柴若楠史亮謝華馬德賓張俊麗

·實(shí)驗(yàn)研究·

變應(yīng)性鼻炎患者血清IL-12及IL-31水平測(cè)定及其臨床意義

柴若楠1史亮1謝華1馬德賓1張俊麗1

目的探討變應(yīng)性鼻炎患者血清IL-12及IL-31水平及其臨床意義。方法 變應(yīng)性鼻炎患者按照體外檢測(cè)血清中抗體常規(guī)加入吸入性過敏原特異性抗體IgE（sIgE）抗體檢測(cè)結(jié)果分為陽性組和陰性組，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)164例變應(yīng)性鼻炎患者和82例健康對(duì)照組血清中IL-12及IL-31水平。特異性IgE測(cè)定采用德國(guó)歐盟優(yōu)敏系列（EUROALLER）檢測(cè)系統(tǒng)。結(jié)果變應(yīng)性鼻炎特異性IgE陽性組、陰性組的血清IL-12及IL-31檢測(cè)結(jié)果分別為：23.8±9.1、19.1±7.9和27.9±9.4；22.8±6.7；對(duì)照組的血清IL-12及IL-31檢測(cè)結(jié)果分別為：11.3±4.8、14.9±7.5；與對(duì)照組相比IL-12、IL-31均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。變應(yīng)性鼻炎特異性IgE陽性組亞組中，螨蟲過敏組的血清Il-12水平最高，其次為蟑螂過敏組等；與對(duì)照組相比，螨蟲過敏組與蟑螂過敏組均有顯著性差異（P＜0.05）；變應(yīng)性鼻炎特異性IgE陽性組的血清IL-31水平與對(duì)照組相比均有顯著性差異（P＜0.05）。結(jié)論免疫因子IL-12及IL-31可能參與變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病過程，環(huán)境中的螨蟲與蟑螂是變應(yīng)性鼻炎的主要誘因。

變應(yīng)性鼻炎；IL-12；IL-31；過敏原

變應(yīng)性鼻炎(allergic rhinitis,AR)是變態(tài)反應(yīng)科與耳鼻咽喉科的常見病之一，目前國(guó)內(nèi)發(fā)病率約為20%～30%之間，其發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，目前多認(rèn)為該病為IgE介導(dǎo)的Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)，多種免疫細(xì)胞如T、B淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞等及多種細(xì)胞因子參與發(fā)病機(jī)制[1]。臨床上患者連續(xù)陣發(fā)性噴嚏、大量水樣鼻涕、鼻癢及鼻塞為主要癥狀，部分患者伴有嗅覺減退，嚴(yán)重影響患者的學(xué)習(xí)、工作和生活。近年來，新的細(xì)胞因子不斷被發(fā)現(xiàn)，其中許多新的白介素與變應(yīng)性鼻炎關(guān)系密切，多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)變應(yīng)性鼻炎患者血清中IL-4、IL-12、sIL-2R、TNF-α、IL-10、白三烯水平或相應(yīng)的mRNA含量升高[2-5]。

最新研究表明，IL-12具有多功能的免疫調(diào)節(jié)作用，與AR發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，能抑制特異性IgE的產(chǎn)生，在各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)AR發(fā)病都可能起到一定的調(diào)節(jié)作用[6]，IL-12在Th細(xì)胞亞群的分化中起著關(guān)鍵作用[7]，可有效抑制或逆轉(zhuǎn)Th細(xì)胞向Th2細(xì)胞亞群的分化，是抗呼吸道變態(tài)反應(yīng)性疾病的重要因素[8]。研究同時(shí)也發(fā)現(xiàn)AR患者體內(nèi)IL-31 mRNAi水平約是健康人群中的10倍[9]。與Th2型細(xì)胞因子的表達(dá)正相關(guān)[10]。

本文通過ELISA法檢測(cè)變應(yīng)性鼻炎患者和正常人對(duì)照血清中IL-12及IL-31的表達(dá)水平，分析這些細(xì)胞因子在變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病中所起的作用，并通過測(cè)定特異性IgE的過敏原檢測(cè)方法找到變應(yīng)性鼻炎患者主要的環(huán)境影響因素。

資料與方法

1 臨床資料

所有研究患者均來自2014年5月～2014年10月于我變態(tài)反應(yīng)科門診就治的164例變應(yīng)性鼻炎患者，全部符合變應(yīng)性鼻炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[11]。

sIgE檢測(cè)，sIgE的測(cè)定采用德國(guó)歐盟優(yōu)敏系列（EUROALLER）檢測(cè)系統(tǒng)）（其中sIgE陽性組82例，男40例，女42例，年齡13～54歲，平均(32.1±13.7)歲，病程3個(gè)月～3年，平均(12.2±3.6)個(gè)月。其中單一過敏40例（蟑螂15例、螨蟲17例、艾蒿2例、樹木2例、螃蟹2例、淡水魚1例、大豆1例）；剩余42例均為多種過敏患者，其中含有食物過敏的為28例，其次是蟑螂和螨蟲過敏，分別有36和38例。

sIgE陰性組82例（噴嚏、流涕、眼癢、鼻黏膜充血＞1月），男41例，女41例，年齡13～66歲，平均(36.2±15.4)歲，病程3個(gè)月～3年，平均(13.5±6.2)個(gè)月。就診前3天均未服用抗組胺類藥物、1個(gè)月內(nèi)未使用過糖皮質(zhì)激素類藥物。對(duì)照組選自來我院康體保健中心體檢的健康人82名，其性別、年齡組成與病例組具有可比性，且均無全身性疾病，無內(nèi)分泌系統(tǒng)及心肺肝腎等慢性病，近期無局部及全身感染性疾病，也無特應(yīng)性皮炎及其他過敏性疾病。

2 方法

2.1 標(biāo)本采集

在簽訂知情同意書后，抽取對(duì)照組人員與所有變應(yīng)性鼻炎患者清晨靜息狀態(tài)下空腹靜脈5ml，離心10min（2000r/min）后，吸取上層血清，密封后，-20℃保存待檢。

2.2 檢測(cè)方法

采用人IL-12、IL-31檢測(cè)試劑盒，用ELISA法測(cè)定血清樣本中各細(xì)胞因子濃度；操作方法均嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié)果

1 血清測(cè)定結(jié)果分析

血清樣本測(cè)定結(jié)果顯示，變應(yīng)性鼻炎sIgE陽性組、陰性組的血清IL-12、IL-31檢測(cè)結(jié)果分別為：23.8±9.1、19.1±7.9和27.9±9.4；22.8±6.7；對(duì)照組的血清IL-12、IL-31檢測(cè)結(jié)果分別為：11.3±4.8、14.9± 7.5；與對(duì)照組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 變應(yīng)性鼻炎sIgE陽性組、變應(yīng)性鼻炎sIgE陰性組和對(duì)照組血清IL-12、IL-31水平檢測(cè)(pg/mL)

2 變應(yīng)性鼻炎sIgE陽性組亞組分析

變應(yīng)性鼻炎sIgE陽性組亞組中，血清檢測(cè)IL-12、IL-31水平含量螨蟲過敏組最高（21.4±6.3、 24.5±7.3），其次為蟑螂（19.9±9.5、22.2±9.7）過敏組，與對(duì)照組相比，螨蟲過敏組與蟑螂過敏組均有顯著性差異（P＜0.05），見表2。

表2 變應(yīng)性鼻炎sIgE（+）亞組和對(duì)照組血清IL-12、IL-31水平檢測(cè)(pg/mL，±s)

表2 變應(yīng)性鼻炎sIgE（+）亞組和對(duì)照組血清IL-12、IL-31水平檢測(cè)(pg/mL，±s)

注：*P＜0.05，**P＜0.01

組別 例數(shù) IL-12單一過敏組食物過敏組蟑螂過敏組螨蟲過敏組對(duì)照組40 28 36 38 64 17.5±9.2 15.7±6.6 19.9±9.5 21.4±6.3 12.9±5.8 t值2.87*2.21*4.31**6.73**IL-31 t值20.7±9.1 18.8±7.8 22.2±9.7 24.5±7.3 17.9±7.5 1.61 0.58 2.40*4.28**

討論

AR是常見的呼吸道變應(yīng)性疾病。其機(jī)制涉及一系列炎癥細(xì)胞（嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等）和眾多的細(xì)胞因子此外還存在神經(jīng)調(diào)解、遺傳學(xué)因素等作用，尚未完全明確[12]。本研究采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)164例變應(yīng)性鼻炎患者健康對(duì)照組血清中IL-12及IL-31水平。對(duì)照組的血清IL-12及IL-31檢測(cè)結(jié)果與對(duì)照組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。變應(yīng)性鼻炎sIgE陽性組亞組中，血清檢測(cè)IL-12水平含量螨蟲過敏組高，其次為蟑螂過敏組等；與對(duì)照組相比，螨蟲過敏組與蟑螂組均有顯著性差異（P＜0.05）；變應(yīng)性鼻炎sIgE陽性組的血清IL-31水平與對(duì)照組相比均有顯著性差異（P＜0.05）。這表明IL-12及IL-31可能參與變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病過程。

白細(xì)胞介素31（IL-31）是一種新發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子，主要由活化的Th2細(xì)胞產(chǎn)生。IL-31其功能受體是由IL-31R和抑瘤素M受體（OSMR，oncostatin M receptor）兩個(gè)亞基組成的異源二聚體復(fù)合物。有研究顯示，來自氣道過敏癥的動(dòng)物模型病變組織中的IL-31受體表達(dá)增加[13]。IL-31成為連接變性鼻炎中T細(xì)胞和皮膚瘙癢的細(xì)胞因子[14]。很多研究集中在變應(yīng)性鼻炎和特應(yīng)性皮膚炎中，發(fā)現(xiàn)變應(yīng)性鼻炎和特應(yīng)性皮炎患兒的疾病活動(dòng)度和Th2細(xì)胞因子水平顯著相關(guān)性[15]，IL-31在變應(yīng)性鼻炎和慢性特應(yīng)性皮炎的皮膚T細(xì)胞表達(dá)增加[16]。

白細(xì)胞介素12是近幾年發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子，它主要是由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌，它的產(chǎn)生能夠誘導(dǎo)CD4＋Th細(xì)胞向Th1型細(xì)胞分化，進(jìn)而能夠平衡Th2型細(xì)胞的功能性亢進(jìn)，抑制Th2型細(xì)胞產(chǎn)生和特異性IgE合成，從而進(jìn)一步抑制EOS的聚集和浸潤(rùn)以及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[17-19]。并可直接抑制多種Th2型細(xì)胞因子如IL-4、IL-5、IL-10等生成，促進(jìn)Th1型細(xì)胞因子IFN-γ及IL-2產(chǎn)生，增強(qiáng)Th1細(xì)胞的免疫應(yīng)答，被認(rèn)為是促使T輔助細(xì)胞向Th1分化的始動(dòng)因素[20]。本研究發(fā)現(xiàn)血清樣本測(cè)定結(jié)果顯示，變應(yīng)性鼻炎sIgE陽性組、陰性組的血清IL-12、IL-31檢測(cè)結(jié)果分別為：23.8±9.1、19.1±7.9、27.9±9.4；22.8±6.7；對(duì)照組的血清IL-12、IL-31檢測(cè)結(jié)果分別為：11.3±4.8、14.9±7.5；與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），變應(yīng)性鼻炎sIgE陽性組亞組中，血清檢測(cè)IL-12水平含量螨蟲過敏組最高，其次為蟑螂過敏組、單一過敏組及食物過敏組；與對(duì)照組相比，螨蟲過敏組與蟑螂過敏組均有顯著性差異（P＜0.05）。

本研究檢測(cè)變應(yīng)性鼻炎患者白細(xì)胞介素12、31的水平和表達(dá)，發(fā)現(xiàn)其在AR患者中的水平均高于健康對(duì)照人群，提示IL-12及IL-31可能參與變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病過程，并通過測(cè)定sIgE的過敏原檢測(cè)方法找到變應(yīng)性鼻炎患者主要的環(huán)境影響因素，環(huán)境中的螨蟲與蟑螂是變應(yīng)性鼻炎的主要誘因。

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（收稿:2015-02-15 修回：2015-03-23）

Levels of serum IL-12 and IL-31 in patients with allergy rihitis and its clinical significance

CHAI Ruonan,SHI Ling,XIE Hua,MA Debin ZHANG Junli
General Hospital of Shenyang Military Area Command,The PLA center of Respiratory and allergic disease diagnosing management,Shenyang,110016,China

ObjectiveTo investigate levels of serum IL-12and IL-31 in patients with Allergy rititis and its clinical significance.MethodsSerum levels of IL-12and IL-31 were detected by enzyme-linked immunoadsorbent assay（ELISA）in 164 Allergy rititis patients(sIgE(+)82 cases、sIgE(-)82 cases)and 82 healthy controls.sIgE was measured by EUROALLER system.ResultssIgE positive groups,negative groups serum IL-12and IL-31respectively are 23.8±9.1、19.1±7.9、27.9±9.4；22.8±6.7,Control group serum IL-12 and IL-31respectively are 11.3±4.8,14.9±7.5,The differences were statistically significant compared with control group(P＜0.05).The subgroup of sIgE positive groups,mite group have high level of IL-12 in serum，followed by the cockroach allergy groups, Compared with control group,Mite allergy and cockroach allergy groups have significant difference(P＜0.05).ConclusionIL-12 and IL-31 may be involved in the pathogenesis of Allergy rititis mite and cockroach allergy may be the main induced factors of allergy rihitis.

Allergic Rhinitis;IL-12;IL-31;Allergens

10.16542/j.cnki.issn.1007-4856.2015.04.001

1 沈陽軍區(qū)總醫(yī)院全軍呼吸內(nèi)科及變態(tài)反應(yīng)疾病診治中心(沈陽，110016）

張俊麗，副主任醫(yī)師.Email:Lilypad_ff@126.com