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離體子宮平滑肌測定方法的改進

2014-11-29 04:16崇立明王忠輝楊陽王蓉周莉孫祖越
生物技術通訊 2014年6期
關鍵詞:離體營養(yǎng)液平滑肌

崇立明,王忠輝,楊陽,王蓉,周莉,孫祖越

上海市計劃生育科學研究所 藥理毒理學研究室,中國生育調節(jié)藥物毒理學檢測中心,上海 200032

離體子宮平滑肌是生物活性組織,通過人工模擬的生理環(huán)境測定藥物對子宮平滑肌舒張和收縮變化的影響,同時采用計算機生物信號采集處理系統(tǒng),使子宮平滑肌收縮的復雜信號量化,繪制出給藥前后子宮平滑肌收縮的圖形并測得數(shù)據(jù),可為實驗提供更加客觀和準確定量的分析方法。離體器官實驗需要給離體器官一個適宜的環(huán)境,包括溫度(35℃)、營養(yǎng)液(De-Jalon's 液)及混合氧(95% O2和5%CO2)[1]。正常實驗中,在供氧時直接用鋼瓶給營養(yǎng)液中通入混合氧[2-9]??紤]到用鋼瓶通氣的危險性,而且通混合氧費時、費事,耗費較多,我們以新西蘭兔離體子宮平滑肌為材料,在營養(yǎng)液中分別通入混合氧、增氧泵通氣及不通氣,觀察了離體子宮平滑肌的收縮反應,尋求一種簡便、易行、經濟的替代方法。

1 材料與方法

1.1 材料

健康雌性新西蘭兔(普通級,體重2.5~3.5 kg)購自上海松江區(qū)松聯(lián)實驗動物場[生產許可證SCXK(滬)2012-0011,使用許可證SYXK(滬)2013-0027],飼養(yǎng)于上海市計劃生育科學研究所(中國生育調節(jié)藥物毒理檢測中心)普通級小動物房,室溫18~26℃,相對濕度40%~70%,光照12~14 h,黑暗10~12 h。實驗開始前于不銹鋼籠內(單只/籠)適應性飼養(yǎng)7 d,自由進食、飲水。

De-Jalon's 液:NaCl 9 g,KCl 0.42 g,NaHCO30.5 g,CaCl20.06 g,葡萄糖0.5 g,蒸餾水1000 mL。

RM-6240BD 多道生理信號采集處理系統(tǒng)、JZJ01H 型肌肉張力換能器、離體腸管及熱板恒溫器(均購自成都儀器廠);增氧泵。

1.2 實驗方法

每只兔取3 mm×10 mm 大小子宮平滑肌3 段,隨機分為混合氧組、增氧泵通氣組和不通氣組,每組8 段子宮,一端穿線固定于離體器官恒溫水浴裝置的浴槽底部,另一端穿線與記錄裝置相連,分別通入混合氧、增氧泵通氣及不通任何氣體;將已連接的子宮肌浸沒于浴槽,浴槽中盛有6 mL 新鮮配置的De-Jalon's 液,給予子宮肌1 g 的負荷并保持,靜置10 min,待波形穩(wěn)定后,記錄約5 min正常波形。

1.3 統(tǒng)計學處理

以RM-6240BD 生物機能實驗系統(tǒng)描記子宮平滑肌的收縮活動。測定子宮平滑肌的收縮幅度、頻率及活動力(幅度×頻率),實驗數(shù)據(jù)以x±s 表示,用SPSS11.5統(tǒng)計分析軟件處理數(shù)據(jù),單因素方差分析。

2 結果

不通氣組子宮平滑肌的頻率和活動力與混合氧組比較均有統(tǒng)計學差異,而混合氧組與增氧泵組比較無統(tǒng)計學差異。表明給新西蘭兔離體子宮平滑肌的營養(yǎng)液內通入混合氧或使用增氧泵通氣效果相同,不通氣組的效果最差。見表1、圖1。

表1 不同通氣方式對新西蘭兔子宮平滑肌收縮的影響()

表1 不同通氣方式對新西蘭兔子宮平滑肌收縮的影響()

與混合氧組相比,*P<0.01,**P<0.05

圖1 不同通氣方式對新西蘭兔子宮平滑肌波形的影響

3 討論

增氧泵是通過電動馬達抽吸空氣,通過管道通路吹到水中釋放,增加了空氣和水的接觸面和水的循環(huán)流動,可以保證水中始終保持充足的溶氧量和溶氧的均一度。

本實驗中,離體子宮維持生理功能的條件是營養(yǎng)液,營養(yǎng)液中的混合氧含量及營養(yǎng)液與子宮是否充分接觸都是維持組織正常生理功能的重要條件。根據(jù)實驗結果,增氧泵通氣組與混合氧組對比無統(tǒng)計學差異,說明使用增氧泵通氣可促進營養(yǎng)液流動,增加營養(yǎng)液與子宮充分接觸的機會,在氧氣供應方面也達到了與通入混合氧相同的效果。綜上所述,使用增氧泵通氣可以達到供氧及促進液體流動的雙重目的,完全可替代傳統(tǒng)的用鋼瓶通入混合氧的方法,而且增氧泵體積較小,操作簡單,方便經濟,是離體子宮實驗的理想選擇。

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