李偉娟
像眾多留學(xué)生一樣,姚新靈也有一顆熾熱的愛國心,2000年,歷經(jīng)三年的留學(xué)生涯后他毅然回國,并在寧夏大學(xué)從事教學(xué)和科研工作。因?yàn)樵鴰煆鸟R鈴薯基因組測序發(fā)起人著名科學(xué)家Richard Visser教授,受其啟發(fā),他的研究興趣主要有“淀粉生物合成基因表達(dá)調(diào)控及代謝生物學(xué)”和“茄科植物發(fā)育分子機(jī)制及轉(zhuǎn)錄組學(xué)及發(fā)育生物學(xué)”等方面。尤其是在高粘度和高產(chǎn)量淀粉的品系研究方面頗具成就。
回國后的十幾年時(shí)間,姚新靈圍繞自己的研究領(lǐng)域,先后主持完成國家科技計(jì)劃資助課題6項(xiàng),地方資助課題5項(xiàng),參加國家科技計(jì)劃3項(xiàng),申請國家發(fā)明專利4項(xiàng),獲得高淀粉及高粘度馬鈴薯轉(zhuǎn)化子9個(gè),累計(jì)培養(yǎng)畢業(yè)研究生15名,發(fā)表論文40余篇。建立了空間、時(shí)間和基因型三維水平識別細(xì)胞分化及發(fā)育特異表達(dá)基因的轉(zhuǎn)錄子消減雜交(TSH)方法。期間,他還承擔(dān)了生物化學(xué)及分子生物學(xué)專業(yè)碩士研究生《植物分子生理學(xué)》、《植物基因工程》及《分子遺傳學(xué)》、生物技術(shù)專業(yè)本科生《分子生物學(xué)》、《分子遺傳學(xué)》課程的講授。
淀粉,為人類的發(fā)展做出了重要貢獻(xiàn)
姚新靈教授介紹說,淀粉是植物利用光能聚合二氧化碳和水形成的大分子物質(zhì),作為最為重要的天然物質(zhì)之一供養(yǎng)了人類的文明進(jìn)化;淀粉存在于自然界的歷史同于植物存在地球的時(shí)間,盡管經(jīng)過漫長的改良,我們今天每年可收獲更多的淀粉,但對淀粉品質(zhì)有限的了解,極大地限制了這一天然大分子的應(yīng)用范圍。
淀粉品質(zhì)決定了其用途和應(yīng)用范圍,葡萄糖分子間以alfa(1-4)糖苷鍵連接形成直鏈淀粉,直鏈淀粉中多處存在以alfa(1-6)糖苷鍵連接的葡萄糖鏈分支形成的分子,稱作支鏈淀粉;直鏈和支鏈分子在淀粉中所占比重、淀粉粒大小等等均是淀粉品質(zhì)的決定因素。
經(jīng)過多年的研究,姚新靈教授總結(jié)了目前改變淀粉品質(zhì)的途徑:alfa(1-4)糖苷鍵連接的直鏈葡聚糖是alfa(1-6)糖苷鍵(分支鏈)合成的前提,ADP-葡萄糖供應(yīng)波動(dòng)的緩沖,相對增加了ADP-葡萄糖的供應(yīng),有望增加直鏈葡聚糖中alfa(1-6)糖苷鍵的形成,從而提高支鏈淀粉合成,改變最終淀粉的品質(zhì)。
植物體內(nèi)腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)是由兩個(gè)大亞基和兩個(gè)小亞基組成的異源四聚體酶,代謝合成淀粉生物合成所需的底物ADP-葡萄糖。光照周期調(diào)控AGPase翻譯后氧化還原修飾,決定著淀粉的生物合成效率。夜間兩小亞基以二硫鍵共價(jià)連接,AGPase呈失活的氧化態(tài),白天依賴NADP-硫氧還蛋白還原酶(NTRC)解離共價(jià)連接,AGPase寡聚體呈激活的還原態(tài)。
在和可溶性淀粉合成酶和去分支酶的共同作用下,淀粉粒結(jié)合淀粉合成酶(GBSSI)和淀粉分支酶(BE)分別以ADP-葡萄糖為底物催化糖苷鍵的形成,其中前者催化alfa(1-4)糖苷鍵合成,實(shí)現(xiàn)直鏈淀粉合成,后者催化alfa(1-6)糖苷鍵合成,實(shí)現(xiàn)支鏈合成。
工業(yè)淀粉需求巨大,但是很難規(guī)模發(fā)展
姚教授說,工業(yè)淀粉主要來源玉米、馬鈴薯和木薯等作物,但是受耕地面積和作為飼料巨大需求的限制,以玉米為原料加工淀粉的產(chǎn)業(yè)正在逐漸淡出淀粉市場,在我國情況尤其如此。同時(shí),組成淀粉的葡萄糖間糖苷鍵連接決定著淀粉品質(zhì),傳統(tǒng)植物育種技術(shù)無法實(shí)現(xiàn)分子間連接方式的改變;基因工程技術(shù)則是以對分子進(jìn)行定向改良見長。因此為了充分發(fā)揮淀粉作為光能聚合載體的潛力,自基因工程技術(shù)誕生以來,對淀粉分子改良的腳步就未停止過。
在國際市場對淀粉巨大需求的驅(qū)動(dòng)下,高出粉率、高粘度淀粉更是炙手可熱。過去十多年,國際化工巨頭、如荷蘭Avbe和德國BASF及Unika旗下等巨頭紛紛投資于淀粉品質(zhì)改良的育種研究,取得了許多育種成果。德國Basf公司已獲批相關(guān)基因?qū)@?.5萬個(gè)。
早在1992年,Basf公司通過基因工程途徑,將直鏈淀粉合成酶編碼基因GBSSI關(guān)閉,獲得了轉(zhuǎn)化株系A(chǔ)mflora(EH92-527-1),田間試驗(yàn)表型測定結(jié)果表明,其塊莖淀粉中支鏈淀粉含量在90%以上;這是淀粉在紡織和造紙等應(yīng)用領(lǐng)域運(yùn)用近百年來,首次對其改良的突破。
據(jù)稱由Amflora加工的高粘度淀粉,在紡織和造紙等應(yīng)用領(lǐng)域只需傳統(tǒng)淀粉用量的五分之一,即可達(dá)到同樣的使用效果;歐盟民眾多年來一直抵制在西歐種植轉(zhuǎn)基因作物,但鑒于Amflora淀粉性能的巨大誘惑,2010年歐盟批準(zhǔn)BASF在歐洲種植Amflora,據(jù)預(yù)測Amflora 淀粉可年創(chuàng)3000萬歐元產(chǎn)值。
我國適宜木薯種植的土地有限,產(chǎn)能受到影響,而適宜馬鈴薯種植的長江以北及西部和東部省區(qū)廣大區(qū)域具有淀粉生產(chǎn)的巨大潛力,但是用于工業(yè)淀粉加工的馬鈴薯仍占少數(shù)。2010年,我國馬鈴薯種植面積達(dá)到7808萬畝,居于世界第一,用于淀粉加工的馬鈴薯只占總產(chǎn)的5%,且淀粉大多僅局限于食品添加劑的狹窄用途,遠(yuǎn)落后于發(fā)達(dá)國家20%加工的水平,更無高端淀粉生產(chǎn),從而制約了高級紙張、高端紡織品、高端化工產(chǎn)品的生產(chǎn),這些產(chǎn)品長期依賴進(jìn)口。
包括內(nèi)蒙在內(nèi)的西北馬鈴薯產(chǎn)區(qū)占我國馬鈴薯種植面積的三分之二,從生產(chǎn)到加工的完整馬鈴薯產(chǎn)業(yè)鏈?zhǔn)窍嚓P(guān)省區(qū)的農(nóng)業(yè)支柱產(chǎn)業(yè)之一;近年,國際巨頭技術(shù)進(jìn)步對產(chǎn)區(qū)的可持續(xù)發(fā)展帶來了嚴(yán)峻挑戰(zhàn),龍頭企業(yè)的加工效益急劇下降,問題的核心是馬鈴薯產(chǎn)量低、加工品質(zhì)不高。國內(nèi)的淀粉技術(shù)改良迫在眉睫,只有創(chuàng)新科技,才能真正助力國家經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。
科技創(chuàng)新,引領(lǐng)經(jīng)濟(jì)發(fā)展
姚新靈教授帶領(lǐng)課題組,緊緊圍繞阻礙產(chǎn)業(yè)發(fā)展的核心的問題,在過去的15年間,開展了通過分子生物學(xué)及基因工程途徑調(diào)控淀粉生物合成的應(yīng)用基礎(chǔ)研究,期間先后6次得到國家相關(guān)科技計(jì)劃的支持,其中淀粉品質(zhì)改良研究取得了預(yù)期的結(jié)果,先后獲得了高粘度和天然交聯(lián)淀粉品系,品系淀粉具體技術(shù)參數(shù)如下。
高粘度淀粉性能指標(biāo):該項(xiàng)目高粘度淀粉的粘度比國內(nèi)產(chǎn)同類淀粉高出30%以上,與德國Basf尚未上市的Amflora淀粉水平持平。
天然交聯(lián)淀粉性能指標(biāo):直鏈淀粉含量(≤11)顯著低于非交聯(lián)對照,粘度高于或等同于化學(xué)交聯(lián)淀粉,動(dòng)態(tài)熱穩(wěn)定性抗剪切性高于化學(xué)交聯(lián)淀粉;目前國際范圍尚未檢出內(nèi)源(天然)交聯(lián)淀粉及相關(guān)產(chǎn)品。
姚教授還將項(xiàng)目技術(shù)及產(chǎn)品特點(diǎn)做了以下介紹:
1、重組基因組成及結(jié)構(gòu)的唯一性
檢索Pubmed、Genbank和各類專利數(shù)據(jù)庫發(fā)現(xiàn),到目前為止有2個(gè)重組基因用于馬鈴薯淀粉品質(zhì)改良,一個(gè)是Monsanto公司用Patatin啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的glgC16的重組基因,另一個(gè)是Basf公司用于Patatin啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)反義GBSSI的重組基因。本項(xiàng)目完成了4個(gè)重組基因構(gòu)建,其中,重組基因組成中的glgC由本項(xiàng)目獨(dú)立完成分離,序列比對發(fā)現(xiàn),其編碼的氨基酸序列中有3個(gè)特異突變尚未見報(bào)道。
2、多個(gè)基因操作進(jìn)行淀粉品質(zhì)改良
Avebe和Monsanto公司分別以GBSSI和glgC16單個(gè)基因?yàn)槟康幕?,?jīng)過基因工程途徑獲得了高產(chǎn)和低直鏈淀粉品系,因其報(bào)道極為有限,兩者所產(chǎn)淀粉的性能指標(biāo)尚不了解,但可以肯定的是單個(gè)基因操作所能達(dá)到的淀粉品質(zhì)改良效果有限。
本項(xiàng)目首次采用多個(gè)基因,包括glgC、AGPase小亞基編碼基因和GBSSI 3個(gè)基因的操作,達(dá)到了提高淀粉含量、改變其組成和結(jié)構(gòu)增強(qiáng)粘度的育種目的;國內(nèi)已用的馬鈴薯品種主要是通過傳統(tǒng)育種方法的,且對淀粉品質(zhì)改良的育種尚未見報(bào)道。
3、首創(chuàng)內(nèi)源交聯(lián)淀粉
傳統(tǒng)上,交聯(lián)淀粉只能通過化學(xué)變性方法獲得,本項(xiàng)目通過基因工程方法獲得了含有天然內(nèi)源交聯(lián)淀粉的品系,在不改變產(chǎn)業(yè)鏈生產(chǎn)條件的前提下,依此品系為原料品種,可生產(chǎn)獲得最終產(chǎn)品——內(nèi)源交聯(lián)淀粉,內(nèi)源交聯(lián)淀粉屬于技術(shù)國際領(lǐng)先的全新產(chǎn)品。
4、國內(nèi)首創(chuàng)高粘度淀粉
本項(xiàng)目獲得的高粘度淀粉的品系,在不改變產(chǎn)業(yè)鏈生產(chǎn)條件的前提下,依此品系為原料可生產(chǎn)獲得最終產(chǎn)品---高粘度淀粉,屬于國內(nèi)技術(shù)領(lǐng)先的全新產(chǎn)品。
姚新靈教授研究的課題具有極大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和社會(huì)價(jià)值,如今取得了斐然的成績,姚教授并未停下科研的腳步,他將繼續(xù)帶領(lǐng)科研小組為祖國的經(jīng)濟(jì)發(fā)展提供強(qiáng)大的科技支撐,為實(shí)現(xiàn)祖國的強(qiáng)國夢而奉獻(xiàn)自己的力量。endprint