反定型加O細胞是非常有必要的［3］。針對這種情況還必須加做H抗原檢測。Lewis抗原不是紅細胞本身的抗原，而是被血漿中鞘糖脂從血漿吸附到紅細胞膜上。由于Lewis物質(zhì)與ABH起源于一個共同的前身物，檢測Lewis血型有助于鑒定類孟買血型。類孟買血型個體Lewis血型表現(xiàn)為Le(a-b+)或Le(a-b-)，而不會表現(xiàn)為Le(a+ b-)，當Se位點為Sew時，表現(xiàn)為Le(a+b+)［4］。紅細胞表面H抗原缺乏，唾液等分泌液中檢測出H物質(zhì)是類孟買血型最重要血清學依據(jù)。本研究被檢者紅細胞上H抗原為陰性，Lewis血型表現(xiàn)為Le(a-b+)，紅細胞吸收放散試驗與唾液血型物質(zhì)測定結(jié)果一致，且后者檢出H物質(zhì)，由此可斷定被檢者為類孟買血型。類孟買血型人群血清中通常存在冷抗體抗-H或抗-HI。本研究也檢測到此類抗體，進一步證實為類孟買血型。另外，抗-H或抗-HI能跟大多數(shù)具有H抗原的紅細胞凝集，在無法找到相同H抗原缺乏血型血源時應(yīng)根據(jù)類孟買血型患者抗-A、抗-B、抗-H或抗-HI實際情況，選擇37℃時與類孟買血型患者血清反應(yīng)最弱的ABO血型血液進行輸血治療［5］。

目前，在歐洲、東南亞、美國等人群中均發(fā)現(xiàn)了類孟買型。文獻報道在日本約為(1～2)/ 300 000，中國香港約為1/15 620，中國臺灣約為1/8 000［6］，提示不同地區(qū)不同人群中類孟買型表型頻率存在地區(qū)性差異。中國大陸尚無這方面的統(tǒng)計資料，有待進一步研究。

有研究表明，H(FUT1)位點基因控制H抗原物質(zhì)在紅細胞表達，其突變可導致類孟買血型;而Se(FUT2)位點基因則控制H抗原在體液中表達。孟買型是由于FUT1和FUT2基因發(fā)生突變，H抗原在紅細胞和分泌液中均檢測不到;而類孟買型僅為FUT1基因發(fā)生突變，因此分泌液中仍存在ABH物質(zhì)［7］。本研究結(jié)果與文獻相符。FUT1基因直接編碼產(chǎn)物是α-1，2巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶。將供給底物二磷酸鳥苷-L-巖藻糖(guanosine diphosphate-L-fucose，GDP-L-fucose)的巖藻糖基轉(zhuǎn)移到接受底物前體糖鏈上形成H抗原，并進一步在A和B糖基轉(zhuǎn)移酶的作用下形成A和B抗原［8］。推測4例類孟買血型者FUT1基因的突變使α-1，2巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶失活，導致H抗原合成減弱，繼而使紅細胞上A或B抗原表達弱于正常型［9］。

類孟買型由基因突變或自親代獲得2個隱性基因(hh)而產(chǎn)生［10］。本調(diào)查家系中，先證者c與妹妹同為Bmh，父母和弟弟均表現(xiàn)為正常ABO和H表型。從分子遺傳機制考慮存在如下可能: (1)父母H位點基因正常(HH)，姐妹倆FUT1基因發(fā)生突變;(2)父母為單鏈突變基因攜帶者(Hh)。姐妹從親代繼承了h基因，發(fā)生純合或雜合甚至復合突變，使得α-1，2巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶活性嚴重下降甚至失活，影響了血型抗原的形成，最終導致了先證者及其妹妹的類孟買血型。突變攜帶者的血型表型正常，可能是這些個體在另一半正常表達的H抗原基礎(chǔ)上合成了足夠多的ABO血型抗原，細胞表面的抗原位點數(shù)量能夠滿足單克隆抗體的結(jié)合所需，從而顯示了正常的血清學實驗結(jié)果［11］。至于弟弟是否為單鏈突變基因攜帶者留待今后對其子代進行調(diào)查。

本研究中有3人同為Bmh，促使考慮能否建立類孟買型信息庫，使這種稀有同血型者能快速找到最適供者。另外，由于類孟買型隱性遺傳，?？稍谙茸C者同胞中發(fā)現(xiàn)相同類孟買血型，因此對其同胞進行調(diào)查也不失為尋找相合供者的重要途徑。

［1］SCHENKEL-BRUNNER H.ABO system.Human blood groups chemical and biochemical basis of antigen specificity［M］.2nd edition.New York: Springer wien，2000:110-117.

［2］樊鳳艷，王洪波，魏少平，等.不規(guī)則抗體導致ABO正反定型不符處理探討［J］.檢驗醫(yī)學，2012，27(10):822-824.

［3］江慧.常規(guī)血型鑒定發(fā)現(xiàn)類孟買型Bhm1例［J］.檢驗醫(yī)學與臨床，2013，10(18):2494.

［4］郭忠慧，向東，朱自嚴，等.中國類孟買血型FUT1和FUT2基因研究［J］.中華醫(yī)學遺傳學雜志，2004，21(5):417-421.

［5］向東，張雄民，朱自嚴，等.1例類孟買血型的鑒定及輸血［J］.中國輸血雜志，2004，17(4):275-276.

［6］BLUMENFELD OO，PATNAIK SK.Allelic genes of blood group antigens:a source of human mutations and cSNPs documented in the Blood Group Antigen Gene Mutation Database［J］.Hum Mutat，2004，23 (1):8-16.

［7］杰夫·丹尼爾.人類血型［M］.朱自嚴，譯.2版.北京:科學出版社，2007:8-79.

［8］許國先，洪小珍，劉瑛，等.一個類孟買血型家系的α1，2巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶基因突變分析［J］.中華醫(yī)學遺傳學雜志，2010，27(3):250-254.

［9］林甲進，黃穎，朱碎永.一例類孟買血型的家系分析和分子機制研究［J］.中華醫(yī)學遺傳學雜志，2013，30(2):165-167.

［10］吳遠軍，劉景春，劉興玲，等.類孟買血型OHmB的血型血清學及家系調(diào)查［J］.第四軍醫(yī)大學學報，2006，27(19):1778-1781.

［11］駱宏，林健偉，張潤青，等.類孟買血型兩例的分子遺傳機制研究［J］.中華檢驗醫(yī)學雜志，2012，35(9):815-819.

Study on the serology identification of para-Bombay phenotype and the investigation of a family

ZHU Zehang，LU Yuanshan.(Department of Transfusion，Shanghai General Hospital，Shanghai Jiaotong University，Shanghai 200080，China)

ObjectiveTo study the correct serology identification methods of para-Bombay phenotype and search compatible donors for rare blood type.MethodsA total of 4 cases of positive and reverse typing discrepancy were identified comprehensively.ABO positive and reverse typing，Lewis blood type identification，H antigen detection，red blood cell absorption-elution test，cold antibody detection and hemagglutination inhibition test for blood type substance in saliva were performed.A family investigation was made.ResultsAll the 4 cases were confirmed as para-Bombay phenotype.Proband c＇s sister was also proved that she was the same para-Bombay phenotype.ConclusionsThe cases of positive and reverse typing discrepancy should be added other essential tests for para-Bombay phenotype.The detection of cold antibody assists in not only identifying para-Bombay phenotype but also selecting compatible blood for transfusion.Family investigation makes possible observe source and inheritance of para-Bombay phenotype and provide homogeneous donors for transfusion.

Para-Bombay phenotype;ABD positive and reverse typing;H antigen;Cold antibody

1673-8640(2015)09-0874-03

R446.11

A

10.3969/j.issn.1673-8640.2015.09.002

2015-03-04)

(本文編輯:范基農(nóng))

朱澤航，女，1969年生，學士，副主任技師，主要從事血型鑒定和輸血技術(shù)工作。