徐 明 朱文燁
犬精液動態(tài)參數(shù)分析與研究
徐 明 朱文燁
就犬繁育而言,在公母比例為1∶6的生產(chǎn)群中,公犬精液品質(zhì)出現(xiàn)問題對受胎率的影響是母犬的6倍。因母犬發(fā)情周期較長,一次空胎便使育種的世代間隔增加半年,給警犬繁育工作帶來巨大的影響。而通過產(chǎn)仔數(shù)量來判斷公犬生育能力缺乏準(zhǔn)確性和存在滯后性。因而強(qiáng)化對犬精液質(zhì)量檢測,不僅能使犬繁育工作順利開展,也能減少繁育工作的成本和時間,更是向各級一線公安機(jī)關(guān)提供量足質(zhì)優(yōu)受訓(xùn)犬的保障。
本文旨在通過對種公犬精液動態(tài)參數(shù)的分析與研究,對精液動態(tài)參數(shù)中的9項(xiàng)動態(tài)參數(shù)值(VCL、VSL、VAP、ALH、BCF、M AD、LIN、W O B、STR)的正態(tài)分布范圍進(jìn)行觀察,用精液動態(tài)參數(shù)分析法為診斷公犬不育提供參考依據(jù)。
本實(shí)驗(yàn)對警犬的精液中的動態(tài)參數(shù)進(jìn)行檢測,計算確定各項(xiàng)數(shù)值的正態(tài)分布范圍。通過與生育障礙組以及不育組的對比分析,找到影響公犬生育的各項(xiàng)因素。從而總結(jié)出一套較為科學(xué),實(shí)踐操作性強(qiáng),能應(yīng)用于臨床判斷公犬生育能力的檢測標(biāo)準(zhǔn),提高公犬的繁殖水平及產(chǎn)仔量。
(一)生育正常組的檢驗(yàn)
1.實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)用公犬:選取年齡均為2周歲以上,體成熟、性成熟,平均窩產(chǎn)6頭以上的公犬。飼養(yǎng)地點(diǎn)設(shè)在某警犬基地。
飼養(yǎng)條件:采取分舍飼養(yǎng)。犬舍為半開放式。采取自由飲水,限量采食的方式。日糧按每頭犬每日0.45千克某成犬糧飼喂,并喂少量牛肉稀飯,每日進(jìn)食兩次,采取“對時制”方式飼喂。每日由基地繁育員定點(diǎn)散放,時間為半小時。所有犬的飲食及活動量基本一致。
實(shí)驗(yàn)儀器及軟件:本實(shí)驗(yàn)所使用的儀器為W LJ Y-9000精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)及相關(guān)的恒溫設(shè)備(北京偉力技貿(mào)公司提供),所使用的數(shù)理統(tǒng)計材料軟件為SAS數(shù)理統(tǒng)計軟件。
2.實(shí)驗(yàn)方法
選取符合實(shí)驗(yàn)條件的種公犬15頭,使用人工手握法對其分別進(jìn)行采樣、保存。利用W LJ Y-9000型精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)對公犬的精液動態(tài)參數(shù)以及精子活力、精子活率進(jìn)行檢測。所獲得的數(shù)據(jù)通過SAS數(shù)理統(tǒng)計軟件進(jìn)行計算,并且各參數(shù)檢測正常范圍均以x±s表示,從而確定生育正常組各項(xiàng)動態(tài)參數(shù)的正態(tài)分布范圍。
(二)生育障礙組的檢驗(yàn)
1.實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)用公犬:分別選取少精液(精液量<2m l)、精液密度低(密度<0.8億每毫升)、精子畸形(畸形率>15%)、精子活力低(A級精子<30%)的2周歲以上,體成熟、性成熟的公犬進(jìn)行分組比較檢測。
飼養(yǎng)條件及實(shí)驗(yàn)軟件同前。
2.實(shí)驗(yàn)方法
使用人工手握法對實(shí)驗(yàn)犬分別進(jìn)行采樣、保存。利用W LJ Y-9000精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)對公犬的精液動態(tài)參數(shù)以及精子活力、精子活率進(jìn)行檢測。所獲得的數(shù)據(jù)通過SAS數(shù)理統(tǒng)計軟件進(jìn)行計算,與生育正常組進(jìn)行比較分析,從而獲得各種參數(shù)對于犬生育能力的影響程度。
(三)不育組的檢驗(yàn)
1.實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)用公犬:選取年齡均為2周歲以上,體成熟、性成熟,無生育能力的公犬。飼養(yǎng)地點(diǎn)設(shè)在某警犬基地。
飼養(yǎng)條件及實(shí)驗(yàn)軟件同前。
2.實(shí)驗(yàn)方法
使用人工手握法對實(shí)驗(yàn)犬進(jìn)行分別采樣、保存。利用W LJ Y-9000精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)對公犬的精液動態(tài)參數(shù)(VCL、VSL、VAP、ALH、BCF、M AD、LIN、W O B、STR 9項(xiàng)參數(shù))以及精子活力、精子活率進(jìn)行檢測。所獲得的數(shù)據(jù)通過SAS數(shù)理統(tǒng)計軟件進(jìn)行計算,并與生育正常組進(jìn)行比較分析,確定造成犬不育的主要動態(tài)參數(shù)有哪些?
(一)實(shí)驗(yàn)過程
1.采精
對于首次采精和主動防御性強(qiáng)的公犬而言,犬主人必須在場,采精前先讓公犬排尿,清理公犬腹部及包皮,剪掉包皮周圍的毛,用0.1%高錳酸鉀溶液將公犬包皮附近洗凈消毒,并用生理鹽水沖洗干凈。
2.鏡檢
采集后的精液,在17℃環(huán)境下經(jīng)過20m in的液化。打開W LJ Y-9000精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)的動態(tài)分析功能,輸入犬相關(guān)信息。點(diǎn)擊“活動顯示”按鈕,點(diǎn)擊“計算分析”按鈕,再點(diǎn)擊視野中任意位置開始分析,在數(shù)據(jù)選用對話框中點(diǎn)擊選擇“采用此組數(shù)據(jù)”,提示是否結(jié)束分析下一場次時選“是”,此時進(jìn)入下一場次的分析,移動檢測板使視野發(fā)生變化,再點(diǎn)擊視野中任意位置開始分析,如此反復(fù),取6~8個視野。此時結(jié)束分析,檢測系統(tǒng)自動生成該精液樣本的各項(xiàng)動態(tài)參數(shù)數(shù)據(jù)。
假人盛行,皇帝的新裝就會不停地上演。明明看到某人光腚在街上裸奔,卻不站出來說丑陋。有人說,光鮮漂亮,他立馬跟著說,帥氣無敵、氣度不凡。事情看得明白,心里憤慨,可就是不愿大聲說出來。習(xí)慣于戴著一副假面具,在不能承受之重下阿Q樣地生活著。見到不公,遇到弱者,不敢伸張正義。還有一些人,總是喋喋不休地向人們灌輸一些大而空疏的漂亮道理,強(qiáng)迫人們?nèi)ソ邮?,去熱愛,而自己依然干著雞鳴狗盜的卑鄙之事。說和做,成了兩股道上奔跑的東西,道德和正直,就是霧里的花,水中的月。君子和小人,你永遠(yuǎn)分不清。
(二)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
本實(shí)驗(yàn)是對利用W LJ Y-9000精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)所檢測出的各項(xiàng)動態(tài)參數(shù)(VCL、VSL、VAP、ALH、BCF、M AD、LIN、W O B、STR、活力、活率)數(shù)值,采用數(shù)理統(tǒng)計方法中根據(jù)數(shù)據(jù)的分布范圍及數(shù)量,選取數(shù)據(jù)中95%置信區(qū)間進(jìn)行計算,從而獲得的正常生育組各項(xiàng)精液動態(tài)參數(shù)的正態(tài)分布范圍。
正態(tài)分布范圍的計算公式:
X±1.96S (注: S表示標(biāo)準(zhǔn)差)
(注: x表示平均值,n表示樣標(biāo)本數(shù)量)
1.生育正常組檢驗(yàn)結(jié)果(見表1、表2)
正常組犬動態(tài)參數(shù)數(shù)據(jù)(表1)
正常組犬動態(tài)參數(shù)數(shù)據(jù)(表2)
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生育障礙組犬動態(tài)參數(shù)數(shù)據(jù)(表3)
3.不育組檢驗(yàn)結(jié)果(見表5、表6)
(三)實(shí)驗(yàn)分析
由于實(shí)驗(yàn)所獲得的樣本數(shù)據(jù)數(shù)量十分有限,為了能獲取較有參考依據(jù)的種公犬精液動態(tài)參數(shù)總體情況,僅靠這些數(shù)據(jù)是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的。所以需要使用生物統(tǒng)計學(xué)中關(guān)于利用樣本均數(shù)和樣本標(biāo)準(zhǔn)差求總體均數(shù)的方法對所獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行計算、驗(yàn)證,以確定所獲得的數(shù)據(jù)是否具有參考價值,能否做為衡量精液質(zhì)量的具體標(biāo)準(zhǔn),故需要對所求數(shù)據(jù)中各項(xiàng)動態(tài)參數(shù)的T進(jìn)行檢驗(yàn),檢驗(yàn)結(jié)果是總體均數(shù)相等,故承認(rèn)其存在研究的價值。
生育障礙組犬動態(tài)參數(shù)數(shù)據(jù)(表4)
不育組犬動態(tài)參數(shù)數(shù)據(jù)(表5)
不育組犬動態(tài)參數(shù)數(shù)據(jù)(表6)
1.正常組與生育障礙組的比較(見表7)
精液動態(tài)參數(shù)的t值表(表8)
精液動態(tài)參數(shù)的各t值表(表9)
由此可以得到各數(shù)據(jù)的t值,具體見表8。
2.正常組與不育組的比較(見表9)
3.相關(guān)性檢測
為了獲曉實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)間是否具有相關(guān)性。故取9項(xiàng)動態(tài)參數(shù)中的VSL作為統(tǒng)計計算中的自變量,其余參數(shù)為因變量(LIN、W O B、STR為參數(shù)比值,故不列入分析范圍),來求取各數(shù)據(jù)間的關(guān)系。利用公式:
(注:r表示相關(guān)性)
可求得:
VSL與各動態(tài)參數(shù)的相關(guān)性(表10)
由此可見:VSL在變化過程中與VAP、BCF、VCL存在著顯著的相關(guān)性,而于MAD、ALH的相關(guān)性不顯著。為了檢測其與VAP、BCF、VCL所存在的關(guān)系,則進(jìn)一步利用公式對其進(jìn)行一元線性回歸求解。結(jié)果:隨著精子直線速度(VSL)的上升,其曲線速度(VCL)、平均路徑速度(VAP)上升明顯,而鞭打頻率(BCF)呈下降趨勢。
(一)經(jīng)實(shí)驗(yàn)檢測的30例樣本經(jīng)過t檢驗(yàn)證實(shí):具有生物統(tǒng)計參考價值,能夠做為衡量精液質(zhì)量總體情況的具體標(biāo)準(zhǔn)。
(二)正常精液組和異常精液組各項(xiàng)精子動態(tài)參數(shù)比較,均存在統(tǒng)計學(xué)差異; 隨著精子活動的下降,曲線速度(VCL)、直線速度(VSL)、平均路徑速度(VAP)、平均移動角度(MAD)、側(cè)擺幅度(ALH)、前向性(STR)下降明顯,鞭打頻率(BCF)呈上升趨勢,而直線性(LIN)、擺動性(W OB)差異無顯著性。
(三)單個動態(tài)參數(shù)間無顯著性差異,即無法直接作為判斷公犬生育能力的標(biāo)準(zhǔn)。由此而得出的結(jié)論是:警犬精子動態(tài)參數(shù)不一定能提供直接判斷公犬生育能力的診斷依據(jù),但是能在評估精液質(zhì)量時,提供重要的參考價值,可以對公犬繁殖能力的診斷、治療和研究提供充分的依據(jù)。
(作者單位:公安部南昌警犬基地,330100)
(編輯:李 冰)