国产日韩欧美一区二区三区三州_亚洲少妇熟女av_久久久久亚洲av国产精品_波多野结衣网站一区二区_亚洲欧美色片在线91_国产亚洲精品精品国产优播av_日本一区二区三区波多野结衣 _久久国产av不卡

?

3個(gè)藜蒿品種的快速繁殖研究

2015-01-08 02:53張建蔣細(xì)旺
關(guān)鍵詞:激素

張建 蔣細(xì)旺

摘 要:以藜蒿莖段為外植體,通過(guò)對(duì)各組織培養(yǎng)階段中激素種類和濃度的篩選,研究了不同激素使用的必要性及作用。試驗(yàn)結(jié)果表明,最適宜愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基分別為云南藜蒿MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L、楚天藜蒿MS+6-BA 1.5 mg/L+IAA 1.0 mg/L、香藜一號(hào)MS+6-BA 1.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L;最適宜的增殖培養(yǎng)基分別為云南藜蒿MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,楚天藜蒿、香藜一號(hào)MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;最適宜的生根培養(yǎng)基為1/2 MS+NAA 0.1 mg/L。

關(guān)鍵詞:藜蒿;莖段;快速繁殖;激素;濃度篩選

藜蒿(Artemisia selengensis),別名蔞蒿,蘆蒿,水艾等,為菊科多年生宿根性草本植物[1],蔞蒿味甘性涼,具有祛風(fēng)濕、健脾胃、平抑肝火、化痰、助消化等功效[2]。藜蒿營(yíng)養(yǎng)豐富,據(jù)測(cè)定,每100 g嫩莖含有蛋白質(zhì)3.70 g、脂肪0.64 g、鐵2.9 mg、胡蘿卜素 4.0 mg、維生素C 3.73 mg、維生素B 0.28 mg、尼古酸1.27 mg、天門(mén)冬氨酸20.4 mg、谷氨酸3.43 mg、賴氨酸0.97 mg,并含有豐富的微量元素和酸性洗滌纖維等[3]。

藜蒿膳食纖維含量高,其TDF(總膳食纖維)占鮮質(zhì)量的3.95%、干莖的50%以上,SDF(可溶性膳食纖維)在總膳食纖維中所占比重較大(SDF/TDF=34.88%),IDF(不溶性膳食纖維)持水性好,溶脹力強(qiáng),所含果膠比例較高。這些特性表明,藜蒿是極好的膳食纖維源[4,5]。

目前隨著農(nóng)業(yè)種植結(jié)構(gòu)的調(diào)整和市場(chǎng)的需要,在湖北省,藜蒿種植面積也逐年增加。武漢市成為華中地區(qū)藜蒿的優(yōu)勢(shì)產(chǎn)區(qū),特別是在武漢市蔡甸區(qū),藜蒿已經(jīng)成為當(dāng)?shù)厝笾鲗?dǎo)特色蔬菜之一。藜蒿種植使當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)產(chǎn)值顯著提高,當(dāng)?shù)剞驾锓N植面積達(dá)到4 500 hm2 以上,且平均每年每667 m2總產(chǎn)值可達(dá)10 000元[6]。

通過(guò)對(duì)藜蒿進(jìn)組織培養(yǎng), 可加快藜蒿的繁殖速度,實(shí)現(xiàn)大規(guī)模工廠化生產(chǎn),保證市場(chǎng)的全年供應(yīng),進(jìn)而為藜蒿藥用、保健等深層次的加工提供原料基礎(chǔ)[7]。

近年來(lái),藜蒿的組織培養(yǎng)集中在以藜蒿幼葉[8,9]、嫩莖[9,10]、離體莖尖[11]、嫩芽[12]等為外植體的研究,本試驗(yàn)用目前武漢市種植的3個(gè)藜蒿主栽品種為材料,以莖段為外植體,研究不同藜蒿品種的最適激素濃度,從而實(shí)現(xiàn)藜蒿的高效快速繁殖,為農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整和農(nóng)業(yè)增效、農(nóng)民增收服務(wù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)采用云南藜蒿、楚天藜蒿、香藜一號(hào)3個(gè)藜蒿品種,材料均由武漢荷香源農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)方法

先將藜蒿莖段在流水下沖洗1 h,然后在超凈工作臺(tái)上,先用75%的酒精消毒30 s,無(wú)菌水沖洗3~4次,再用0.1%升汞(HgCl2)消毒3 min,用無(wú)菌水沖洗5~6次,升汞消毒重復(fù)2次,將莖段接種在愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。

①不同IAA、6-BA濃度對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)的影響 以MS為基本培養(yǎng)基,附加6-BA(0.5、1.0、 1.5 mg/L)、IAA(0.1、0.5、1.0 mg/L),進(jìn)行兩因素組合,共計(jì)9個(gè)組合,并設(shè)1組空白對(duì)照,記為A1~A10。每個(gè)組合5瓶,每瓶接4個(gè)莖段。黑暗條件下培養(yǎng),15 d后開(kāi)始觀察,統(tǒng)計(jì)愈傷組織誘導(dǎo)率、愈傷組織形成所用時(shí)間及生長(zhǎng)情況。愈傷組織誘導(dǎo)率(%)=形成愈傷組織的莖段數(shù)/接種莖段總數(shù)×100%。

②不同NAA、6-BA濃度對(duì)愈傷組織增殖的影響 以MS為基本培養(yǎng)基,研究不同NAA、6-BA濃度對(duì)愈傷組織增殖的影響,MS培養(yǎng)基中附加6-BA(0.5、1.0、1.5 mg/L)、NAA(0.1、0.5、1.0 mg/L),共設(shè)9個(gè)組合,并設(shè)1組空白對(duì)照,記為B1~B10。30 d后統(tǒng)計(jì)增殖系數(shù),增殖系數(shù)=莖段發(fā)生的不定芽總數(shù)/接種莖段總數(shù)。

③不同IBA、NAA濃度對(duì)生根誘導(dǎo)的影響 以1/2 MS為基本培養(yǎng)基,采用二因素四水平完全隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn),分別附加IBA(0.1、0.4、0.7、1.0 mg/L)、NAA(0.1、0.4、0.7、1.0 mg/L),試驗(yàn)組合分別記為C1~C9。2周后統(tǒng)計(jì)生根率、平均根數(shù)、平均根長(zhǎng)。

以上培養(yǎng)基中加蔗糖30 g/L、瓊脂7 g/L,高壓滅菌前調(diào)pH值為5.8~6.0,培養(yǎng)溫度為(24±2)℃,日光燈光源光照強(qiáng)度為2 000~2 400 lx,光照時(shí)問(wèn)為16 h/d。繼代周期為30 d,試驗(yàn)重復(fù)3次。

④無(wú)菌苗的移栽 將裝有生根的無(wú)菌苗的培養(yǎng)瓶移至通風(fēng)有散射光處煉苗48 h,打開(kāi)瓶蓋,小心洗凈根部培養(yǎng)基,移栽到消過(guò)毒的河沙中,1周后統(tǒng)計(jì)成活率。

1.3 數(shù)據(jù)處理及分析

試驗(yàn)重復(fù)3次,數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行差異顯著性分析(Duncan's新復(fù)極差法,p=0.05)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同IAA、6-BA濃度對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)和分化的影響

觀察發(fā)現(xiàn),接種15 d后,外植體切口處開(kāi)始膨大并且呈紡錘形,愈傷組織開(kāi)始分化,20 d左右,愈傷組織的顏色開(kāi)始變深。較好的愈傷組織質(zhì)地緊密、顏色較深、表面出現(xiàn)較多綠色突點(diǎn),后期可以形成健壯生長(zhǎng)的叢生芽;生長(zhǎng)不好的愈傷組織顏色為淺黃綠色,質(zhì)地疏松,體積偏小,后期難以形成健壯的叢生芽,或者叢生芽細(xì)小,難以生長(zhǎng)。說(shuō)明不同激素組合對(duì)不同品種藜蒿愈傷組織誘導(dǎo)的影響存在顯著差異。

由表1可知,本試驗(yàn)中不同IAA、6-BA濃度對(duì)藜蒿愈傷組織誘導(dǎo)率不同,不同品種達(dá)到最高愈傷組織誘導(dǎo)率時(shí),激素濃度組合不相一致。當(dāng)6-BA濃度為1.0 mg/L、IAA濃度為0.5 mg/L時(shí),云南藜蒿愈傷組織誘導(dǎo)率最高,達(dá)到94%,且生長(zhǎng)狀況總體較好,而最適合楚天藜蒿和香藜一號(hào)愈傷組織誘導(dǎo)的激素濃度分別是6-BA 1.5 mg/L、IAA 1.0 mg/L和6-BA 1.5 mg/L、IAA 0.5 mg/L,且誘導(dǎo)率均能達(dá)到96%。大量的試驗(yàn)表明,外植體的基因型對(duì)其再生能力有直接的影響,外植體再生能力由染色體上的基因操控,因此不同基因型的外植體對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基是不一樣的[13]。

2.2 不同NAA、6-BA濃度對(duì)芽叢增殖的影響

將初代培養(yǎng)的芽叢分離,接種于增殖培養(yǎng)基上,14 d后,芽叢基部開(kāi)始形成大量幼芽。由表2可以看出,不同濃度的激素組合對(duì)藜蒿芽叢增殖的影響差異顯著,并且激素組合對(duì)不同品種藜蒿芽叢增殖的影響存在顯著差異。當(dāng)6-BA濃度為1.0 mg/L、NAA濃度為 0.1 mg/L時(shí),云南藜蒿芽叢增殖系數(shù)最高;而楚天藜蒿、香藜一號(hào)芽叢增殖系數(shù)最高時(shí),激素濃度均為6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.5 mg/L。

2.3 不同IBA、NAA濃度對(duì)生根誘導(dǎo)的影響

將增殖后獲得的較為健壯的組培苗轉(zhuǎn)入不含激素的MS培養(yǎng)基培養(yǎng)2周,以消除前設(shè)激素的影響[14],然后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中,15 d后統(tǒng)計(jì)生根情況。從表3可以看出,植株生根過(guò)程中,NAA對(duì)生根的促進(jìn)作用明顯大于IBA,相同激素濃度下,4個(gè)添加NAA的1/2 MS處理的組培苗的生根率與4個(gè)添加IBA的1/2 MS處理的相當(dāng)或更高,4個(gè)添加NAA的1/2 MS處理的平均根數(shù)與平均根長(zhǎng)也比添加IBA的1/2 MS及空白對(duì)照處理提高,說(shuō)明NAA對(duì)藜蒿組培苗根的形成有明顯的促進(jìn)作用。在NAA濃度為0.1 mg/L時(shí)生根率最高,且植株生根數(shù)與根長(zhǎng)都是最大的。綜合生根率、平均根數(shù)、平均根長(zhǎng)來(lái)看,添加0.1 mg/L NAA的1/2 MS培養(yǎng)基的優(yōu)勢(shì)最大。

2.4 移栽成苗

當(dāng)無(wú)菌苗長(zhǎng)5 cm左右、葉片舒展時(shí),將培養(yǎng)瓶移至室溫通風(fēng)有散射光處,去除封口膜煉苗48 h,洗凈幼苗根部培養(yǎng)基后移栽到消過(guò)毒的河沙中,1周后,幼苗成活率均達(dá)到90%以上。

3 結(jié)論與討論

藜蒿的組培通過(guò)器官發(fā)生途徑實(shí)現(xiàn)。在植物組培研究中,如何提高誘導(dǎo)率和增殖系數(shù)一直是各種植物組培快繁技術(shù)的關(guān)鍵。涂藝聲等[10]研究認(rèn)為,MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L最適合誘導(dǎo)藜蒿的葉片、莖段形成愈傷組織,以及愈傷組織分化成再生植株,黃白紅[15]研究表明,藜蒿莖葉均適宜作為外植體進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo),最佳配方為MS+6-BA 1 mg/L+2,4-D 4 mg/L。本試驗(yàn)以藜蒿莖段為外植體,結(jié)果表明,最適宜愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基分別為云南藜蒿MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L、楚天藜蒿MS+6-BA 1.5 mg/L+IAA 1.0 mg/L、香藜一號(hào)MS+6-BA 1.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L。

黃白紅等[9]研究表明,最適宜誘導(dǎo)藜蒿葉叢芽分化的繼代培養(yǎng)基配方為MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.4 mg/L。蔣向輝等[8]篩選出藜蒿叢生芽誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基為 MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.5 mg/L。本試驗(yàn)結(jié)果表明,最適宜的增殖培養(yǎng)基分別為云南藜蒿MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,楚天藜蒿和香藜一號(hào)均為 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。

藜蒿的生根培養(yǎng)直接影響其移栽成活率。涂藝聲等[10]研究認(rèn)為,MS+NAA 0.5 mg/L 最適合藜蒿外植體誘導(dǎo)生根,黃白紅[15]研究表明,藜蒿叢生苗生根的最佳培養(yǎng)基為1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+IAA

0.5 mg/L。本試驗(yàn)結(jié)果表明,藜蒿最適宜的生根培養(yǎng)基為1/2 MS+NAA 0.1 mg/L;生根培養(yǎng)中,NAA的效果明顯好于IBA,顯著促進(jìn)生根,這可能是藜蒿無(wú)菌苗對(duì)IBA較為遲鈍造成,因此,在工廠化育苗中宜選用NAA。

參考文獻(xiàn)

[1] 中國(guó)科學(xué)院植物研究所.中國(guó)高等植物圖鑒[M].北京:科學(xué)出版社,1985.

[2] 涂宗財(cái),毛沅文,李志,等.野生藜蒿葉中黃酮類化合物的提取工藝[J].南昌大學(xué)學(xué)報(bào):工科版,2011,33(3):234-238.

[3] 鄒崢嶸,袁宜如,計(jì)紅冰,等.鄱陽(yáng)湖野生藜蒿的化學(xué)成分研究[J].中國(guó)野生植物資源,2009,28(1):64-66.

[4] 王艷麗,劉凌,孫慧,等.膳食纖維的微觀結(jié)構(gòu)及功能特性研究[J].中國(guó)食品添加劑,2014(2):98-103.

[5] 薛菲,陳燕.膳食纖維與人類健康的研究進(jìn)展[J].中國(guó)食品添加劑,2014(2):208-213.

[6] 熊桂云,劉冬碧,胡時(shí)友,等.藜蒿肥料用量與施肥效益究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2003(4):81-82.

[7] 李漢霞,汪淑芬,王孝琴,等.武漢蔡甸區(qū)蔞蒿(藜蒿)高產(chǎn)高效栽培[J].中國(guó)蔬菜,2009(9):39-41.

[8] 蔣向輝,付明,佘朝文,等.藜蒿叢生芽誘導(dǎo)條件的篩選驗(yàn)[J].長(zhǎng)江蔬菜,2008(18):65-67.

[9] 黃白紅,喬乃妮,龔逸,等.藜蒿離體培養(yǎng)再生體系的建立[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(22):6 832-6 834.

[10] 涂藝聲,余蘭平,王永強(qiáng),等.藜蒿的組織培養(yǎng)和快速繁殖研究[J].中國(guó)野生植物資源,2005,24(2):59-61.

[11] 馬宗興,趙紅,柳申飛.蘆蒿的組織培養(yǎng)技術(shù)[J].安徽農(nóng)學(xué)報(bào),2003,9(5):44.

[12] 王新華,劉偉,趙恒國(guó).藜蒿組織培養(yǎng)[J].北方園藝,2002(4):62.

[13] 鞏振輝,申書(shū)興.植物組織培養(yǎng).2版[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2013:13.

[14] 王曉娟,金樑,沈延松,等.萱草再生植株過(guò)程中根的誘導(dǎo)[J].復(fù)旦學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2002,41(1):89-91.

[15] 黃白紅.藜蒿離體培養(yǎng)與試管苗分泌結(jié)構(gòu)的研究[D].長(zhǎng)沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué),2007.

2.2 不同NAA、6-BA濃度對(duì)芽叢增殖的影響

將初代培養(yǎng)的芽叢分離,接種于增殖培養(yǎng)基上,14 d后,芽叢基部開(kāi)始形成大量幼芽。由表2可以看出,不同濃度的激素組合對(duì)藜蒿芽叢增殖的影響差異顯著,并且激素組合對(duì)不同品種藜蒿芽叢增殖的影響存在顯著差異。當(dāng)6-BA濃度為1.0 mg/L、NAA濃度為 0.1 mg/L時(shí),云南藜蒿芽叢增殖系數(shù)最高;而楚天藜蒿、香藜一號(hào)芽叢增殖系數(shù)最高時(shí),激素濃度均為6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.5 mg/L。

2.3 不同IBA、NAA濃度對(duì)生根誘導(dǎo)的影響

將增殖后獲得的較為健壯的組培苗轉(zhuǎn)入不含激素的MS培養(yǎng)基培養(yǎng)2周,以消除前設(shè)激素的影響[14],然后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中,15 d后統(tǒng)計(jì)生根情況。從表3可以看出,植株生根過(guò)程中,NAA對(duì)生根的促進(jìn)作用明顯大于IBA,相同激素濃度下,4個(gè)添加NAA的1/2 MS處理的組培苗的生根率與4個(gè)添加IBA的1/2 MS處理的相當(dāng)或更高,4個(gè)添加NAA的1/2 MS處理的平均根數(shù)與平均根長(zhǎng)也比添加IBA的1/2 MS及空白對(duì)照處理提高,說(shuō)明NAA對(duì)藜蒿組培苗根的形成有明顯的促進(jìn)作用。在NAA濃度為0.1 mg/L時(shí)生根率最高,且植株生根數(shù)與根長(zhǎng)都是最大的。綜合生根率、平均根數(shù)、平均根長(zhǎng)來(lái)看,添加0.1 mg/L NAA的1/2 MS培養(yǎng)基的優(yōu)勢(shì)最大。

2.4 移栽成苗

當(dāng)無(wú)菌苗長(zhǎng)5 cm左右、葉片舒展時(shí),將培養(yǎng)瓶移至室溫通風(fēng)有散射光處,去除封口膜煉苗48 h,洗凈幼苗根部培養(yǎng)基后移栽到消過(guò)毒的河沙中,1周后,幼苗成活率均達(dá)到90%以上。

3 結(jié)論與討論

藜蒿的組培通過(guò)器官發(fā)生途徑實(shí)現(xiàn)。在植物組培研究中,如何提高誘導(dǎo)率和增殖系數(shù)一直是各種植物組培快繁技術(shù)的關(guān)鍵。涂藝聲等[10]研究認(rèn)為,MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L最適合誘導(dǎo)藜蒿的葉片、莖段形成愈傷組織,以及愈傷組織分化成再生植株,黃白紅[15]研究表明,藜蒿莖葉均適宜作為外植體進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo),最佳配方為MS+6-BA 1 mg/L+2,4-D 4 mg/L。本試驗(yàn)以藜蒿莖段為外植體,結(jié)果表明,最適宜愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基分別為云南藜蒿MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L、楚天藜蒿MS+6-BA 1.5 mg/L+IAA 1.0 mg/L、香藜一號(hào)MS+6-BA 1.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L。

黃白紅等[9]研究表明,最適宜誘導(dǎo)藜蒿葉叢芽分化的繼代培養(yǎng)基配方為MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.4 mg/L。蔣向輝等[8]篩選出藜蒿叢生芽誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基為 MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.5 mg/L。本試驗(yàn)結(jié)果表明,最適宜的增殖培養(yǎng)基分別為云南藜蒿MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,楚天藜蒿和香藜一號(hào)均為 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。

藜蒿的生根培養(yǎng)直接影響其移栽成活率。涂藝聲等[10]研究認(rèn)為,MS+NAA 0.5 mg/L 最適合藜蒿外植體誘導(dǎo)生根,黃白紅[15]研究表明,藜蒿叢生苗生根的最佳培養(yǎng)基為1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+IAA

0.5 mg/L。本試驗(yàn)結(jié)果表明,藜蒿最適宜的生根培養(yǎng)基為1/2 MS+NAA 0.1 mg/L;生根培養(yǎng)中,NAA的效果明顯好于IBA,顯著促進(jìn)生根,這可能是藜蒿無(wú)菌苗對(duì)IBA較為遲鈍造成,因此,在工廠化育苗中宜選用NAA。

參考文獻(xiàn)

[1] 中國(guó)科學(xué)院植物研究所.中國(guó)高等植物圖鑒[M].北京:科學(xué)出版社,1985.

[2] 涂宗財(cái),毛沅文,李志,等.野生藜蒿葉中黃酮類化合物的提取工藝[J].南昌大學(xué)學(xué)報(bào):工科版,2011,33(3):234-238.

[3] 鄒崢嶸,袁宜如,計(jì)紅冰,等.鄱陽(yáng)湖野生藜蒿的化學(xué)成分研究[J].中國(guó)野生植物資源,2009,28(1):64-66.

[4] 王艷麗,劉凌,孫慧,等.膳食纖維的微觀結(jié)構(gòu)及功能特性研究[J].中國(guó)食品添加劑,2014(2):98-103.

[5] 薛菲,陳燕.膳食纖維與人類健康的研究進(jìn)展[J].中國(guó)食品添加劑,2014(2):208-213.

[6] 熊桂云,劉冬碧,胡時(shí)友,等.藜蒿肥料用量與施肥效益究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2003(4):81-82.

[7] 李漢霞,汪淑芬,王孝琴,等.武漢蔡甸區(qū)蔞蒿(藜蒿)高產(chǎn)高效栽培[J].中國(guó)蔬菜,2009(9):39-41.

[8] 蔣向輝,付明,佘朝文,等.藜蒿叢生芽誘導(dǎo)條件的篩選驗(yàn)[J].長(zhǎng)江蔬菜,2008(18):65-67.

[9] 黃白紅,喬乃妮,龔逸,等.藜蒿離體培養(yǎng)再生體系的建立[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(22):6 832-6 834.

[10] 涂藝聲,余蘭平,王永強(qiáng),等.藜蒿的組織培養(yǎng)和快速繁殖研究[J].中國(guó)野生植物資源,2005,24(2):59-61.

[11] 馬宗興,趙紅,柳申飛.蘆蒿的組織培養(yǎng)技術(shù)[J].安徽農(nóng)學(xué)報(bào),2003,9(5):44.

[12] 王新華,劉偉,趙恒國(guó).藜蒿組織培養(yǎng)[J].北方園藝,2002(4):62.

[13] 鞏振輝,申書(shū)興.植物組織培養(yǎng).2版[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2013:13.

[14] 王曉娟,金樑,沈延松,等.萱草再生植株過(guò)程中根的誘導(dǎo)[J].復(fù)旦學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2002,41(1):89-91.

[15] 黃白紅.藜蒿離體培養(yǎng)與試管苗分泌結(jié)構(gòu)的研究[D].長(zhǎng)沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué),2007.

2.2 不同NAA、6-BA濃度對(duì)芽叢增殖的影響

將初代培養(yǎng)的芽叢分離,接種于增殖培養(yǎng)基上,14 d后,芽叢基部開(kāi)始形成大量幼芽。由表2可以看出,不同濃度的激素組合對(duì)藜蒿芽叢增殖的影響差異顯著,并且激素組合對(duì)不同品種藜蒿芽叢增殖的影響存在顯著差異。當(dāng)6-BA濃度為1.0 mg/L、NAA濃度為 0.1 mg/L時(shí),云南藜蒿芽叢增殖系數(shù)最高;而楚天藜蒿、香藜一號(hào)芽叢增殖系數(shù)最高時(shí),激素濃度均為6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.5 mg/L。

2.3 不同IBA、NAA濃度對(duì)生根誘導(dǎo)的影響

將增殖后獲得的較為健壯的組培苗轉(zhuǎn)入不含激素的MS培養(yǎng)基培養(yǎng)2周,以消除前設(shè)激素的影響[14],然后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中,15 d后統(tǒng)計(jì)生根情況。從表3可以看出,植株生根過(guò)程中,NAA對(duì)生根的促進(jìn)作用明顯大于IBA,相同激素濃度下,4個(gè)添加NAA的1/2 MS處理的組培苗的生根率與4個(gè)添加IBA的1/2 MS處理的相當(dāng)或更高,4個(gè)添加NAA的1/2 MS處理的平均根數(shù)與平均根長(zhǎng)也比添加IBA的1/2 MS及空白對(duì)照處理提高,說(shuō)明NAA對(duì)藜蒿組培苗根的形成有明顯的促進(jìn)作用。在NAA濃度為0.1 mg/L時(shí)生根率最高,且植株生根數(shù)與根長(zhǎng)都是最大的。綜合生根率、平均根數(shù)、平均根長(zhǎng)來(lái)看,添加0.1 mg/L NAA的1/2 MS培養(yǎng)基的優(yōu)勢(shì)最大。

2.4 移栽成苗

當(dāng)無(wú)菌苗長(zhǎng)5 cm左右、葉片舒展時(shí),將培養(yǎng)瓶移至室溫通風(fēng)有散射光處,去除封口膜煉苗48 h,洗凈幼苗根部培養(yǎng)基后移栽到消過(guò)毒的河沙中,1周后,幼苗成活率均達(dá)到90%以上。

3 結(jié)論與討論

藜蒿的組培通過(guò)器官發(fā)生途徑實(shí)現(xiàn)。在植物組培研究中,如何提高誘導(dǎo)率和增殖系數(shù)一直是各種植物組培快繁技術(shù)的關(guān)鍵。涂藝聲等[10]研究認(rèn)為,MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L最適合誘導(dǎo)藜蒿的葉片、莖段形成愈傷組織,以及愈傷組織分化成再生植株,黃白紅[15]研究表明,藜蒿莖葉均適宜作為外植體進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo),最佳配方為MS+6-BA 1 mg/L+2,4-D 4 mg/L。本試驗(yàn)以藜蒿莖段為外植體,結(jié)果表明,最適宜愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基分別為云南藜蒿MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L、楚天藜蒿MS+6-BA 1.5 mg/L+IAA 1.0 mg/L、香藜一號(hào)MS+6-BA 1.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L。

黃白紅等[9]研究表明,最適宜誘導(dǎo)藜蒿葉叢芽分化的繼代培養(yǎng)基配方為MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.4 mg/L。蔣向輝等[8]篩選出藜蒿叢生芽誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基為 MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.5 mg/L。本試驗(yàn)結(jié)果表明,最適宜的增殖培養(yǎng)基分別為云南藜蒿MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,楚天藜蒿和香藜一號(hào)均為 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。

藜蒿的生根培養(yǎng)直接影響其移栽成活率。涂藝聲等[10]研究認(rèn)為,MS+NAA 0.5 mg/L 最適合藜蒿外植體誘導(dǎo)生根,黃白紅[15]研究表明,藜蒿叢生苗生根的最佳培養(yǎng)基為1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+IAA

0.5 mg/L。本試驗(yàn)結(jié)果表明,藜蒿最適宜的生根培養(yǎng)基為1/2 MS+NAA 0.1 mg/L;生根培養(yǎng)中,NAA的效果明顯好于IBA,顯著促進(jìn)生根,這可能是藜蒿無(wú)菌苗對(duì)IBA較為遲鈍造成,因此,在工廠化育苗中宜選用NAA。

參考文獻(xiàn)

[1] 中國(guó)科學(xué)院植物研究所.中國(guó)高等植物圖鑒[M].北京:科學(xué)出版社,1985.

[2] 涂宗財(cái),毛沅文,李志,等.野生藜蒿葉中黃酮類化合物的提取工藝[J].南昌大學(xué)學(xué)報(bào):工科版,2011,33(3):234-238.

[3] 鄒崢嶸,袁宜如,計(jì)紅冰,等.鄱陽(yáng)湖野生藜蒿的化學(xué)成分研究[J].中國(guó)野生植物資源,2009,28(1):64-66.

[4] 王艷麗,劉凌,孫慧,等.膳食纖維的微觀結(jié)構(gòu)及功能特性研究[J].中國(guó)食品添加劑,2014(2):98-103.

[5] 薛菲,陳燕.膳食纖維與人類健康的研究進(jìn)展[J].中國(guó)食品添加劑,2014(2):208-213.

[6] 熊桂云,劉冬碧,胡時(shí)友,等.藜蒿肥料用量與施肥效益究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2003(4):81-82.

[7] 李漢霞,汪淑芬,王孝琴,等.武漢蔡甸區(qū)蔞蒿(藜蒿)高產(chǎn)高效栽培[J].中國(guó)蔬菜,2009(9):39-41.

[8] 蔣向輝,付明,佘朝文,等.藜蒿叢生芽誘導(dǎo)條件的篩選驗(yàn)[J].長(zhǎng)江蔬菜,2008(18):65-67.

[9] 黃白紅,喬乃妮,龔逸,等.藜蒿離體培養(yǎng)再生體系的建立[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(22):6 832-6 834.

[10] 涂藝聲,余蘭平,王永強(qiáng),等.藜蒿的組織培養(yǎng)和快速繁殖研究[J].中國(guó)野生植物資源,2005,24(2):59-61.

[11] 馬宗興,趙紅,柳申飛.蘆蒿的組織培養(yǎng)技術(shù)[J].安徽農(nóng)學(xué)報(bào),2003,9(5):44.

[12] 王新華,劉偉,趙恒國(guó).藜蒿組織培養(yǎng)[J].北方園藝,2002(4):62.

[13] 鞏振輝,申書(shū)興.植物組織培養(yǎng).2版[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2013:13.

[14] 王曉娟,金樑,沈延松,等.萱草再生植株過(guò)程中根的誘導(dǎo)[J].復(fù)旦學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2002,41(1):89-91.

[15] 黃白紅.藜蒿離體培養(yǎng)與試管苗分泌結(jié)構(gòu)的研究[D].長(zhǎng)沙:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué),2007.

猜你喜歡
激素
孕婦能不能吃雙黃蛋?
談激素色變?沒(méi)必要!
激素怎么用才安全
治療哮喘,激素怎么用
激素草莓能吃嗎
激素7問(wèn):消除“恐激癥”
激素軟膏不可長(zhǎng)期使用
好中醫(yī)也會(huì)用激素
動(dòng)物激素的主要研究方法及其實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)