方芳　王平珍　邱蕓

【摘要】目的：通過VEGF（血管內(nèi)皮生長因子）信號傳導通路探討仙桃草促進骨折愈合的機制。方法：復制新西蘭兔骨折模型64只，雙盲隨機分成仙桃草治療組和生理鹽水對照組，分別以仙桃草湯及生理鹽水灌胃。第0天、7天、14天及21天每組各處置8只動物， Elisa方法檢測骨痂組織中VEGF表達。結(jié)果：與對照組比較，治療組第7、14天VEGF的表達增強，差異具有統(tǒng)計學意義（P<005）；VEGF的表達第7天達到峰值，之后表達逐漸減弱。結(jié)論：骨折早期，仙桃草能夠促進VEGF的表達，達到促進骨折愈合的效果。

【關鍵詞】VEGF；信號傳導通路；仙桃草；骨折愈合

【中圖分類號】R2855【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2014）21-0015-01

仙桃草，學名蚊母草，為玄參科婆婆屬植物，帶蟲癭的全草入藥。2010版《中國藥典》記載：仙桃草活血消腫，止血，止痛，主要用于跌打傷痛等諸痛。本研究通過VEGF的信號傳導通路探討仙桃草促進骨折愈合的機制，現(xiàn)報道如下。

1材料與方法

11材料

111實驗動物健康新西蘭長耳大白兔64只，8～10月，體重20～25kg，雌雄各半，購自南昌大學醫(yī)學院動物科學部。

112實驗材料仙桃草由本院中藥房提供，VEGF Elisa檢測試劑盒由美國PeproTech公司提供。

12方法

121造模及分組64只新西蘭大白兔適應性喂養(yǎng)1周后，隨機分成治療組和對照組，每組各32只。3%戊巴比妥鈉lml/kg兔耳緣靜脈注射麻醉，對兔左前肢常規(guī)消毒，外側(cè)切口約15～20cm，逐層剝離暴露橈骨中段。在左側(cè)橈骨中段約3mm橫行鋸斷，制造標準骨折模型，不作任何固定，生理鹽水沖洗切口，逐層縫合切口。術后常規(guī)分籠飼養(yǎng)，肌肉注射40萬單位青霉素，共3d，每天1次。

122制藥及給藥仙桃草先用高出藥面2～3mm的溫水浸泡15～20min，后水煎煮3次，趁熱榨渣取汁，過濾后合并藥液，濃縮成含生藥5g/ml的藥液，無菌封瓶，放在4℃冰箱保存?zhèn)溆?。術后當天治療組進行仙桃草提取液灌胃，對照組灌胃相同體積的生理鹽水，每日1次。給藥量按以下公式計算。兔給藥量（g·kg-1）=人給藥量（g·kg-1）×93/100×人體體重（kg）1/3/兔平均體重（kg）1/3。

123標本檢測于實驗第0天、7天、14天及21天每組各處置8只動物。麻醉后在無菌操作下快速取出骨折處骨痂組織段1cm左右放入離心管，液氮驟冷4min后放在-80℃冰箱保存，后嚴格按照試劑盒說明采用Elisa方法進行VEGF檢測。

124統(tǒng)計分析實驗數(shù)據(jù)均以SPSS 170數(shù)據(jù)統(tǒng)計軟件處理，以均數(shù)±標準差表示，結(jié)果采用t 檢驗，以P<005或P<001表示差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

結(jié)果表明，與對照組比較，治療組第7、14天VEGF的表達增強，差異具有統(tǒng)計學意義（P<005）；VEGF的表達第7天達到峰值，之后表達逐漸減弱。

3討論

骨折，指骨骼的完整性或連續(xù)性發(fā)生部分或完全斷裂，古稱折骨[1]?！度珖胁菟巺R編》和《中華本草》均記載仙桃草具有活血消腫，止血止痛的功效。主治跌打損傷，癰疽瘡瘍等。

研究表明，血管內(nèi)皮生長因子是新血管生成和血管內(nèi)皮細胞的特定絲分裂的重要介質(zhì)[2]。血管內(nèi)皮生長因子具有促進血管生成、維持血管功能以及增加血管內(nèi)皮細胞通透性的作用[3]。VEGF作為促進骨折愈合的重要因子，具有促進血管形成、加速骨折愈合的作用[4]。

本研究結(jié)果分析，與對照組比較，治療組第7、14天VEGF的表達增強，差異具有統(tǒng)計學意義（P<005） ；VEGF的表達第7天達到峰值，之后表達逐漸減弱。結(jié)果提示，骨折當天仙桃草治療效果還未顯現(xiàn)，而骨折中后期仙桃草治療效果不明顯；骨折早期，仙桃草能夠促進VEGF的表達，達到促進骨折愈合的效果。

參考文獻

[1]李玄.中醫(yī)骨傷科基礎[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：53.

[2] Gerstenfeld LC， Cullinane DM， Barnes GL， et al. Fracture healing as a post-natal developmental process： molecular， spatial， and temporal aspects of its regulation[J]. J Cell Biochem，2003，88（5）：873-884.

[3] Le AX， Miclau T， Hu D.Molecular aspects of healing in stabilized and non-stabilized fractures[J].J Orthop Res，2001，19（1）78-84.

[4] 鮑小明，張民.VEGF在骨質(zhì)疏松性骨折愈合中的作用[J].中國矯形外科雜志，2012，20（22）：2054-2056.

（收稿日期：20140815）endprint

【摘要】目的：通過VEGF（血管內(nèi)皮生長因子）信號傳導通路探討仙桃草促進骨折愈合的機制。方法：復制新西蘭兔骨折模型64只，雙盲隨機分成仙桃草治療組和生理鹽水對照組，分別以仙桃草湯及生理鹽水灌胃。第0天、7天、14天及21天每組各處置8只動物， Elisa方法檢測骨痂組織中VEGF表達。結(jié)果：與對照組比較，治療組第7、14天VEGF的表達增強，差異具有統(tǒng)計學意義（P<005）；VEGF的表達第7天達到峰值，之后表達逐漸減弱。結(jié)論：骨折早期，仙桃草能夠促進VEGF的表達，達到促進骨折愈合的效果。

【關鍵詞】VEGF；信號傳導通路；仙桃草；骨折愈合

【中圖分類號】R2855【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2014）21-0015-01

仙桃草，學名蚊母草，為玄參科婆婆屬植物，帶蟲癭的全草入藥。2010版《中國藥典》記載：仙桃草活血消腫，止血，止痛，主要用于跌打傷痛等諸痛。本研究通過VEGF的信號傳導通路探討仙桃草促進骨折愈合的機制，現(xiàn)報道如下。

1材料與方法

11材料

111實驗動物健康新西蘭長耳大白兔64只，8～10月，體重20～25kg，雌雄各半，購自南昌大學醫(yī)學院動物科學部。

112實驗材料仙桃草由本院中藥房提供，VEGF Elisa檢測試劑盒由美國PeproTech公司提供。

12方法

121造模及分組64只新西蘭大白兔適應性喂養(yǎng)1周后，隨機分成治療組和對照組，每組各32只。3%戊巴比妥鈉lml/kg兔耳緣靜脈注射麻醉，對兔左前肢常規(guī)消毒，外側(cè)切口約15～20cm，逐層剝離暴露橈骨中段。在左側(cè)橈骨中段約3mm橫行鋸斷，制造標準骨折模型，不作任何固定，生理鹽水沖洗切口，逐層縫合切口。術后常規(guī)分籠飼養(yǎng)，肌肉注射40萬單位青霉素，共3d，每天1次。

122制藥及給藥仙桃草先用高出藥面2～3mm的溫水浸泡15～20min，后水煎煮3次，趁熱榨渣取汁，過濾后合并藥液，濃縮成含生藥5g/ml的藥液，無菌封瓶，放在4℃冰箱保存?zhèn)溆?。術后當天治療組進行仙桃草提取液灌胃，對照組灌胃相同體積的生理鹽水，每日1次。給藥量按以下公式計算。兔給藥量（g·kg-1）=人給藥量（g·kg-1）×93/100×人體體重（kg）1/3/兔平均體重（kg）1/3。

123標本檢測于實驗第0天、7天、14天及21天每組各處置8只動物。麻醉后在無菌操作下快速取出骨折處骨痂組織段1cm左右放入離心管，液氮驟冷4min后放在-80℃冰箱保存，后嚴格按照試劑盒說明采用Elisa方法進行VEGF檢測。

124統(tǒng)計分析實驗數(shù)據(jù)均以SPSS 170數(shù)據(jù)統(tǒng)計軟件處理，以均數(shù)±標準差表示，結(jié)果采用t 檢驗，以P<005或P<001表示差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

結(jié)果表明，與對照組比較，治療組第7、14天VEGF的表達增強，差異具有統(tǒng)計學意義（P<005）；VEGF的表達第7天達到峰值，之后表達逐漸減弱。

3討論

骨折，指骨骼的完整性或連續(xù)性發(fā)生部分或完全斷裂，古稱折骨[1]。《全國中草藥匯編》和《中華本草》均記載仙桃草具有活血消腫，止血止痛的功效。主治跌打損傷，癰疽瘡瘍等。

研究表明，血管內(nèi)皮生長因子是新血管生成和血管內(nèi)皮細胞的特定絲分裂的重要介質(zhì)[2]。血管內(nèi)皮生長因子具有促進血管生成、維持血管功能以及增加血管內(nèi)皮細胞通透性的作用[3]。VEGF作為促進骨折愈合的重要因子，具有促進血管形成、加速骨折愈合的作用[4]。

本研究結(jié)果分析，與對照組比較，治療組第7、14天VEGF的表達增強，差異具有統(tǒng)計學意義（P<005） ；VEGF的表達第7天達到峰值，之后表達逐漸減弱。結(jié)果提示，骨折當天仙桃草治療效果還未顯現(xiàn)，而骨折中后期仙桃草治療效果不明顯；骨折早期，仙桃草能夠促進VEGF的表達，達到促進骨折愈合的效果。

參考文獻

[1]李玄.中醫(yī)骨傷科基礎[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：53.

[2] Gerstenfeld LC， Cullinane DM， Barnes GL， et al. Fracture healing as a post-natal developmental process： molecular， spatial， and temporal aspects of its regulation[J]. J Cell Biochem，2003，88（5）：873-884.

[3] Le AX， Miclau T， Hu D.Molecular aspects of healing in stabilized and non-stabilized fractures[J].J Orthop Res，2001，19（1）78-84.

[4] 鮑小明，張民.VEGF在骨質(zhì)疏松性骨折愈合中的作用[J].中國矯形外科雜志，2012，20（22）：2054-2056.

（收稿日期：20140815）endprint

【摘要】目的：通過VEGF（血管內(nèi)皮生長因子）信號傳導通路探討仙桃草促進骨折愈合的機制。方法：復制新西蘭兔骨折模型64只，雙盲隨機分成仙桃草治療組和生理鹽水對照組，分別以仙桃草湯及生理鹽水灌胃。第0天、7天、14天及21天每組各處置8只動物， Elisa方法檢測骨痂組織中VEGF表達。結(jié)果：與對照組比較，治療組第7、14天VEGF的表達增強，差異具有統(tǒng)計學意義（P<005）；VEGF的表達第7天達到峰值，之后表達逐漸減弱。結(jié)論：骨折早期，仙桃草能夠促進VEGF的表達，達到促進骨折愈合的效果。

【關鍵詞】VEGF；信號傳導通路；仙桃草；骨折愈合

【中圖分類號】R2855【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2014）21-0015-01

仙桃草，學名蚊母草，為玄參科婆婆屬植物，帶蟲癭的全草入藥。2010版《中國藥典》記載：仙桃草活血消腫，止血，止痛，主要用于跌打傷痛等諸痛。本研究通過VEGF的信號傳導通路探討仙桃草促進骨折愈合的機制，現(xiàn)報道如下。

1材料與方法

11材料

111實驗動物健康新西蘭長耳大白兔64只，8～10月，體重20～25kg，雌雄各半，購自南昌大學醫(yī)學院動物科學部。

112實驗材料仙桃草由本院中藥房提供，VEGF Elisa檢測試劑盒由美國PeproTech公司提供。

12方法

121造模及分組64只新西蘭大白兔適應性喂養(yǎng)1周后，隨機分成治療組和對照組，每組各32只。3%戊巴比妥鈉lml/kg兔耳緣靜脈注射麻醉，對兔左前肢常規(guī)消毒，外側(cè)切口約15～20cm，逐層剝離暴露橈骨中段。在左側(cè)橈骨中段約3mm橫行鋸斷，制造標準骨折模型，不作任何固定，生理鹽水沖洗切口，逐層縫合切口。術后常規(guī)分籠飼養(yǎng)，肌肉注射40萬單位青霉素，共3d，每天1次。

122制藥及給藥仙桃草先用高出藥面2～3mm的溫水浸泡15～20min，后水煎煮3次，趁熱榨渣取汁，過濾后合并藥液，濃縮成含生藥5g/ml的藥液，無菌封瓶，放在4℃冰箱保存?zhèn)溆?。術后當天治療組進行仙桃草提取液灌胃，對照組灌胃相同體積的生理鹽水，每日1次。給藥量按以下公式計算。兔給藥量（g·kg-1）=人給藥量（g·kg-1）×93/100×人體體重（kg）1/3/兔平均體重（kg）1/3。

123標本檢測于實驗第0天、7天、14天及21天每組各處置8只動物。麻醉后在無菌操作下快速取出骨折處骨痂組織段1cm左右放入離心管，液氮驟冷4min后放在-80℃冰箱保存，后嚴格按照試劑盒說明采用Elisa方法進行VEGF檢測。

124統(tǒng)計分析實驗數(shù)據(jù)均以SPSS 170數(shù)據(jù)統(tǒng)計軟件處理，以均數(shù)±標準差表示，結(jié)果采用t 檢驗，以P<005或P<001表示差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

結(jié)果表明，與對照組比較，治療組第7、14天VEGF的表達增強，差異具有統(tǒng)計學意義（P<005）；VEGF的表達第7天達到峰值，之后表達逐漸減弱。

3討論

骨折，指骨骼的完整性或連續(xù)性發(fā)生部分或完全斷裂，古稱折骨[1]?！度珖胁菟巺R編》和《中華本草》均記載仙桃草具有活血消腫，止血止痛的功效。主治跌打損傷，癰疽瘡瘍等。

研究表明，血管內(nèi)皮生長因子是新血管生成和血管內(nèi)皮細胞的特定絲分裂的重要介質(zhì)[2]。血管內(nèi)皮生長因子具有促進血管生成、維持血管功能以及增加血管內(nèi)皮細胞通透性的作用[3]。VEGF作為促進骨折愈合的重要因子，具有促進血管形成、加速骨折愈合的作用[4]。

本研究結(jié)果分析，與對照組比較，治療組第7、14天VEGF的表達增強，差異具有統(tǒng)計學意義（P<005） ；VEGF的表達第7天達到峰值，之后表達逐漸減弱。結(jié)果提示，骨折當天仙桃草治療效果還未顯現(xiàn)，而骨折中后期仙桃草治療效果不明顯；骨折早期，仙桃草能夠促進VEGF的表達，達到促進骨折愈合的效果。

參考文獻

[1]李玄.中醫(yī)骨傷科基礎[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：53.

[2] Gerstenfeld LC， Cullinane DM， Barnes GL， et al. Fracture healing as a post-natal developmental process： molecular， spatial， and temporal aspects of its regulation[J]. J Cell Biochem，2003，88（5）：873-884.

[3] Le AX， Miclau T， Hu D.Molecular aspects of healing in stabilized and non-stabilized fractures[J].J Orthop Res，2001，19（1）78-84.

[4] 鮑小明，張民.VEGF在骨質(zhì)疏松性骨折愈合中的作用[J].中國矯形外科雜志，2012，20（22）：2054-2056.

（收稿日期：20140815）endprint